学术投稿

VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定

周琪;梁后杰;阎晓初;彭秋平;周进明;吴峰;陈龙;边志衡

关键词:NRP2, RNA干扰, 真核表达载体, 构建, 鉴定
摘要:目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响.结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功.结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 洁悠神治疗褥疮的疗效观察

    目的:探讨洁悠神治疗褥疮的效果.方法:对Ⅱ~Ⅲ期褥疮的晚期肿瘤病人73例分为两组:观察组37例,对照组36例,观察组对各期褥疮在无菌操作下采用0.9%生理盐水彻底冲洗创面,用红外线灯40W照射15~20min后再用洁悠神均匀喷洒创面治疗褥疮,对照组则不采用洁悠神而用2%碘酊治疗,其它处理方式相同.将两组处理后的效果进行比较.结果:观察组治愈率明显优于对照组,时间明显短于对照组(P<0.01).结论:洁悠神治疗褥疮具有临床实用价值.

    作者:柯娜;吴惠琼;梁美嫦;周慧梅 刊期: 2007年第09期

  • 三维适形放疗联合肝动脉碘油栓塞化疗并热疗治疗原发性肝癌的疗效研究

    目的:探讨原发性肝癌的肝动脉碘油栓塞化疗(TACE)、热疗、三维适形放疗(3DCRT)的综合治疗价值.方法:122例原发性肝癌患者进行前瞻性随机分组研究,综合治疗组64例,行TACE并3DCRT,结合热疗治疗.对照组58例3DCRT治疗,联合TACE.结果:1、2、3年生存率综合治疗组分别为85%、65%、39%,对照组分别为59%、30%、18%(P<0.05)两组毒副作用相似.结论:对于非手术切除的原发性肝癌患者,TA-CE,结合3DCRT并热疗,能明显提高疗效,而毒副作用不增加.

    作者:谢小卫;张智策;赵东利;朱姣;李涛 刊期: 2007年第09期

  • 肿瘤专科医院抗肿瘤辅助用药分析

    目的:探讨肿瘤专科医院抗肿瘤辅助用药的逐年消耗情况,为促进临床合理用药提供依据.方法:对我院2003年~2005年连续3年的抗肿瘤辅助用药的年消耗量、金额、用药频度(DDDs)情况进行统计分析.结果:2003年~2005年抗肿瘤辅助用药占抗肿瘤药物的金额比例分别为26.3%、26.9%和30.0%.抗肿瘤辅助用药的金额逐年上升,且增幅明显.结论:抗肿瘤辅助药品在肿瘤治疗药物中占据的比例有增加的趋势,一些单品种用药存在不合理现象.

    作者:邵颖;吴古生 刊期: 2007年第09期

  • 山仙颗粒对小鼠S180肉瘤组织中Bax基因表达的影响

    目的:通过山仙颗粒(SXG)对小鼠移植性S180肉瘤组织中凋亡相关基因Bax表达的影响,探讨山仙颗粒抗肿瘤发生和发展的机理.方法:选取昆明小鼠40只,随机取10只作为空白对照组,其余30只小鼠于左后肢皮下接种S180肉瘤细胞,24小时后随机分为三组:荷瘤对照组(B组),金龙胶囊(JLC)组(C组),山仙颗粒组(D组).观察出瘤时间,检测移植瘤重,分别计算抑瘤率,并应用免疫组织化学方法(二步法)检测瘤组织中Bax基因的表达情况.结果:与荷瘤对照组比较,山仙颗粒组出瘤时间显著延长(P<0.05),小鼠瘤重减轻(P<0.05),Bax水平升高(P<0.05);两用药组之间无显著性差异(P>0.05).结论:山仙颗粒能抑制荷瘤小鼠体内S180肉瘤的生长,其机理可能与上调Bax的表达水平、诱导肿瘤细胞凋亡有关.

    作者:应小平;史迎丽;郭兰生;方艳;方改英;陈光伟 刊期: 2007年第09期

  • 沙培林增强人腹腔巨噬细胞抗癌免疫功能的研究

    目的:探讨腹腔内注射沙培林增强人腹腔抗癌免疫功能的机制.方法:72例早中期胃肠道肿瘤患者术前48h和24h腹腔内分别注射生理盐水和5KE的沙培林,术中采集腹腔内巨噬细胞,计数并测定乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)的活性,巨噬细胞吞噬活力,一氧化氮(NO)的分泌以及对人胃癌MKN1细胞的细胞毒性进行分析.同时采集大网膜,对大网膜乳斑的数量和面积进行观察.结果:沙培林显著增加腹腔巨噬细胞(PMΦ)的数量和NO的分泌,增强LDH和ACP的活性,吞噬活力,以及抗癌细胞毒性,也显著增加了大网膜乳斑的数量和面积.结论:腹腔内注射沙培林可显著增加人大网膜乳斑的数量和面积,并因此增加PMΦ的数量,增强PMΦ的活性.因而增强了腹腔巨噬细胞的免疫功能.

    作者:黄允宁;徐远义;王炜;杨世杰;杨勇;姚宝国 刊期: 2007年第09期

  • 半蛤壳状切口切除左颈胸交界部多发神经纤维瘤病1例

    1 病人患儿郭×,女,10岁,体重26Kg.因发现全身多处包块3年就诊,其父患神经纤维瘤病20余年.查体:左眼上睑下垂,左侧瞳孔缩小,左锁骨上、左腋窝、左臂内侧、左前臂、右枕部可扪及大小不等质硬肿块,左侧胸壁散在、成片咖啡色斑,左臂牵拉疼痛、外展受限.

    作者:刘文;苏旅明;李勃;张涛;刘凯;陈宁君;杨秋凤 刊期: 2007年第09期

  • 胃肠安方抑制胃癌转移的临床观察及对胃癌细胞株侵袭转移的影响

    目的:晚期胃癌多存在脾虚为本,邪实为标的病机特点,胃肠安方是以健脾为主,辅以清热解毒、软坚化痰的治疗胃癌的临床经验方剂.本研究旨在观察胃肠安方对胃癌转移的抑制作用.方法:对148例胃癌术后病例进行随机分组对照研究.并用transwell小室法检测胃肠安方对MGC-803细胞株侵袭能力和趋化运动能力的影响.结果:胃肠安方组及中西医结合组胃癌术后1、2、3年生存率明显高于化疗组,差异有显著性(P<0.05).胃癌术后1年转移率,胃肠安组与化疗组,中西医组与化疗组比较,差异均有显著性(P<0.05),胃肠安组与中西医组比较,差异无显著性(P>0.05);10%胃肠安方药物血清处理MGC-803细胞株24h,能明显抑制MGC-803细胞株的侵袭、趋化运动能力.结论:胃肠安方对胃癌术后转移可能有一定的预防作用.胃肠安方能明显抑制MGC-803细胞株的侵袭、趋化运动能力.

    作者:沈克平;潘传芳 刊期: 2007年第09期

  • 局部晚期的早期子宫颈癌综合治疗模式探讨

    目的:探讨局部晚期的早期宫颈癌(ⅠB2和ⅡA期)综合治疗的模式.方法:2000年1月至2002年10月,我们以新辅化疗后+放疗后,行宫颈癌根治术,治疗宫颈肿瘤≥4cm的局部晚期的早期宫颈癌224例,术后根据盆腔淋巴结转移、宫颈间质深层浸润、脉管内癌栓、组织分化差等高危因素给予化疗和外照射治疗.回顾性分析同期收治的ⅠB2~ⅡA期宫颈癌100例,作为对照组,均行术前腔内后装放疗+宫颈癌根治术.结果:治疗组与对照组癌细胞消失率差异有显著性(P=0.006);癌细胞浅肌层浸润率差异也有显著性(P=0.002);深肌层浸润率差异无显著性(P=0.316).盆腔淋巴结转移率比较:髂血管区>闭孔区>骶前区同时合并髂血管区.结论:新辅助化疗+术前后装联合手术治疗是局部晚期的早期宫颈癌综合治疗的较佳模式.宫颈癌术中有必要做骶前区淋巴结清扫.

    作者:冯继良;彭素蓉 刊期: 2007年第09期

  • 368例胃癌胃镜与病理病灶大小的对比分析

    目的:对比观察胃癌胃镜和病理病灶大小的变化.方法:回顾分析1996年1月~2005年12月诊治的368例胃癌患者,均经胃镜和病理证实,对比分析胃镜直视下其病灶大小与手术切除后病理病灶大小.结果:胃镜与病理判断基本符合者288例(78.1%),其中完全一致者58例(28%),判断不相符者80例(21.9%).结论:胃镜对病灶大小的判断与实际大小基本一致,但仍有21.9%的判断失误,准确判断胃镜下病灶大小及特点,对外科术式的选择及判断预后有重要意义.

    作者:刘峰;董雷 刊期: 2007年第09期

  • 围化疗期患者健康教育临床路径表的应用

    目的:观察健康教育临床路径表对围化疗期患者应用的效果.方法:确诊的120例围化疗期肿瘤患者被随机分为路径组、非路径组两组,观察出院前患者对肿瘤化疗相关知识和健康技能的掌握情况,患者及其家属对护理工作的满意程度.结果:化疗相关知识和健康技能掌握的百分比:路径组90%,非路径组46.7%(P<0.05);患者及其家属对护理工作的满意度:路径组95%,非路径组80%(P<0.05),路径组、非路径组两组对肿瘤化疗相关知识和健康技能的掌握及对护理工作的满意程度均有显著性差异.结论:健康教育临床路径表的应用显著提高了肿瘤化疗患者对化疗相关知识及健康技能的理解和认知、也提高了患者及其家属对护理工作的满意程度,有利于系统规范地进行健康教育,促进了整体护理的深入.

    作者:许艳萍;岑爱萍;华静 刊期: 2007年第09期

  • 植皮区射野皮肤耐受量观察

    目的:观察植皮区射野皮肤放疗耐受量.方法:以6Mev电子束或6MvX线照射植皮区皮肤,2~3Gy/次,5次/周,总剂量DT18~ Gy.结果:13例患者中,4例耐受DT18Gy;4例耐受DT50Gy;3例耐受DT60Gy;1例照至DT24Gy时因搔抓出现植皮区破溃,停止放疗;1例受照6Gy时因隐性皮肤窦道,合并感染,出现皮肤破溃,停止放疗.结论:自体皮肤移植成活后,除合并皮肤隐性窦道、感染及人为抓伤外可耐受18~60 Gy剂量.因病例数较少,对于植皮区皮肤放射耐受剂量,尚须进一步观察.

    作者:柯庆华;苏小岩;杨继元 刊期: 2007年第09期

  • 护理人员的语言干预对食管癌病人围手术期的影响

    目的:探讨护理人员语言干预对食管癌病人围手术期的影响.方法:将100例食管癌病人随机分为A、B两组.两组病人年龄、性别及职业统计学无显著差异.A组50例病人采用治疗性语言方式,即采用启发和鼓励性语言方式.B组50例病人采用非治疗性语言方式,分别在实施前后各1小时对病人脉搏、呼吸、血压指数进行观察并记录.结果:两种语言对患者的血压、脉搏、呼吸的影响有统计学差异.A组大多数病人基本处于放松状态,情绪相对稳定,而B组中大多数病人出现紧张情绪,甚至恐慌不安.结论:护理人员的语言表达方式对食管癌病人围手术期会有很大的影响.

    作者:李侠;宋萍 刊期: 2007年第09期

  • 后程适形放疗同步化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床观察

    目的:观察后程适形放疗同步化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床疗效及毒副作用.方法:对53例Ⅲ期非小细胞肺癌患者采用后程适形放疗同步化疗治疗.放射治疗先常规放疗2 Gy/天/次,5次/周;至40Gy后改适形放疗,3 Gy/天/,5次/周,共10次.化疗采用NP方案,每3周重复.结果:53例患者均完成治疗,CR 5例(9.4%),PR39例(73.6%),总有效率(CR+PR)为83.0%,1、2年生存率分别为81%和42%,局部控制率分别为85%和46%.放射性肺炎1~2级16例,3级1例;放射性食管炎1~2级26例,3级1例.结论:后程适形放疗同步化疗治疗晚期非小细胞肺癌能提高肿瘤局部控制率和近期疗效,并发症可以耐受.

    作者:李绵利;于泽顺;刘丽华;彭宪忠;纪春祥 刊期: 2007年第09期

  • 肺癌肺切除术后肺动脉残端充盈缺损的CT表现

    目的:探讨多层螺旋CT检查,肺癌肺切除术后肺动脉残端充盈缺损的发生率及其CT表现.方法:回顾性分析1999年~2003年间132例患者的胸部平扫和增强CT图像,男85例,女47例,平均年龄62.3岁(25岁~80岁).56例行右肺切除手术,76例左肺切除手术.观察增强CT是否出现肺动脉残端充盈缺损、大小、形态和随访CT上的变化.测量平扫和增强CT的CT值.测量肺动脉残端的长度,观察远离肺动脉残端的其他肺动脉内是否出现血栓.结果:肺动脉残端的充盈缺损见于17例肺癌肺切除患者(12.9%),充盈缺损局限于血管腔内,右侧肺动脉残端充盈缺损发生率为26.8%,左侧发生率为2.6%(P<0.001).右肺动脉残端的平均长度长于左侧(P<0.001).平扫和增强CT的CT值无明显变化.随访CT,大部分病灶无变化或缩小.结论:肺癌肺切除术后在CT上出现肺动脉残端充盈缺损并不罕见,原位血栓形成应与肿瘤复发、肺血栓栓塞相鉴别.

    作者:韩雪;赵殿江;孙晓楠 刊期: 2007年第09期

  • 吡柔比星膀胱灌注预防膀胱癌术后复发临床观察

    目的:分析2002年6月~2005年8月间158例浅表性膀胱癌患者行膀胱部分切除术或行TUR-Bt术后采用吡柔比星(THP)膀胱灌注预防肿瘤复发.方法:THP 30mg,每周1次,连用8周,而后每月1次,连用10个月,总疗程12个月.结果:所有患者均获6~24个月的随访.平均随访12.3个月.复发20例,复发率12.8%.结论:THP用于膀胱灌注预防膀胱癌术后复发有较好的疗效,不良反应少,给药方便,值得临床推广应用.

    作者:邵勇;祝青国 刊期: 2007年第09期

  • 大分割三维适形放疗治疗非小细胞肺癌的疗效观察

    目的:观察非小细胞肺癌(NSCLC)三维适形放射治疗(3D-CRT)大剂量分割的疗效与并发症.方法:回顾性分析大剂量分割3D-CRT的NSCLC32例,90%剂量线包绕PTV,单次分割剂量4 Gy~9Gy,5~10次不等,隔日,DT35~54Gy.结果:全部患者均能完成治疗计划,32例患者中,完全缓解(CR)7例,部分缓解(PR)19例,总有效率(CR+PR)81.2%,1、2年生存率分别为68.8%、28.1%,统计分析表明肿瘤体积为影响疗效的主要因素,全组病例无严重的急性放射副反应.结论:3D-CRT对NSCLC有较好的近期疗效,可改善症状,早期并发症可以耐受,更远期的疗效尚待进一步观察.

    作者:徐鹏飞;郭明;黄辉;魏鹏飞 刊期: 2007年第09期

  • VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定

    目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响.结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功.结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体.

    作者:周琪;梁后杰;阎晓初;彭秋平;周进明;吴峰;陈龙;边志衡 刊期: 2007年第09期

  • 纵隔卵黄囊瘤并发脑转移1例并文献复习

    卵黄囊瘤(yolk sac tumor,YST),又名内胚窦瘤(endodermal sinus tumor),是一种起源于生殖细胞的高度恶性肿瘤.大约占原始生殖细胞肿瘤的20%.纵隔卵黄囊瘤的发生,是由于生殖细胞从卵黄囊向生殖嵴移行过程中,被阻留在纵隔处或异常移居的结果.发生在性腺外者,因罕见或对其认识不足易误诊,本文报告1例患者的诊治过程,并就其临床病理形态学特点及其组织起源等问题,结合复习文献加以分析.

    作者:郑国甫 刊期: 2007年第09期

  • 多西紫杉醇联合顺铂治疗Ⅲ~Ⅳ期NSCLC临床研究

    目的:观察多西紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗Ⅲ~Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效、生存期及毒副反应.方法:Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者62例,多西紫杉醇75mg/m2,静脉点滴,d1;顺铂75mg/m2,静脉点滴,d1~3.21天为1疗程,至少治疗3周期.结果:总有效率为43.5%(27/62,均为部分缓解),Karnofsky计分增加或不变者占67.4%,中位缓解期为7个月.主要毒副反应为骨髓抑制,Ⅲ~Ⅳ度白细胞下降占16.1%,无Ⅲ~Ⅳ度血红蛋白和血小板下降.非血液学毒性轻微.结论:多西紫杉醇与顺铂联合给药方案治疗NSCLC有较好疗效,耐受性好.

    作者:李军孝;谷仲平;朱以芳;张涛 刊期: 2007年第09期

  • 42例合并心肌缺血的老年肿瘤病人围麻醉期管理

    目的:探讨合并心肌缺血的老年肿瘤病人围麻醉期管理.方法:42例合并心肌缺血老年的肿瘤病人进行全麻手术,采用异丙酚、瑞芬太尼静脉全身麻醉,根据心电图、血压、心率、脉搏、氧饱和度等监测结果,给予硝酸甘油、倍他乐克或艾司洛尔、利多卡因等处理,以维持血流动力学稳定.结果:37例患者停药后10~15 min清醒,呼吸功能和肌张力恢复,5例患者15~20 min清醒,恢复呼吸功能和肌张力.全部病例围麻醉期心血管或血流动力学指标平稳,无1例发生心衰、心肌梗塞、严重心律失常和麻醉意外等并发症,术后恢复良好.结论:采用异丙酚、瑞芬太尼静脉全身麻醉并维持一定深度麻醉,充分供氧,加强术中监测,适当酌情使用硝酸甘油、倍他乐克或艾司洛尔等,维持心血管系统和血流动力学稳定,对合并心肌缺血的老年肿瘤病人顺利度过手术麻醉期有重要的作用和临床意义,也是围麻醉期管理的关键.

    作者:梁锐;黄冰;潘灵辉;钱卫;黎阳 刊期: 2007年第09期

现代肿瘤医学杂志

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