单桂秋；李艳辉；张雅妮；邓爱民；李红梅；吕品；周谋；刘广亚
血小板的主要功能是参与生理性止血、促进凝血并维持毛细血管的完整性等.20世纪60年代以来已确证血小板有吞噬病毒、细菌和其他颗粒的功能.以往临床静脉输注血小板的主要用途是治疗血小板数量减少或和功能异常的患者;然而血小板作为1种多功能细胞,如今不仅在血栓形成和止血中发挥作用,而且在血管发生、组织修复和炎症等过程中也扮演着重要的角色.20世纪70年代即已开展了富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)应用于创伤修复中的研究,Harke等[1]于1977年首次分离制备PRP,成功地将其用于心脏外科手术患者.1993年,Hood等[2]在PRP中加入凝血酶和钙离子,并将其所形成的凝胶状物质代替纤维素凝胶,首次提出了血小板凝胶(platelet gel,PG)的概念.近年来,有关血小板应用于创伤修复的研究有了更加深入与广泛的发展,涉及颌面外科、矫形外科、整形外科和美容外科等多学科,甚至在细胞培养(包括干细胞培养)、基因工程、组织工程、抗衰老、运动医学方面以及创伤修复的完美愈合中显现出独特的作用.
作者：单桂秋；程飚；张雅妮；李艳辉；刘广亚 刊期： 2011年第04期
目的 分析初筛ABO血型检测不符的影响因素,并提出相应的预防措施.方法 统计无偿献血标本26406人次中初筛与实验室内血型不符的例数及原因.结果 26 406例无偿献血标本,初筛血型错误79例,误定率为0.3%,其中实验室正反定型相符71例,不符8例.献血者标本含有强冷凝集素、亚型及抗原减弱为17例.结论 初筛 ABO血型不符大多数是人为因素导致.应采取加强责任心,严格操作规程,改善献血环境,加强试剂管理等措施以减少血型错误的发生.
作者：袁小玲；熊春梅；杨卫红；李国良 刊期： 2011年第04期
目的 调查对全省33家三级以上综合性医院输血科现状,加强对输血科的建设和管理.方法 本次医院输血科的考核检查,的主要从医院管理者、临床医生和输血科工作人员等方面进行设计,具体包括机构设置和管理制度、输血规范和科学合理输血、血液贮存发放和输血质量管理进行考核检查.结果 机构设置和管理制度、输血规范和科学合理输血、血液贮存发放和输血质量管理等方面的平均合格率分别为62.0%、67.3%、82.1%.结论 医院输血科的建设和管理,首先卫生行政部门和医疗机构要对医院输血科进一步重视,加强科室建设和管理.其次,强化临床医护人员对输血的安全意识,严格按照临床输血有关规范操作.
作者：王显荣；付铁红；张萍萍；徐伟伟 刊期： 2011年第04期
机采血小板是临床上较常用的一种血液制品,具有纯度高,疗效好,不良反应少等优点.在机采血小板采集的过程中,因献血者精神紧张或采血不畅等诸多因素会导致血小板出现冲红的现象,冲红后的血小板混有大量的红细胞,无法发放临床.由于采集血小板的耗材十分昂贵,同时血小板捐献者的招募又存在困难,如果把冲红的血小板报废掉,这就造成了巨大的血源浪费,目前本站采用MCS+血细胞分离机995E耗材中的三连袋进行离心处理冲红的血小板,取得了很好的效果,现报道如下.
作者：尹涛；白兰兰；石丽萍；娄凯 刊期： 2011年第04期
目的 了解广西沿海地区无偿献血人群的HIV感染情况,为采供血机构开展合理有效的无偿献血宣传、招募和检测工作提供依据.方法 选取2005～2009年广西沿海地区(北海、钦州和防城港)3家血站的无偿献血者的血液标本的抗-HIV检测数据进行分析,这些标本均经2种不同厂家的ELBA试剂筛查,对抗-HIV阳性的标本应用免疫印迹法(WB)作了确证试验.结果 广西沿海地区2005～2009年5年的无偿献血人群抗-HIV阳性率为0.04%(76/169 091)其中钦州为0.06%(55/94 372)、北海为0.04%(19/46 121)、防城港为0.007%(2/28 598);感染者以当地居民为主,男性多于女性,已婚者和未婚者接近,以18～29岁年龄段为主,职业以文化程度较低的自由职业者居多.结论 HIV感染已从高危人群向一般人群扩散,采供血机构除了要严格对无偿献血者的抗-HIV筛检外,应强化对其预防艾滋病的宣传力度,确保献血者来自健康的低危人群,保证临床用血的安全.
作者：黄聪；孙家志；谭瑞琼 刊期： 2011年第04期
目的 探讨枸橼酸钠对机采血小板捐献者骨代谢和骨转换过程的影响.方法 选择初次捐献(A组)和1年内捐献6次以上(B组)的健康机采血小板捐献者各39名,捐献前和捐献过程中均不服用钙剂.分别于采集前和采集后1 h内留取血液标本分离血清,采用ELISA方法 测定捐献者血清骨钙蛋白(OC)、护骨素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)和1型胶原C端肽(CTX-1)水平.结果 A、B2组采集后血清OC、OPG、OPN和CTX-I水平均明显高于采集前水平(均为P<0.01);B组采集前4项观察指标水平明显高于A组采集前水平(均为P<0.01);B组采集前OPG水平明显低于A组采集后水平,而前者OC、OPN和CTX-I水平明显高于后者(均为P<0.01).结论 以ACD-A抗凝、不服用钙剂的机采血小板捐献者捐献后骨代谢、骨转换活动活跃,长期反复捐献者骨转换长期维持较活跃状态,溶骨过程占优势.
作者：王同显；吴振军；张永征；赵会霞；孙振秀 刊期： 2011年第04期
目的 建立血小板捐献者HLA基因分型资料库,探讨HLA-A、B基因频率及单体型频率,为临床患者提供HLA匹配的血小板.方法 应用聚合酶链反应-序列特异性引物方法 和Luminex-SSO方法 对730名沈阳地区血小板捐献者进行中低分辨率HLA-A、B基因分型,根据HLA表型群体资料,使用大数学预期值算法(ExpectationMaximization,EM)计算HLA-A、B座位单体型频率.结果 HLA-A位点共检出15种等位基因,HLA-B位点共检出36种等位基因,单体型数222种.结论 为向临床提供HLA匹配的血小板,各地区有必要建立血小板捐献者HLA基因分型资料库.
作者：张坤莲；陈阳；李晓丰；章旭；李剑平 刊期： 2011年第04期
目的 探讨一氧化氮(NO)供体S-亚硝基乙酰膏霉胺(SNAP)对常温保存血小板过程中血小板质量的影响.方法 离心法制各浓缩血小板共12人份,38～40 ml/份.将相同血型的2袋混合,加入复温后的冰冻血浆至约100 ml,混匀后均分、转移至2个血小板专用保存袋,分别为实验组:保存前加入终浓度10～5mol/L SNAP;对照组:加入等体积的无菌生理盐水.(22±2)℃振荡保存7 d,分别在d1、d3、d5、d7取样检测血小板计数、pH、血小板活化率及抗低渗性休克反应等指标.结果 2组血小板在保存过程中pH均保持在6.8以上;血小板活化率均不断升高,实验组从(5.93±1.43)%升高到(44.22±6.84)%,对照组从(8.22±1.33)%升高到(54.32±5.68)%,d1、d3、d5、d7 2组血小板之间活化率差异有统计学意义(P<0.05);d1、d5、d7实验组血小板抗低渗休克反应分别为(65.98±7.57%)、(53.1±8.44)%、(44.23±0.08)%,对照组为(50.92±4.48)%、(40.06±4.66)%、(35.28±0.04)%,d1、d5、d7实验组抗低渗休克反应能力高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 在血小板保存过程中加入NO供体SNAP一定程度上可以抑制血小板活化,改善血小板功能.
作者：谢月娜；刘嘉馨；王红；魏天静；曹晔；雷宇 刊期： 2011年第04期
目的 调查本地区血小板输注患者血小板抗体阳性率及临床血小板交叉不合实际发生率.方法 采用固相凝集法分别比较160名有输血史的随机血小板输注患者(作为实验组)和160名无输血史的随机住院患者(作为对照组)的血小板抗体阳性率以及实验组中血小板抗体阳体患者和血小板抗体性阴性患者的临床血小板交叉不合实际发生率.结果 实验组和对照组血小板抗体阳性率分别为44.4%(71/160)和16.3%(26/160),组间差异有统计学意义(P<0.05);实验组临床血小板交叉不合总体发生率为5.0%(8/160),其中血小板抗体阳性患者和血小板抗体阴性患者临床血小板交叉不合发生率分别为9.0%(7/71)和0(0/89),组间比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组中输血次数<5次和输血次数≥5次的患者血小板抗体阳性率分别为29.0%(18/62)和54.1%(53/98).结论 本地区血小板输注患者血小板交叉不合临床实际发生率并不低,血小板抗体阳性患者的血小板交叉配型工作需要引起大家的重视.
作者：谢作听；洪俊英；陈钦宏；何彬彬；陶志华 刊期： 2011年第04期
目的 优化血小板凝胶(platelet gel,PG)的制备方法.方法 采用CCK-8试剂盒检测不同浓度外源性凝血酶、不同浓度血小板、血小板与激活剂不同比例制备的PC对ECV304细胞增殖的影响;通过细胞迁移试验检测不同浓度外源性凝血酶对ECV304细胞迁移的影响;采用ELISA试剂金检测不同浓度外源性凝血酶和不同浓度血小板对VEGF释放量的影响.结果 PG促进ECV304细胞增殖和迁移;加入外源性凝血酶PG形成时间为40～60s,而不加外源性凝血酶PC,形成时间600～1 200 s,但是不同浓度(0、100、1 000 U/ml)的凝血酶对ECV304细胞增殖和迁移影响甚微;PG促ECV304细胞增殖作用随血小板浓度的增加而增强,血小板浓度处于(1 500～2 500)×109/L时趋于稳定;富血小板血浆(PRP)与激活剂的比例为10:1时促细胞增殖效果略优于5:1;PG上清中VEGF含量随着PRP中血小板含量的增加而增加,不同浓度(0、100、1 000U/ml)凝血酶制备的PG上清中VEGF含量的差异,无统计学意义(P>0.05).结论 常规采集PRP的血小板浓度(1 000×109/L左右)巴能保证细胞增殖效果、满足用于临床的PG需求;PG是否添加激活剂凝血酶应根据临床实际情况选择.
作者：单桂秋；李艳辉；张雅妮；刘广亚；吕品；周谋；丘勇新 刊期： 2011年第04期
目的 将基于测序分型(SBT)技术应用干中华骨髓库山东分库建设的探讨.方法 使用ABI 3730 xlDNA测序仪,采用SBT直接测序法,对山东地区的3 500份志愿者血液标本进行DNA测序,其中HLA Ⅰ类基因对第2、3和4外显子双向测序,Ⅱ类基因对第2外显子双向测序,以得到其HLA高分辨分型结果 ;对部分呈现中分辨分型结果 的标本,通过SSSP技术确认.结果 HLA-A、B、DRB1位点分别有48.23%、42.86%和76.91%得到高分辨结果.此3个位点均获得高分结果 的比例为15.91%.在随机增选的760例中分辨标本中,659例(86.71%)经SSSP技术后,获得高分辨结果.结论 SBT技术是骨髓分库开展HLA高分辨分型工作的有力工具.
作者：庄云龙；朱传福；朱永宝；毛永鑫；宋永红；张教；聂向民；刘艳 刊期： 2011年第04期
目的 评价同源异体血小板凝胶促进糖尿病性难治创面愈合的疗效.方法 采用同源异体单采血小板为原料制备血小板凝胶(platelet gel,PG).32例患者分为皮肤溃疡型和窦道型2类,各类分别设立对照组与实验组,皮肤溃疡型各10例,窦道型各6例,对照组采用临床常规方法,实验组采用PG治疗,观察并记录创面愈合情况,测量愈合面积或体积,进行统计学分析.结果 32例糖尿病性溃疡患者综合疗效评价统计结果 显示,糖尿病性皮肤表面溃疡型和窦道型溃疡种类型的PG治疗效果明显优于对照组,实验组12周痊愈率达到87.5%,而对照组仅为12.5%.皮肤溃疡型和窦道型创面治疗第3、6、12周时的愈合率实验组高于对照组.实验组具有疗程短、换药间隔时间长、愈合质量好等优势.结论 同源异体血小板凝胶用于治疗糖尿病性难治性溃疡效果明显优于常规治疗方法,无不良反应,是一种简单易行、安全有效的治疗糖尿病性难治性创面愈合的方法.
作者：单桂秋；李艳辉；张雅妮；邓爱民；李红梅；吕品；周谋；刘广亚 刊期： 2011年第04期
目的 建立荧光法测定血浆中S-亚硝基硫醇(RSNOs)的方法 并探讨影响其测定的相关因素.方法 建立标准曲线,确定荧光法的准确性与可重复性;以检测过程中某一种影响因素(如样品制备条件、孵育时间等)为变量观察多因素对检测结果 的影响;取9份全血(400 ml/份)在保存d1、d7、d14、d21、d28和d35时分别检测血浆中RSNOs含量.结果 同一份血浆,相同实验条件下检测10次,变异系数为(CV)=3.5%;不同离心力470、734、1057、1 438 g制各的血浆,RSNOs含量分别为(9.22±0.14)、(9.97±0.11)、(10.40±0.05)、(10.91±0.01)μmol/L;铜离子浓度为100、150、200 μmol/L时的RSNOs含量分别为(13.83±0.02)、(14.23 ±0.03)、(13.22±0.01)μmol/L;在其他条件相同的情况下,孵育1、1.5、2、2.5 h样品的RSNOs含量分别为(10.34±0.04)、(10.75±0.02)、(12.31±0.09)、(10.53±0.06)μmol/L;在其他条件相同的结果 下,血浆中加入FHb为20、40、60、80、100 μl时,检测结果 为(13.58±0.02)、(13.41±0.02)、(13.10±0.01)、(12.60±0.06)、(12.17 ±0.01)μmol/L;全血保存d1、d7、d14、d21、d28和d35血浆中的RSNO含量分别为(12.94±2.92)、(10.67±2.18)、(6.87±1.24)、(7.13±1.17)、(7.01 ±1.66)和(5.80±1.55)μmol/L 结论 荧光法测定RSNOs具有良好的准确性与可重复性;不同离心力制备的样品、不同的孵育时间、不同的铜离子浓度以及血液样品中的游离血红蛋白对荧光法检测RSNOs的结果 均会有影响;全血保存过程中RSNOs含量呈下降趋势.
作者：魏天静；谢月娜；王红；曾晔；何语良；刘嘉馨 刊期： 2011年第04期
目的 为保证检测系统间的稳定可比,对申报市药监局待评审的血沈变测试仪A与已通过评审并临床应用很稳定的血流变测试仪B进行比对偏倚分析,验证待审仪器A申报资料中的重复性、精密度.方法 根据审核标准对两台仪器进行重复性以及精密度评价,参照美国国家临床实验室标准化协会(NCCLS)的EP9-A2文件对两台仪器进行方法 验证.结果 待评审的血流变测试仪A重复性误差大于仪器说明书的范围.仪器A与仪器B比对,全血1切、5切、30切、200切黏度和血浆黏度的偏倚为14.08%,30.95%,22.82%,13.07%,20.92%.结论 仪器A重复性误差与其说明书数据不一致;仪器A与仪器B相比,全血黏度1切、5切、30切、200切、血浆黏度性能不相当.
作者：侯军林；赵旭宏；张曼；冯玲 刊期： 2011年第04期
目的 研究人源性混合血小板凝胶对新西兰兔创面愈合的影响.方法 采用手工分离的人源性混合血小板为原材料,加入不同激活剂(含有1 000 U/ml、100 U/ml、0 U/ml凝血酶的10%葡萄糖酸钙溶液)制备PG,血小板与激活剂按体积10∶1混合.新西兰兔24只雌雄各半随机分为4组,6 只/组,每只制备2个创面,创面采用不同的敷料外敷:对照组敷料为无菌纱布,另3组(实验组)敷料为不同浓度凝血酶的激活剂制备的PG纱布.在术后d5、10、15、20更换敷料并切取病理组织标本,HE染色观察.结果 实验组与对照组在创面愈合率的差异上无统计学意义(P>0.05),但肉眼观察创面愈合质量有较明显差异.组织学观察显示,实验组成纤维细胞排列整齐,紧密有序,细胞增生较快,新生血管出现早且丰富,新生皮肤质量明显优于对照组.结论 人源性混合血小板凝胶能促进新西兰兔创面愈合,有临床研究和应用价值.
作者：李艳辉；单桂秋；张雅妮；刘广亚；吕品；周谋；丘勇新 刊期： 2011年第04期
目的 研究MMPs和TIMPs基因单核苷酸多态性(SNPs)在中国成都汉族人群中的分布特点.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法 检测132名中国成都汉族个体MMPs基因6个SNPs(MMP1-1607 1G/2G、MMP2-1306C/T、MMP2-735C/T、MMP3-1612 5A/6A、MMP9-1562 C/T、MMP21 572 C/T)和TIMPs基因2个SNPs(TIMP2 303C/T、TIMP3-1296 C/T)的多态性,并与中国北方汉族及日本、欧洲群体的MMPs和TIMPs基因SNPs等位基因频率的分布进行比较.结果 获得了成都汉族人群的MMPs和TIMPs基因8个SNPs的群体遗传学资料.除MMP21 572 C/T位点外,其余MMPs和TIMPs的SNPs基因型及等位基因频率及单体型的频率分布与中国北方汉族人群、日本及欧洲等人群之间的比较具有统计学意义(P<0.05).结论 成都地区汉族人群MMPs和TIMPs基因8个SNPs的等位基因频率同其他地区人群的存在较明显的不同.
作者：官璇；罗昊；董再全；白鹏；吴谨 刊期： 2011年第04期
目的 研究人外周血单核细胞分离方法.方法 采集24名健康志愿献血者外周血,分别以EDTA-K2、肝素钠、枸橼酸钠抗凝,将抗凝全血或单个核细胞悬液缓慢加入不同密度和渗透压组合的Nycodenz-NaCI溶液上层,离心分离单核细胞;EDTA抗凝血经Ficoll-Hypaque密度梯度离心获得的单个核细胞,再分别用Nycodenz-NaCl密度渗透压介质离心法、Percoll密度梯度离心法、贴壁法、MACS(抗CD-14磁珠)分离单核细胞.结果 如上4种方法 获得的单核细胞纯度和收获率中位数(M)分别为98.9%和68.5%、89.6%和64.5%、64.8%和60.5%、94.1%和73.5%,比较显示Nycodenz法获得的单核细胞纯度高(P<0.01);吞噬指数和趋化指数分别为188.8±11.2和26.8±5.9、187.8±12.2和26.1±5.1、144.4 ±24.8和15.4±7.3、177.1 ±18.3和18.9±6.7.统计表明Percoll法和Nycodenz法获得的单核细胞的吞噬指数、趋化指数高于贴壁法和MACS法(P<0.05);单核细胞受LPS刺激分泌细胞因子IL-12p70、IL-10、TNF-α水平(pg/ml)分别为2 545±341、1 216±397、3.999±418,2 489±425、1080±277、3 891±446,2 147±223、794±180、3268±411,35±12、142±81、407±199,比较得知MACS的单核细胞受LPS刺激分泌细胞因子IL-12p70、IL-10、TNF-α水平非常显著低于其他方法 (P<0.01);单核细胞经典亚群CD14+CD16-HLA-DR+百分比和非经典亚群CD14+CD16+HLA-DR+百分比(M)分别为89%和5%、88%和1%、73%和1%、51%和36%,统计表明MACS法的单核细胞经典亚群百分比明显低于其他分离方法 (P<0.01),而非经典亚群百分比明显高于其他方法 (P<0.01).结论 Nycodenz-NaCl密度渗透压介质离心法能够分离获得较高纯度、较多经典型的单核细胞.
作者：尹建平；余谨；王先广；陈禹潭；马威；赵云斌 刊期： 2011年第04期
目的 评价1种新型血小板用去白细胞输血器的临床使用效果.方法 根据随机分布表随机将53个治疗剂量的单采血小板制剂输注给实验组26名及对照组27名血液病患者,实验组采用该新型滤白细胞输血器过滤血小板,对照组采用市售滤白细胞输血器过滤血小板;体外试验,测定其经该新型去白细胞输血器过滤前后的血小板计数、白细胞计数、血小板黏附率、低渗休克相对变化率;体内试验:观察2组的止血效果,同时测定输注后1、24 h患者校正血小板增加值(CCI).结果 体外评价实验发现,血小板回收率:实验组与对照组为(90.73±3.57)%vs(93.46±3.50)%(P>0.05),白细胞剩余数:实验组与对照组为(0.31±0.68)×106vs(0.90±0.92)×106个≤2.5×106个,(P<0.05)两组过滤前后血小板黏附率变化不明显,低渗休克相对变化率均<10%.体内试验发现,输注无效发生率:(实验组为37%,对照组为29.2%).结论 该新型血小板用去白细胞输血器符合国家行业标准,过滤过程中对血小板功能无明显影响,临床使用安全有效.
作者：王世春；王红；范娅涵；李兵；刘嘉馨；陈润；万佳；赵树铭 刊期： 2011年第04期
目的 观察与评价自体富血小板血浆在美容整形外科中的应用效果.方法 选取2006年2月～2010年12月共6名在广州军区广州总医院激光整形美容中心和暨南大学第一附属医院整形烧伤外科接受美容整形手术治疗的患者,其中面部除皱2例,双颞部凹陷自体脂肪充填2例,自体脂肪隆胸1例,乳房提升术1例.术前抽取患者静脉血液20～60 ml.通过离心技术收集富血小板成分的血浆,在一侧术区外用,对侧不做其他特殊处理.结果 随访时间1～2年,使用自体富血小板血浆的一侧,创面愈合质量有显著提升,瘢痕减少.结论 自体富血小板血浆能显著提高美容整形手术的愈合能力及自体脂肪移植的成活率,且该方法 操作简单,可行性强,值得临床推广.
作者：程飚；刘宏伟；唐建兵；肖丽玲；张宏斌；单桂秋 刊期： 2011年第04期
目的 探索从国产蝮蛇毒中分离纯化人血浆蛋白C激活物(PCA)的方法 及其用于蛋白C的鉴定.方法 以国产蝮蛇毒为原料,通过溶解、离心、透析,利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析和Superdex G75凝胶过滤法分离纯化PCA组份.通过SDS-PAGE观察PCA组份的分子量,用发色底物法和凝固法分别测定活化PC(APC)的酰胺酶活性和抗凝活性.结果 经两步层析,从蝮蛇粗蛇毒中纯化出PCA组份,SDS-PAGE图谱显示在分子量51 kD左右呈现1条蛋白带;经生物学活性鉴定:该组份在体外能迅速将PC激活为APC,APC的酰胺酶活性(A405)高约为Protac(R)(唯一商品化的PC激活剂产品)作用的2.8倍,抗凝活性(秒值)高约为Protac(R)作用的I.4倍,比活性2.20 IU/mg;不同浓度组份激活PC的酰胺酶活性和抗凝活性均随组份浓度的增大而升高,有明显的量效关系.结论 采用离子交换层析和凝胶过滤法,可以从国产蝮蛇粗蛇毒中分离纯化出PCA组份,该组份具有较强的激活PC的能力,其生物活性与浓度呈正相关.
作者：章俊；肖小璞；李长清；王宗奎；林方昭 刊期： 2011年第04期
中国输血杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
