学术投稿

冻存后人脐血DC介导的食管癌细胞瘤苗实验研究

陈素钻;陈康文;俞晶;谢丽华;张娟;罗丽莉;郭光华

关键词:低温保存, 树突状细胞, 食管癌细胞, 细胞融合, 癌症疫苗
摘要:目的:探讨杂交瘤技术制备脐血树突状细胞(DC)和食管癌细胞的融合瘤苗在低温冻存后的生物学特性及特异性CTL活性.方法:分离脐血CD34+干细胞诱导扩增为成熟DC,与EC109细胞经聚乙二醇(PEG)法融合;免疫磁珠法筛选EC109-DC;鉴定瘤苗表型;-80℃低温冰箱冻存融合细胞EC109-DC,3周后融冻;观察融冻瘤苗表型及致瘤性;MTT法测定瘤苗诱导淋巴细胞增殖能力及体外特异性免疫应答能力.结果:融冻后疫苗体外半悬浮生长;同时高表达FR和CD80;融冻后瘤苗接种小鼠体内未见肿瘤形成;未冻存和冻存后融合疫苗EC109-DC活化的T淋巴细胞,可产生针对EC109细胞的特异性杀伤作用.结论:冻存未破坏融合疫苗的完整性;融冻后瘤苗无体内致瘤性,安全可靠;-80℃低温冰箱短期冻存对EC109-DC融合疫苗生物学特性及特异的CTL活性无明显影响,可望为DC疫苗提供简单可行的保存方法.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 蛋珍油对家兔放射性食管损伤防治作用的实验研究

    目的:用家兔放射性食管损伤的模型来评价中药制剂蛋珍油对放射性食管炎的防治作用.方法:24只雄性家兔按随机抽签法分为单纯照射(R)组、蛋珍油给药(D)组、思密达给药(S)组和正常对照(C)组,每组6只.家兔清醒状态下,用直线加速器对R组、D组和S组家兔全胸部照射,照射剂量单次15Gy,源皮距(SSD)为100cm,照射面积7cm×3cm,照射剂量率200cGy/min.C组未行照射.蛋珍油给药量,7ml/次,思密达药量3g/次.每天分3次经口腔缓慢地给药,连续给药5天后立即统一处死家兔.取材切片,行苏木精一伊红(HE)染色,在光镜下观察食管组织病理学改变,用Western-bloting和RT-PCR技术分别检测IL-8和TGF-β1蛋白及mRNA表达水平.结果:D组家兔食管组织于照射后第5天放射性食管损伤比照射组明显减轻.D组IL-8和TGF-β1蛋白相对含量(0.589±0.053,0.511±0.022)较R组(0.744±0.026,0.686±0.091)明显减弱(P<0.01),与S组(0.547±0.062,0.496±0.066)差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR结果显示,R组的IL-8和TGF-β1mRNA相对含量(0.697±0.076,0.626±0.071)较D组(0.149±0.056,0.162±0.022),S组(0.332±0.081,0.396±0.018)和C组(0.126±0.092,0.108±0.058)差异均有统计学意义(P<0.01),D组IL-8和TGF-β1mRNA相对含量低于S组(P<0.05).结论:成功地复制了放射性食管损伤急性期动物模型,并发现蛋珍油能明显减轻辐射所引起食管损伤的病理改变,抑制放射性食管损伤中IL-8和TGFβ1蛋白表达及mRNA表达,对家兔急性放射性食管炎具有一定防治作用.

    作者:郭景华;朱云;史恒军;梁军 刊期: 2008年第07期

  • 脑血管母细胞瘤与Von Hippel-Lindau病的诊断与治疗(附1例)

    目的:探讨脑血管网状细胞瘤(血管母细胞瘤)与Von Hippel-Lindau病的诊断及治疗,以及两者之间的关系.方法:系统回顾性分析1980年6月-2005年6月诊治的96例脑血管网状细胞瘤,包括其中9例Von Hippel-Lindau病的临床资料.结果:96例脑血管网状细胞瘤全切78例,大部切除18例,死亡6例,手术死亡率6.28%,9例Von Hippel-Lindau病患者中,3例死于肾癌.结论:脑血管网状细胞瘤为良性血管性肿瘤,头颅MR可对典型病例作出定性分析,肿瘤实质性者病程缓慢,囊性者病程较短,出血性者起病急骤.发病部位较为恒定,主要在小脑,而以右小脑半球多见.治疗以手术切除为主,彻底切除则可治愈.Von Hippel-Lindau病具有潜在恶性,有家族遗传倾向.对于首先发现颅内脑血管网状细胞瘤的患者,应考虑Von Hippel-Lindau病的可能,应仔细全身检查,排除其它脏器病变,并长期随诊.

    作者:汤建明;谢万福;张晓东;王茂德 刊期: 2008年第07期

  • 冻存后人脐血DC介导的食管癌细胞瘤苗实验研究

    目的:探讨杂交瘤技术制备脐血树突状细胞(DC)和食管癌细胞的融合瘤苗在低温冻存后的生物学特性及特异性CTL活性.方法:分离脐血CD34+干细胞诱导扩增为成熟DC,与EC109细胞经聚乙二醇(PEG)法融合;免疫磁珠法筛选EC109-DC;鉴定瘤苗表型;-80℃低温冰箱冻存融合细胞EC109-DC,3周后融冻;观察融冻瘤苗表型及致瘤性;MTT法测定瘤苗诱导淋巴细胞增殖能力及体外特异性免疫应答能力.结果:融冻后疫苗体外半悬浮生长;同时高表达FR和CD80;融冻后瘤苗接种小鼠体内未见肿瘤形成;未冻存和冻存后融合疫苗EC109-DC活化的T淋巴细胞,可产生针对EC109细胞的特异性杀伤作用.结论:冻存未破坏融合疫苗的完整性;融冻后瘤苗无体内致瘤性,安全可靠;-80℃低温冰箱短期冻存对EC109-DC融合疫苗生物学特性及特异的CTL活性无明显影响,可望为DC疫苗提供简单可行的保存方法.

    作者:陈素钻;陈康文;俞晶;谢丽华;张娟;罗丽莉;郭光华 刊期: 2008年第07期

  • 经皮氩氦超低温定向消融治疗肺癌

    目的:观察经皮氩氦超低温定向消融治疗肺癌的近期疗效.方法:对无手术适应证的36例Ⅲ期和Ⅳ期肺癌患者,应用低温冷冻系统在CT引导下行经皮氩氦超低温定向消融治疗术.结果:患者术后早期多数出现一过性疼痛,无血、气胸等严重并发症.治疗结束后肿瘤CT值明显下降,治疗后3个月多数患者肿瘤缩小、局部疼痛减轻、KPS评分改善.结论:CT引导下氩氦超低温经皮靶向治疗肺癌是一个安全、有效的局部治疗手段,近期治疗效果良好.

    作者:杨胜生;曾志勇;程先进;庄聪文;林金祥 刊期: 2008年第07期

  • 阿片类药物治疗终末期癌痛患者的临床分析

    目的:分析终末期癌症患者应用阿片类镇痛药物的剂量与安全性.方法:回顾性分析181例终末期癌症患者中138例J(76.3%)用阿片类药物镇痛,比较不同性别、年龄、原发肿瘤部位和转移部位阿片镇痛药物疗效及副作用.结果:可评价的138例中,用硫酸吗啡控释片(美施康定)105例(76.1%),芬太尼透皮帖剂(多瑞吉)21例(15.3%),弱阿片类12例(8.7%).日平均吗啡口服量男性高于女性(P=0.02);随着年龄增大,用药剂量减少(P<0.05),不同部位肿瘤患者用量无明显差异(P>0.05).用硫酸吗啡控释片发生呼吸抑制需解救者4例(3.8%),便秘发生率11.4%.无药物过量致死亡患者.结论:阿片类镇痛药物使用剂量与性别和年龄有一定关系,原发病灶与剂量无关,不良反应可控制.

    作者:王笃平;王莉;陈馨 刊期: 2008年第07期

  • 三氧化二砷抑制小鼠H22肝癌移植瘤血管生长的实验研究

    目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠H22肝癌移植瘤组织血管生成的抑制作用.方法:建立小鼠H22肝癌移植瘤模型,腹腔应用As2O3治疗后,通过瘤体体积及瘤重的比较,病理观察血管分布,VEGF及bF-GF免疫组化检测,反映As2O3对小鼠H22肝癌组织血管生成的抑制作用.结果:As2O3高剂量及低剂量组均有效地抑制荷瘤鼠皮下肿瘤的体积及瘤重,瘤重抑瘤率分别为39.32%、44.89%,病理观察发现As2O3治疗组的肿瘤血供较对照组明显减少,免疫组化检测结果为As2O3治疗组肿瘤细胞的VEGF阳性细胞数低于对照组VEGF阳性细胞数,As2O3治疗组bFGF阳性表达率明显低于对照组(P<0.01),有显著差异.结论:As2O3对小鼠肝癌移植瘤血管生成具有明显的抑制作用,具有治疗肝癌的潜在价值.

    作者:唐印华;王玺;博挽澜;刘铁夫 刊期: 2008年第07期

  • 小干扰RNA对骨肉瘤细胞株CXCR4基因表达和侵袭力的影响

    目的:研究小干扰RNA (siRNA)对骨肉瘤细胞株中趋化因子受体CXCR4基因表达和侵袭力的影响.方法:采用单细胞克隆技术,从人骨肉瘤细胞系MG-63中分离培养出高表达CXCR4的骨肉瘤细胞株,设计合成针对CXCR4基因的siRNA,脂质体法转染骨肉瘤细胞株后用RT-PCR检测CXCR4基因表达水平的变化,荧光检测转染效率,Transwell趋化侵袭实验观察转染后细胞株侵袭能力的变化.结果:转染效率约为43.82%, CXCR4编码基因序列特异性siRNA能有效下调CXCR4基因表达水平,与空白组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05),细胞株穿过侵袭膜的细胞数也较转染前减少(P<0.05).结论:小分子干扰RNA技术能有效抑制骨肉瘤细胞株CXCR4基因的表达和体外侵袭能力.

    作者:李康华;肖文峰;龙海涛;朱勇;罗令 刊期: 2008年第07期

  • 热疗联合放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌疗效观察

    目的:观察热疗联合放化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和不良反应.方法:60例满足入组条件患者,随机分为对照组(30例)和治疗组(30例).对照组接受常规放疗,60-65 Gy/30-33 F-6-6.5W,放疗前接受NP方案化疗2周期,放疗后再接受1-4周期化疗;治疗组放化疗同对照组,放疗后1h内接受热疗,共6次-l3次(中位热疗次数9次).结果:治疗组有效率和1年局控率明显高于对照组(80.0% VS 53.3%,P<0.05;83.3% Vs 56.7%,P<0.05),而两组不良反应相似,患者均可耐受.结论:热疗联合放化疗治疗局部晚期NSCLC是一种安全有效的方法.

    作者:孙蔚亮;李小瑞;张清琴;花勤亮 刊期: 2008年第07期

  • MMP-2和COX-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

    目的:探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)和环氧合酶-2 (cyclooxygen-ase-2, COX-2)蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达与意义.方法:应用免疫组化SP方法检测80例非小细胞肺癌组织中MMP-2,COX-2的表达.结果: MMP-2及COX-2的阳性率分别为31.25%、41.25%.MMP-2及COX-2蛋白表达与临床病理因素无相关性.MMP-2和COX-2的阳性表达之间无相关性.结论: MMP-2及COX-2参与非小细胞肺癌的发生,但可能不能作为重要的预后指标.

    作者:王萍;张庆;王祖义;于东红;武士伍;承泽农 刊期: 2008年第07期

  • 凋亡诱导因子(AIF)在胃癌细胞和组织中的表达及意义

    目的:探讨凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:用免疫印迹法检测AIF在细胞中的表达量;用免疫组化法检测AIF在29例胃癌组织和10例癌旁正常胃组织中的表达.结果:胃癌细胞株中(低分化胃癌细胞株MGC-803、中分化胃癌细胞株SGC-7901)AIF的表达量高于上皮细胞株(胎儿胃上皮细胞株HFE-145、胃上皮永生细胞株GES-1);AIF在胃癌组织、癌旁正常胃组织中表达阳性率分别为41.38%、10%,胃癌组织中AIF的表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期、有无淋巴结转移均无关(P>0.05).结论:AIF的表达量上调可能对胃癌的发生、发展起一定作用.

    作者:王昌正;李英男;吴本俨;朱鸣;王卫华 刊期: 2008年第07期

  • HMGB1在大肠癌组织中的表达及其意义

    目的:研究大肠癌组织中高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)的表达,并探讨其与癌分化程度、肿瘤大小以及转移的关系.加入不同浓度丁酸钠后,观察SW620细胞中HMGB1的表达情况,以及不同药物浓度对癌细胞增殖活性的影响,从而探讨HMGB1与大肠癌细胞增殖活性的关系.方法:免疫组织化学法检测70例大肠癌组织、70例癌旁组织、70例正常大肠组织HMGB1蛋白表达;培养SW620细胞,MTT法检测SW620细胞增殖情况,计算抑制率,绘制抑制率曲线;免疫细胞化学法检测HMGB1蛋白表达情况.结果:HMGB1在大肠癌中呈强阳性表达(80.0%),在癌旁组织中仅有微弱表达,正常大肠组织无表达;HMGB1的阳性率与癌分化程度无关(P>0.05);与肿瘤的大小、浸润、淋巴及血道转移呈正相关(P<0.01);加入不同浓度丁酸钠后,对SW620细胞生长均有抑制作用,且丁酸钠的抑制作用与药物浓度和作用时间呈现一定的正相关;同时,随着药物浓度的增加,HMGB1的表达也有所下降.结论:HMGB1在大肠癌中呈强阳性表达,HMGB1与大肠癌的转移与增殖有着密切的联系,可作为大肠癌生长、转移及预后的重要判定指标.

    作者:宋舟;刘屹;包国强;何显力;马庆久 刊期: 2008年第07期

  • 彩色多普勒超声鉴别乳腺良恶性肿瘤的临床应用

    目的:探讨彩色多普勒超声鉴别乳腺良恶性肿瘤的诊断价值.方法:对84例乳腺肿瘤患者,进行二维超声确定肿瘤的部位、形态、大小、边界等一般情况.然后用彩色多普勒超声观察血流分级,用频谱多普勒测量病灶内血流的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)和峰值流速等并记录.结果:彩色多普勒超声鉴别乳腺良性与恶性肿瘤在血流分级及多普勒峰值PI、RI有显著性的差异(P<0.05.结论:彩色多普勒超声有助于乳腺肿瘤良恶性的鉴别诊断.

    作者:王瑞霞;王晓慧;薛小宁 刊期: 2008年第07期

  • 5-氟尿嘧啶联合干扰素α对胃癌细胞的影响

    目的:探讨化疗药物与细胞因子联合应用对肿瘤细胞增殖的影响.方法:首先MTT法测出不同浓度干扰素α(IFN)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞的抑制率,根据公式求出5-FU的半抑制浓度,然后用此浓度的5-FU与不同浓度的干扰素α配伍作用于胃癌细胞,用MTT法检测抑制率.用免疫细胞化学方法检测干扰素α、5-FU和干扰素α+5-Fu作用组的p53、p27、PCNA、Fas-L蛋白的表达情况.结果:MTT检测结果未发现干扰素α明显抑制肿瘤细胞增殖作用;5-Fu有抑制肿瘤增殖作用,且有浓度相关性;与5-FU作用组相比干扰素α+5-FU作用组的抑制率大于单纯5-FU组,且与配伍的干扰素浓度呈正相关性.之后的免疫组化试验发现IFNα+5FU组p53、p27、Fas-L蛋白表达的阳性率高于单纯的5-Fu组的阳性率,更明显高于IFN组的阳性率,而PCNA蛋白则相反.结论:5-FU对SGC7901胃癌细胞有明显的抗增殖作用,IFNα未见明显的抗增殖作用,但这两药物联合应用时,IFNα明显增强5-Fu的抗增殖作用;联合用药组的凋亡相关蛋白表达阳性率与5-FU组明显不同,IFNα增强5-FU的抗肿瘤增殖作用可能是由凋亡途径参与作用的.

    作者:李建;李宁;费哲为;欧敬民 刊期: 2008年第07期

  • 芳香化酶抑制剂的耐药机制及对策

    芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitors, AIs)在绝经后激素反应性乳腺癌妇女的辅助内分泌治疗和解救治疗效果优于三苯氧胺(tamoxifen, TAM).然而,随着药物治疗的深入,AIs的耐药也逐渐显现.近年研究发现: AIs的原发耐药可能与芳香化酶基因多态性有关,但具体的原理还不甚清楚.AIs的继发耐药可能与雌激素受体(ER)和多个生长因子通路的交叉通话相关.针对AIs的耐药,许多学者进行了逆转耐药的研究,本文就AIs的原发与继发耐药机制及逆转耐药的策略进行综述.

    作者:陈蕊华;张凤春 刊期: 2008年第07期

  • p53、TSP-1在食管鳞癌中的表达及临床意义

    目的:探讨食管鳞癌组织中p53蛋白、血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1, TSP-1)的表达特征及临床意义.方法:利用免疫组织化学(SP法)法检测食管癌病人根治术切除标本的68例食管鳞癌组织中p53、TSP-1的表达状况及计数肿瘤内微血管密度(microvessel density, MVD),并对上述指标与临床病理特征、复发转移率之间的关系进行分析.结果:食管鳞癌组织中p53、TSP-1的总阳性率分别为72.06$和66.18%,p53表达与TSP-1表达呈负相关(P<0.01),TSP-1蛋白阳性表达组与TSP-1蛋白阴性表达组的MVD值分别为(18.37±4.86),(29.80±6.35),两组MVD值之间差异显著具有统计学意义(P<0.01);TSP-1与MVD呈负相关(P<0.0l);p53的表达与病理分级、淋巴结转移和临床分期具有相关性.结论:TSP-1的阳性表达有可能通过抑制食管癌新生血管的形成,从而阻止浸润和转移.p53、TSP-1有可能成为判断食管癌恶性潜能和预后的重要生物学指标.

    作者:褚廷广;万里新;蔡政;陈沛;吴会芳;周文鹏;李琮宇 刊期: 2008年第07期

  • SOD、CYFRA21-1及CA125联合检测在卵巢癌诊断中的意义

    目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)、CYFRA21-1及CA125检测在卵巢癌诊断中的意义.方法:测定83例卵巢癌、35例卵巢良性病变及30例正常妇女血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、CYFRA21-11及CA125,并作比较分析.结果:卵巢癌患者血清Mn-SOD水平较卵巢良性病变及正常妇女明显降低(P<0.05或0.Ol),CYFRA21-1及CA125水平明显升高(P<0.05或0.O1),Mn-SOD、CYFRA21-1及CA125的敏感性分别为74.7%、81.9%和79.5%.三者联合检测可使敏感性提高到95.1%,准确度提高到94.7%.结论:联合检测Mn-SOD、CYFRA21-1及CA125对卵巢癌诊断有一定的临床应用价值.

    作者:劳明;吴芸;黄文成;潘元平;李佩章;雷考宁 刊期: 2008年第07期

  • 顺铂水针剂与粉针剂体外细胞毒作用的差异性研究

    目的:比较两种不同剂型顺铂针剂的细胞毒效应.方法:用含不同终浓度顺铂水针剂与粉针剂的培养液培养Hela细胞系,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算顺铂的50%抑制浓度(IC50),分析比较两种不同顺铂剂型针剂在体外的细胞毒效应.结果:相对于顺铂粉针剂,相同终浓度顺铂水针剂作用的Hela细胞存活率较低,其IC50值分别为(14.0±0.07)μg·ml-1及(15.03±0.26)μg·ml-1(P=0.003).其中在(0.1、1、10)μg·ml-1组中细胞存活率存在差异.结论:顺铂水针剂较粉针剂体外细胞毒效应强.

    作者:杨乐;刘文超;李蓉 刊期: 2008年第07期

  • Id1在肾细胞癌中的检测及其意义

    目的:含双螺旋环的Id1(inhibitor of DNA binding or inhibitor of differentiation),在器官组织中的表达具有组织特异性.近年研究显示其高表达与某些肿瘤的发生、发展密切相关.本研究检测了肾正常组织、肾良性囊肿和肾癌中Id1蛋白的表达,并分析其表达量与肾癌细胞分化类型的相关性.方法:用免疫组化SP法检测10例肾癌旁正常组织、38例肾细胞癌和10例肾良性囊肿组织中Id1的表达.用JD801形态图像分析系统对图像进行定量分析.结果:Id1蛋白在正常肾组织中在肾小管上皮细胞内高表达;在肾良性囊肿组织中表达量明显减少;在肾癌细胞中均阳性表达(38/38).颗粒细胞癌中Id1的表达水平高,其次为混合细胞癌,透明细胞癌表达量较少.结论:人正常肾小管上皮细胞内高表达Id1;良性囊肿组织中Id1表达减少;肾癌组织中Id1蛋白有广泛表达,且分化差的癌细胞类型表达量高,表明Id1与肾癌细胞的恶性度和预后密切相关.

    作者:于小玲;尚芳芳;徐晓慧;姜长青;徐文华 刊期: 2008年第07期

  • 参芪扶正注射液配合紫杉醇加顺铂治疗中晚期非小细胞肺癌的临床观察

    目的:评价参芪扶正注射液配合紫杉醇加顺铂在中晚期非小细胞肺癌化疗中的作用.方法:60例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为参芪扶正注射液配合化疗组(治疗组)和单纯化疗组(对照组),其中配合化疗组30例,采用紫杉醇135mg/m2+生理盐水500ml静滴3小时以上,第1天,后予顺铂30mg/m2静滴,第1-3天方案化疗,化疗时常规行抗过敏预处理及止吐处理,化疗当天静滴参芪扶正注射液250ml,1次/日,连用10天-14天,每21天为1周期.对照组30例化疗方案同配合化疗组,至少2个周期后评价疗效及生存质量改善情况.结果:参芪扶正注射液配合化疗组总有效率(53.3%)较单纯化疗组(46.6%)高,但差异无统计学意义(P>0.05),在改善患者生活质量、减轻化疗毒性方面明显优于单纯化疗组,差异有显著性(P<0.05).结论:参芪扶正注射液配合紫杉醇加顺铂在治疗非小细胞肺癌中可提高化疗疗效,减轻化疗毒性,提高患者生活质量.

    作者:张福林 刊期: 2008年第07期

  • 增强型绿色荧光蛋白基因稳定转染胰腺癌细胞

    目的:建立稳定高表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)并能连续传代的胰腺癌细胞株.方法:将携带EGFP基因的pEGFP-C1质粒体外转染人胰腺癌细胞株SW1990,G418筛选稳定表达绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养,用荧光显微镜和流式细胞仪检测癌细胞荧光蛋白表达.结果:转染EGFP的胰腺癌细胞用G418筛选18天后,挑选克隆扩大培养,癌细胞几乎均见荧光蛋白表达并可连续稳定传至20代以上.结论:胰腺癌细胞株SW1990-EGFP的建立有助于构建理想的动物模型来研究肿瘤侵袭和转移的机制.

    作者:刘文松;燕海姣;戴宗晴 刊期: 2008年第07期

现代肿瘤医学杂志

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主管:陕西省科学技术协会

主办:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会