血友病携带者与产前基因诊断

陆晔玲；丁秋兰；戴菁；王鸿利；奚晓东；王学锋

关键词：血友病, 携带者检测, 产前诊断, 倒位检测, 核苷酸测序

摘要：目的建立1种简便、快速的血友病携带者检测与产前诊断体系.方法对38个血友病A家系,用长链PCR及序列特异PCR作咫基因内合子22及1倒位检测;有家族史家系可联合F8基因内外的8个多态性位点进行遗传连锁分析,DXS 52(ST14)位点多态性以PCR产物凝胶电泳法检测,7个STR位点(F8Civs13、CA22、DXS15、DXS9901、G6PD、DXS1073、DXS1108)的多态性以多重荧光PCR法检测,产前诊断加用性别位点(Amelo);对于散发家系,通过直接核苷酸测序查找先证者的基因突变,继而对家系女性成员作携带者与产前诊断.对12个血友病B家系采用直接核苷酸测序法确定基因突变,多重荧光PCR法检测F9基因外6个SIR位点(DXSll92、DXS1211、DXS8094、DXS8013、DXS1227、DXS102)的多态性.结果 38个血友病A家系中,10名先证者的咫基因内含子22倒位检测为阳性,l例先证者为咫基因内含子1倒位阳性,对于有家族史的家系,综合应用倒位检测和遗传连锁分析.携带者与产前诊断率均为100%;4个散发家系均可找到致病突变;38个血友病A家系的携带者及产前诊断总诊断率为94.81%.12个血友病B家系中有10个家系通过直接测序可找到突变,联合丹基因外6个STR位点对血友病B家系的遗传连锁分析的可诊断率为96.88%.结论咫基因内含子22及1倒位筛检联合咫基因内、外多个位点的遗传连锁分析可以进行血友病A的携带者及产前诊断;直接核苷酸测序可确定丹基因突变,而联合基因外多个多态性位点检测并进行遗传连锁分析,是血友病B携带者检测与产前诊断的简便、快速的方法.

中国输血杂志相关文献

抗-HCV分片段酶联免疫确认试剂对EUSA试剂组合的应用

丙型肝炎病毒(HCV)抗体是采供血机构的检测项目之一.目前血液筛查所采用的第3代HCV总抗体酶联免疫吸附试剂,由于抗原的组合、来源及含量等差异,导致不同厂家试剂的测定结果差异较大.卫生部规定,必须采用两种不同厂家的试剂进行初、复检,以尽可能保证输血安全.如何选择初、复检试剂,以大程度地减少假阴性血液的漏检是抗-HCV检测工作的关键.我们应用HCV分片段酶联免疫确认试剂盒对4种国产抗.HCV ELISA试剂盒进行了组配实验,报道如下.

作者：赵宇；唐银海刊期： 2008年第04期
血小板输注无效

血小板输注适用于预防和治疗血小板减少或血小板功能缺陷患者的出血,并已成为各种血液病及肿瘤患者放、化疗的有效支持疗法,但患者在多次输血(全血、红细胞、白细胞、血小板),妊娠及器官移植后,易产生血小板相关抗体,导致血小板输注无效(PTR).我们结合近几年国内外研究进展,对血小板输注无效的实验室检查方法、治疗与预防措施等综述如下.

作者：焦淑贤；扬志夏；赵林刊期： 2008年第04期
HER-2/neu胞外配体第2结构域致敏的DC与CIK共培养对高表达HER-2/neu乳腺癌细胞杀伤作用的研究

目的探讨HER-2/neu胞外配体第2结构域(RLD2)作为肿瘤疫苗在抗乳腺癌免疫中的作用.方法纯化出目的蛋白HER-2/neu胞外配体第2结构域,同时选取10例经免疫组化证实为HER-2/neu阳性的乳腺癌,用RLD2分别负荷这10名患者外周血来源的树突状细胞(DC),再诱导抗原特异的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),将DC与CIK共培养,研究其对HER-2/neu阳性、阴性肿瘤细胞株和自体乳腺癌细胞杀伤活性的作用.结果 RLIY2诱导的特异性CIK对HER-2/neu阳性肿瘤细胞SKBR-3以及自体乳腺癌细胞的杀伤活性,较之单独CIK组更高,差异有统计学意义(P<0.01);RLD2诱导的特异性CIK对HER-2/neu阴性细胞MDA-435的杀伤活性与单独CIK组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论负载RLD2的DCs诱导的CIK对HER-2/neu阳性肿瘤细胞以及自体乳腺癌肿瘤有特异性杀伤能力,RLD2可能成为新型肿瘤疫苗应用于临床乳腺癌免疫治疗.

作者：钟国成；敬新蓉；赵碧；李硕；徐明；孙薏；闵敏；廖皓；张鹤腾；陈健刊期： 2008年第04期
四川骨髓库汉族人群HLA-DRB1* 14等位基因分布

目的研究四川骨髓库中四川籍汉族人群HLA-DRB1 14等位基因分布.方法在四川骨髓库8934名四川汉族造血干细胞捐献志愿者中随机筛选107例中低分辨为DRB114的样本,以PCR-SBT分型技术检测DRBl位点的第2外显子以鉴定HLA-DRB1 14等位基因.结果共检出6种DRB1 14等位基因,包括DRB1 140101/1454(56.0%),DRBl 1403(1.8%),DRB1*1404(11.0%),DRB1*140501(27.5%).DRB1*140701(1.8%)和DRB1*142.5(1.8%);其中主要的DRB1*140101/1454频率与美国亚裔/太平洋岛民接近,而与高加索人、非洲裔美国人、西班牙裔及韩国人和中国北方汉族中的分布有显著性差异:DRB1*140501和DRB1*1404则与中国北方汉族分布类似;本研究未检到的等位基因在四川汉族DRB1*14阳性个体中的频率低干3%.结论四川汉族人群HLA-DRB1*14等位基因呈现多样性并存在自身特点.

作者：王珏；罗玫；陈雪黎；黄淑；田素华；邹海；郑忠伟；陈静娴；陈强刊期： 2008年第04期
城市远郊储血库的建立及其信息网络化管理对输血安全的保障

目的探讨城市远郊区(市)县储血库网络标准化楚设与输血安全.方法对成都地区2003-2006年先后建立15个储血库实施过程,从规划设置、建设标准、准入验收、输血网络管理、供血与输血安全作比较分析.结果储血库标准化建立,输血管理网络化,临床用血准入化.成分输血比倜不断提高,确保了临床用血与安全.结论在城市远郊实施储血库网络标准化建设,对确保临床医疗用血和输血安全十分必要,对进一步提高辖区内输血规范、科学管理水平效果显著

作者：程勤侦；杨群身；赵晓嘉刊期： 2008年第04期
侵入性操作前的预防性成分输血

侵入性操作(bedside procedure,BP)是指以诊断和治疗为目的的病床边简单的手术操作,如胃肠内窥镜检查、侵人性内放射治疗等.临床上术前备血是外科手术准备的重要一环,目的是防止术中出血较多时能及时补充血容量和改善血液的携氧能力,以保证手术顺利完成.

作者：车嘉琳；何子毅；田兆嵩刊期： 2008年第04期
RhD(-)血液分离设备改进的效果观察

RhD(-)血液常以甘油作为保护剂对红细胞进行低温冰冻保存,临床使用前必须解冻去除甘油,使洗涤后红细胞悬液中甘油残留量含量<10g/L[1],因此解冻后的洗涤过程的操作至关重要.我们在制备解冻红细胞的过程中使用改良设备,取得了满意的效果.

作者：王天恒；苗丰盈；董志伟；王淑香刊期： 2008年第04期
云南汉族人群KIR基因多态性研究

目的分析云南汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因的多态性及基因型和单倍型特点.方法从献血者中随机选择150名无亲缘关系的云南汉族健康志愿者,采用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)对其进行K/R基因低分辨率检测,并根据Hsu等[5]的标准进行基因型和单倍型分析.结果在云南汉族人群中共检出目前已知的17个K/R基因,其中3DL3、2DL4、3DP1和3DL2框架基因存在于所有个体.2DL1、2DL3、2DP1、3DP1*003、3DL1、2DS4*001/002基因较为常见,而2DL2、2DLSA、2DLSB、2DS1、2DS2、2DS3、2DS4*003、2DS5、3DS1和3DPI*001/002基因频率较低.在云南汉族人群中共检出31种基因型,常见基因型为AJ(2,2)和AF(1,2)型,频率分别为26.67%和17.33%.同时检出15种单倍型.以单倍型2为常见,频率为47.3%.此外,还发现2种新基因型目前在其他人群中尚未见报道,3种基因型无法根据Hsu等[5]的标准模式分析出单倍型.结论云南汉族人群KIR基因分布表现出中国汉族人群KIP,多态性的一些共同特点,同时具有其独特的K/R基因频率、单倍型频率和基因型频率分布.

作者：苏品璨；杨通汉；邹海；徐晓红；李玉明；朱祥明；高宏；郑忠伟；陈强刊期： 2008年第04期
妇科手术围手术期输血的临床观察

妇科手术围手术期输血历史悠久,直至20世纪末,在妇科大中型手术中输血几乎是约定俗成的传统,旨在保证手术安全和患者的术后恢复.但随着对输血与术后恢复及疾病预后关系的研究,不当输血的诸多弊端和并发症得以揭示,输血的安全性及风险性引起了医患双方的关注.为了探讨输血治疗的利弊与得失.为患者排疑解惑,我们对围手术期输血与否及输血的种类和方法进行了观察,报告如下.

作者：宋茜；陈玉环；姚恒；李静文刊期： 2008年第04期
冻干人凝血酶原复合物的生产工艺研究

目的冻干人凝血酶原复合物的生产工艺和病毒灭活工艺的研究.方法对比两种生产工艺和两种不同类型的灭活方法对制品质量的影响.结果采用以血浆为原料生产的制品,4种凝血因子活性均保持较高水平;制品经过S/D病毒灭活,4种凝血因子活性回收率分别在78%以上;制品经过(100±0.5)℃灭活,4种凝血因子活性基本没有降低.结论采用以血浆为原料生产人凝血酶原复合物优于其他方法;为保证制品安全,同时采用S/D灭活和(100±0.5)℃灭活30min对制品是必须的且对制品的活性基本没有影响.

作者：魏舒；时凯；刘国荣；汤敏刊期： 2008年第04期
IgM、IgG抗-LebH A致配血不合患者自身输血1例

Lewis抗体一般为IgM,在37℃时无活性.我们在交叉配血不合的患者血清中发现了1例IgM、Igc抗-Leb不规则抗体,经进一步检测为抗-Lebh A.因其与5名O型供者配血不合,患者同意自身输血,现报告如下.

作者：方春富；周丽君；何智；郭伟鹏刊期： 2008年第04期
备血不足手术大量失血的应急策略

1病例摘要患者,男,71岁,因腹部巨大恶性肿瘤拟剖腹探查手术.术前检查见患者腹部隆起如足月妊娠,全身消瘦和低蛋白血症,Hb74g/L;术前备血仅RBC 200ml.手术在全身麻醉下施行,麻醉开始前开放右侧颈内静脉和外周静脉2条通路,同时作桡动脉穿刺连续监测动脉压.

作者：招伟贤；黎涌刊期： 2008年第04期
前置胎盘患者预存式自体输血安全性研究

目的研究预存式自体输血对前置胎盘患者红细胞、血红蛋白、细胞比客和血小板数量的影响,并观察产后出血以及妊娠结局,进而探讨在前置胎盘患者中实施预存武自体输血的安全性,为以后临床操作提供参考.方法收集2004-2007年5月住院分娩的64名前置胎盘患者,将其分为预存式自体输血组和未自体输血组.比较自体输血患者采血前后不同时间以及两组分娩前后红细胞、血红蛋白、细胞比容和血小板数量差异有无显著性.观察不同组产后出血量、自异体输血量和妊娠结局.结果预存式自体输血患者采血前、采血后24-72h及分娩后48h和两组分娩前后血常规主要指标差异不具统计学意义(P>0.05).实施过程对母胎不会产生不良影响,新生儿Apgar评分9-10分.自体输血组的自血回输量明显大干异体输血量.绪论预存式自体输血对前置胎盘患者红细胞、血红蛋白、细胞比容和血小板数量不会产生明显的影响,且对母胎安全不会造成威胁.实际操作中可适当增加分娩前预存式自体备血量以减少前置胎盘患者剖宫产异体输血量.

作者：张丽丽；黄亚绢；李志强；徐文皓刊期： 2008年第04期
人血白蛋白分离工艺的历史沿革及发展

低温乙醇工艺分离血浆蛋白,自20世纪40年代创建以来,至今已有60年的历史.Cohn教授及其领导的开发团队所创立的Cohn 6法已成为白蛋白分离的经典方法,是国际上通用的血浆白蛋白分离工艺的基础.随后所使用的各种白蛋白分离方法依旧以Cohn 6法中的pH值、温度、乙醇浓度、离子强度和蛋白浓度5变参数为依据,通过不同的参数组合,可进行其它多种蛋白制品的分离.

作者：刘力；刘文芳刊期： 2008年第04期
急性白血病化疗后未缓解期血小板输注效果观察.

急性白血病患者在接受化疗后几乎都会出现骨髓抑制现象,表现为全血细胞减少,如果化疗后白血病不能获得缓解,则血小板恢复延迟,这一阶段患者的血小板计数明显减少,部分患者出现出血倾向,所以患者在此阶段往往需要反复输注血小板,预防性或治疗性输注血小板是其重要的支持治疗措施.我们观察了近期本院血液科病房初发或复发急性白血病患者化疗后未缓解期患者的血小板输注情况,并对其输注效果分析如下.

作者：乌宇波；陈勤奋；杨李辉；沈宝珍；谈婕瑾；顾艳刊期： 2008年第04期
BEPⅢ处理样品出现结果与加样不符问题的分析

目前,全自动酶标分析系统被越来越多地使用于血站血液标本检测中,我们把在使用过程中曾经遇到过的,因手工进板方向错误,造成比色结果与试验不符的这一问题与大家交流,希望能在以后的工作中得以借鉴.

作者：范丽霞；周俊；金玉；杜海燕刊期： 2008年第04期
ABO血型不合导致的输血不良反应的原因分析

<临床输血技术规范>、<血站质量管理规范>要求对临床输血不良反应进行上报,但我国目前尚未见较全面的输血不良反应统计报告.美国食品和药品管理局(FDA)报告,1976-1985年因输血死亡328例中,溶血性输血反应死亡182例(55.5%),其中急性溶血性输血反应死亡159例(48.8%),这159例中137例(41.8%)为.

作者：杨青成刊期： 2008年第04期
血液隔离与放行程序

[编者按] 本栏目上一期介绍了对血液隔离与放行机制的建立与发展过程、血液批放行的意义和作用以及具体实施要点,鉴于血液批放行是贯彻一法两规的难点之一,为了便于进一步理解和实施,包括具体程序文件和操作规程的编制,从本期开始,将例举福建省血液中心的血液隔离与放行程序,随后将陆续刊登和其他血站的血液计算机批放行实践与体会.

作者：王鸿捷；林豪；郭永建刊期： 2008年第04期
多次输血患者及HBV阳性者中HHV-8抗体的检测报告

人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8),又称卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是Chums等[1]于1994年在1例艾滋病患者的卡波氏肉瘤(Kaposi's,sarcoma,KS)病损组织中发现的一种新型疱疹病毒.随后的研究发现HHV-8与KS的发病有很大的关联.

作者：管洪宇；付涌水；周振海；周豪杰刊期： 2008年第04期
术中回收式自身输血的研究进展

术中回收式自身输血(intraoperafive salvage autotransfusion,ISA)的广泛应用已有30多年的时间[1],而术中回收式自身输血技术的出现距今已有近200年的历史.1818年Blundell[2]收集了10名产后大出血患者的血液,分别回输给患者本人,获得了很好的治疗效果,存活率达到了50%,但在接下来的19世纪里,这项技术却很少得到应用.20世纪早期随着血型技术的发明和库存血的大量应用,使人们渐渐遗忘了自身输血,尽管当时有很多权威专家大力提倡使用术中自身输血,但在1936年以前还是很少应用这项技术.

作者：夏晓峰；钱宝华刊期： 2008年第04期