吴扬；杨莉；赵霞；宿静梅；胡兵；刘继彦；牛挺；罗彦；李秋；魏于全
目的研究中国汉族人共济失调性毛细血管扩张症(ataxia telangiectasia mutated,ATM)基因的单核苷酸多态和点突变.方法首先用PCR扩增ATM基因第39、61和63外显子的靶片段,然后用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)技术进行筛选,选择典型带型经全自动DNA测序证实.结果在ATM基因第39外显子以及第61和63内含子发现6个新的单核苷酸多态,它们分别是第39外显子第5689位和第5691位的A/T多态,第61内含子第+69位的T/G多态、第+94位的A/G多态和第+99位的T/G多态,第63内含子第+17位的G/C多态.在ATM基因第61外显子、第62内含子和第63外显子发现5个新的点突变,它们分别是第61外显子第8618位的T/G颠换、第62内含子第-13位的T/G颠换、第63外显子第8793位的T/G颠换、第8816位和第8848位的G/A转换.证实了ATM基因第39外显子第5557位G/A、第61内含子第+104位T/C和第62内含子第-55位T/C多态在中国汉族人中的存在.结论中国汉族人ATM基因的单核苷酸多态与白人存在较大差异.
作者：汤洪伟；边建超；江峰；沈强；朱虔兮；张宏伟；吴毅 刊期： 2004年第06期
目的研究重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus vector, rAAV)介导的β-半乳糖苷酶的结构基因LacZ,构建的rAAVLacZ病毒经不同途径给药后骨骼肌的转染效率、表达持续时间,为rAAV载体介导的目的基因对Duchenne肌营养不良的基因治疗探索合适的给药途径.方法采用报告基因LacZ、包装质粒PXX2、腺病毒成份辅助质粒PXX6三质粒共转染293细胞,包装重组腺相关病毒载体介导的rAAVLacZ,将rAAVLacZ局部腓肠肌肌肉注射转染至C57/BL6鼠骨胳肌,分别于单点注射后2个月、5个月取肌肉切片X-Gal染色.采用经股动脉注射rAAVLacZ观察LacZ基因在后肢骨骼肌的转染表达.结果 (1)C57/BL6鼠局部肌注rAAVLacZ后, 2个月和5个月时,均呈LacZ基因阳性表达,5个月时无表达减低.(2)经股动脉注射rAAVLacZ, C57/BL6小鼠后肢骨骼肌的肌膜及血管壁平滑肌LacZ基因广泛转染.结论重组腺相关病毒载体介导的报告基因LacZ可在C57/BL6鼠骨胳肌中高效持续表达5个月以上,经股动脉转染是有希望的下肢肌肉转染途径,此工作为神经肌肉遗传病,尤其是Duchenne肌营养不良基因治疗的进一步研究奠定了基础.
作者：黎红华；张苏明；方思羽；陈春莲；汪道文；Xiao Xiao 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值.方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测.以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照. 结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿.1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体.FISH检测与常规核型分析结果一致.结论 FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值.
作者：肖红梅；谭跃球；李麓芸；卢光琇 刊期： 2004年第06期
先证者男,30岁,结婚3年,其妻孕5次,均在孕4个月内自然流产.均行B超检查示胚胎不发育,只有胚囊,无胚芽.患者夫妇表型正常,身体健康,非近亲婚配,孕期无患病史,但有接触硫磺史.查体:患者表型正常,发育正常,身高170 cm,体重69 kg.心肺功能正常,精液检查也正常.
作者：温莉娟；孟昭彦；刘利明；张玫 刊期： 2004年第06期
患者女,13岁,因身材矮小来我院儿童保健门诊就诊.患者系第3胎第1产,孕44周顺产.查体:身高115 cm,身材匀称,无颈蹼,第二性征未发育,无月经初潮,乳房未发育,智力正常.B超:子宫轮廓清晰,边缘规整,约16 mm×13 mm,实质回声分布均匀,双侧附件显示不清,双侧卵巢未探及,子宫声像为基始子宫.X线照片:双胫骨近端内侧骨软骨瘤.父母非近亲婚配,表型正常,母孕期正常,无有害物质接触史.患者之妹,现已7岁,发育正常.
作者：叶志纯；赵蕊；祝兴元 刊期： 2004年第06期
目的探讨7号染色体异常在急性白血病中的发生率及预后意义.方法采用R带常规显带技术进行染色体检查,对410例急性白血病患者的核型进行分析.结果 410例急性白血病患者中检出7号染色体异常患者32例,占7.8%;其中-7/7q-19例(59.4%),t(7;11)3例(9.4%),其他为少见的7号染色体改变:der(7),+7, t(2;7),t(5;7),t(7;9),t(7;8), dic(1;7).-7/7q-中,急性髓细胞白血病12例,其中M0、M1、M2型的-7/7q-发生率高于其他类型急性髓细胞白血病.32例患者中20例同时有其他染色体异常,常见的是t(9;22)伴-7,+8,-5.30例进行正规化疗的患者,11例缓解,缓解率低于同期急性白血病的总缓解率(36.7% vs 65.8%);伴-7/7q-的急性髓细胞白血病的缓解率低于染色体正常的急性髓细胞白血病患者(25% vs 55.6%);伴-7/7q-的急性淋巴细胞白血病的缓解率与染色体正常的急性淋巴细胞白血病患者无差异(57.1% vs 77.8%),但缓解的4例急性淋巴细胞白血病患者均于短期内复发.伴其他7号染色体异常的11例患者仅4例缓解.结论 -7/7q-是7号染色体异常中为常见的核型改变,且多见于急性髓细胞白血病的M0、M1、M2型, 并可能与急性白血病的发病有关;伴7号染色体异常的急性白血病患者预后较差.
作者：陆滢；金洁；陈志妹；楼基余；徐伟来 刊期： 2004年第06期
目的明确一个伴随有类似关节指垫样病损和指甲病变的表皮松解性掌跖角化病的中国家系中角蛋白9(keratin 9, KRT9)基因突变情况. 方法用聚合酶链反应技术扩增家系成员及家系外50名正常人 KRT9基因的编码区及外显子与内含子交界处,DNA序列分析寻找突变位点,然后经限制性内切酶DdeⅠ分析验证. 结果患者 KRT9基因第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT的突变(N160S),而家系正常成员及家系外50个正常人中均不存在此突变. 结论 KRT9基因的第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT突变(N160S)导致该家系患者发生表皮松解性掌跖角化病.
作者：张宝荣；殷鑫浈；夏昆；丁美萍；胡正茂；郑敏；刘志蓉；夏家辉 刊期： 2004年第06期
目的探讨一氧化氮合酶2A(nitric oxide synthase 2A, NOS2A)基因启动子-969(G→C)多态性与肝硬化门静脉高压的相关性.方法采用病例对照和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测106例乙肝后肝硬化患者和108名健康对照者 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性,比较等位基因及基因型频率;应用逆转录-聚合酶链反应和Western 印迹技术,检测肝硬化组织NOS2A mRNA和蛋白表达.构建 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性荧光素酶重组质粒,瞬时转染,分析多态性的功能.结果在门静脉高压症组C等位基因和GC基因型频率为16.9%、33.8%,比正常对照组高(8.8%、17.6%),差异有显著性(P＜0.05,OR=2.42),相关分析呈正相关(r=0.18).单纯肝硬化组与对照组的C等位基因和GC基因型频率相比,差异无显著性(P＞0.05).C等位基因携带者比G等位基因携带者肝硬化组织NOS2A mRNA及蛋白表达明显增强,GC基因型启动子的活性显著升高.Logistic多元逻辑回归分析显示这一多态性是形成门静脉高压症新的独立危险因素.结论 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性与门静脉高压症相关,导致启动子活性增强,是形成门静脉高压症的新的危险因素.
作者：程元桥；王文琦；林菊生；熊平；姜晓丹 刊期： 2004年第06期
目的对9例马凡综合征(Marfan syndrome, MFS)患者的原纤维蛋白-1(fibrillin-1, FBN1)基因进行突变筛查,以发现新的 FBN1基因突变.方法应用变性高效液相色谱法对MFS患者 FBN1基因65个外显子中的35个进行突变筛查,对变性高效液相色谱图形异常的PCR扩增片段用DNA测序鉴定突变位置及性质,并用等位基因特异性PCR以及限制性片段长度多态性分析等方法进一步证实突变.结果在两例MFS患者中发现两种新的 FBN1基因突变.其中一种为第34外显子4307～4308位4个碱基TCGT的插入突变(4307insTCGT),另一种为第43外显子5309位的点突变5309G>A.结论FBN1基因移码突变(4307insTCGT)与点突变(5309G>A)分别是这两例MFS患者的发病原因.
作者：黄肖利；伍严安；陈发林；黄毅；马晓宁；陈同 刊期： 2004年第06期
患儿女,9岁,因经常感冒伴双下肢走路不稳,动作笨拙6年余再次来我院就诊.患儿生后5个月内生长发育正常,6个月坐不稳,1岁开始会走,2岁时仍走路不稳,经常跌倒,双手持物动作笨拙,经常感冒发热,每年住院2至3次.5岁前智力发育正常,以后出现进行性精神运动发育倒退.6岁以后共济失调及其他症状明显呈加重趋势,8岁以后上述症状加重且不能行走,语言表达欠清,目光呆滞,双手徐动,衣食不能自理.查体:发育营养正常,面容无异常,耳位不低,颈部淋巴结较少,扁桃体不大,咽后壁可见淋巴滤疱.
作者：刘长云；姜萍；季加芬；郝珉；吴晓萍；李晓娜 刊期： 2004年第06期
目的观察肿瘤坏死因子-β(tumor necrosis factor-β, TNF-β)G252A、C804A基因多态性分布,探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)发生的遗传学机理. 方法分别应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和序列特异性引物扩增技术对210 例CHD患者和186名健康对照者TNF-β G252A和C804A进行基因分型,同时用酶联免疫吸附剂试验测定其血清水平. 结果 CHD组C804A基因型分布(CC型25.7%、CA型49.5%、AA型24.8%)与对照组(37.1%、45.7%、17.2%)差异有显著性(χ2=7.073,P<0.05),CHD患者的AA型显著高于对照组(P<0.05);基因型频率的相对风险分析发现,AA型及CA型患CHD的风险是CC型的1.704倍(OR=1.704,95%CI:1.109～2.617);G252A基因型频率在两组之间比较差异无显著性,在累及血管支数之间比较差异有显著性(P<0.05).CHD组TNF-β及超敏C-反应蛋白血清水平[(46.62±21.65)pg/ml,(5.92±3.38)mg/L]均明显高于对照组[(13.37±11.28)pg/ml,(2.16±0.48)mg/L],差异有显著性(P<0.05),两组中804位点AA基因型TNF-β血清水平均略高于其它基因型,但差异无显著性(P>0.05). 结论 TNF-β C804A基因多态性与CHD的发病有相关性,804A等位基因可能是CHD发生的重要易感基因,252G与CHD病变严重程度有一定相关性.
作者：李艳；汪明；张平安；陈会；蒋学俊；黄从新 刊期： 2004年第06期
目的研究两例散发正常血钾型周期性麻痹(normokalemic periodic paralysis,normoKPP)患者的临床特点及其电压门控钠通道Ⅳ型α亚单位(α-subunit type Ⅳ of voltage-gated sodium channel, SCN4A)基因的突变.方法应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术及测序分析检测患者 SCN4A基因第13、19、23、24(部分)外显子是否发生已知导致高钾型周期性麻痹(hyperKPP)的突变(T704M、A1156T、M1360V、I1495F、M1592V);随后应用DHPLC技术筛查 SCN4A基因其余外显子,对出现异常洗脱峰者进行测序分析.结果两例患者的 SCN4A基因发生点突变2418(G→A)并引起氨基酸序列改变V781I,且为 SCN4A基因唯一错义突变.病例1的父亲也发生该突变,但未发病.结论中国人normoKPP患者存在V781I突变,该突变可能是导致normoKPP的突变之一.
作者：郭秀海；吴卫平；张雁华；贾建平；朱克 刊期： 2004年第06期
目的研究E-选择素(E-selectin)基因第2外显子G98T和第4外显子S128R遗传多态性在广西壮、汉两民族中的分布.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和DNA序列测定法检测162名壮族人和170名汉族人E-选择素基因第2外显子G98T和第4外显子S128R遗传多态性,比较两组E-选择素基因型和等位基因的分布频率.结果 E-选择素基因第2外显子等位基因G、T频率在壮族与汉族正常人群中分别为94.8%、5.2%和95.3%、4.7%;第4外显子等位基因S、R频率分别为92.0%、8.0%和95.9%、4.1%(χ2=4.482,P=0.034).结论 E-选择素基因 S128R多态性在广西壮、汉两民族中差异有显著性;E-选择素基因G98T多态性在广西壮、汉两民族中差异无显著性.
作者：韦叶生；蓝艳；杜诗库 刊期： 2004年第06期
目的探讨哈萨克族人群醛固酮合成酶基因 CYP11B2 T(-344)C多态性与原发性高血压的关联性.方法用聚合酶链反应、限制性内切酶方法检测了新疆巴里坤县哈萨克族186例原发性高血压患者和168名正常人群 CYP11B2基因T(-344)C多态性.结果哈萨克族正常人群及高血压患者的 CYP11B2基因T(-344)C多态CC、CT、TT基因型频率分布分别为0.12、0.61、0.27和0.20、0.50、0.30,C和T等位基因分布频率分别为0.43、0.57和0.45、0.55,符合Hardy-Weinberg平衡.群体相关分析结果表明: CYP11B2基因的C及T等位基因分布在高血压病组及正常人群差异无显著性(χ2=0.380,P=0.537);基因型频率之间差异无显著性(χ2=4.838,P=0.089).然而女性高血压组CC基因型频率较正常人群高(χ2=6.104,P＜0.05).结论 CYP11B2基因T(-344)C多态性可能与新疆巴里坤哈萨克族女性高血压有关.
作者：徐新娟；汪师贞；林仁勇；王笑峰；梁晓慧；温浩；张朝霞 刊期： 2004年第06期
目的建立针对中国人常见β-地中海贫血(β-地贫)基因型的产前诊断新方法.方法 PCR扩增的靶序列,经引物延伸,得到中国人β-地贫5个常见突变的特异性延伸片段,用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物,分离图谱可鉴定被检样本的基因型.结果盲法分析显示,36个家系108例样品的引物延伸变性高效液相色谱与反向点杂交(reverse dot blot,RDB)检测结果符合率为100%.其中6例RDB诊断为上述5个常见突变以外的突变.该法的突变检出率为94.4%(102/108),对产前诊断家庭的诊断率为97.2%(35/36).结论该法是一种准确、高效的β-地贫突变分析方法,可用于β-地贫的产前诊断.
作者：华亮；朱海；李欣荣；李坚；莫秋华；廖灿；侯云霞；钟梅；徐湘民 刊期： 2004年第06期
目的肿瘤生长具有血管依赖性.内皮抑素为胶原XⅧ羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子.实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinant human endostatin adenorirus, Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性.方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应.结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长.动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关.结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性.
作者：吴扬；杨莉；赵霞；宿静梅；胡兵；刘继彦；牛挺；罗彦；李秋；魏于全 刊期： 2004年第06期
目的探讨一个非综合征型遗传性耳聋大家系线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变类型.方法临床听力测试已明确诊断,并收集非综合征型遗传性耳聋分支家系中33人及6例散发聋患者的外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段,分别用BsmAⅠ、 ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G 和7445G点突变,对相关的扩增片段进行基因测序.结果酶切检测,家系中17例耳聋患者均为1555G点突变阳性,非母系成员及散发聋病例均为阴性.测序结果:6例酶切显示1555G突变阳性病例均发现(nt)1555 A→G转换和(nt)961 C插入,3243G、7445G点突变阴性.结论在该非综合征型遗传性耳聋大家系中,mtDNA 12S rRNA基因区域A1555G和961 insC的双重突变可能共同参与了听力损害的过程.
作者：曹新；邢光前；魏钦俊；卜行宽；王登元 刊期： 2004年第06期
目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4, CTLA-4)基因第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性及其导致的无效转录对重症肌无力(myasthenia gravis, MG)遗传易感性的影响. 方法酶联免疫吸附实验测定MG患者和健康对照血清中可溶性CTLA-4的水平;限制性片段长度多态性分析检测第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性;转录因子核因子(nuclear factor 1,NF-1)和CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein beta, c/EBPβ)结合位点通过染色质免疫沉淀实验得以验证.结果启动区-1772、-1661位点和第1外显子+49位点的多态性与MG,特别是伴发有胸腺瘤的MG密切相关.启动子-318位点的多态性与MG无关.CTLA-4基因4个多态性位点间有一个明确的正性连锁不平衡关系.MG患者血清可溶性CTLA-4的表达水平与等位基因的突变相关联.-1772、-1661位点的多态性可改变转录因子NF-1和c/EBPβ结合位点,而ConA、PHA则能促进NF-1和c/EBPβ的这种位点特异性转录活性.结论 MG患者 CTLA-4 A/G+49、C/T-1772和A/G-1661多态性可导致无效转录,影响MG的遗传易感性,T→C-1772的突变能影响基因的剪接,从而干扰蛋白的表达和功能.
作者：毛海婷；王雄彪；张玲；顾洪涛 刊期： 2004年第06期
目的对成都汉族群体6个短串联重复序列等位基因频率及其种属特异性进行研究,探讨其在法医学中的应用价值.方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色技术,对110名成都汉族无血缘关系健康个体的6个短串联重复序列等位基因频率及其种属特异性进行研究.结果D4S2366、D4S2367、D6S474、 D6S1281、 D2S1396和D20S601在成都汉族群体中等位基因个数分别为7、7、6、7、5、7;观察杂合度分别为0.802、0.708、0.770、0.627、0.542、0.672;个人识别率分别为0.887、0.828、0.849、0.848、0.794、0.865;非父排除率0.602、0.441、0.544、0.325、0.227、0.386.通过种属特异性的评价发现6个短串联重复序列与其他种属间存在较大差异.结论 6个短串联重复序列在成都汉族群体中具有较好的遗传多态性及种属特异性,在法医学研究中具有应用价值.
作者：张伟娟；侯一平；吴谨；贾振军；周雪平；李英碧；田静；颜静 刊期： 2004年第06期
目的探讨高脂血症患者载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)亚类组成变化的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和双向电泳-免疫印迹检测法,分析112例高脂血症患者和73名正常对照者APOE基因型、HDL各亚类组成及相对含量.结果高脂血症组和对照组APOE基因型及等位基因频率分布均以E3/3和ε3高.高脂血症患者中等位基因ε2携带者血清APOE/CⅢ较等位基因ε3升高,而HDL3b则下降,其差异有显著性(P<0.05).对照组中等位基因ε2携带者血清甘油三酯、apoE 、apoE/CⅢ较等位基因ε3和ε4携带者升高,等位基因ε2携带者HDL3a较等位基因ε3携带者低,其差异有显著性(P<0.05).结论 APOE基因多态性可能与血清HDL部分亚类的含量变化相关.
作者：龙石银；张雪梅；傅明德；徐燕华；刘秉文 刊期： 2004年第06期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
