学术投稿

利用RTS500系统进行抗菌肽葛佬素蛋白的体外表达

罗平;许波;鲁永玲;周红

关键词:翻译系统, 抗菌肽, 葛佬素, 蛋白, 方法, 重组质粒, 体外表达, 裂解产物, 连接, 基因片段, 大肠杆菌, 表达载体, 重组子, 双酶切, 阳性, 扩增, 鉴定, 构建
摘要:目的:构建含目的基因葛佬素(Gloverin)的重组子并通过体外快速翻译系统RTS500(Rapid Translation System)对其进行表达.方法:采用PCR方法扩增gloverin cDNA,将其与表达载体pIVEX2.3连接;采用PCR及双酶切方法鉴定连接产物.将含目的基因片段的阳性重组质粒通过体外表达翻译系统RTS500,使其蛋白能在大肠杆菌(E. coli)裂解产物中进行表达.
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  • AngⅡ对ECV304细胞增殖作用的相关基因表达谱研究

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  • 萘哌地尔衍生物BWJ对麻醉大鼠及猫血压的影响

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    作者:唐灿;曾南;沈映君 刊期: 2004年第04期

  • 大安颗粒对戊巴比妥钠致小鼠睡眠的影响

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    作者:王汉蓉;包旭;柳小秦;曹小霞;包定元 刊期: 2004年第04期

  • BWYJ的降压作用及对血流动力学的影响

    目的:观察萘哌地尔衍生物(BWYJ)对正常血压及实验性高血压模型大鼠血压的影响,采用麻醉猫观察其对血流动力学的影响,并探讨其降压机制.方法:采用肾动脉双肾双夹(2K2C)法制作大鼠肾血管性高血压模型,分别对正常及高血压大鼠静脉和口服给药,观察血压的变化;利用麻醉开胸猫测定血流动力学各项指标的变化;采用侧脑室给药、猫在体瞬膜神经肌肉标本和肾上腺素的翻转实验探讨BWYJ的降压作用机制.

    作者:眭玉霞;孙安盛;吴芹;余丽梅;黄燮南 刊期: 2004年第04期

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    目的:建立用高效液相色谱法快速检测盐酸替扎尼定血药浓度的方法.方法:取血浆加1mol·L-1NaOH,混匀,加氯仿提取吹干,用流动相复溶进样;色谱柱SUNTEKR Kromasil C18 5u粒径,150×4.6mmID;色谱条件:A:乙腈=100:25(A:水-甲酸-氨水(28%)=100:5:10(V/V,pH 8.50));流速1.0mL·min-1;紫外检测波长318nm,内标物为雷尼替丁.

    作者:陈锋杰;张成志;李岑;何海霞;周远大;杨辉 刊期: 2004年第04期

  • 异鼠李素对肺癌的影响及其抗肿瘤机制的初步探讨

    目的:探讨异鼠李素体外对人肺癌细胞A549、体内Lewis肺癌增殖的影响及初步研究其抗肿瘤机制.方法:以不同浓度异鼠李素加入体外培养的A549细胞中,用MTT比色法,细胞计数法,细胞生长曲线的测定、细胞形态学变化、克隆形成、3H-TdR掺入实验等观察测定体外抗肿瘤活性,用流式细胞仪、基因组DNA片段分析,彗星电泳、免疫组化等观察其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;采用Lewis细胞C57BL/6鼠移植瘤,观察药物对移植瘤的影响.

    作者:朱玲;王正荣;杨春蕾;周黎明;万莉红;任福强;赵研研 刊期: 2004年第04期

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    目的:观察异鼠李素对人细胞株A549、MCF-7、PC3、Caco-2、K562、AD293、Hacat等细胞增殖、分化的影响及相关基因的变化.方法:不同浓度异鼠李素处理上述细胞,光镜电镜下观察细胞形态;进行集落形成实验,3H-TdR掺人实验、生长曲线法、MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡峰及bax,bcl-2等凋亡相关基因的表达.

    作者:周黎明;朱玲;王正荣 刊期: 2004年第04期

  • 利用激光共聚焦显微镜研究MP多肽抑制粒细胞呼吸爆发造成的脂质过氧化作用

    目的:研究MP多肽抑制呼吸爆发的作用机制.方法:培养人白细胞系THP1细胞,对照组细胞培养体系中仅给予内毒素(LPS,100ng/ml)刺激,治疗组在同样浓度的LPS刺激同时加入MP多肽(20μM),采用乙酰乙酸盐2,7二氯氢化荧光素(D399)和碘化丙啶(PI)双标记,用D399及PI对两组细胞进行染色,激光共聚焦显微镜检测两组细胞D399在细胞内的脂质过氧化产物2,7二氯荧光素及PI的荧光强度.

    作者:曹红卫;郭毅斌;郑江 刊期: 2004年第04期

  • 以Tau蛋白为靶点治疗阿尔茨海默病的药物发展

    阿尔茨海默病(Alzheimer'disease,AD)是老年人中痴呆主要的原因,以不可逆进行性记忆和认知功能障碍为主要临床症状.目前AD的病因和发病机制尚未完全阐明,其主要神经病理特征包括:神经细胞外以β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积为核心形成的老年斑(senile plaques,SP);神经细胞内以过磷酸化的tau蛋白为核心形成的神经元纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)和神经细胞丢失.NFT以成对螺旋丝样结构(paired helical filament,PHF)存在,与临床痴呆症状呈正相关[1].PHF具有不溶解性和对蛋白酶解的抵抗性,tau蛋白是组成PHF/NFT唯一的必需成分,在AD的发病机制中起重要作用[2].

    作者:杨云霞;包定元;包旭;周黎明;彭英 刊期: 2004年第04期

  • 生物抗菌肽及其抗菌活性与中和内毒素作用

    革兰阴性菌细胞外壁成分脂多糖/内毒素(lipoplysaccharide,LPS)能激活单核细胞/巨噬细胞产生大量的炎症介质,如TNF-α、IL-1、IL-6、NO等,触发一系列的病理反应过程,终导致内毒素血症、脓毒症休克甚至死亡.其中TNF-α已被证实是导致内毒素诱导动物模型死亡主要的致病炎症因子.

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    目的:从中药赤芍提取分离出具有拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行活性检测,探讨赤芍抗LPS作用的物质基础.方法:将LPS包被于生物传感器的疏水性样品池以测定赤芍提取物与LPS的亲合力为指导,通过硅胶柱层析技术和常规中药分离技术对中药赤芍拮抗LPS有效成分进行分离提取,应用鲎实验测定该成分对LPS的中和作用及其对LPS刺激小鼠RAW264.7细胞释放TNF-α的影响.

    作者:魏利召;郑江;蒋栋能 刊期: 2004年第04期

四川生理科学杂志

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