刘全海;申骏龙;李晶;周建成;程永毅;赵文彩
目的:构建PRL-3过表达载体,研究其对结直肠癌细胞系SW620生长的影响.方法:提取Hela细胞总RNA并反转为cDNA,以cDNA为模板通过PCR反应扩增PRL-3基因,将扩增产物克隆至表达载体pcDNA3.1,通过转染让SW620细胞过表达PRL-3,空载体组和空白组作为阴性对照.qPCR、Western blot实验用来检测PRL-3在SW620细胞的表达水平,CCK-8实验、平板克隆形成实验用来检测SW620细胞的增殖状况,流式细胞术用来检测SW620细胞的周期分布.结果:成功构建了PRL-3过表达载体.与空载体组和空白组相比,PRL-3过表达载体转染结直肠癌细胞系SW620后,qPCR检测PRL-3表达水平上调数倍.CCK-8实验表明过表达PRL-3能够促进SW620细胞增殖.平板克隆形成实验表明上调PRL-3能够增强SW620细胞增殖能力.流式细胞术结果表明过表达PRL-3能够加快SW620细胞周期进程.结论:PRL-3能够促进结直肠癌细胞系SW620生长,为结直肠癌早期诊断和靶向治疗提供实验依据.
作者:刘军;董文刚;褚楚;穆楠;顾锦涛;张旺倩;薛晓畅;张英起;张伟 刊期: 2018年第11期
目的:探讨乙肝病毒x蛋白(hepatitis B virus x protein,HBx)对肝癌细胞中PUMA表达的影响及其机制.方法:利用质粒转染技术对p53基因不同状态的肝癌细胞转染野生型HBx基因,用RT-PCR检测转染后肝癌细胞中HBx mRNA表达和荧光定量PCR检测NFκB mRNA表达,Western blot检测HBx、p53、NFκB、PUMA蛋白表达.结果:转染后随着HBx的表达,在p53野生型肝癌细胞BEL-7402和p53突变型肝癌细胞Huh-7中NFκB mRNA和蛋白上调而p53蛋白表达下降,BEL-7402细胞PUMA蛋白表达下降而Huh-7细胞中PUMA蛋白表达略有下降.加入NFκB抑制剂PDTC后并随着PDTC浓度逐渐增加,BEL-7402细胞NFκB蛋白表达逐渐下降而p53蛋白和PUMA蛋白表达逐渐上升;但在Huh-7细胞中随着NFκB蛋白表达的抑制,p53蛋白逐渐上升而PUMA蛋白上升不明显.结论:结果提示转染HBx基因可以抑制肝癌细胞中PUMA蛋白表达,在p53野生型肝癌细胞这种抑制可能与HBx通过NFκB的激活有关.
作者:彭松林;戴朝六;姚殿波 刊期: 2018年第11期
甲状腺癌是常见的内分泌肿瘤,近年来甲状腺癌的发病率有逐年递增趋势,其中甲状腺乳头状癌占80%以上,且男女发病率差异较大,这一现象引起了国内外学者的高度重视.很多研究都表明出现这样的性别差异可能与雌激素有关,雌激素可能在此过程中发挥着关键作用.雌激素与甲状腺癌的相关性研究是一个热点问题,目前已深入到各个研究层次,包括蛋白质及基因水平.探究雌激素在甲状腺癌发生发展过程中的作用及影响机制具有重要意义.因此本文通过查阅目前国内外研究报道就各研究层次雌激素与甲状腺癌的相关性进行综述.
作者:彭学姣;许天敏;张琨;赵生炳;史莹;常伟勤 刊期: 2018年第11期
人参皂苷单体Rh2和Rg3具有促进细胞凋亡的作用,研究发现Toll样受体中的TLR4可通过MYD88等下游信号蛋白经由NF-κB反应途径激活白介素6和白介素8的表达,而IL-6和IL-8可以进一步通过JAK-STAT、Src类酪氨酸蛋白激酶、FAK-Ras-MAPK等配体非依赖性的细胞信号传导途径活化雄激素受体,而非配体依赖性AR的激活则进一步促进了前列腺癌肿瘤细胞的增殖,由此推测TLR4、IL-6/IL-8、AR的逐级活化正是去势抵抗性前列腺癌进展的重要机制,研究发现人参皂苷可以下调Toll样受体的表达及活性,由此推测人参皂苷通过下调TLR4,进而抑制IL-6/IL-8和AR受体的表达,终抑制去势抵抗性前列腺癌的进展.
作者:楼雨蛟;张青川 刊期: 2018年第11期
目的:探讨卵巢癌顺铂耐药患者腹水中ALDH1阳性肿瘤细胞的生物学特征.方法:从卵巢癌顺铂耐药患者腹水中分离癌细胞,流式分选法得到 ALDH1阳性和ALDH1阴性细胞,荧光定量RT-PCR检测两组细胞的干细胞标志CD44、CD90、CD133及上皮间质化相关标志E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Fi-bronectin在mRNA水平的表达,MTT法测定细胞增殖曲线和对顺铂的耐药指数,Transwell小室侵袭实验、克隆形成实验、悬浮成球实验分别观察细胞侵袭能力、增殖分化能力及干细胞的潜能.结果:与ALDH1阴性细胞相比,ALDH1阳性细胞的干细胞标志CD44、CD90、CD133表达升高,上皮化标志E-cadherin降低,间质化标志 N-cadherin、Vimentin表达明显升高.MTT测定生长曲线显示ALDH1阳性细胞增殖明显增快,对顺铂的耐药指数为14.2,ALDH1阳性细胞的穿膜细胞数、克隆形成数以及成球数目显著高于ALDH1阴性细胞(P<0.05).结论:ALDH1阳性细胞具备干细胞特征,其耐药性和侵袭能力增强.
作者:郑淑婕;郝建民 刊期: 2018年第11期
肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是常见的泌尿外科恶性肿瘤,其发生与发展受到多种复杂因素的调控.长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类特殊的RNA,其参与了包括RCC在内的多种恶性肿瘤发生的调控.同时,随着分子生物学技术的发展,对RCC中异常表达的lncRNA的检测不仅有助于从基因调控层面阐述RCC的相关致病机制,也可通过检测lncRNA的表达来改进对RCC的诊断及预后.基于RCC中特异lncRNA靶点的治疗方法也处于研究之中,未来有可能为RCC的临床治疗提供全新的思路及方法.因此,本文重点对lncRNA参与调控RCC的机制、lncRNA用于RCC的诊断预后及基于lncRNA靶点的治疗研究进展进行简要综述.
作者:周秀琴;刘城城;陈素兰 刊期: 2018年第11期
目的:筛选β-榄香烯处理前后肺癌A549细胞的差异基因并对其进行鉴定,为进一步研究靶基因的功能奠定基础.方法:CCK-8法检测β-榄香烯对肺癌A549及H1299细胞的增殖抑制作用及其对肺癌A549细胞的药物敏感性;运用基因芯片技术检测β-榄香烯处理前后A549细胞的基因表达谱变化并筛选出差异基因进行数据分析;使用实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time Quantitative PCR Detecting System, qPCR)筛选出与基因芯片实验结果一致且表达丰度较高的基因,构建慢病毒干扰载体,高内涵细胞功能学筛选(HCS)实验选择增殖抑制明显的基因,进而进行阳性基因单靶点筛选,并用qPCR和Western-Blot分别对阳性靶点进行鉴定.结果:CCK-8法两轮增殖检测结果:β-榄香烯对人肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)值较H1299细胞稳定,选用A549细胞进行后续实验细胞;A549细胞药敏试验结果:随着时间和浓度的升高,A549细胞对β-榄香烯的药物敏感性增加,呈一定的时间和浓度依赖性;基因芯片技术筛选出β-榄香烯处理前后A549细胞有差异表达的基因721个,其中上调基因273个,下调基因448个,从下调基因筛选出30个在肺癌中尚未报道但可能具有潜在功能的基因;运用qPCR筛选出20个基因进行HCS筛选,结果显示慢病毒转染后细胞增殖抑制表型明显的基因为POLE2;qPCR检测单靶点RNAi效率,结果显示shPOLE2-PSC34533基因敲减效率达75.6%(P<0.05).Western-Blot鉴定结果显示靶点对POLE2基因的外源表达在蛋白质水平有显著的敲减作用,进一步证实POLE2是有效靶点.结论:β-榄香烯可下调肺癌A549细胞POLE2基因的表达,其可能为肺癌临床治疗的一个潜在靶点.
作者:李娜苗;张莹莹;范亚莉;赵钰玲;董娅;李建英 刊期: 2018年第11期
目的:探讨不同分子分型乳腺癌中E-钙黏素蛋白(E-cadherin)的表达及其在三阴性组中的临床意义.方法:收集2012年1月至2013年12月乳腺浸润性导管癌共188例,应用免疫组织化学及荧光原位杂交技术将乳腺癌分为Luminal A型49例、Luminal B型41例、HER-2阳性型44例,三阴性组(TNBC)54例.免疫组织化学检测的E-cadherin的表达情况同时分析E-cadherin在TNBC中与临床病理特征关系,并随访54例TNBC患者3年复发或转移率及PFS.结果:乳腺癌中E-cadherin阳性率为52.13%,Luminal A型组阳性率为63.27%、Luminal B型组阳性率为63.41%、HER-2阳性组阳性率为43.18%及TNBC组为42.59%,四组间阳性率差别具有统计学意义(χ2=7.89,P<0.05).TNBC与HER-2阳性组间差别无统计学意(χ2=0.003,P>0.05),而TNBC组阳性率较Luminal A型组和Luminal B型组均明显降低,差别具有统计学意义(42.59% vs 63.27%,χ2=4.40,P<0.05,42.59% vs 63.41%,χ2=4.05,P<0.05);TNBC中E-cadherin阳性表达与年龄无关(P>0.05),与肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、淋巴结转移状态及Ki67负相关,差别具有统计学意义(P<0.05);TNBC总体3年复发或转移率高达55.56%,无病生存率为44.44%.E-cadherin阳性组复发转移率为39.13%,E-cadherin阴性组复发转移率为67.74%,差别有统计学意义(χ2=4.38,P<0.05),3年无疾病进展时间(PFS)E-cadherin阳性组明显优于阴性组(P<0.05).结论:不同分子分型乳腺癌中E-cadherin表达不同,E-cadherin阳性表达与肿瘤大小、组织学分级、分期及浸润转移呈负相关,对预测3年复发转移有一定意义.
作者:马志强;王文胜;师丙帅;赵爱国;李帅;范军朝;张双林 刊期: 2018年第11期
活化的凝血因子Ⅶ(coagulation factor Ⅶ,FⅦ)与组织因子(tissue factor,TF)特异性结合是机体高效靶向识别的重要生理过程.近来,靶向恶性肿瘤TF的治疗迅速发展,并发现在肿瘤干细胞表面也存在TF高表达,并尝试将其作为攻击靶点进行肿瘤的根治性研究.FⅦ作为TF的天然配体已成为重要的工具因子,在基因水平对FⅦ进行修饰改造,可充分发挥其靶向识别的优势,抑制其凝血相关的特性,对恶性实体肿瘤的靶向治疗具有重要的应用价值.本文就该领域的研究新进展作一综述.
作者:刘胜来;张羽;吴长利 刊期: 2018年第11期
目的:探讨β-catenin在膀胱癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用以及相关分子机制.方法:利用siRNA靶向沉默膀胱癌细胞系T24细胞的β-catenin基因,并利用Real-time quantitative PCR和Western blot实验验证siRNA敲减效率.通过Transwell实验检测β-catenin敲减后T24细胞的侵袭能力,进一步使用Real-time quantitative PCR和Western blot实验检测β-catenin敲减后T24细胞的EMT相关标志物的变化.后,通过下载TCGA数据库,并分析β-catenin与EMT相关标志物的相关性.结果:我们成功在mRNA和蛋白水平上沉默了β-catenin.通过Transwell实验发现,与对照组相比,β-catenin敲减组细胞的侵袭能力下调.与对照组相比,β-catenin敲减组的Slug蛋白、Vimentin蛋白和mR-NA下调,E-cadherin蛋白和mRNA上调.通过分析TCGA数据库发现,β-catenin与Slug(r=0.1835,P=0.0002)和Vimentin(r=0.1903,P=0.0001)均呈正相关.结论:β-catenin通过调控Slug的表达从而调控膀胱癌细胞的EMT.
作者:刘全海;申骏龙;李晶;周建成;程永毅;赵文彩 刊期: 2018年第11期
目的:报道1例少见的脾脏窦岸细胞血管瘤(littoral cell angioma,LCA),以提高临床医师对该疾病的认识.方法:对1例LCA的临床、病理特征、免疫组化及术后随访情况进行分析并复习文献.结果:LCA具有内皮标记如CD31以及组织细胞标记如CD68双重分化的特征.结论:LCA是脾脏的良性肿瘤,病理上易与窦岸细胞血管内皮瘤和窦岸细胞血管肉瘤等混淆,诊断依靠病理组织学表现及免疫组化特点.行脾切除术可治愈,预后良好.
作者:吉翔;于建平;石鑫;王朝阳;李洪涛;韩晓鹏;刘宏斌 刊期: 2018年第11期
目的:研究儿童喉乳头状瘤(juvenile onset laryngeal papilloma,JLP)中Toll样受体4(Toll-like recep-tor 4,TLR4)、激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)(通常是c-Jun和c-Fos的异源二聚体)蛋白的表达及其相互关系.方法:应用免疫组化法及RT-PCR检测JLP组织中TLR4和AP-1(c-Jun、c-Fos)的表达情况,分析两者表达的相关性及与JLP复发的相关性.结果:儿童JLP组织中TLR4和 AP-1(c-Jun、c-Fos)蛋白和mRNA均为阳性表达,与无复发组比较,复发组有显著性增高(P<0.01),与正常对照组比较,JLP两组均有显著性增高(P<0.01).其中TLR4蛋白复发组和无复发组阳性率分别为83.33%和58.33%,c-Jun、c-Fos蛋白复发组阳性率分别为86.67%和83.33%,无复发组阳性率均为66.67%.TLR4和AP-1(c-Jun、c-Fos)蛋白表达均与JLP的复发有明显相关性(P<0.05或者P<0.01);JLP组织中TLR4和AP-1 (c-Jun、c-Fos)表达两者呈正相关(P<0.01).结论:TLR4及AP-1的高表达可能在JLP的发生发展机制中起着重要作用.
作者:胡彬雅;赵斯君;任基浩;陶礼华;彭湘粤 刊期: 2018年第11期
免疫抗癌疗法是一种新的治疗实体肿瘤的方法.在这个新的领域,免疫系统里作为负向调节因子的免疫检查位点,在抗肿瘤免疫反应领域中起着重要的作用.因此,诸如抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性细胞死亡蛋白(PD-1)、程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1),现在已经研发出了针对前述这三者免疫检查位点的阻断因子,用于抗肿瘤的药物,在临床前期研究和临床研究中有着可喜的成果.本文综述关于在结直肠癌中免疫检查位点阻断剂的生物背景和临床研发新进展.关于阻断PD-1和PD-L1的临床前期试验结果的前景令人充满希望,尤其是在带有微卫星不稳定性(MSI)的结直肠癌患者中更加明显.接下来进一步深入开展的临床试验将证实这些初步结果,并且评估这二者联合治疗方法的可行性和确认这两个生物标记物作为免疫检查位点阻断剂的效应在哪些人群中更有可能受益或更加抵抗.
作者:李甜甜;刘斌;王丽;苏勤军;范钰 刊期: 2018年第11期
目的:采用Hepasphere载药微球栓塞(DEB-TACE)治疗中晚期肝细胞癌(HCC),观察该疗法的安全性及疗效.方法:评估接受DEB-TACE治疗HCC患者术前术后肝功能,血清AFP水平变化以及术后不良反应、短期疗效和生存期.结果:从2014年7月到2017年10月纳入研究HCC患者24人(男21人,女3人),中位年龄为57(24~82)岁,肿瘤平均长径为(9.3士4.0)cm.根据BCLC分期,包括B期5人,C期19人.合计接受DEB-TACE治疗31人次,成功率100%.DEB-TACE术前、后ALB、ALT、AST、T.BIL和AFP无统计学意义(P>0.5).DEB-TACE术后30天内未见肝梗死等严重并发症,不良反应包括发热6例(19.4%)、恶心1例(3.2%),肝区疼痛4例(12.9%).随访时间范围从3.9~40.0个月,平均随访13.2个月.根据改良 RECST标准,治疗后1、3、6个月获得的疾病缓解率为58.3%、45.8%和40.9%,疾病控制率为91.7%、83.3%和86.4%.1、2年的存活率为87.5%和58.3%.截止到研究终点,中位生存期为25.6个月.结论:DEB-TACE对治疗中晚期HCC安全好,短期疗效稳定.
作者:朴相浩;曾健滢;杨清峰;邹忠元;李见英 刊期: 2018年第11期
目的:观察复方苦参注射液(compound Kushen injection,CKI)对荷DMS153小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用,并初步探讨其作用机制与STAT3、MMP9表达的关系.方法:建立荷DMS153裸鼠移植瘤模型.实验分为对照组、CKI低中高剂量干预组、顺铂干预组,共5组,每组10只裸鼠.CKI低中高干预组每天予以不同剂量CKI干预[1.0、2.0和4.0 ml/(kg·d)],顺铂(DDP)干预组予以顺铂干预(第1、3、5天给药4.8 mg/kg),每天观察移植瘤生长情况,并测量肿瘤体积,各实验组裸鼠在第29天处死取材.qPCR和Western blotting法检测肿瘤中STAT3和MMP9的mRNA和蛋白表达水平.结果:相比于对照组,CKI不同剂量干预均能不同程度抑制肿瘤的生长(P<0.05),其中高剂量组抑制作用为明显;与对照组相比,DDP干预亦能够显著抑制移植瘤生长(P<0.05),与 CKI高剂量干预组相比差异具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,CKI不同剂量干预均能不同程度抑制移植瘤中 STAT3和MMP9的mRNA转录和蛋白表达水平(P<0.05),其中高剂量组抑制为显著;CKI不同剂量干预组STAT3和MMP9的mRNA转录呈显著正相关(Pear-son相关系数为0.912>0,P=0.044<0.05);CKI不同剂量干预组STAT3和MMP9的蛋白表达水平均呈显著正相关(Pearson相关系数为0.990>0,P=0.005<0.05);与对照组相比,DDP干预亦能够显著抑制移植瘤组织中STAT3和MMP9的mRNA转录和蛋白表达(P<0.05),与CKI高剂量干预组相比差异亦具有统计学意义(P<0.05).结论:CKI能够有效抑制荷DMS153小细胞肺癌裸鼠移植瘤的生长,且高剂量组抑瘤作用较优;CKI抗小细胞肺癌的作用机制可能与其调控STAT3和MMP9的基因和蛋白表达有关.
作者:黄明华;肖明生;陈传军;樊拖迎;吴军 刊期: 2018年第11期
NF-κB与肿瘤发生发展的关系已经比较明确,近年来SIRT1与肿瘤发生发展关系的研究越来越多,有文献报道称SIRT1通过去乙酰化作用抑制NF-κB的转录从而影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生和发展,但具体机制尚未明确.就近年来SIRT1与NF-κB在NSCLC发生发展过程中的关系及相互影响作一综述.
作者:牛凯星;蒋中秀;张晓晔 刊期: 2018年第11期
目的:探讨不同麻醉及镇痛方法对宫颈癌患者细胞免疫功能和术后恢复的影响.方法:拟行腹腔镜下宫颈癌根治术患者78例,分为3组(n=26),Ⅰ组:全凭静脉麻醉+静脉病人自控镇痛(PCIA),Ⅱ组:全凭静脉麻醉联合硬膜外神经阻滞+硬膜外病人自控镇痛(PCEA),Ⅲ组:静吸复合麻醉联合硬膜外神经阻滞+PCEA.观察麻醉前(T0)、术毕(T1)、术后24 h(T2)、术后48 h(T3)时点T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比的变化.记录患者第一次补救镇痛时间、胃肠道恢复时间、下床时间、术后呕吐及患者满意度.结果:与T0比较,3组患者在T1、T2时点CD3 +、CD4 +、CD4 +/CD8 +及 NK细胞百分比明显降低,CD8 +明显升高(P<0.05);Ⅱ组和Ⅲ组在T2及T3与Ⅰ组比较,CD3 +、CD4 +、CD4 +/CD8 +及NK细胞百分比显著增高,CD8 +细胞百分比显著降低(P<0.05).Ⅱ组和Ⅲ组患者术后恢复明显优于Ⅰ组(P<0.05),其中术后呕吐和患者满意度Ⅱ组明显优于Ⅲ组(P<0.05).结论:全凭静脉麻醉联合硬膜外神经阻滞并行硬膜外术后镇痛对宫颈癌患者术后细胞免疫功能的抑制较小,术后恢复快,有益于患者的康复.
作者:周彪;王琛;韩国瑞;吕梦新;刘涛 刊期: 2018年第11期
食管支架置入广泛用于临床解决进食困难的病人,本文就食管支架在食管癌治疗中的应用作一综述.
作者:简超;吴开春 刊期: 2018年第11期
目的:探讨全程优化护理在降低MAC30阳性乳腺癌化疗患者消化道反应中的应用价值.方法:2012年9月到2016年1月选择在我院行诊治的MAC30阳性乳腺癌患者78例作为研究对象,根据随机信封抽签原则分为观察组与对照组各39例,对照组给予常规治疗与护理,观察组在对照组干预基础上给予积极地全程优质护理,观察周期为3个月.结果:观察组与对照组化疗期间的用药依从性分别为100.0%和87.2%,观察组的用药依从性明显高于对照组(P<0.05).观察组化疗期间的恶心呕吐、便秘、腹泻等发生率分别为23.1%、20.5%和5.1%,对照组分别为89.7%、61.5%和33.3%,观察组明显低于对照组(P<0.05).观察组与对照组化疗后的生活质量评分分别为(57.55士10.25)分和(70.14士9.89)分,都明显低于化疗前的(87.49士11.48)分和(87.10士10.41)分(P<0.05),在化疗后,对比两组生活质量评分,能够看出观察组明显低于对照组(P<0.05).结论:全程优化护理在降低MAC30阳性乳腺癌化疗患者中的应用能降低发生消化道反应的概率,提升患者的用药依从性,进而改善其生活质量.
作者:刘曲;戴经纬;齐向秀;赵毅 刊期: 2018年第11期
目的:探讨保留肾单位手术(NSS)治疗偶发性肾细胞癌的临床效果.方法:回顾性分析我院2012年至2014年1月收治并采用保留肾单位手术治疗的11例偶发性肾癌患者的临床资料,并分别与同期9例行肾癌根治术(RN)、8例行保守治疗的偶发性肾癌患者进行对比.结果:保留肾单位手术组与肾癌根治组、保守治疗组患者年龄、性别比较差异无显著性.NSS组肿瘤平均直径为(3.1士1.0)cm,RN组平均直径为(7.5士2.6)cm,保守治疗组平均直径为(5.1士1.4)cm,三者差异有显著意义(t1=7.2,t2=5.6,P<0.01).同时三组在肿瘤所处位置、术后病理类型、是否有腹膜后淋巴结肿大以及是否有腔静脉系统的癌栓形成等方面都有着显著的差异性.NSS组和RN组在术前肌酐值比较方面无显著性差异,但是在术后差异有显著性(t=6.21,P<0.01).NSS组和RN组在术中出血量、引流量以及手术时间方面差异无显著性(P>0.05).NSS组肿瘤分期明显低于其他两组(P<0.01).术后3年、5年随访生存率分别为88.6%、79.5%,明显高于其他两组.在同等情况下,NSS治疗偶发性肾癌手术治疗效果要明显高于RN组和保守治疗组(P<0.01).结论:在适应证选择合适情况下,保留肾单位手术是应用于偶发性肾癌的一种有效治疗方式,在保留患肾大部分功能的同时其术后并发症也相对较小,预后相对也较好.
作者:吴佳成;姜力 刊期: 2018年第11期