学术投稿

新型非病毒纳米微囊-VEGF复合体转染鼠成纤维细胞的体外试验研究

贾宁;戴辉;毛海泉;陈苏民;易成刚;郭树忠

关键词:基因治疗, 纳米微囊, VEGF基因
摘要:探讨新型纳米微囊载体应用于基因治疗的可行性,安全性、转染效率、转移方法并与阳离子脂质体、质粒DNA进行比较.方法:以血管内皮细胞生长因子(VEGF165)为目的基因,构建真核表达载体pcDM3.1/myc-hi sA-VEGF165,分别利用纳米微囊、阳离子脂质体介导VEGF165转染鼠成纤维细胞(3Y1),转染4h后镜下观察细胞转染后表型变化,24、48h后通过绿色荧光蛋白的表达观察瞬时转染效率,通过免疫组织化学、Western Blot检测基因表达水平及定位.MTT法检测对转基因细胞的毒性.ELISA检测经G418筛选后上清培养液VEGF蛋白持续表达情况.结果:经G418筛选后的阳性细胞克隆,为高表达VEGF的鼠成纤维细胞模型.免疫组织化学证实pcDNA3.1/myc-hisA-VEGF165在转基因的细胞中呈高表达,定位于胞浆.Western Blot结果显示纳米微囊转染3Y1细胞48h后细胞胞浆及培养上清中均有VEGF蛋白表达.免疫荧光显示纳米微囊转染效率明显高于相应浓度的阳离子脂质体,转染4h后镜下观察细胞表型显示1 0mM浓度纳米微囊有较高的毒性.MTT测定示纳米微囊对3Y1细胞有显著的抑制增殖作用并随浓度梯度变化,ELISA检测发现纳米微囊、脂质体组培养上清中VEGF蛋白表达水平可维持4周,但纳米微囊组随时间变化而下降,瞬时表达水平高于脂质体组.结论:纳米微囊转基因载体作为一种新型非病毒载体,具备基因治疗应用潜能,可能为血管重建基因治疗提供了一种新的模式.
中国美容医学杂志相关文献
  • 羟基磷灰石及其复合生物材料的研究进展

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    作者:曹川;陈艳清;李世荣 刊期: 2004年第02期

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    作者:闻可;黄金龙 刊期: 2004年第02期

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    作者:李祝华 刊期: 2004年第02期

  • Millard法结合下三角瓣法修复单侧完全性唇裂

    探讨采用Millard法结合下三角瓣法修复单侧完全性唇裂的临床效果.方法:采用Millard法结合下三角瓣法修复单侧完全性唇裂26例,阐明该术式的方法、优点及手术中应注意的问题.结果:26例患者手术全部成功,上唇解剖形态恢复满意,上唇丰满,唇弓外形自然,患侧唇峰下降充足,唇上部紧张度较大,鼻小柱居中,患侧鼻翼鼻孔外形恢复良好,鼻底丰满,人中嵴形态良好,直线状瘢痕模拟人中嵴.结论:该方法集Millard法及下三角瓣法之优点,相互弥补其缺点,修复单侧完全性唇裂临床效果满意,手术灵活性及难度较大,主要靠目测及临床经验,应在熟练掌握两种常用术式后选用.

    作者:余波;张萍;罗锐 刊期: 2004年第02期

  • 抗衰老药物与方法的研究

    随着科学技术的进步和人民生活水平的提高,人们对生活质量和美容的追求越来越迫切,对其研究的内容也越来越广泛,其中对抗衰老方法的研究既是提高生命质量的需要,更是提高医疗美容效果的基础和根本.众所周知,衰老是一切生物发展的自然规律,是不以人类意志为转移的生物学法规,它虽不可完全逆转,但可应用现代科学技术,延缓其进程,从而提高生命质量,延长人类寿命,从而达到青春常驻的美容效果.现将近年来有关抗衰老方法的研究进展综述如下:

    作者:徐金秀;刘宏丽;苏学进 刊期: 2004年第02期

  • 眼袋整复术350例体会

    复习下睑局部解剖,探讨眼袋的解剖学原因,寻求较满意的手术方法,为眼袋整复积累临床经验.方法:对35 0例患者进行眼袋整复术,根据不同患者下睑局部解剖结构特点,采用皮肤径路法或下睑结膜径路法进行手术.结果:1 2例因眶脂去除不够,经再次手术后获得满意结果;8例术后下睑轻度外翻,3~6个月均自行恢复正常;其余效果均满意.结论:眼袋整形手术的效果与下睑局部解剖结构特点有密切的关系.

    作者:赵文斌;朱智生;杨恩品 刊期: 2004年第02期

  • 留置尿管拔除后发生尿潴留的预防及护理

    全身麻醉下行整形外科手术的患者要留置导尿管,但拔除后极易发生尿潴留,为预防拔除尿管后尿潴留的发生,笔者自2002年1月至2003年9月对68例患者在全麻下行整形手术留置导尿管,在拔除尿管前对患者采用38℃~40℃复合溶液100ml从尿管中注入的方法,均取得了满意的效果,现报道如下.

    作者:王慧聪;赵伟;王瑶 刊期: 2004年第02期

  • TGF-β1对兔耳创面肉芽组织和瘢痕组织蛋白激酶C活性的影响

    观察TGF-β1对兔耳伤口肉芽组织和瘢痕组织中蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)活性以及伤口愈合时间和瘢痕形成的影响,探讨PKC的作用.方法:在兔耳腹侧伤口和瘢痕组织使用TGF-β1,测定正常兔耳皮肤、伤后3d、6d、创面上皮化时(11~16d),上皮化后14d、30d、45d和60d组织中PKC活性.观察上皮化时间和瘢痕变化.结果:肉芽组织、周边组织和非增生性瘢痕和组织PKC活性上皮化后均高于伤前皮肤组织(P<0.001或0.05).增生性瘢痕的PKC活性均高于非增生性瘢痕(P<0.01或0.05).TGF-β1进一步活化各种组织的PKC(P<0.01),且加速伤口愈合并显著刺激瘢痕增生(P<0.05).上皮化前后使用TGF-β1的增生性瘢痕、非增生性瘢痕组织间分别比较时无差异(P>0.05).结论:PKC活化与伤口愈合和瘢痕增生有关.TGF-β1进一步活化各种组织的PKC提示PKC介导TGF-β1的刺激信号.

    作者:张选奋;郭树忠;张琳西;刘凯 刊期: 2004年第02期

  • 激光治疗鼾症及激光牙齿美白--激光美容系列讲座九

    1激光治疗鼾症鼾症(simple snoring,SS)和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)的手术治疗多采取悬雍垂腭咽成形术(uvulopalatopharyngoplasty,UPPP),但常规手术需住院在全麻下进行,并常需气管插管及预防性气管切开,术中出血多,术后局部水肿、疼痛明显,并发症多,危险性大.

    作者:孙林潮;卢芳丽;张艺权;高天文;李荣;刘玉峰 刊期: 2004年第02期

  • 两种培养状态下黑素细胞的生物学特征比较

    比较角质形成细胞无血清培养基(KC-SFM)和含血清的黑素细胞培养基培养的人类黑素细胞的生物学特征的差异,寻找适合黑素细胞移植治疗的黑素细胞培养方法.方法:以KC-SFM和含血清的黑素细胞培养基培养黑素细胞,在培养7d内倒置显微镜观察黑素细胞形态,MTT法观察生长曲线,并测定酪氨酸酶活性和黑素含量.结果:KC-SFM培养的黑素细胞具有较多树突且树突明显延长,增殖活性低于含血清的黑素细胞培养基培养的黑素细胞,而酪氨酸酶活性、黑素含量测定吸光值分别为0.385±0.036、0.276±0.022,和含血清的黑素细胞培养基培养黑素细胞比较均有显著差异.结论:KC-SFM可促进黑素细胞树突增多和树突延长,提高酪氨酸酶活性和黑素含量,适合用于移植治疗的黑素细胞培养.

    作者:赵小东;刘仲荣;孙林潮;张海龙;廖文俊;王冬青;高天文;刘玉峰 刊期: 2004年第02期

  • 脂肪组织移植整复臀部凹陷

    臀部凹陷影响人的体形美.自1998年以来,笔者采用臀部吸脂结合脂肪移植和皮瓣转移两种术式治疗6例臀部凹陷畸形患者,获得了较满意的效果.

    作者:何葆华;杨甄宇;林洁;吴卫华;姚建民 刊期: 2004年第02期

  • 保留完整阴道粘膜的阴道紧缩术

    阴道紧缩术是性快感强化手术之一,传统的方法是将阴道后壁的粘膜菱形切除.但此术式术后存在许多弊端,笔者自1998年以来,采用保留完整阴道粘膜的阴道紧缩术,治疗28例患者,术后效果满意,现报道如下.

    作者:陈静 刊期: 2004年第02期

  • 不同桩核材料及箍结构对前牙残根抗折力影响的研究

    对前牙残根的修复方法进行研究.方法:以48颗离体上中切牙制备残根模型,按是否制备箍结构和不同桩核材料类型分组,加压测试折裂强度,进行对比研究.结果:制备箍结构组与不制备箍结构组抗折强度有显著差异(P<0.05),不同桩核材料各组抗折裂强度无显著差异(p>0.05),但折裂位置不同.整体铸造桩核组均发生再次根折,纤维桩+树脂核组未发生再次根折,成品金属桩+树脂核组部分发生再次根折.结论:修复前牙残根时,颈缘制备箍结构后抗折力增强.纤维桩+树脂核的桩核类型更有利于保护残根.

    作者:周强;陈吉华;王辉;赵桂文;贾二曼 刊期: 2004年第02期

  • 叉形瓣法功能性修复重度双侧唇裂

    探讨并改进重度双侧唇裂的修复方法.方法:根据Black设计的叉形瓣并作适当的改进.深达骨膜的绕鼻翼切口使鼻翼基部及口轮匝肌充分游离,重建鼻底及正常的口轮匝肌环;前唇粘膜瓣用于加深唇沟;侧唇唇红瓣修复前唇唇红和唇珠.应用本方法修复重度双侧唇裂57例.结果:5 3例创口I期愈合,鼻底宽度及丰满度较满意,上唇在静态和动态时的外形均较好,但有不同程度的上唇过紧,鼻翼、鼻尖有不同程度的塌陷.2例感染、1例抓伤、1例摔伤导致伤口部分裂开.结论:叉形瓣法功能性修复重度双侧唇裂能获得较好的鼻唇外形和唇部功能,并为II期修复创造了条件,可作为修复重度双侧唇裂的重要方法.

    作者:李小林;巫国辉;刘善;曾瑞;夏小平;刘诚 刊期: 2004年第02期

  • 国产硅胶乳房假体隆乳术486例

    探讨采用国产硅胶囊乳房假体隆乳的手术方法和术后并发症的预防及处理.方法:对486例女性采用腋下、乳晕、乳房下皱襞等不同切口进行置入国产硅胶囊乳房假体,术后1~6年随访,总结出现并发症的情况.结果:常见的并发症是血肿、假体破裂、纤维挛缩变硬、外形欠佳.结论:硅胶假体隆乳术中预防并发症的主要措施是术中彻底止血,置放时注意保护假体,操作勿粗暴,手术分离范围应充分,术后坚持按摩等.

    作者:徐红霞;闫晓辉;张勇;薛艳斌;谭云华 刊期: 2004年第02期

  • 脂肪抽吸术肿胀麻醉液配制改进

    肿胀法吸脂技术应用于临床已历经10余年,得到了广大医务人员及患者的一致认可.近4年来,笔者通过将肿胀麻醉液进行改进对76位局部肥胖患者进行了门诊吸脂手术治疗,明显减轻了患者术中痛苦,减少了术中、术后并发症,均取得了满意效果.

    作者:周卫兵;范红渠;王智勇;郝鲁峰 刊期: 2004年第02期

  • 脂肪颗粒移植修复面部凹陷性组织缺损

    探讨面部凹陷性组织缺损的修复方法.方法:用10ml的常用注射器吸取腹部脂肪颗粒移植充填面部凹陷性组织缺损畸形.结果:本组治疗12例,一次性充填组织缺损,全部成功,术后无感染,伤口I期愈合.结论:注射器吸取脂肪颗粒移植修复组织凹陷畸形,方法简便,不需做手术切口,术后不遗留瘢痕,痛苦少,脂肪颗粒吸收少,治疗后外形理想,是一种较简便的治疗方法.

    作者:程新德;赵天兰;李光早;徐静;葛树星;王怀谷;李旭文 刊期: 2004年第02期

  • 激素依赖性皮炎的综合疗法

    由于非正规的外用激素现象十分普遍,激素依赖性皮炎已成为皮肤科的常见病.近10年来国内有关治疗激素依赖性皮炎的临床报道,显示中医药在本病的治疗中具有优势.中医认为本病病性多属热,热在血分,治疗多以清热凉血为大法.由于没有统一、客观的疗效判定标准,难以判断治疗方法的优劣.笔者在综合多种疗效判定标准的基础上,提出激素依赖性皮炎疗效判定的标准.本文以中医为主,综述几种治疗方法.

    作者:陈勇;陈彤云 刊期: 2004年第02期

  • 根尖下截骨术12例临床疗效评价

    研究根尖下截骨术在成人双颌前突正颌外科手术中的应用并对其临床疗效做出评价.方法:在12例中重度成人双颌前突的患者中应用根尖下截骨术正畸正颌联合矫治其错(牙合)畸形,对其手术前后14项决定面部侧貌美学特征的软硬组织指标进行X线头影测量,分析、评价其临床疗效.结果:12例患者术后面形均获得了较好的改变,SNA角由86.556°±1.184°减小到81.611°±0.698°,SNB角由83.389°±1.487°减小到79.889°±1.449°.结论:根尖下截骨术具有操作简单、并发症少的优点,用于正畸正颌矫治成人双颌前突可以使患者获得良好面形.

    作者:王媛;段银钟;刘鑫;刘岚 刊期: 2004年第02期

  • 审美愉悦与愉悦疗法

    审美愉悦是人们在审美心理过程中,接触到审美对象时由审美对象的内在本质、内容和形式所引起的一种审美情感体验,是一种赏心悦目的心理状态,是对审美对象的认识、欣赏与理性愉悦,具有个体的直觉性和身心整体的愉悦性.

    作者:刘志华 刊期: 2004年第02期

中国美容医学杂志

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