杜娟；林戈；乜照燕；卢光琇
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值.方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测.以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照. 结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿.1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体.FISH检测与常规核型分析结果一致.结论 FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值.
作者：肖红梅；谭跃球；李麓芸；卢光琇 刊期： 2004年第06期
目的研究中国汉族人共济失调性毛细血管扩张症(ataxia telangiectasia mutated,ATM)基因的单核苷酸多态和点突变.方法首先用PCR扩增ATM基因第39、61和63外显子的靶片段,然后用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)技术进行筛选,选择典型带型经全自动DNA测序证实.结果在ATM基因第39外显子以及第61和63内含子发现6个新的单核苷酸多态,它们分别是第39外显子第5689位和第5691位的A/T多态,第61内含子第+69位的T/G多态、第+94位的A/G多态和第+99位的T/G多态,第63内含子第+17位的G/C多态.在ATM基因第61外显子、第62内含子和第63外显子发现5个新的点突变,它们分别是第61外显子第8618位的T/G颠换、第62内含子第-13位的T/G颠换、第63外显子第8793位的T/G颠换、第8816位和第8848位的G/A转换.证实了ATM基因第39外显子第5557位G/A、第61内含子第+104位T/C和第62内含子第-55位T/C多态在中国汉族人中的存在.结论中国汉族人ATM基因的单核苷酸多态与白人存在较大差异.
作者：汤洪伟；边建超；江峰；沈强；朱虔兮；张宏伟；吴毅 刊期： 2004年第06期
目的研究中国人4q35与10q26同源性EcoRⅠ片段的结构多态性,探讨该区域的可塑性、易位和体细胞嵌合现象及其与D4Z4重复单位缺失的关系.方法研究对象包括110名无血缘关系的健康成年人.低熔点胶包埋法抽提基因组DNA.同一样品分别进行EcoRⅠ酶切和EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切, 脉冲场电泳分离,p13E-11探针Southern杂交,曲线拟合法计算分析EcoRⅠ片段的长度,SPSS11.0统计软件分析数据.结果 77.3%(85/110)的个体为标准构型,4q35 EcoRⅠ片段的长度均值为(87.9±3.3) kb,中位数为78.5 kb;10q26同源性片段的长度均值为(90.1±4.1) kb,中位数为73.0 kb;经t检验,两者差异无显著性(P>0.05).19.1%(21/110)的个体检测到易位构型,其中4q→10q易位和10q→4q易位分别为9.1%(10/110)和10.0%(11/110),经卡方检验,两种易位形式的频率基本相等(χ2=0.053,P>0.05).3.6%(4/110)的个体检测到体细胞嵌合片段.此外,14.5%(16/110)的个体检测到小于35 kb的10q26 EcoRⅠ短片段.结论正常中国人4q35和10q26 EcoRⅠ片段具有多态性和动态性变化特征,两者具有高度同源性.4q35-10q26易位是导致4q35区不稳定和D4Z4缺失的重要因素,体细胞嵌合现象的出现提示4q与10q区D4Z4的互换重组可能发生于有丝分裂过程中.
作者：吴志英；王志强；王柠；林珉婷；慕容慎行 刊期： 2004年第06期
先证者男,30岁,结婚3年,其妻孕5次,均在孕4个月内自然流产.均行B超检查示胚胎不发育,只有胚囊,无胚芽.患者夫妇表型正常,身体健康,非近亲婚配,孕期无患病史,但有接触硫磺史.查体:患者表型正常,发育正常,身高170 cm,体重69 kg.心肺功能正常,精液检查也正常.
作者：温莉娟；孟昭彦；刘利明；张玫 刊期： 2004年第06期
目的对河南汉族人群6个短串联重复序列(short tandem repeats,STR)基因座等位基因频率进行研究并获得群体遗传数据.方法对140名无血缘关系河南汉族个体的EDTA抗凝血样用酚-氯仿法提取DNA,应用多重PCR扩增技术结合聚丙烯酰胺凝胶电泳对D12S391、D5S818、D18S51、PAHI3、D8S1179、D3S1358共6个基因座在河南地区人群中的基因型分布进行分析.结果 6个基因座的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,各基因座的观察杂合度分别为0.871、0.769、0.871、0.773、0.901、0.722,6个位点的累积个体识别率为0.9999998,累计非父排除率为0.99845,累计个体匹配率为2.39×10-7.结论 6个基因座在河南汉族群体中具有较高的非父排除率和个体识别率,在法医学和群体遗传学研究中有一定的应用价值.
作者：陈辉；李晓雯；连建华；宋国英；程晓丽；贺颖；齐华；刘华；张钦宪 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在遗传病和产前诊断中的应用价值.方法应用着丝粒探针、特异性序列探针及染色体涂染探针等对36例常规核型分析疑有染色体异常患者的外周血和45例进行产前诊断的孕妇羊水间期细胞或中期分裂相进行FISH检测. 结果检出的染色体异常类型有:45,X、45,X/46,XX、45,X/46,Xr(X)、46,X,i(Xq)、47,XXY、46,XX,t(4;7)、47,XYY、47,XXX、47,XXY,inv(7)、46,XY,inv(7)、47,XX,+21,同时产前诊断出两例异常胎儿,分别是47,XX,+18和46,XY,der(15)t(Y;15).结论 FISH技术可以准确、快速地诊断各种染色体异常,是传统细胞遗传学的必要补充,可广泛用于遗传病诊断及产前诊断.
作者：赵丽；李红；薛永权；潘金兰；吴亚芳；卢敏 刊期： 2004年第06期
目的探讨7号染色体异常在急性白血病中的发生率及预后意义.方法采用R带常规显带技术进行染色体检查,对410例急性白血病患者的核型进行分析.结果 410例急性白血病患者中检出7号染色体异常患者32例,占7.8%;其中-7/7q-19例(59.4%),t(7;11)3例(9.4%),其他为少见的7号染色体改变:der(7),+7, t(2;7),t(5;7),t(7;9),t(7;8), dic(1;7).-7/7q-中,急性髓细胞白血病12例,其中M0、M1、M2型的-7/7q-发生率高于其他类型急性髓细胞白血病.32例患者中20例同时有其他染色体异常,常见的是t(9;22)伴-7,+8,-5.30例进行正规化疗的患者,11例缓解,缓解率低于同期急性白血病的总缓解率(36.7% vs 65.8%);伴-7/7q-的急性髓细胞白血病的缓解率低于染色体正常的急性髓细胞白血病患者(25% vs 55.6%);伴-7/7q-的急性淋巴细胞白血病的缓解率与染色体正常的急性淋巴细胞白血病患者无差异(57.1% vs 77.8%),但缓解的4例急性淋巴细胞白血病患者均于短期内复发.伴其他7号染色体异常的11例患者仅4例缓解.结论 -7/7q-是7号染色体异常中为常见的核型改变,且多见于急性髓细胞白血病的M0、M1、M2型, 并可能与急性白血病的发病有关;伴7号染色体异常的急性白血病患者预后较差.
作者：陆滢；金洁；陈志妹；楼基余；徐伟来 刊期： 2004年第06期
先证者男,32岁,结婚3年余.其妻妊娠两次,均于孕50余天时自然流产.曾做妇科及染色体检查均正常,妊娠期间无服药史,无有害物质接触史.患者表型及智力正常,夫妇非近亲结婚.
作者：段玲；段磊 刊期： 2004年第06期
目的肿瘤生长具有血管依赖性.内皮抑素为胶原XⅧ羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子.实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinant human endostatin adenorirus, Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性.方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应.结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长.动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关.结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性.
作者：吴扬；杨莉；赵霞；宿静梅；胡兵；刘继彦；牛挺；罗彦；李秋；魏于全 刊期： 2004年第06期
目的利用cDNA表达阵列构建遗传性癫痫大鼠海马基因表达谱,寻找其中的差异表达基因,为从分子水平探讨癫痫的发病机理打下基础.方法采用32P-α-dATP 逆转录标记探针与 cDNA 阵列杂交,构建P77PMC大鼠和Wistar大鼠海马基因表达谱,用图象分析仪分析两者基因表达谱差异.结果在P77PMC大鼠海马中共发现有15个差异表达基因,其中12个基因表达上调,3个基因表达下调.并用逆转录-聚合酶链反应进一步证实了结果的可靠性.结论 P77PMC大鼠与正常Wistar大鼠海马中存在多个差异表达基因,这些差异表达的基因可能在癫痫的发生中具有重要作用.
作者：吴志国；肖波；杨晓苏；唐发清；曾艺；谢光洁 刊期： 2004年第06期
先证者(Ⅲ9) 男,75岁.56岁时因诊断为喉癌行半喉手术切除术,术后病理检查证实为鳞状细胞癌.手术15年后因劳累后尿血,CT检查显示右输尿管口处直径约3 cm肿瘤,在我院行肿瘤及部分膀胱切除手术,术后病理诊断为(膀胱)乳头状癌.同年做胸片检查时发现右上肺孤立性结节影,CT示右上肺转移癌,行X刀立体定向放射治疗.2年前患者又出现胸闷气紧,胸片检查示:左侧胸腔积液,左肺下叶不张.CT扫描结果:左肺下叶癌并大量胸腔积液,抽胸水后注入顺铂等药物,配合X刀治疗后肿瘤消失.1年前患者因呕血,出现消化道梗阻症状,CT检查示幽门癌,行部分胃及幽门肿瘤切除术,术后病理证实为印戒细胞癌,现继续全身化疗.
作者：任晋进；张树平 刊期： 2004年第06期
例1 姐姐,12岁,为第1胎第1产,足月顺产.在1岁前生长发育与同龄儿童无差异,以后出现发育迟缓.查体:智力、视力及听力正常.身高91 cm,体重15 kg,指间距94 cm,体格发育明显落后于同龄儿童.皮肢粗糙,头大、前额突出,鼻梁凹,颈短、驼背、鸡胸明显.前肋缘外翻,腰椎后突,肝脾不大.四肢关节膨大,腕关节过伸,双膝关节外翻,下肢X型.腿疼难忍,鸭步,活动受限.手足畸形,指尖细,呈爪状.
作者：鞠秀丽；赵淑娥 刊期： 2004年第06期
目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析.方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonic stem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应分析新基因的表达谱,并应用增强型绿色荧光蛋白真核表达系统分析新基因的亚细胞定位.结果成功克隆了一个新基因 HPESCRG1,GenBank登录号为AY283672.该基因cDNA长1395 bp,包含9个外显子和8个内含子,开放阅读框为250～1146 bp,定位在3q13.13,预测编码297个氨基酸,预计分子量为33 784,等电点为9.35.其编码蛋白有一个SAP功能域,该蛋白定位在细胞核内.该基因仅在人类ES细胞中表达,而在其分化细胞不表达,在人胚胎成纤维细胞、人间充质干细胞、成人和流产胚胎的多种正常组织中不表达.结论 HPESCRG1基因是一个人类ES细胞中表达特异性新基因,很可能与人类ES细胞的自我更新和维持其未分化状态密切相关.
作者：杜娟；林戈；乜照燕；卢光琇 刊期： 2004年第06期
目的探讨一个非综合征型遗传性耳聋大家系线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变类型.方法临床听力测试已明确诊断,并收集非综合征型遗传性耳聋分支家系中33人及6例散发聋患者的外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段,分别用BsmAⅠ、 ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G 和7445G点突变,对相关的扩增片段进行基因测序.结果酶切检测,家系中17例耳聋患者均为1555G点突变阳性,非母系成员及散发聋病例均为阴性.测序结果:6例酶切显示1555G突变阳性病例均发现(nt)1555 A→G转换和(nt)961 C插入,3243G、7445G点突变阴性.结论在该非综合征型遗传性耳聋大家系中,mtDNA 12S rRNA基因区域A1555G和961 insC的双重突变可能共同参与了听力损害的过程.
作者：曹新；邢光前；魏钦俊；卜行宽；王登元 刊期： 2004年第06期
目的探讨高脂血症患者载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)亚类组成变化的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和双向电泳-免疫印迹检测法,分析112例高脂血症患者和73名正常对照者APOE基因型、HDL各亚类组成及相对含量.结果高脂血症组和对照组APOE基因型及等位基因频率分布均以E3/3和ε3高.高脂血症患者中等位基因ε2携带者血清APOE/CⅢ较等位基因ε3升高,而HDL3b则下降,其差异有显著性(P<0.05).对照组中等位基因ε2携带者血清甘油三酯、apoE 、apoE/CⅢ较等位基因ε3和ε4携带者升高,等位基因ε2携带者HDL3a较等位基因ε3携带者低,其差异有显著性(P<0.05).结论 APOE基因多态性可能与血清HDL部分亚类的含量变化相关.
作者：龙石银；张雪梅；傅明德；徐燕华；刘秉文 刊期： 2004年第06期
目的研究重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus vector, rAAV)介导的β-半乳糖苷酶的结构基因LacZ,构建的rAAVLacZ病毒经不同途径给药后骨骼肌的转染效率、表达持续时间,为rAAV载体介导的目的基因对Duchenne肌营养不良的基因治疗探索合适的给药途径.方法采用报告基因LacZ、包装质粒PXX2、腺病毒成份辅助质粒PXX6三质粒共转染293细胞,包装重组腺相关病毒载体介导的rAAVLacZ,将rAAVLacZ局部腓肠肌肌肉注射转染至C57/BL6鼠骨胳肌,分别于单点注射后2个月、5个月取肌肉切片X-Gal染色.采用经股动脉注射rAAVLacZ观察LacZ基因在后肢骨骼肌的转染表达.结果 (1)C57/BL6鼠局部肌注rAAVLacZ后, 2个月和5个月时,均呈LacZ基因阳性表达,5个月时无表达减低.(2)经股动脉注射rAAVLacZ, C57/BL6小鼠后肢骨骼肌的肌膜及血管壁平滑肌LacZ基因广泛转染.结论重组腺相关病毒载体介导的报告基因LacZ可在C57/BL6鼠骨胳肌中高效持续表达5个月以上,经股动脉转染是有希望的下肢肌肉转染途径,此工作为神经肌肉遗传病,尤其是Duchenne肌营养不良基因治疗的进一步研究奠定了基础.
作者：黎红华；张苏明；方思羽；陈春莲；汪道文；Xiao Xiao 刊期： 2004年第06期
目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4, CTLA-4)基因第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性及其导致的无效转录对重症肌无力(myasthenia gravis, MG)遗传易感性的影响. 方法酶联免疫吸附实验测定MG患者和健康对照血清中可溶性CTLA-4的水平;限制性片段长度多态性分析检测第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性;转录因子核因子(nuclear factor 1,NF-1)和CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein beta, c/EBPβ)结合位点通过染色质免疫沉淀实验得以验证.结果启动区-1772、-1661位点和第1外显子+49位点的多态性与MG,特别是伴发有胸腺瘤的MG密切相关.启动子-318位点的多态性与MG无关.CTLA-4基因4个多态性位点间有一个明确的正性连锁不平衡关系.MG患者血清可溶性CTLA-4的表达水平与等位基因的突变相关联.-1772、-1661位点的多态性可改变转录因子NF-1和c/EBPβ结合位点,而ConA、PHA则能促进NF-1和c/EBPβ的这种位点特异性转录活性.结论 MG患者 CTLA-4 A/G+49、C/T-1772和A/G-1661多态性可导致无效转录,影响MG的遗传易感性,T→C-1772的突变能影响基因的剪接,从而干扰蛋白的表达和功能.
作者：毛海婷；王雄彪；张玲；顾洪涛 刊期： 2004年第06期
目的调查Y染色体特异基因座DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2的遗传多态性在河北汉族人群中的分布. 方法应用聚合酶链反应及8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物结合银染显带技术,对DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座进行调查. 结果 DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座分别检出4、5、5、4种等位基因,基因频率分布分别为0.0359～0.6587、0.0179～0.4107、0.0122～0.4146、0.0476～0.5238,个人识别率分别为0.5121、0.6811、0.6679和0.6327;上述4个基因座组成的单倍型在164名无关男性中共观察到70种,其中有36种仅出现一次,单倍型的个人识别机率达0.9480,家系调查符合单倍型父系遗传方式.结论 DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2基因座个人识别机率高,属较高鉴别能力的遗传标记系统,且具有明显的人群分布差异,在法医学及人类遗传学研究中具有重要的应用价值.
作者：赵丽；姚玉霞；丛斌；付丽红；谷振勇；李淑瑾；左敏；张国忠 刊期： 2004年第06期
目的分析汉族人群caspase-3基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点及其构成的单倍型,为研究caspase-3基因对凋亡调节机制的个体差异提供线索.方法用变性高效液相色谱技术和DNA测序技术检测caspase-3基因的调控区、第2～7外显子及部分侧翼序列的多态性位点;分析位点间的连锁不平衡关系,估算它们构成的单倍型. 结果共检出3个SNP位点(C829A、A17532C、C20541T),分别位于caspase-3基因的5′端调控区、第4内含子和3′调控区;3个位点间存在强连锁不平衡,其中位点A17532C与C20541T呈完全连锁不平衡;54.3%的C-829/A-17532/C-20541是汉族人群的主要单倍型. 结论浙江地区汉族人群caspase-3基因上的3个SNP位点间存在强连锁不平衡,它们构成的主要单倍型不同于北美人群.
作者：谢云；周韧；叶月芳；杨水友；张伟 刊期： 2004年第06期
我们从1998年6月至2003年11月,对1260例男性患者进行染色体分析,主要为第1胎生育异常儿;不育症;无精子症;其妻习惯性流产等.按本室常规方法经细胞培养、制片及显带后,进行染色体核型分析,每例计数30个中期分裂相,分析5～10个核型.所检1260例男性患者中有30例Y染色体异常,异常率占2.4%,其中Y染色体数目异常3例,Y染色体结构异常8例,Y染色体长度变异19例:大Y染色体7例,小Y染色体12例.Y染色体异常的核型分析及遗传效果,见表1.
作者：戴美珍；朱敏；李伯利 刊期： 2004年第06期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
