任晋进；张树平
目的研究中国汉族人共济失调性毛细血管扩张症(ataxia telangiectasia mutated,ATM)基因的单核苷酸多态和点突变.方法首先用PCR扩增ATM基因第39、61和63外显子的靶片段,然后用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)技术进行筛选,选择典型带型经全自动DNA测序证实.结果在ATM基因第39外显子以及第61和63内含子发现6个新的单核苷酸多态,它们分别是第39外显子第5689位和第5691位的A/T多态,第61内含子第+69位的T/G多态、第+94位的A/G多态和第+99位的T/G多态,第63内含子第+17位的G/C多态.在ATM基因第61外显子、第62内含子和第63外显子发现5个新的点突变,它们分别是第61外显子第8618位的T/G颠换、第62内含子第-13位的T/G颠换、第63外显子第8793位的T/G颠换、第8816位和第8848位的G/A转换.证实了ATM基因第39外显子第5557位G/A、第61内含子第+104位T/C和第62内含子第-55位T/C多态在中国汉族人中的存在.结论中国汉族人ATM基因的单核苷酸多态与白人存在较大差异.
作者：汤洪伟；边建超；江峰；沈强；朱虔兮；张宏伟；吴毅 刊期： 2004年第06期
例1 姐姐,12岁,为第1胎第1产,足月顺产.在1岁前生长发育与同龄儿童无差异,以后出现发育迟缓.查体:智力、视力及听力正常.身高91 cm,体重15 kg,指间距94 cm,体格发育明显落后于同龄儿童.皮肢粗糙,头大、前额突出,鼻梁凹,颈短、驼背、鸡胸明显.前肋缘外翻,腰椎后突,肝脾不大.四肢关节膨大,腕关节过伸,双膝关节外翻,下肢X型.腿疼难忍,鸭步,活动受限.手足畸形,指尖细,呈爪状.
作者：鞠秀丽；赵淑娥 刊期： 2004年第06期
患者女,13岁,因身材矮小来我院儿童保健门诊就诊.患者系第3胎第1产,孕44周顺产.查体:身高115 cm,身材匀称,无颈蹼,第二性征未发育,无月经初潮,乳房未发育,智力正常.B超:子宫轮廓清晰,边缘规整,约16 mm×13 mm,实质回声分布均匀,双侧附件显示不清,双侧卵巢未探及,子宫声像为基始子宫.X线照片:双胫骨近端内侧骨软骨瘤.父母非近亲婚配,表型正常,母孕期正常,无有害物质接触史.患者之妹,现已7岁,发育正常.
作者：叶志纯；赵蕊；祝兴元 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在遗传病和产前诊断中的应用价值.方法应用着丝粒探针、特异性序列探针及染色体涂染探针等对36例常规核型分析疑有染色体异常患者的外周血和45例进行产前诊断的孕妇羊水间期细胞或中期分裂相进行FISH检测. 结果检出的染色体异常类型有:45,X、45,X/46,XX、45,X/46,Xr(X)、46,X,i(Xq)、47,XXY、46,XX,t(4;7)、47,XYY、47,XXX、47,XXY,inv(7)、46,XY,inv(7)、47,XX,+21,同时产前诊断出两例异常胎儿,分别是47,XX,+18和46,XY,der(15)t(Y;15).结论 FISH技术可以准确、快速地诊断各种染色体异常,是传统细胞遗传学的必要补充,可广泛用于遗传病诊断及产前诊断.
作者：赵丽；李红；薛永权；潘金兰；吴亚芳；卢敏 刊期： 2004年第06期
先证者(Ⅲ1) 男,34岁.因生育掌跖角化症患儿来我所进行遗传咨询.患者幼年发病,掌跖皮肤呈弥漫性角质增厚,黄褐色,有裂痕,并延伸到掌跖侧缘;甲板增厚,弯曲,冬季加重.
作者：张爱东；吴爱华；邱毅；贾颐舫；任秀凤 刊期： 2004年第06期
先证者男,32岁,结婚3年余.其妻妊娠两次,均于孕50余天时自然流产.曾做妇科及染色体检查均正常,妊娠期间无服药史,无有害物质接触史.患者表型及智力正常,夫妇非近亲结婚.
作者：段玲；段磊 刊期： 2004年第06期
目的探讨食管癌/贲门癌高发区人群食管癌和贲门癌染色体基因组变化特征.方法应用比较基因组杂交技术分析37例原发性食管癌和30例贲门癌患者染色体基因组的变化.结果比较基因组杂交发现,食管癌组织染色体8q发生DNA扩增的频率高(78%),其它依次为3q、5p、6q和7p;3p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为8p、9q和11q.贲门癌组织染色体20q发生DNA扩增频率高(43%),其它依次为6q、8q和6p; 17p发生DNA丢失的频率高(57%),其它依次为19p、1p和4p.结论 8q、3q和5p DNA扩增和3p、8p和9q DNA丢失是河南高发区食管癌患者基因组DNA变化特征;而20q、6q DNA扩增和17p、19p、1p DNA丢失可能是河南高发区贲门癌患者基因组DNA变化特征. 这些结果为进一步定位筛选和克隆与食管癌/贲门癌相关基因提供了重要的理论信息.
作者：秦艳茹；王立东；邝丽芸；关新元；庄则豪；范宗民；安继业；曹世华 刊期： 2004年第06期
目的建立模拟人成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblast growth factor receptor 3, Fgfr3)374号甘氨酸至精氨酸点突变小鼠模型并进行初步表型分析.方法应用双重PCR法及分子克隆技术构建小鼠 Fgfr3-Gly374Arg点突变打靶载体,对胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞)进行打靶后,采用G418、Ganciclovir正负双向选择和Southern杂交对打靶ES细胞进行筛选,选发生正确同源重组的ES细胞进行胚泡显微注射,携带Neo基因的 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠与EIIa-Cre转基因鼠杂交后,得到只含 Fgfr3-Gly374Arg点突变鼠.用PCR法进行了基因型鉴定,并应用骨骼染色、组织学等技术对其表型进行了初步分析.结果 Fgfr3-Gly374Arg点突变小鼠体小尾短、头大,前额圆凸,骨骺生长板区明显缩短、结构紊乱,肥大软骨细胞区也有明显减少.同时伴有多数雌性小鼠不孕、子宫、卵巢变小、乳腺发育不良等变化.结论成功地建立了模拟人 Fgfr3-Gly374Arg点突变所致软骨发育不全的小鼠模型.
作者：王建民；杜晓兰；李翠玲；尹良军；陈波；孙晶；苏楠；赵玲；宋瑞华；宋维威；陈林；邓初夏 刊期： 2004年第06期
目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4, CTLA-4)基因第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性及其导致的无效转录对重症肌无力(myasthenia gravis, MG)遗传易感性的影响. 方法酶联免疫吸附实验测定MG患者和健康对照血清中可溶性CTLA-4的水平;限制性片段长度多态性分析检测第1外显子+49位点、启动区-318、-1661、-1772位点的多态性;转录因子核因子(nuclear factor 1,NF-1)和CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding protein beta, c/EBPβ)结合位点通过染色质免疫沉淀实验得以验证.结果启动区-1772、-1661位点和第1外显子+49位点的多态性与MG,特别是伴发有胸腺瘤的MG密切相关.启动子-318位点的多态性与MG无关.CTLA-4基因4个多态性位点间有一个明确的正性连锁不平衡关系.MG患者血清可溶性CTLA-4的表达水平与等位基因的突变相关联.-1772、-1661位点的多态性可改变转录因子NF-1和c/EBPβ结合位点,而ConA、PHA则能促进NF-1和c/EBPβ的这种位点特异性转录活性.结论 MG患者 CTLA-4 A/G+49、C/T-1772和A/G-1661多态性可导致无效转录,影响MG的遗传易感性,T→C-1772的突变能影响基因的剪接,从而干扰蛋白的表达和功能.
作者：毛海婷；王雄彪；张玲；顾洪涛 刊期： 2004年第06期
先证者男,30岁,结婚3年,其妻孕5次,均在孕4个月内自然流产.均行B超检查示胚胎不发育,只有胚囊,无胚芽.患者夫妇表型正常,身体健康,非近亲婚配,孕期无患病史,但有接触硫磺史.查体:患者表型正常,发育正常,身高170 cm,体重69 kg.心肺功能正常,精液检查也正常.
作者：温莉娟；孟昭彦；刘利明；张玫 刊期： 2004年第06期
目的探讨一氧化氮合酶2A(nitric oxide synthase 2A, NOS2A)基因启动子-969(G→C)多态性与肝硬化门静脉高压的相关性.方法采用病例对照和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测106例乙肝后肝硬化患者和108名健康对照者 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性,比较等位基因及基因型频率;应用逆转录-聚合酶链反应和Western 印迹技术,检测肝硬化组织NOS2A mRNA和蛋白表达.构建 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性荧光素酶重组质粒,瞬时转染,分析多态性的功能.结果在门静脉高压症组C等位基因和GC基因型频率为16.9%、33.8%,比正常对照组高(8.8%、17.6%),差异有显著性(P＜0.05,OR=2.42),相关分析呈正相关(r=0.18).单纯肝硬化组与对照组的C等位基因和GC基因型频率相比,差异无显著性(P＞0.05).C等位基因携带者比G等位基因携带者肝硬化组织NOS2A mRNA及蛋白表达明显增强,GC基因型启动子的活性显著升高.Logistic多元逻辑回归分析显示这一多态性是形成门静脉高压症新的独立危险因素.结论 NOS2A基因启动子-969(G→C)多态性与门静脉高压症相关,导致启动子活性增强,是形成门静脉高压症的新的危险因素.
作者：程元桥；王文琦；林菊生；熊平；姜晓丹 刊期： 2004年第06期
目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值.方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测.以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照. 结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿.1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体.FISH检测与常规核型分析结果一致.结论 FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值.
作者：肖红梅；谭跃球；李麓芸；卢光琇 刊期： 2004年第06期
目的克隆抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,HnRNPA2/B1)单克隆抗体的重链可变区(variable region of heavy chain, VH)和轻链可变区(variable region of light chain, VL)基因,构建抗HnRNPA2/B1单链抗体(single chain Fv,ScFv)基因,并在大肠杆菌表达.方法采用斑点ELISA、Western印迹和免疫组化检测抗HnRNPA2/B1单克隆抗体3E8的特异性,并通过逆转录-聚合酶链反应、重叠延伸PCR来克隆、串联VH和VL基因,构建抗HnRNPA2/B1 ScFv基因pET28(a+)表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳、竞争抑制ELISA检测表达产物.结果 3E8抗体能特异性地与HnRNPA2/B1合成肽以及3株人肺癌细胞内HnRNPA2/B1结合;克隆的VH基因为345 bp,VL基因为309 bp,符合小鼠抗体可变区特性;抗HnRNPA2/B1 ScFv蛋白以包涵体形式表达,分子量约28 000,并具有与抗原结合活性.结论成功构建了抗HnRNPA2/B1 ScFv基因克隆,并在大肠杆菌中获得了功能性表达,为阐明HnRNPA2/B1与肺癌相关性奠定了实验基础.
作者：王霞；彭晓东；黎光；胡丽娟；毕建虹 刊期： 2004年第06期
目的研究中国人4q35与10q26同源性EcoRⅠ片段的结构多态性,探讨该区域的可塑性、易位和体细胞嵌合现象及其与D4Z4重复单位缺失的关系.方法研究对象包括110名无血缘关系的健康成年人.低熔点胶包埋法抽提基因组DNA.同一样品分别进行EcoRⅠ酶切和EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切, 脉冲场电泳分离,p13E-11探针Southern杂交,曲线拟合法计算分析EcoRⅠ片段的长度,SPSS11.0统计软件分析数据.结果 77.3%(85/110)的个体为标准构型,4q35 EcoRⅠ片段的长度均值为(87.9±3.3) kb,中位数为78.5 kb;10q26同源性片段的长度均值为(90.1±4.1) kb,中位数为73.0 kb;经t检验,两者差异无显著性(P>0.05).19.1%(21/110)的个体检测到易位构型,其中4q→10q易位和10q→4q易位分别为9.1%(10/110)和10.0%(11/110),经卡方检验,两种易位形式的频率基本相等(χ2=0.053,P>0.05).3.6%(4/110)的个体检测到体细胞嵌合片段.此外,14.5%(16/110)的个体检测到小于35 kb的10q26 EcoRⅠ短片段.结论正常中国人4q35和10q26 EcoRⅠ片段具有多态性和动态性变化特征,两者具有高度同源性.4q35-10q26易位是导致4q35区不稳定和D4Z4缺失的重要因素,体细胞嵌合现象的出现提示4q与10q区D4Z4的互换重组可能发生于有丝分裂过程中.
作者：吴志英；王志强；王柠；林珉婷；慕容慎行 刊期： 2004年第06期
我们从1998年6月至2003年11月,对1260例男性患者进行染色体分析,主要为第1胎生育异常儿;不育症;无精子症;其妻习惯性流产等.按本室常规方法经细胞培养、制片及显带后,进行染色体核型分析,每例计数30个中期分裂相,分析5～10个核型.所检1260例男性患者中有30例Y染色体异常,异常率占2.4%,其中Y染色体数目异常3例,Y染色体结构异常8例,Y染色体长度变异19例:大Y染色体7例,小Y染色体12例.Y染色体异常的核型分析及遗传效果,见表1.
作者：戴美珍；朱敏；李伯利 刊期： 2004年第06期
目的明确一个伴随有类似关节指垫样病损和指甲病变的表皮松解性掌跖角化病的中国家系中角蛋白9(keratin 9, KRT9)基因突变情况. 方法用聚合酶链反应技术扩增家系成员及家系外50名正常人 KRT9基因的编码区及外显子与内含子交界处,DNA序列分析寻找突变位点,然后经限制性内切酶DdeⅠ分析验证. 结果患者 KRT9基因第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT的突变(N160S),而家系正常成员及家系外50个正常人中均不存在此突变. 结论 KRT9基因的第1外显子第160位密码子发生AAT→AGT突变(N160S)导致该家系患者发生表皮松解性掌跖角化病.
作者：张宝荣；殷鑫浈；夏昆；丁美萍；胡正茂；郑敏；刘志蓉；夏家辉 刊期： 2004年第06期
目的建立针对中国人常见β-地中海贫血(β-地贫)基因型的产前诊断新方法.方法 PCR扩增的靶序列,经引物延伸,得到中国人β-地贫5个常见突变的特异性延伸片段,用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物,分离图谱可鉴定被检样本的基因型.结果盲法分析显示,36个家系108例样品的引物延伸变性高效液相色谱与反向点杂交(reverse dot blot,RDB)检测结果符合率为100%.其中6例RDB诊断为上述5个常见突变以外的突变.该法的突变检出率为94.4%(102/108),对产前诊断家庭的诊断率为97.2%(35/36).结论该法是一种准确、高效的β-地贫突变分析方法,可用于β-地贫的产前诊断.
作者：华亮；朱海；李欣荣；李坚；莫秋华；廖灿；侯云霞；钟梅；徐湘民 刊期： 2004年第06期
目的探讨一个非综合征型遗传性耳聋大家系线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变类型.方法临床听力测试已明确诊断,并收集非综合征型遗传性耳聋分支家系中33人及6例散发聋患者的外周静脉血样本,从白细胞中提取DNA,聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段,分别用BsmAⅠ、 ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555G、3243G 和7445G点突变,对相关的扩增片段进行基因测序.结果酶切检测,家系中17例耳聋患者均为1555G点突变阳性,非母系成员及散发聋病例均为阴性.测序结果:6例酶切显示1555G突变阳性病例均发现(nt)1555 A→G转换和(nt)961 C插入,3243G、7445G点突变阴性.结论在该非综合征型遗传性耳聋大家系中,mtDNA 12S rRNA基因区域A1555G和961 insC的双重突变可能共同参与了听力损害的过程.
作者：曹新；邢光前；魏钦俊；卜行宽；王登元 刊期： 2004年第06期
目的探讨7号染色体异常在急性白血病中的发生率及预后意义.方法采用R带常规显带技术进行染色体检查,对410例急性白血病患者的核型进行分析.结果 410例急性白血病患者中检出7号染色体异常患者32例,占7.8%;其中-7/7q-19例(59.4%),t(7;11)3例(9.4%),其他为少见的7号染色体改变:der(7),+7, t(2;7),t(5;7),t(7;9),t(7;8), dic(1;7).-7/7q-中,急性髓细胞白血病12例,其中M0、M1、M2型的-7/7q-发生率高于其他类型急性髓细胞白血病.32例患者中20例同时有其他染色体异常,常见的是t(9;22)伴-7,+8,-5.30例进行正规化疗的患者,11例缓解,缓解率低于同期急性白血病的总缓解率(36.7% vs 65.8%);伴-7/7q-的急性髓细胞白血病的缓解率低于染色体正常的急性髓细胞白血病患者(25% vs 55.6%);伴-7/7q-的急性淋巴细胞白血病的缓解率与染色体正常的急性淋巴细胞白血病患者无差异(57.1% vs 77.8%),但缓解的4例急性淋巴细胞白血病患者均于短期内复发.伴其他7号染色体异常的11例患者仅4例缓解.结论 -7/7q-是7号染色体异常中为常见的核型改变,且多见于急性髓细胞白血病的M0、M1、M2型, 并可能与急性白血病的发病有关;伴7号染色体异常的急性白血病患者预后较差.
作者：陆滢；金洁；陈志妹；楼基余；徐伟来 刊期： 2004年第06期
目的分析汉族人群caspase-3基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点及其构成的单倍型,为研究caspase-3基因对凋亡调节机制的个体差异提供线索.方法用变性高效液相色谱技术和DNA测序技术检测caspase-3基因的调控区、第2～7外显子及部分侧翼序列的多态性位点;分析位点间的连锁不平衡关系,估算它们构成的单倍型. 结果共检出3个SNP位点(C829A、A17532C、C20541T),分别位于caspase-3基因的5′端调控区、第4内含子和3′调控区;3个位点间存在强连锁不平衡,其中位点A17532C与C20541T呈完全连锁不平衡;54.3%的C-829/A-17532/C-20541是汉族人群的主要单倍型. 结论浙江地区汉族人群caspase-3基因上的3个SNP位点间存在强连锁不平衡,它们构成的主要单倍型不同于北美人群.
作者：谢云；周韧；叶月芳；杨水友；张伟 刊期： 2004年第06期
中华医学遗传学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
