段玲；段磊
目的肿瘤生长具有血管依赖性.内皮抑素为胶原XⅧ羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子.实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinant human endostatin adenorirus, Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性.方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应.结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长.动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关.结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性.
作者：吴扬；杨莉；赵霞；宿静梅；胡兵；刘继彦；牛挺；罗彦；李秋；魏于全 刊期： 2004年第06期
目的建立模拟人成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblast growth factor receptor 3, Fgfr3)374号甘氨酸至精氨酸点突变小鼠模型并进行初步表型分析.方法应用双重PCR法及分子克隆技术构建小鼠 Fgfr3-Gly374Arg点突变打靶载体,对胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞)进行打靶后,采用G418、Ganciclovir正负双向选择和Southern杂交对打靶ES细胞进行筛选,选发生正确同源重组的ES细胞进行胚泡显微注射,携带Neo基因的 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠与EIIa-Cre转基因鼠杂交后,得到只含 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠.用PCR法进行了基因型鉴定,并应用骨骼染色、组织学等技术对其表型进行了初步分析.结果 Fgfr3-Gly374Arg点突变小鼠体小尾短、头大,前额圆凸,骨骺生长板区明显缩短、结构紊乱,肥大软骨细胞区也有明显减少.同时伴有多数雌性小鼠不孕、子宫、卵巢变小、乳腺发育不良等变化.结论成功地建立了模拟人 Fgfr3-Gly374Arg点突变所致软骨发育不全的小鼠模型.
作者：王建民；杜晓兰；李翠玲；尹良军；陈波；孙晶；苏楠；赵玲；宋瑞华；宋维威；陈林；邓初夏 刊期： 2004年第06期
目的探讨一氧化氮合酶2A(nitric oxide synthase 2A, NOS2A)基因启动子-969(G→C)多态性与肝硬化门静脉高压的相关性.方法采用病例对照和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测106例乙肝后肝硬化患者和108名健康对照者 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性,比较等位基因及基因型频率;应用逆转录-聚合酶链反应和Western 印迹技术,检测肝硬化组织NOS2A mRNA和蛋白表达.构建 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性荧光素酶重组质粒,瞬时转染,分析多态性的功能.结果在门静脉高压症组C等位基因和GC基因型频率为16.9%、33.8%,比正常对照组高(8.8%、17.6%),差异有显著性(P＜0.05,OR=2.42),相关分析呈正相关(r=0.18).单纯肝硬化组与对照组的C等位基因和GC基因型频率相比,差异无显著性(P＞0.05).C等位基因携带者比G等位基因携带者肝硬化组织NOS2A mRNA及蛋白表达明显增强,GC基因型启动子的活性显著升高.Logistic多元逻辑回归分析显示这一多态性是形成门静脉高压症新的独立危险因素.结论 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性与门静脉高压症相关,导致启动子活性增强,是形成门静脉高压症的新的危险因素.
作者：程元桥；王文琦；林菊生；熊平；姜晓丹 刊期： 2004年第06期
目的明确一个伴随有类似关节指垫样病损和指甲病变的表皮松解性掌跖角化病的中国家系中角蛋白9(keratin 9, KRT9)基因突变情况. 方法用聚合酶链反应技术扩增家系成员及家系外50名正常人 KRT9基因的编码区及外显子与内含子交界处,DNA序列分析寻找突变位点,然后经限制性内切酶DdeⅠ分析验证. 结果患者 KRT9基因第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT的突变(N160S),而家系正常成员及家系外50个正常人中均不存在此突变. 结论 KRT9基因的第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT突变(N160S)导致该家系患者发生表皮松解性掌跖角化病.
作者：张宝荣；殷鑫浈；夏昆；丁美萍；胡正茂；郑敏；刘志蓉；夏家辉 刊期： 2004年第06期
继发性白血病(secondary leukemia, SL)主要是指原发性恶性肿瘤或非恶性疾病因接受化疗和(或)放疗所致的白血病(treatment related leukemia, TRL)亦称继发性白血病.目前的研究已表明:绝大多数继发性白血病有特征性的染色体异常;染色体核型分析对该病的诊断、分型、治疗、预后和发病机理等研究都具有十分重要的价值.
作者：姜丽波；韩树林；张淑英；周红；曲延章；郭珩 刊期： 2004年第06期
目的研究中国人4q35与10q26同源性EcoRⅠ片段的结构多态性,探讨该区域的可塑性、易位和体细胞嵌合现象及其与D4Z4重复单位缺失的关系.方法研究对象包括110名无血缘关系的健康成年人.低熔点胶包埋法抽提基因组DNA.同一样品分别进行EcoRⅠ酶切和EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切, 脉冲场电泳分离,p13E-11探针Southern杂交,曲线拟合法计算分析EcoRⅠ片段的长度,SPSS11.0统计软件分析数据.结果 77.3%(85/110)的个体为标准构型,4q35 EcoRⅠ片段的长度均值为(87.9±3.3) kb,中位数为78.5 kb;10q26同源性片段的长度均值为(90.1±4.1) kb,中位数为73.0 kb;经t检验,两者差异无显著性(P>0.05).19.1%(21/110)的个体检测到易位构型,其中4q→10q易位和10q→4q易位分别为9.1%(10/110)和10.0%(11/110),经卡方检验,两种易位形式的频率基本相等(χ2=0.053,P>0.05).3.6%(4/110)的个体检测到体细胞嵌合片段.此外,14.5%(16/110)的个体检测到小于35 kb的10q26 EcoRⅠ短片段.结论正常中国人4q35和10q26 EcoRⅠ片段具有多态性和动态性变化特征,两者具有高度同源性.4q35-10q26易位是导致4q35区不稳定和D4Z4缺失的重要因素,体细胞嵌合现象的出现提示4q与10q区D4Z4的互换重组可能发生于有丝分裂过程中.
作者：吴志英；王志强；王柠；林珉婷；慕容慎行 刊期： 2004年第06期
患者女,13岁,因身材矮小来我院儿童保健门诊就诊.患者系第3胎第1产,孕44周顺产.查体:身高115 cm,身材匀称,无颈蹼,第二性征未发育,无月经初潮,乳房未发育,智力正常.B超:子宫轮廓清晰,边缘规整,约16 mm×13 mm,实质回声分布均匀,双侧附件显示不清,双侧卵巢未探及,子宫声像为基始子宫.X线照片:双胫骨近端内侧骨软骨瘤.父母非近亲婚配,表型正常,母孕期正常,无有害物质接触史.患者之妹,现已7岁,发育正常.
作者：叶志纯；赵蕊；祝兴元 刊期： 2004年第06期
目的对9例马凡综合征(Marfan syndrome, MFS)患者的原纤维蛋白-1(fibrillin-1, FBN1)基因进行突变筛查,以发现新的 FBN1基因突变.方法应用变性高效液相色谱法对MFS患者 FBN1基因65个外显子中的35个进行突变筛查,对变性高效液相色谱图形异常的PCR扩增片段用DNA测序鉴定突变位置及性质,并用等位基因特异性PCR以及限制性片段长度多态性分析等方法进一步证实突变.结果在两例MFS患者中发现两种新的 FBN1基因突变.其中一种为第34外显子4307～4308位4个碱基TCGT的插入突变(4307insTCGT),另一种为第43外显子5309位的点突变5309G>A.结论FBN1基因移码突变(4307insTCGT)与点突变(5309G>A)分别是这两例MFS患者的发病原因.
作者：黄肖利；伍严安；陈发林；黄毅；马晓宁；陈同 刊期： 2004年第06期
目的探讨高脂血症患者载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)亚类组成变化的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和双向电泳-免疫印迹检测法,分析112例高脂血症患者和73名正常对照者APOE基因型、HDL各亚类组成及相对含量.结果高脂血症组和对照组APOE基因型及等位基因频率分布均以E3/3和ε3高.高脂血症患者中等位基因ε2携带者血清APOE/CⅢ较等位基因ε3升高,而HDL3b则下降,其差异有显著性(P<0.05).对照组中等位基因ε2携带者血清甘油三酯、apoE 、apoE/CⅢ较等位基因ε3和ε4携带者升高,等位基因ε2携带者HDL3a较等位基因ε3携带者低,其差异有显著性(P<0.05).结论 APOE基因多态性可能与血清HDL部分亚类的含量变化相关.
作者：龙石银；张雪梅；傅明德；徐燕华；刘秉文 刊期： 2004年第06期
目的利用cDNA表达阵列构建遗传性癫痫大鼠海马基因表达谱,寻找其中的差异表达基因,为从分子水平探讨癫痫的发病机理打下基础.方法采用32P-α-dATP 逆转录标记探针与 cDNA 阵列杂交,构建P77PMC大鼠和Wistar大鼠海马基因表达谱,用图象分析仪分析两者基因表达谱差异.结果在P77PMC大鼠海马中共发现有15个差异表达基因,其中12个基因表达上调,3个基因表达下调.并用逆转录-聚合酶链反应进一步证实了结果的可靠性.结论 P77PMC大鼠与正常Wistar大鼠海马中存在多个差异表达基因,这些差异表达的基因可能在癫痫的发生中具有重要作用.
作者：吴志国；肖波；杨晓苏；唐发清；曾艺；谢光洁 刊期： 2004年第06期
目的研究E-选择素(E-selectin)基因第2外显子G98T和第4外显子S128R遗传多态性在广西壮、汉两民族中的分布.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和DNA序列测定法检测162名壮族人和170名汉族人E-选择素基因第2外显子G98T和第4外显子S128R遗传多态性,比较两组E-选择素基因型和等位基因的分布频率.结果 E-选择素基因第2外显子等位基因G、T频率在壮族与汉族正常人群中分别为94.8%、5.2%和95.3%、4.7%;第4外显子等位基因S、R频率分别为92.0%、8.0%和95.9%、4.1%(χ2=4.482,P=0.034).结论 E-选择素基因 S128R多态性在广西壮、汉两民族中差异有显著性;E-选择素基因G98T多态性在广西壮、汉两民族中差异无显著性.
作者：韦叶生；蓝艳；杜诗库 刊期： 2004年第06期
例1 姐姐,12岁,为第1胎第1产,足月顺产.在1岁前生长发育与同龄儿童无差异,以后出现发育迟缓.查体:智力、视力及听力正常.身高91 cm,体重15 kg,指间距94 cm,体格发育明显落后于同龄儿童.皮肢粗糙,头大、前额突出,鼻梁凹,颈短、驼背、鸡胸明显.前肋缘外翻,腰椎后突,肝脾不大.四肢关节膨大,腕关节过伸,双膝关节外翻,下肢X型.腿疼难忍,鸭步,活动受限.手足畸形,指尖细,呈爪状.
作者：鞠秀丽；赵淑娥 刊期： 2004年第06期
目的探讨食管癌/贲门癌高发区人群食管癌和贲门癌染色体基因组变化特征.方法应用比较基因组杂交技术分析37例原发性食管癌和30例贲门癌患者染色体基因组的变化.结果比较基因组杂交发现,食管癌组织染色体8q发生DNA扩增的频率高(78%),其它依次为3q、5p、6q和7p;3p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为8p、9q和11q.贲门癌组织染色体20q发生DNA扩增频率高(43%),其它依次为6q、8q和6p; 17p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为19p、1p和4p.结论 8q、3q和5p DNA扩增和3p、8p和9q DNA丢失是河南高发区食管癌患者基因组DNA变化特征;而20q、6q DNA扩增和17p、19p、1p DNA丢失可能是河南高发区贲门癌患者基因组DNA变化特征. 这些结果为进一步定位筛选和克隆与食管癌/贲门癌相关基因提供了重要的理论信息.
作者：秦艳茹；王立东；邝丽芸；关新元；庄则豪；范宗民；安继业；曹世华 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在遗传病和产前诊断中的应用价值.方法应用着丝粒探针、特异性序列探针及染色体涂染探针等对36例常规核型分析疑有染色体异常患者的外周血和45例进行产前诊断的孕妇羊水间期细胞或中期分裂相进行FISH检测. 结果检出的染色体异常类型有:45,X、45,X/46,XX、45,X/46,Xr(X)、46,X,i(Xq)、47,XXY、46,XX,t(4;7)、47,XYY、47,XXX、47,XXY,inv(7)、46,XY,inv(7)、47,XX,+21,同时产前诊断出两例异常胎儿,分别是47,XX,+18和46,XY,der(15)t(Y;15).结论 FISH技术可以准确、快速地诊断各种染色体异常,是传统细胞遗传学的必要补充,可广泛用于遗传病诊断及产前诊断.
作者：赵丽；李红；薛永权；潘金兰；吴亚芳；卢敏 刊期： 2004年第06期
目的研究两例散发正常血钾型周期性麻痹(normokalemic periodic paralysis,normoKPP)患者的临床特点及其电压门控钠通道Ⅳ型α亚单位(α-subunit type Ⅳ of voltage-gated sodium channel, SCN4A)基因的突变.方法应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术及测序分析检测患者 SCN4A基因第13、19、23、24(部分)外显子是否发生已知导致高钾型周期性麻痹(hyperKPP)的突变(T704M、A1156T、M1360V、I1495F、M1592V);随后应用DHPLC技术筛查 SCN4A基因其余外显子,对出现异常洗脱峰者进行测序分析.结果两例患者的 SCN4A基因发生点突变2418(G→A)并引起氨基酸序列改变V781I,且为 SCN4A基因唯一错义突变.病例1的父亲也发生该突变,但未发病.结论中国人normoKPP患者存在V781I突变,该突变可能是导致normoKPP的突变之一.
作者：郭秀海；吴卫平；张雁华；贾建平；朱克 刊期： 2004年第06期
目的对成都汉族群体6个短串联重复序列等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值.方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色技术,对110名成都汉族无血缘关系健康个体的6个短串联重复序列等位基因频率及其种属特异性进行研究.结果D4S2366、D4S2367、D6S474、 D6S1281、 D2S1396和D20S601在成都汉族群体中等位基因个数分别为7、7、6、7、5、7;观察杂合度分别为0.802、0.708、0.770、0.627、0.542、0.672;个人识别率分别为0.887、0.828、0.849、0.848、0.794、0.865;非父排除率0.602、0.441、0.544、0.325、0.227、0.386.通过种属特异性的评价发现6个短串联重复序列与其他种属间存在较大差异.结论 6个短串联重复序列在成都汉族群体中具有较好的遗传多态性及种属特异性,在法医学研究中具有应用价值.
作者：张伟娟；侯一平；吴谨；贾振军；周雪平；李英碧；田静；颜静 刊期： 2004年第06期
目的探讨一个非综合征型遗传性耳聋大家系线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变类型.方法临床听力测试已明确诊断,并收集非综合征型遗传性耳聋分支家系中33人及6例散发聋患者的外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段,分别用BsmAⅠ、 ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G 和7445G点突变,对相关的扩增片段进行基因测序.结果酶切检测,家系中17例耳聋患者均为1555G点突变阳性,非母系成员及散发聋病例均为阴性.测序结果:6例酶切显示1555G突变阳性病例均发现(nt)1555 A→G转换和(nt)961 C插入,3243G、7445G点突变阴性.结论在该非综合征型遗传性耳聋大家系中,mtDNA 12S rRNA基因区域A1555G和961 insC的双重突变可能共同参与了听力损害的过程.
作者：曹新；邢光前；魏钦俊；卜行宽；王登元 刊期： 2004年第06期
目的分析汉族人群caspase-3基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点及其构成的单倍型,为研究caspase-3基因对凋亡调节机制的个体差异提供线索.方法用变性高效液相色谱技术和DNA测序技术检测caspase-3基因的调控区、第2～7外显子及部分侧翼序列的多态性位点;分析位点间的连锁不平衡关系,估算它们构成的单倍型. 结果共检出3个SNP位点(C829A、A17532C、C20541T),分别位于caspase-3基因的5′端调控区、第4内含子和3′调控区;3个位点间存在强连锁不平衡,其中位点A17532C与C20541T呈完全连锁不平衡;54.3%的C-829/A-17532/C-20541是汉族人群的主要单倍型. 结论浙江地区汉族人群caspase-3基因上的3个SNP位点间存在强连锁不平衡,它们构成的主要单倍型不同于北美人群.
作者：谢云；周韧；叶月芳；杨水友；张伟 刊期： 2004年第06期
目的研究重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus vector, rAAV)介导的β-半乳糖苷酶的结构基因LacZ,构建的rAAVLacZ病毒经不同途径给药后骨骼肌的转染效率、表达持续时间,为rAAV载体介导的目的基因对Duchenne肌营养不良的基因治疗探索合适的给药途径.方法采用报告基因LacZ、包装质粒PXX2、腺病毒成份辅助质粒PXX6三质粒共转染293细胞,包装重组腺相关病毒载体介导的rAAVLacZ,将rAAVLacZ局部腓肠肌肌肉注射转染至C57/BL6鼠骨胳肌,分别于单点注射后2个月、5个月取肌肉切片X-Gal染色.采用经股动脉注射rAAVLacZ观察LacZ基因在后肢骨骼肌的转染表达.结果 (1)C57/BL6鼠局部肌注rAAVLacZ后, 2个月和5个月时,均呈LacZ基因阳性表达,5个月时无表达减低.(2)经股动脉注射rAAVLacZ, C57/BL6小鼠后肢骨骼肌的肌膜及血管壁平滑肌LacZ基因广泛转染.结论重组腺相关病毒载体介导的报告基因LacZ可在C57/BL6鼠骨胳肌中高效持续表达5个月以上,经股动脉转染是有希望的下肢肌肉转染途径,此工作为神经肌肉遗传病,尤其是Duchenne肌营养不良基因治疗的进一步研究奠定了基础.
作者：黎红华；张苏明；方思羽；陈春莲；汪道文；Xiao Xiao 刊期： 2004年第06期
患者女,20岁.两年前因无月经、乳房不发育诊断为原发性闭经,服中药3个月无效.后使用雌、孕激素周期治疗,月经开始每月一次,乳房开始发育,停药后,月经又停止.再次激素治疗又来月经,但停药后月经仍停止.家族中无同类病史.
作者：周明君；郑文亮 刊期： 2004年第06期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
