陆滢；金洁；陈志妹；楼基余；徐伟来
患者女,13岁,因身材矮小来我院儿童保健门诊就诊.患者系第3胎第1产,孕44周顺产.查体:身高115 cm,身材匀称,无颈蹼,第二性征未发育,无月经初潮,乳房未发育,智力正常.B超:子宫轮廓清晰,边缘规整,约16 mm×13 mm,实质回声分布均匀,双侧附件显示不清,双侧卵巢未探及,子宫声像为基始子宫.X线照片:双胫骨近端内侧骨软骨瘤.父母非近亲婚配,表型正常,母孕期正常,无有害物质接触史.患者之妹,现已7岁,发育正常.
作者：叶志纯；赵蕊；祝兴元 刊期： 2004年第06期
例1 姐姐,12岁,为第1胎第1产,足月顺产.在1岁前生长发育与同龄儿童无差异,以后出现发育迟缓.查体:智力、视力及听力正常.身高91 cm,体重15 kg,指间距94 cm,体格发育明显落后于同龄儿童.皮肢粗糙,头大、前额突出,鼻梁凹,颈短、驼背、鸡胸明显.前肋缘外翻,腰椎后突,肝脾不大.四肢关节膨大,腕关节过伸,双膝关节外翻,下肢X型.腿疼难忍,鸭步,活动受限.手足畸形,指尖细,呈爪状.
作者：鞠秀丽；赵淑娥 刊期： 2004年第06期
目的建立针对中国人常见β-地中海贫血(β-地贫)基因型的产前诊断新方法.方法 PCR扩增的靶序列,经引物延伸,得到中国人β-地贫5个常见突变的特异性延伸片段,用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物,分离图谱可鉴定被检样本的基因型.结果盲法分析显示,36个家系108例样品的引物延伸变性高效液相色谱与反向点杂交(reverse dot blot,RDB)检测结果符合率为100%.其中6例RDB诊断为上述5个常见突变以外的突变.该法的突变检出率为94.4%(102/108),对产前诊断家庭的诊断率为97.2%(35/36).结论该法是一种准确、高效的β-地贫突变分析方法,可用于β-地贫的产前诊断.
作者：华亮；朱海；李欣荣；李坚；莫秋华；廖灿；侯云霞；钟梅；徐湘民 刊期： 2004年第06期
目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析.方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonic stem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应分析新基因的表达谱,并应用增强型绿色荧光蛋白真核表达系统分析新基因的亚细胞定位.结果成功克隆了一个新基因 HPESCRG1,GenBank登录号为AY283672.该基因cDNA长1395 bp,包含9个外显子和8个内含子,开放阅读框为250～1146 bp,定位在3q13.13,预测编码297个氨基酸,预计分子量为33 784,等电点为9.35.其编码蛋白有一个SAP功能域,该蛋白定位在细胞核内.该基因仅在人类ES细胞中表达,而在其分化细胞不表达,在人胚胎成纤维细胞、人间充质干细胞、成人和流产胚胎的多种正常组织中不表达.结论 HPESCRG1基因是一个人类ES细胞中表达特异性新基因,很可能与人类ES细胞的自我更新和维持其未分化状态密切相关.
作者：杜娟；林戈；乜照燕；卢光琇 刊期： 2004年第06期
目的研究两例散发正常血钾型周期性麻痹(normokalemic periodic paralysis,normoKPP)患者的临床特点及其电压门控钠通道Ⅳ型α亚单位(α-subunit type Ⅳ of voltage-gated sodium channel, SCN4A)基因的突变.方法应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术及测序分析检测患者 SCN4A基因第13、19、23、24(部分)外显子是否发生已知导致高钾型周期性麻痹(hyperKPP)的突变(T704M、A1156T、M1360V、I1495F、M1592V);随后应用DHPLC技术筛查 SCN4A基因其余外显子,对出现异常洗脱峰者进行测序分析.结果两例患者的 SCN4A基因发生点突变2418(G→A)并引起氨基酸序列改变V781I,且为 SCN4A基因唯一错义突变.病例1的父亲也发生该突变,但未发病.结论中国人normoKPP患者存在V781I突变,该突变可能是导致normoKPP的突变之一.
作者：郭秀海；吴卫平；张雁华；贾建平；朱克 刊期： 2004年第06期
目的调查Y染色体特异基因座DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2的遗传多态性在河北汉族人群中的分布. 方法应用聚合酶链反应及8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物结合银染显带技术,对DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座进行调查. 结果 DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座分别检出4、5、5、4种等位基因,基因频率分布分别为0.0359～0.6587、0.0179～0.4107、0.0122～0.4146、0.0476～0.5238,个人识别率分别为0.5121、0.6811、0.6679和0.6327;上述4个基因座组成的单倍型在164名无关男性中共观察到70种,其中有36种仅出现一次,单倍型的个人识别机率达0.9480,家系调查符合单倍型父系遗传方式.结论 DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座个人识别机率高,属较高鉴别能力的遗传标记系统,且具有明显的人群分布差异,在法医学及人类遗传学研究中具有重要的应用价值.
作者：赵丽；姚玉霞；丛斌；付丽红；谷振勇；李淑瑾；左敏；张国忠 刊期： 2004年第06期
先证者(Ⅲ1) 男,34岁.因生育掌跖角化症患儿来我所进行遗传咨询.患者幼年发病,掌跖皮肤呈弥漫性角质增厚,黄褐色,有裂痕,并延伸到掌跖侧缘;甲板增厚,弯曲,冬季加重.
作者：张爱东；吴爱华；邱毅；贾颐舫；任秀凤 刊期： 2004年第06期
患者女,35岁.结婚12年,自然流产两次,均发生在妊娠2个月左右.患者表型正常,身体健康,否认家族有流产、死胎或生育畸形儿史.妇科检查无异常,孕期无服药、患病及接触有害物质史.夫妇非近亲结婚,丈夫身体健康.取患者外周血进行淋巴细胞培养,常规制片,G显带分析,核型为46,XX,inv(7)(pter→p11∷q36→p11∷q36→qter).丈夫核型正常.
作者：张志芬；姜淼；孙素芬；韩维田 刊期： 2004年第06期
目的研究中国人4q35与10q26同源性EcoRⅠ片段的结构多态性,探讨该区域的可塑性、易位和体细胞嵌合现象及其与D4Z4重复单位缺失的关系.方法研究对象包括110名无血缘关系的健康成年人.低熔点胶包埋法抽提基因组DNA.同一样品分别进行EcoRⅠ酶切和EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切, 脉冲场电泳分离,p13E-11探针Southern杂交,曲线拟合法计算分析EcoRⅠ片段的长度,SPSS11.0统计软件分析数据.结果 77.3%(85/110)的个体为标准构型,4q35 EcoRⅠ片段的长度均值为(87.9±3.3) kb,中位数为78.5 kb;10q26同源性片段的长度均值为(90.1±4.1) kb,中位数为73.0 kb;经t检验,两者差异无显著性(P>0.05).19.1%(21/110)的个体检测到易位构型,其中4q→10q易位和10q→4q易位分别为9.1%(10/110)和10.0%(11/110),经卡方检验,两种易位形式的频率基本相等(χ2=0.053,P>0.05).3.6%(4/110)的个体检测到体细胞嵌合片段.此外,14.5%(16/110)的个体检测到小于35 kb的10q26 EcoRⅠ短片段.结论正常中国人4q35和10q26 EcoRⅠ片段具有多态性和动态性变化特征,两者具有高度同源性.4q35-10q26易位是导致4q35区不稳定和D4Z4缺失的重要因素,体细胞嵌合现象的出现提示4q与10q区D4Z4的互换重组可能发生于有丝分裂过程中.
作者：吴志英；王志强；王柠；林珉婷；慕容慎行 刊期： 2004年第06期
目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4, CTLA-4)基因第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性及其导致的无效转录对重症肌无力(myasthenia gravis, MG)遗传易感性的影响. 方法酶联免疫吸附实验测定MG患者和健康对照血清中可溶性CTLA-4的水平;限制性片段长度多态性分析检测第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性;转录因子核因子(nuclear factor 1,NF-1)和CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein beta, c/EBPβ)结合位点通过染色质免疫沉淀实验得以验证.结果启动区-1772、-1661位点和第1外显子+49位点的多态性与MG,特别是伴发有胸腺瘤的MG密切相关.启动子-318位点的多态性与MG无关.CTLA-4基因4个多态性位点间有一个明确的正性连锁不平衡关系.MG患者血清可溶性CTLA-4的表达水平与等位基因的突变相关联.-1772、-1661位点的多态性可改变转录因子NF-1和c/EBPβ结合位点,而ConA、PHA则能促进NF-1和c/EBPβ的这种位点特异性转录活性.结论 MG患者 CTLA-4 A/G+49、C/T-1772和A/G-1661多态性可导致无效转录,影响MG的遗传易感性,T→C-1772的突变能影响基因的剪接,从而干扰蛋白的表达和功能.
作者：毛海婷；王雄彪；张玲；顾洪涛 刊期： 2004年第06期
目的观察肿瘤坏死因子-β(tumor necrosis factor-β, TNF-β)G252A、C804A基因多态性分布,探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)发生的遗传学机理. 方法分别应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和序列特异性引物扩增技术对210 例CHD患者和186名健康对照者TNF-β G252A和C804A进行基因分型,同时用酶联免疫吸附剂试验测定其血清水平. 结果 CHD组C804A基因型分布(CC型25.7%、CA型49.5%、AA型24.8%)与对照组(37.1%、45.7%、17.2%)差异有显著性(χ2=7.073,P<0.05),CHD患者的AA型显著高于对照组(P<0.05);基因型频率的相对风险分析发现,AA型及CA型患CHD的风险是CC型的1.704倍(OR=1.704,95%CI:1.109～2.617);G252A基因型频率在两组之间比较差异无显著性,在累及血管支数之间比较差异有显著性(P<0.05).CHD组TNF-β及超敏C-反应蛋白血清水平[(46.62±21.65)pg/ml,(5.92±3.38)mg/L]均明显高于对照组[(13.37±11.28)pg/ml,(2.16±0.48)mg/L],差异有显著性(P<0.05),两组中804位点AA基因型TNF-β血清水平均略高于其它基因型,但差异无显著性(P>0.05). 结论 TNF-β C804A基因多态性与CHD的发病有相关性,804A等位基因可能是CHD发生的重要易感基因,252G与CHD病变严重程度有一定相关性.
作者：李艳；汪明；张平安；陈会；蒋学俊；黄从新 刊期： 2004年第06期
目的克隆抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,HnRNPA2/B1)单克隆抗体的重链可变区(variable region of heavy chain, VH)和轻链可变区(variable region of light chain, VL)基因,构建抗HnRNPA2/B1单链抗体(single chain Fv,ScFv)基因,并在大肠杆菌表达.方法采用斑点ELISA、Western印迹和免疫组化检测抗HnRNPA2/B1单克隆抗体3E8的特异性,并通过逆转录-聚合酶链反应、重叠延伸PCR来克隆、串联VH和VL基因,构建抗HnRNPA2/B1 ScFv基因pET28(a+)表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳、竞争抑制ELISA检测表达产物.结果 3E8抗体能特异性地与HnRNPA2/B1合成肽以及3株人肺癌细胞内HnRNPA2/B1结合;克隆的VH基因为345 bp,VL基因为309 bp,符合小鼠抗体可变区特性;抗HnRNPA2/B1 ScFv蛋白以包涵体形式表达,分子量约28 000,并具有与抗原结合活性.结论成功构建了抗HnRNPA2/B1 ScFv基因克隆,并在大肠杆菌中获得了功能性表达,为阐明HnRNPA2/B1与肺癌相关性奠定了实验基础.
作者：王霞；彭晓东；黎光；胡丽娟；毕建虹 刊期： 2004年第06期
目的研究中国汉族人共济失调性毛细血管扩张症(ataxia telangiectasia mutated,ATM)基因的单核苷酸多态和点突变.方法首先用PCR扩增ATM基因第39、61和63外显子的靶片段,然后用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)技术进行筛选,选择典型带型经全自动DNA测序证实.结果在ATM基因第39外显子以及第61和63内含子发现6个新的单核苷酸多态,它们分别是第39外显子第5689位和第5691位的A/T多态,第61内含子第+69位的T/G多态、第+94位的A/G多态和第+99位的T/G多态,第63内含子第+17位的G/C多态.在ATM基因第61外显子、第62内含子和第63外显子发现5个新的点突变,它们分别是第61外显子第8618位的T/G颠换、第62内含子第-13位的T/G颠换、第63外显子第8793位的T/G颠换、第8816位和第8848位的G/A转换.证实了ATM基因第39外显子第5557位G/A、第61内含子第+104位T/C和第62内含子第-55位T/C多态在中国汉族人中的存在.结论中国汉族人ATM基因的单核苷酸多态与白人存在较大差异.
作者：汤洪伟；边建超；江峰；沈强；朱虔兮；张宏伟；吴毅 刊期： 2004年第06期
目的探讨一个非综合征型遗传性耳聋大家系线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变类型.方法临床听力测试已明确诊断,并收集非综合征型遗传性耳聋分支家系中33人及6例散发聋患者的外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段,分别用BsmAⅠ、 ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G 和7445G点突变,对相关的扩增片段进行基因测序.结果酶切检测,家系中17例耳聋患者均为1555G点突变阳性,非母系成员及散发聋病例均为阴性.测序结果:6例酶切显示1555G突变阳性病例均发现(nt)1555 A→G转换和(nt)961 C插入,3243G、7445G点突变阴性.结论在该非综合征型遗传性耳聋大家系中,mtDNA 12S rRNA基因区域A1555G和961 insC的双重突变可能共同参与了听力损害的过程.
作者：曹新；邢光前；魏钦俊；卜行宽；王登元 刊期： 2004年第06期
患儿女,9岁,因经常感冒伴双下肢走路不稳,动作笨拙6年余再次来我院就诊.患儿生后5个月内生长发育正常,6个月坐不稳,1岁开始会走,2岁时仍走路不稳,经常跌倒,双手持物动作笨拙,经常感冒发热,每年住院2至3次.5岁前智力发育正常,以后出现进行性精神运动发育倒退.6岁以后共济失调及其他症状明显呈加重趋势,8岁以后上述症状加重且不能行走,语言表达欠清,目光呆滞,双手徐动,衣食不能自理.查体:发育营养正常,面容无异常,耳位不低,颈部淋巴结较少,扁桃体不大,咽后壁可见淋巴滤疱.
作者：刘长云；姜萍；季加芬；郝珉；吴晓萍；李晓娜 刊期： 2004年第06期
目的建立模拟人成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblast growth factor receptor 3, Fgfr3)374号甘氨酸至精氨酸点突变小鼠模型并进行初步表型分析.方法应用双重PCR法及分子克隆技术构建小鼠 Fgfr3-Gly374Arg点突变打靶载体,对胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞)进行打靶后,采用G418、Ganciclovir正负双向选择和Southern杂交对打靶ES细胞进行筛选,选发生正确同源重组的ES细胞进行胚泡显微注射,携带Neo基因的 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠与EIIa-Cre转基因鼠杂交后,得到只含 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠.用PCR法进行了基因型鉴定,并应用骨骼染色、组织学等技术对其表型进行了初步分析.结果 Fgfr3-Gly374Arg点突变小鼠体小尾短、头大,前额圆凸,骨骺生长板区明显缩短、结构紊乱,肥大软骨细胞区也有明显减少.同时伴有多数雌性小鼠不孕、子宫、卵巢变小、乳腺发育不良等变化.结论成功地建立了模拟人 Fgfr3-Gly374Arg点突变所致软骨发育不全的小鼠模型.
作者：王建民；杜晓兰；李翠玲；尹良军；陈波；孙晶；苏楠；赵玲；宋瑞华；宋维威；陈林；邓初夏 刊期： 2004年第06期
目的探讨高脂血症患者载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)亚类组成变化的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和双向电泳-免疫印迹检测法,分析112例高脂血症患者和73名正常对照者APOE基因型、HDL各亚类组成及相对含量.结果高脂血症组和对照组APOE基因型及等位基因频率分布均以E3/3和ε3高.高脂血症患者中等位基因ε2携带者血清APOE/CⅢ较等位基因ε3升高,而HDL3b则下降,其差异有显著性(P<0.05).对照组中等位基因ε2携带者血清甘油三酯、apoE 、apoE/CⅢ较等位基因ε3和ε4携带者升高,等位基因ε2携带者HDL3a较等位基因ε3携带者低,其差异有显著性(P<0.05).结论 APOE基因多态性可能与血清HDL部分亚类的含量变化相关.
作者：龙石银；张雪梅；傅明德；徐燕华；刘秉文 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值.方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测.以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照. 结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿.1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体.FISH检测与常规核型分析结果一致.结论 FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值.
作者：肖红梅；谭跃球；李麓芸；卢光琇 刊期： 2004年第06期
目的对9例马凡综合征(Marfan syndrome, MFS)患者的原纤维蛋白-1(fibrillin-1, FBN1)基因进行突变筛查,以发现新的 FBN1基因突变.方法应用变性高效液相色谱法对MFS患者 FBN1基因65个外显子中的35个进行突变筛查,对变性高效液相色谱图形异常的PCR扩增片段用DNA测序鉴定突变位置及性质,并用等位基因特异性PCR以及限制性片段长度多态性分析等方法进一步证实突变.结果在两例MFS患者中发现两种新的 FBN1基因突变.其中一种为第34外显子4307～4308位4个碱基TCGT的插入突变(4307insTCGT),另一种为第43外显子5309位的点突变5309G>A.结论FBN1基因移码突变(4307insTCGT)与点突变(5309G>A)分别是这两例MFS患者的发病原因.
作者：黄肖利；伍严安；陈发林；黄毅；马晓宁；陈同 刊期： 2004年第06期
目的探讨食管癌/贲门癌高发区人群食管癌和贲门癌染色体基因组变化特征.方法应用比较基因组杂交技术分析37例原发性食管癌和30例贲门癌患者染色体基因组的变化.结果比较基因组杂交发现,食管癌组织染色体8q发生DNA扩增的频率高(78%),其它依次为3q、5p、6q和7p;3p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为8p、9q和11q.贲门癌组织染色体20q发生DNA扩增频率高(43%),其它依次为6q、8q和6p; 17p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为19p、1p和4p.结论 8q、3q和5p DNA扩增和3p、8p和9q DNA丢失是河南高发区食管癌患者基因组DNA变化特征;而20q、6q DNA扩增和17p、19p、1p DNA丢失可能是河南高发区贲门癌患者基因组DNA变化特征. 这些结果为进一步定位筛选和克隆与食管癌/贲门癌相关基因提供了重要的理论信息.
作者：秦艳茹；王立东；邝丽芸；关新元；庄则豪；范宗民；安继业；曹世华 刊期： 2004年第06期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
