张平；王升志；戴萍；魏大鹏；赵宗容；蔡美英
目的 合成甲基对氧磷（M1600）人工抗原。方法 用醋酸-锌粉盐酸还原对氧磷，制备氨基甲基对氧磷，重氮化法使氨基甲基对氧磷与牛血清白蛋白（BSA）及中国鲎血蓝蛋白（TTH）偶合，合成人工抗原M1600-BSA、M1600-TTH。结果 M1600-BSA免疫新西兰兔10周后，双向琼脂扩散试验和间接ELISA检测，证明得到了高价且具有较好特异性的多抗血清。结论 成功地合成了甲基对氧磷人工抗原，为其免疫分析方法的建立提供了条件。
作者：张卫国；马兆扬 刊期： 2001年第02期
《免疫学杂志》是由中国免疫学会和第三军医大学主办的、向国内外公开发行的国家级学术刊物。自1985年创刊以来，先后被确定为国家中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊并被美国化学文摘（CA）收录。 其主要栏目有免疫学进展、基础免疫学、临床免疫学、免疫学技术与方法、综述与讲座、短篇报道、简迅等，适合各级医务人员、医学生、免疫学工作者和相关学科的人员阅读。欢迎订阅，欢迎投稿。 《免疫学杂志》为双月刊，国际流行大16开本，全铜版纸精美印刷，每期80页。邮发代号：78-32。每期定价：12元，全年定价：72元。欢迎广大读者前往当地邮局订阅。若错过邮局收订时间或需补订以往各期的订户，可直接与本刊编辑部联系。联系地址：重庆市高滩岩《免疫学杂志》编辑部；邮编：400038，电话：（023）68752237 联系人：陈菁华，朱健利。
作者： 刊期： 2001年第02期
热化疗作为一种肿瘤治疗的新方法，其有效性已得到公认［1］，人们普遍认为它的作用是广泛的。热化疗除了直接杀伤肿瘤细胞以及增强局部化疗药效外［2］，还可以刺激免疫系统的功能，增加CD3＋ T、CD4＋T细胞的数量，提高CD4＋／CD8＋的比值［3，4］，但是其对T细胞功能状态有无改善尚不清楚。本实验的目的旨在研究热化疗后T细胞功能的变化，进一步探讨热化疗的机制以及它与单独热疗、化疗相比的优越性，以促进其在临床的应用和推广。1 材料与方法1．1 动物 BALB／C纯系小白鼠50只（华西医科大学钩端螺旋体病研究室提供），8周龄，雌雄各半，体质量雄鼠：22～24 g，雌鼠21～23 g。分笼标准饲料喂养，自由饮水、摄食。
作者：张平；王升志；戴萍；魏大鹏；赵宗容；蔡美英 刊期： 2001年第02期
目的 建立一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法。方法 采用一种新的非脂质体基因转染试剂Fugene 6，以人p14ARF蛋白表达载体（pCI-neo-p14ARF）为外源DNA，转染存在p14ARF基因原发缺失的人H460，A549，U251和PC-3共4个癌细胞系，通过G418筛选21 d确定转染效率。结果 经转染的4个细胞系培养孔中均长出了抗G418细胞克隆，而且这些细胞克隆的p14ARF基因PCR产物均为阳性，细胞毒性分析发现高浓度Fugene 6作用下各细胞的增殖活力未受影响。结论 Fugene 6为一简便快速、易操作、重复性好且无细胞毒性的体外真核表达载体基因转染新系统。
作者：胡义德；高楠；曹晓运；周决；曹世龙 刊期： 2001年第02期
目的 研究MAGE-1基因在人食管癌中的表达，分析MAGE-1抗原能否作为食管癌的治疗性候选疫苗。方法 采用RT-PCR方法检测了MAGE-1基因在30例食管癌组织和相应癌旁正常组织中的表达；并从食管癌组织中扩增了MAGE-1 cDNA全长序列，经酶切后与pET-30a（+）质粒载体连接，经初步酶切鉴定后，进行DNA序列分析，获得克隆基因的核苷酸序列。结果 MAGE-1基因在食管癌组织中的表达率为43%（13/30），在30例相应癌旁正常组织中未见表达；成功地克隆了MAGE-1 cDNA全长序列。结论 由于MAGE-1基因在食管癌中高频率表达以及MAGE-1抗原具有HLA-I类分子限制性CTL识别表位，因此，MAGE-1抗原可以作为食管癌免疫治疗的候选疫苗。
作者：彭良平；王贵齐；冉宇靓；刘海燕；孙立新；遇珑；杨治华 刊期： 2001年第02期
目的 探索胰岛素促进心肌细胞葡萄糖摄取增加的机制。方法 采用Northern法分析心肌GLUT4 mRNA和免疫法分析心肌GLUT4多肽。结果 胰岛素刺激心肌GLUT4 mRNA和GLUT4多肽表达增加1～1.2倍。同时伴随心肌葡萄糖摄取增多。结论 胰岛素能刺激GLUT4 mRNA和GLUT4多肽表达，使GLUT4数增加，进而促进心肌葡萄糖摄取增多，胰岛素刺激心肌细胞GLUT4表达，可能是心肌增加葡萄糖摄取的重要分子学机制之一。
作者：殷仁富；陈金明；吴宗贵；仇韶华；王咏梅；武瑞美；孔宪涛 刊期： 2001年第02期
G－细菌的脂多糖（LPS）是重要的病原体相关模式分子。PAMPs均可被动物作为外来分子进行识别。LPS能激发机体细胞因子IL-1、TNF-α等活性分子的合成，对感染具有十分重要的作用。LPS是通过什么受体怎样将信号传入免疫细胞并启动免疫反应的，人们一直都不十分清楚。近年来，一种名为Toll蛋白的发现，使人们对机体识别LPS机制的认识向前跨进了一大步。本文试对该模式识别受体的研究进展做一综述。
作者：顾长国；李磊 刊期： 2001年第02期
目的 探讨尿白介素-8（IL-8）检测在狼疮性肾炎（LN）病情判断中的价值。方法 应用ELISA双抗体夹心法检测38例LN患者尿IL-8水平。结果 ①LN患者肾功正常组和肾功不全代偿期组尿IL-8水平显著高于健康人（P＜0.001），且肾功不全代偿期组尿IL-8水平显著高于肾功能正常组（P＜0.01），高尿IL-8水平患者伴较高的血沉值和较低的补体C3值。②出现白细胞尿的LN患者尿IL-8水平显著高于其它患者（P＜0.05）。③环磷酰胺静脉冲击加强的松治疗4周后，LN患者尿IL-8水平显著降低（P＜0.01）。结论 尿IL-8水平的变化可能有助于判断狼疮活动和肾损害程度。LN患者非感染性白细胞尿的出现可能与尿IL-8水平增高有关。环磷酰胺和强的松可能通过抑制免疫细胞和肾固有细胞产生IL-8而取得疗效。
作者：范兴忠；李新东；潘宝安；李世荣；徐新伟 刊期： 2001年第02期
目的 研究新分离的H1N1亚型流感病毒株的HA1基因序列。方法 甲型流感病毒通过鸡胚增殖后提取RNA、逆转录合成cDNA，经PCR扩增和产物纯化构建重组质粒，用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定并进行基因特性分析。结果 新分离到的3株流感病毒株（H1N1）HA1区基因长度为981 bp，编码327个氨基酸；与A／桂防／10／94和A／Bayern／07／95（H1N1）标准株比较其同源性分别为92.8％和91.3％，丢失了第130位氨基酸和304位糖基化位点；新分离的3株甲型流感病毒株（H1N1）HA1区氨基酸同源性高达98％；A／桂防／10／94和A／Bayern ／07／95（H1N1）毒株HN1氨基酸的同源性高达96％。结论 新分离到的3株H1N1毒株HA编码氨基酸不同于A／Bayern／07／95（H1N1）和A／桂防／10／94（H1N1）标准株，它们可能为新的甲型流感病毒变异株。
作者：王希良；严冰；段佩若；张励力；韩洪彦 刊期： 2001年第02期
目的 研究超抗原SEA对外周血T淋巴细胞的活化作用。方法 用SEA刺激人外周血T淋巴细胞，观察细胞的DNA合成、形态、IL-2的产生、细胞表型以及凋亡情况。结果 SEA对T淋巴细胞的促增殖作用在浓度为100 ng/mL强，在第2、3d达高峰；首次或多次刺激不改变T淋巴细胞的CD4+CD8+表型；首次刺激24h内未见明显凋亡；但再次刺激24 h内即有明显凋亡；加入rhIL-2 2 d凋亡现象消失。结论 超抗原SEA对T淋巴细胞的促增殖作用与其浓度、作用时间有关，并且SEA首次或多次刺激对CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞起同等的活化作用。
作者：许桂莲；朱锡华；杨劲 刊期： 2001年第02期
目的 构建人CD154基因真核细胞表达载体。方法 采用RT-PCR方法，从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中扩增得到820 bp的人CD154 cDNA片段，再用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中，限制性内切酶酶切分析重组质粒和DNA序列分析。结果 人CD154 cDNA已经正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论 本研究为探讨CD154分子与淋巴细胞活化的关系及其信号传导机制，为进一步用于抗移植排斥反应的研究，或对由于CD154遗传缺陷所致的免疫缺陷病的基因治疗奠定了基础。
作者：张春艳；宁波；李树浓；张志方；冯炼强 刊期： 2001年第02期
目的 观测Hp全菌抗原和粘膜佐剂LT口服免疫Balb／c小鼠后的胃肠粘膜免疫反应。方法 采用ELISPOT法检测了胃粘膜、肠粘膜相关淋巴组织PP结抗原特异性形成细胞（AFC）。结果 抗原免疫组、抗原＋佐剂组胃肠粘膜抗原特异性sIgA-AFC、IgG-AFC数量明显增加，尤以sIgA-AFC为甚，并且抗原＋佐剂组明显高于单纯抗原组和对照组。结论 口服菌苗可有效诱导胃肠道粘膜免疫应答，局部sIgA可能在抗Hp感染中具有重要作用。
作者：鲁东水；于长青；邹全明 刊期： 2001年第02期
目的 阐明甲胎蛋白生物半衰期（AFP T1／2）与原发性肝癌（PHC）治疗后复发与转移的关系。方法 用单克隆双抗体夹心两步法测定AFP含量；按T1／2=0.3 dT／log（AFP1／AFP2）分别计算介入和射频治疗PHC患者AFP T1／2。结果 当AFP T1／2＞1.5 d时预测PHC患者治疗后复发转移的敏感性、特异性及总符合率（准确度）分别为87.5％、89.3％、88.5％。介入组为82.35％、83.3％、82.75％；射频组为93.3％、93.75％、93.5％。60例患者在200 d内未发生复发转移的患者与发生复发转移或死亡患者之间的AFP T1／2差异非常显著（P＜0.001）。结论 AFP T1／2是预测PHC患者发生转移复发的早期预测指标，它不仅为其后续治疗的监测提供了可靠参数，而且也是评价疗效的良好指标。
作者：刘树林；齐为民；李斌；张丽君 刊期： 2001年第02期
针对海洛因依赖者普遍存在易受细菌、病毒感染，多不易治愈的临床表现。本文通过对45例海洛因成瘾者和40例正常人血清中白细胞介素-1（IL-1），白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子（TNF）含量测定，以探讨海洛因依赖者免疫功能损害与细胞因子含量变化的相互关系。现将结果报告如下：1 对象与方法1．1 研究对象 解放军第473医院戒毒中心收治的海洛因依赖者45例，其中男性35例，女性10例，年龄16～57岁，平均24．8岁；吸毒时间4个月～4 年，平均2．2年；海洛因日均用量0．5～3 g。符合DSM-Ⅲ-R关于阿片类药物依赖诊断标准，尿液吗啡定性实验阳性，既往无心肝肾和自身免疫疾病史。对照组为常规体检健康人40例，男性30例，女性10例，年龄18～40岁，平均为27．5岁。
作者：王嘉军；张伟；杨爱霞；刘东亮；魏敬军 刊期： 2001年第02期
目的 重组表达人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位跨膜区成份。方法 采用DNA重组技术将尿素酶B亚单位3'端732 bp基因片段克隆至pET11C载体上，转化宿主菌BL21（DE3） E.coli，IPTG诱导，SDS-PAGE及Western-blot分析表达情况。结果 成功构建了含UreB 0.7 kb片段的重组质粒pET-UreB0.7，并表达了具有免疫反应性的分子量约28 000 u的重组蛋白，表达率为19.8％。结论 重组的尿素酶B亚单位跨膜区成份为研究其相关生物学特性奠定了重要基础，亦可作为Hp疫苗的成分用于Hp感染的预防和治疗。
作者：毛旭虎；鲁东水；郭红；吴超；王缚鲲；邹全明 刊期： 2001年第02期
目的 为探讨类风湿关节炎（RA）与可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNF-R）、TNF-α、TNF-α/sTNF-R比值的关系。方法 应用双抗体夹心ELISA法检测了活动期RA（28例）,稳定期RA（12例）及健康人（30例）血清中sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ、TNF-α的水平。结果 活动期RA患者血清sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ、TNF-α水平明显高于健康人及稳定期RA组， P均＜0.01。稳定期RA患者血清sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ、TNF-α水平亦明显高于健康人，P＜0.01。在RA患者中，血清sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ水平与ESR、CRP、Ritchie index呈显著正相关，与类风湿因子（RF）水平无相关性。RA患者治疗3个月后sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ及TNF-α/ sTNF R比值显著下降。结论 RA患者血清sTNF-RⅠ、sTNFR-Ⅱ水平显著增高，且与疾病活动度呈正相关。测定血清sTNF-RⅠ、sTNF-RⅡ、TNF-α/sTNF-R水平可作为RA诊断，监测疾病活动、治疗及判断预后的一项有意义的实验室指标。
作者：李萍；刘显红；赵丽娟 刊期： 2001年第02期
本文介绍了几种常见免疫传感器及其换能器的发展概况，同时也对免疫传感器制作中的固定方法和再生性等问题进行了探讨。
作者：温志立；汪世平；沈国励；曾宪芳 刊期： 2001年第02期
目的 在大肠杆菌中表达人白细胞分化抗原CD7胞外区蛋白。方法 采用PCR技术调整CD7基因的阅读框架，使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致，缺失了CD7 cDNA基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子,构建CD7胞外区cDNA和生物素化蛋白基因融合的原核表达质粒PinPointxa3-CD7。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α表达, SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果。结果 融合蛋白的分子量约为30 000 u，Western blotting结果表明:表达的蛋白质可被抗CD7的单克隆抗体识别。结论 为研制抗CD7基因工程抗体奠定了基础。
作者：周艳春；朱锡华；黄云辉 刊期： 2001年第02期
幽门螺杆菌（helicobacter pylori，Hp）是慢性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌，并且与胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发生发展密切相关［1］。采用疫苗预防、治疗Hp感染，已成为近年来的研究热点［1］。本研究采用Hp全菌超声上清和佐剂大肠杆菌不耐热肠毒素口服免疫BALB／c小鼠，从分子水平分析肠粘膜免疫主要诱导部位派伊尔小结（PP）的Th1、Th2细胞在粘膜免疫应答中的调节作用，为Hp口服疫苗研制提供免疫学依据。
作者：于长青；邹全明；王缚鲲；张卫军 刊期： 2001年第02期
芋螺毒素是从海洋软体动物——芋螺的毒液中提取出来的小分子肽类毒素［1］，它通常由10～30个氨基酸组成，并具有“低分子量、高亲合力、高度专一”等特点，现已广泛应用于神经科学、肽化学、分子生物学等学科的研究中，有的已应用于镇痛药的临床研究中。SO3是从线纹芋螺中提取的具有镇痛作用的新基因［2］，目前已进入临床前研究。我们通过化学合成法及折叠得到SO3正确折叠产物，为药代动力学测定需要，开展了SO3抗体的制备研究。由于SO3高度亲水且分子量小，直接免疫于动物极难产生抗体。为此，我们用50%的戊二醛使SO3分别与BSA（牛血清白蛋白）和OVA（卵清白蛋白）交联在一起［3］，然后用人工抗原SO3-BSA免疫家兔，经过49 d后，获得了效价为1∶2万的抗SO3抗体。
作者：于芳；戴秋云；刘凤云；周艳荣；黄培堂 刊期： 2001年第02期
免疫学杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学,中国免疫学会
