程飞；张长春；朱坤；许刚
目的 通过与空心钉固定比较,探讨弹簧钩板治疗后踝骨折的临床疗效.方法 2012年3月-2013年9月,共100例后踝骨折患者符合选择标准纳入研究.根据入院顺序将患者分为对照组(50例,采用空心钉固定)和研究组(50例,采用弹簧钩板固定).两组患者性别、年龄、致伤原因、合并伤及受伤至手术时间等一般资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性.记录并比较两组患者手术时间、术中出血量、骨折愈合时间及踝关节活动度,观察并发症发生情况;采用美国矫形足踝协会(AOFAS)踝与后足功能评分评价踝关节功能.结果 两组手术时间和术中出血量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).两组患者均获随访,对照组随访时间6 ～ 12个月,平均9.8个月;研究组6～12个月,平均9.2个月.X线片复查示两组骨折均愈合,研究组骨折愈合时间为(9.5±1.4)周,显著优于对照组的(10.5±1.3)周(t=2.029,P=0.017).术后6个月研究组踝关节背伸和跖屈活动度分别为(25.1±3.2)、(45.3±2.3)°,均显著优于对照组的(22.2±2.3)、(41.2±2.5)°(t=-3.950,P=0.001;t=-5.212,P=0.000).术后6个月对照组AOFAS踝与后足功能评分为(85.1±8.6)分,获优15例、良20例、中15例,优良率70％;研究组评分为(89.4±7.9)分,获优20例、良22例、中8例,优良率84％;两组比较差异均有统计学意义(忙t=-2.191,P=0.042;x2=0.413,P=0.018).并发症:对照组发生切口感染3例,研究组2例,均经换药后愈合;对照组术后发生空心钉退钉3例、后踝移位4例,研究组均无退钉及后踝移位发生.对照组和研究组并发症发生率分别为20％和4％,比较差异有统计学意义(x2=6.061,P=0.028).结论 与空心钉固定比较,弹簧钩板治疗后踝骨折能缩短骨折愈合时间,增加术后踝关节活动范围,获得更好的功能恢复以及可降低并发症发生几率.
作者：王丙刚；刘娜；张立峰 刊期： 2016年第10期
1 病例介绍患者 男,17岁.9个月前无明显诱因出现左膝关节疼痛,疼痛呈间断性,夜间痛明显,活动后疼痛减轻,无明显压痛及反跳痛,未给予系统治疗;1个月前左膝关节疼痛加重,于2016年2月20日入院.检查:左膝关节无红肿,皮温正常,无浅静脉怒张,无瘢痕及窦道形成;左膝关节髌骨下方有压痛,左膝关节被动活动正常;左侧中指、环指中远端指节并指畸形(图1).
作者：王刚；张政；丁露；杨晨 刊期： 2016年第10期
目的 探讨新型小分子氧自由基清除剂Tempol对大鼠背部超长任意皮瓣(long random pattern skin flap,LRPSF)成活及血管生成的影响及机制.方法 取成年雄性SD大鼠84只,体质量(300±20)g,随机分为Tempol组及对照组,每组42只.两组参照Mcfarlane皮瓣模型方法,于大鼠背部制备面积为9 cm×3 cm的LRPSF.Tempol组术前15 min及术后7d内每天腹腔注射Tempol(100 mg/kg),对照组同时间点注射相同体积生理盐水.术后观察各组大鼠成活以及皮瓣成活情况;第7天,测量皮瓣成活率,Micro-CT血管成像观察血管形成情况并测量血管容积和血管总长度,HE染色观察皮瓣组织层次结构及炎性反应程度,免疫组织化学染色观察VEGF表达;术后即刻及第1、3、7天,采用水溶性四氮唑-1法及可见光法测定皮瓣组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,ELISA法测定炎性因子TNF-α和IL-6含量.结果 术后各组大鼠均存活至实验完成,无积血、积液和感染等发生.随时间延长,两组皮瓣远端均发生坏死,但Tempol组坏死程度较对照组轻;且Tempol组血管分布及连续性均优于对照组.术后第7天Tempol组皮瓣成活率、血管容积及血管总长度均显著高于对照组(P＜0.05).术后第7天组织学及免疫组织化学染色观察示,与对照组比较,Tempol组皮肤各层组织结构层次尚清楚,组织炎性反应及炎性细胞浸润较轻,VEGF蛋白染色程度增高.术后即刻两组SOD、MDA以及TNF-α、IL-6含量比较,差异均无统计学意义(P＜0.05);术后第1、3、7天,Tempol组SOD含量高于对照组,MDA及TNF-α、IL-6含量明显低于对照组(P＜0.05).结论 Tempol显著提高大鼠背部LRPSF成活率,其机制可能与促进皮瓣组织血管生成、降低氧化应激和减轻炎性反应有关.
作者：李国栋；徐永清；何晓清；杨帆；陈德伟；罗浩天；杨曦 刊期： 2016年第10期
1 病例介绍患者女,55岁.1年前发现左膝关节髌骨下“桃核”样大小肿物突出于皮肤表面,无痛,未行系统治疗;后无明显诱因肿物逐渐增大,左膝关节屈伸活动受限,于2014年3月12日入院.检查:左膝关节髌骨下方皮肤隆起明显,无红肿及静脉怒张;局部可触及一大小约8.0 cm×5.0 cm×3.0 cm肿物,质硬,无压痛及叩击痛,肿物与周围组织分界不清,活动度差;膝关节被动活动度为20～80°;左下肢远端末梢血运良好,神经感觉、运动功能无异常.实验室检查:血常规、红细胞沉降率、肝肾功等均正常.影像学检查:左膝关节正侧位X线片示左膝关节髌下脂肪垫内高密度影(图1).MRI示T1WI呈低信号,与软骨信号相似,中间混杂部分钙化及成骨信号;T2WI呈低信号,周围滑膜组织增生水肿(图2).诊断:左膝关节髌骨下肿物(性质待查),考虑骨软骨瘤.
作者：张政；王刚；丁露；杨晨 刊期： 2016年第10期
目的 探讨乳房再造手术同期行对侧乳房对称性整形手术的方法及近期疗效.方法 2014年2月-2015年12月,对6例乳腺癌术前患者及5例乳腺癌保留乳头乳晕的乳房切除术后患者,在乳房再造术中(即刻及延期)同期行对侧乳房对称性整形手术.患者年龄36～55岁,平均45岁.乳腺癌术前患者病程7d～6个月,中位时间2个月;肿瘤分期:TisN0M02例,T1N0M03例,T2N0M0 1例.乳腺癌术后患者于术后2～25年,平均8年入院.11例患者均采用保留乳头乳晕的乳房切除术,乳房再造术应用假体乳房再造术7例,背阔肌肌皮瓣乳房再造术4例;对侧乳房对称性整形手术中6例采用假体植入隆乳术,5例采用乳房缩小术.结果 术后1例出现乳房切口边缘局部愈合不良,给予换药治疗,脱痂后伤口延期愈合;其余患者伤口均I期愈合,未出现伤口感染,假体感染、移位、外露、包膜挛缩等并发症.术后11例均获随访,随访时间3～24个月,平均12个月.末次随访时根据患者自身及整形外科专科医师对双侧乳房对称和美观的评价,优9例,良2例,优良率100％.随访期间患者均未出现肿瘤复发及转移.结论 根据患侧乳房再造的方式及乳房外形,乳房再造术同期行对侧乳房对称性整形手术,避免了二次手术,能够取得满意疗效.
作者：刘岩；穆籣；李广学；杨锴；彭喆；毕晔；朱怡；王偲 刊期： 2016年第10期
目的 对Lenke 1A型青少年特发性脊柱侧凸行后路选择性胸弯融合术后远端叠加现象的发生率进行研究,对可能的危险因素进行分析,以期得出更为合理的远端固定椎(lowest instrumented vertebra,LIV)选择策略.方法 回顾性分析2011年7月-2015年12月行后路椎弓根螺钉系统选择性胸弯融合术矫正治疗的43例Lenke 1A型脊柱侧凸患者.其中男15例,女28例;年龄12～18岁,平均16岁.术前主胸弯Cobb角(50.1±11.3)°.所有患者均在术前、术后即刻及末次随访时摄站立位脊柱全长正侧位X线片,测量手术前后各影像学参数.在末次随访X线片上判定是否发生了术后远端叠加现象,将发生远端叠加现象的患者纳入叠加组,未叠加患者为非叠加组.将可能发生叠加现象的参数进行统计分析.结果 43例均获随访,随访时间12～50个月,平均26.5个月.末次随访时10例(23.3％)发生了远端叠加现象,其中男2例(13.3％),女8例(28.6％).单因素分析显示,两组间比较术前腰弯柔韧性、术前骨盆冠状面倾斜角、术前LIV+1与骶骨中线偏移距离、L4亚分型、LIV与远端触及椎(lasttouching vertebra,LTV)节段差距(LIV-LTV)、LIV与下端椎(lower end vertebra,LEV)节段差距(LIV-LEV)、LIV与稳定椎(stable vertebra,Sv)节段差距(LIV-SV)7个参数差异有统计学意义(P＜0.05);而性别、年龄、Risser征、LIV与中立椎节段差距、手术前后主胸弯Cobb角、术前主胸弯柔韧性、术前代偿性腰弯Cobb角及术后代偿性腰弯残余角、术前顶椎偏移、术前LIV倾斜角、术后主胸弯及腰弯Cobb角矫正率、术后顶椎偏移、末次随访时主胸弯及腰弯Cobb角矫正丢失等参数差异均无统计学意义(P＞0.05).将差异有统计学意义的7个变量带入Logistic回归模型,采用逐步回归法进行变量筛选,结果显示术前LIV+1偏移(＞10 mm,OR值=10.812,P=0.026)、LIV-LTV(＜1,OR值=9.017,P=0.040)、L4亚分型(L4向右倾斜,OR值=9.744,P=0.047)与远端叠加现象明显相关.结论 术前LIV+1偏移＞10 mm、LIV-LTV＜1、L4亚分型(L4向右倾斜)是术后发生叠加现象的独立危险因素.由于叠加现象的发生与远端融合平面的选择密切相关,因此术前应全面考虑下端融合平面并且至少延伸至LTV+1,以防止术后远端叠加现象的发生.
作者：施剑雄；叶峰；周跃；黄博；邱浩；初同伟 刊期： 2016年第10期
目的 研究信号分子丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是否参与50 Hz、0.6 mT低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程.方法 取出生48 h内的SPF级Wistar大鼠6只,采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞.取原代颅骨成骨细胞,经50 Hz、0.6 mT低频脉冲电磁场处理0、5、10、20、40、60、120 min后,采用Western blot检测MAPKs的磷酸化水平.将成骨细胞随机分为对照组(A组)、低频脉冲电磁场处理组(B组)、p-p38抑制剂SB202190组(C组)、SB202190+低频脉冲电磁场处理组(D组),经相应处理1、4、7d后检测其ALP活性.将90％以上融合的成骨细胞经成骨诱导处理后同上法分组,处理9d时行ALP组织化学染色,12d时行茜素红染色观察.结果 Western blot检测示,处理各时间点磷酸化细胞外信号调节激酶1/2、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2蛋白表达量无显著变化(P＞0.05);而p-p38蛋白表达量则在处理5 min后开始升高,至40 min时达峰值,之后开始逐步下降,但各时间点均显著高于0min时(P＜0.05).B组ALP活性、ALP阳性克隆数、ALP阳性克隆面积、钙结节数及钙结节面积均显著多于A、C、D组(P＜0.05).结论 在50 Hz、0.6 mT低频脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟的过程中,信号分子p38参与其中.
作者：方清清；李志忠；周建；闫娟丽；石文贵；谢艳芳；陈克明 刊期： 2016年第10期
目的 在体外环境下同时下调细胞中Noggin基因和增加BMP-14基因,观察对脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)成骨分化能力的影响.方法 取健康成年SD大鼠5只,体质量250～300 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法获取原代ADSCs,体外培养、扩增.使用慢病毒载体将目的基因转染大鼠ADSCs,根据目的基因不同将实验分为3组,A组为空载体病毒Lv-增强型绿色荧光蛋白转染对照组,B组为Lv-BMP-14转染组,C组为BMP-14+Noggin shRNA转染组.分别于转染后3、7、14d,采用实时荧光定量PCR检测BMP-14及成骨相关基因[Ⅰ型胶原、ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)]的表达,转染后14 d采用茜素红染色鉴定其成骨分化能力.结果 转染后3d,各组BMP-14 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05);7、14d,C组BMP-14 mRNA相对表达量高于A、B组,B组高于A组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05).转染后3d,C组各成骨相关基因mRNA相对表达量显著高于A、B组(P＜0.05);A、B组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).转染后7、14 d,C组各成骨相关基因mRNA相对表达量显著高于A、B组,B组高于A组,除转染后7dA、B组间Ⅰ型胶原mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).转染后14 d茜素红染色示,A、B、C组钙结节量呈递增趋势.结论 BMP-14具有增强大鼠ADSCs向成骨细胞分化的能力;沉默细胞中的Noggin基因、联合BMP-14基因共同作用于大鼠ADSCs,其体外成骨分化能力明显强于BMP-14单基因转染,两者有显著的协同作用.
作者：刘浩；芮永军；孙振中；汤峰林；丁涛 刊期： 2016年第10期
目的 对缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)调控椎间盘的相关作用进行综述.方法 查阅国内外有关HIF对椎间盘调控的研究文献,并进行总结分析.结果 HIF是细胞应对缺氧环境的关键转录因子,广泛分布于组织器官,包括椎间盘组织中;其在椎间盘氧浓度低的髓核组织中表达浓度高.HIF对椎间盘调控作用主要包括调节髓核组织分化和发育,维持髓核细胞生存、能量代谢和合成代谢,维持椎间盘内环境稳定.结论 HIF对椎间盘组织发育、分化和行使正常功能发挥重要作用,有望成为研究椎间盘退变机制和治疗椎间盘退变的靶点.
作者：陈琪；马龙冰；杨曦；刘立岷；宋跃明 刊期： 2016年第10期
目的 总结指背双叶穿支皮瓣修复指背软组织缺损的临床疗效.方法 2015年3月-2016年3月,采用指背双叶穿支皮瓣修复指背软组织缺损13例.男6例,女7例;年龄19～66岁,平均31.7岁.致伤原因:机器冲压伤9例,重物压伤4例.受伤至入院时间40 min～36h,平均7.4h.指别:示指3指,中指5指,环指5指.缺损范围1.0 cm×1.0 cm ～ 2.5 cm×2.0 cm.第1皮瓣覆盖缺损创面,第2皮瓣覆盖第1皮瓣供区,第2皮瓣供区直接缝合.结果 术后创面均Ⅰ期愈合.皮瓣均顺利成活,无血管危象发生.12例患者获随访,随访时间3～9个月,平均5.5个月.各皮瓣色泽红润、质地良好;第1皮瓣供区无凹陷、破溃,第2皮瓣供区线性瘢痕愈合,整体外观良好.末次随访时按手指主动活动度(TAM)法评定手功能:优9指、良3指.结论 采用指背双叶穿支皮瓣修复指背创面缺损,手术操作简便,疗效较好.
作者：钱俊；芮永军；施海峰；吴权；吴柯 刊期： 2016年第10期
目的 探讨硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)对成肌细胞增殖以及肌管形成的影响.方法 取第5代成肌细胞制成浓度为1×108个/L的细胞悬液,依据在成肌细胞培养基中添加不同浓度CS,将实验分为A组(0 μg/mL)、B组(50 μg/mL)、C组(100 μg/mL)和D组(200 μg/mL).干预4、5、8d于倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化及肌管形成情况,6d采用MTT法检测各组细胞增殖情况,8d行HE染色检测各组细胞肌管形成数.结果 倒置显微镜观察示,细胞贴壁后呈单核梭形,细胞核呈卵圆形,细胞质致密;贴壁90％时整体肌母细胞呈漩涡状走行,长梭状生长.继续培养成肌细胞细胞核出现融合现象,形成多核肌管.8d,A组细胞多数已融合形成肌管,B、C组细胞有部分未融合,D组细胞融合形成肌管数少.MTT检测示,A、B、C、D组活细胞吸光度(A)值分别为0.045 2±0.0044、0.540 4±0.096 7、0.660 9±0.143 4、1.069 0±0.039 0,A组显著小于B、C、D组,B、C组小于D组,差异均有统计学意义(P＜0.05);B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色示,A组细胞大多数已融合形成肌管;B、C组有少部分细胞未融合形成肌管;D组细胞融合形成肌管数相对少,未融合细胞数稍多.A、B、C、D组肌管形成数分别为(222.01±30.02)、(193.13±42.46)、(170.26±11.96)、(136.88±16.78)根,各组间比较差异无统计学意义(F=1.658,P=0.252).结论 CS显著促进成肌细胞增殖,200 μg/mL CS促成肌细胞增殖能力显著优于其他浓度.
作者：王琳；周立冬；吴美；刘理金；向勇平；刘谋元；刘爱兵 刊期： 2016年第10期
目的 比较内侧副韧带切断加半月板切除与软骨刮除方法制备膝软骨缺损模型的差异,为软骨缺损造模方法选择提供参考.方法 选择成年健康比格犬10只,雌雄不限,体质量5.0～10.0 kg,随机分成3组,A组4只为内侧副韧带切断加半月板切除组,B组4只为软骨刮除组,C组2只为正常对照组.造模术后16周各组行MRI检查、标本大体观察,HE、番红O、甲苯胺蓝组织学染色,并采用国际骨关节炎研究协会(OARSI)骨关节炎组织学评分表对A、B组进行评分.结果 术后16周,与C组相比,A组MRI及组织学观察未见明显软骨缺损;B组MRI和组织学可见明显软骨缺损,大体标本见缺损部位呈暗红色.A、B组OARSI骨关节炎组织学评分分别为(0.940±0.574)、(4.500±0.516)分,差异有统计学意义(t=18.461,P=0.000).结论 采用软骨刮除方法制备软骨缺损模型效果较内侧副韧带切断加半月板切除好,是一种构建软骨缺损模型的良好方法.
作者：段鑫；陈强；李浪；许钊；范兆心；赵雪；张林昊；项舟 刊期： 2016年第10期
目的 对棘突间撑开器(interspinous distraction devices,IDD)治疗退变性腰椎管狭窄症(degenerative lumbar spinal stenosis,DLSS)的研究现状作一综述.方法 查阅近年国内外IDD治疗DLSS的相关文献,并进行分析总结.结果 IDD治疗DLSS的短期疗效优于保守治疗,与减压术或融合术无显著差异.IDD并发症发生率高,虽然并不显著影响手术疗效,但会提高患者医疗成本.结论 IDD为保守治疗无效而又不能耐受开放手术的DLSS患者提供了治疗选择,但其耐用性及长期疗效还需进一步研究观察.
作者：程飞；张长春；朱坤；许刚 刊期： 2016年第10期
目的 综述分娩性臂丛损伤(又称产瘫)的诊治进展.方法 广泛查阅近年与产瘫有关的文献,并对其发病率、危险因素、临床分型、辅助检查以及神经重建手术的适应证、方式和疗效进行总结分析.结果 近年来产瘫发病率未见明显下降.体质量≥4kg、产钳助产和孕妇体质量指数≥21是产瘫的主要危险因素,而剖宫产是保护因素.神经电生理检查可用于产瘫的定性诊断,但不可用作定量指标.脊髓CT及MRI造影的敏感度和特异性分别约为0.7和0.97.一般采用Narakas分型,即Ⅰ型为C5、6损伤,Ⅱ型为C5～7损伤,Ⅲ型为全臂丛损伤,Ⅳ型为Ⅲ型伴Horner征.通常认为3个月无屈肘动作是臂丛探查指征.10％～30％产瘫需要手术治疗,对于上干创伤性神经瘤,绝大多数作者主张行神经瘤切除神经重建.上中干手术疗效的终评价应在术后4年、全臂丛应在术后8年;功能评价主要采用肩关节Mallet评分、肘关节Gilbert评分和手功能Raimondi分级.结论 出生后3个月无屈肘时应行手术探查;对于创伤性神经瘤(即使术中有电传导)应行切除并臂丛重建.
作者：孙嘉宇；陈亮；胡韶楠 刊期： 2016年第10期
目的 总结1例应用耳后瓣联合多瓣修复右颞部恶性肿瘤组织大缺损的效果.方法 2016年1月收治1例右颞部肿物男性患者,75岁;肿物大小约为4 cm×4 cm.术中病理示鳞状细胞癌.术中行扩大切除术、面神经解剖术,肿物切除后组织缺损范围为8 cm×8 cm.于缺损部邻近组织设计制备耳后瓣、鼻唇沟瓣、颊瓣、颈胸皮瓣,大小分别约为4 cm×3 cm、4cm×2 cm、4 cm×3 cm、8 cm×4 cm,联合修复创面.结果 术后皮瓣血运良好,均成活,供受区创面均Ⅰ期愈合.术后1个月内因皮瓣张力过大,右口角向上偏移;外眦受牵拉外移,致右眼裂变小.术后3个月随访,右侧口角位置基本恢复正常,眼周稍肿胀,眼裂稍小,皮瓣色泽、质地均良好.术后4个月面部外形对称,表情自然协调正常,患者满意.结论 耳后瓣联合多瓣修复颞部组织大缺损效果良好,手术方法较简便,尤其适合老年患者.
作者：王子佳；黄谢山；刘德裕；陈尧卉；廖军 刊期： 2016年第10期
目的 通过与石膏外固定、切开复位内固定比较,探讨个体化设计结合3D导板引导下经皮空心螺钉内固定治疗Herbert Ⅰ b型腕舟骨骨折的临床疗效.方法 2010年1月-2015年6月,收治56例Herbert Ⅰ b型腕舟骨骨折患者.其中16例采用管型石膏外固定(外固定组),20例行切开复位空心螺钉内固定(切开复位组),20例采用个体化设计结合3D导板引导经皮空心螺钉内固定(微创组).3组患者性别、年龄、致伤原因、侧别、受伤至入院时间及骨折类型比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性.比较3组骨折愈合时间、骨折不愈合率、患者恢复工作时间、腕关节活动度以及Mayo功能评分.结果 切开复位组及微创组患者切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生.患者均获随访,随访时间10～24个月,平均16.6个月.微创组骨折愈合时间以及患者恢复工作时间显著短于其他两组,骨折不愈合率显著低于其他两组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05).末次随访时,微创组腕关节活动度为(104.40±3.46)°,显著高于外固定组(94.20±2.42)°及切开复位组(96.40±2.66)°(P＜0.05).腕关节Mayo功能评分,外固定组获优6例、良5例、中2例、差3例,优良率为69％;切开复位组获优9例、良7例、中2例、差2例,优良率为80％;微创组获优16例、良3例、中1例,优良率为95％;3组优良率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用个体化设计结合3D导板引导下经皮空心螺钉内固定治疗Herbert Ⅰ b型腕舟骨骨折,具有手术操作微创化、精确化优势,骨折愈合率高、并发症少,患者能尽早恢复工作.
作者：曾俊；林旭；钟泽莅；谭伦 刊期： 2016年第10期
目的 对近年来三维数字化技术在膝关节置换术中的应用进展进行综述.方法 广泛查阅国内外关于三维数字化技术在膝关节置换术中应用的研究文献,并进行分析总结.结果 三维数字化技术能够获得精确的膝关节形态学、生物力学,并能够通过术前规划预测截骨量及假体型号大小,从而精确指导膝关节置换术.结论 三维数字化技术应用于膝关节置换术能够减少手术误差,提高手术精度,改善临床效果.
作者：闫祥甲；李彦林；肖渝；李龙滕 刊期： 2016年第10期
目的 检测腺病毒介导人TGF-β1(human TGF-β1,hTGF-β1)基因转染至胭绳肌腱重建兔前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)术后不同时间点的表达.方法 以DMEM培养基稀释重组腺病毒载体Ad-hTGF-β1与腺病毒空载体Ad-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),使病毒滴度为5×108 PFU/mL.取15～20月龄雄性新西兰大白兔48只,随机分为A、B、C3组(n=16),以兔双侧后肢膝关节为研究对象,取自体胭绳肌腱重建同侧ACL,重建前A、B组腘绳肌腱分别以Ad-hTGF-β1及Ad-GFP转染12h,C组以DMEM培养作为对照组.转染后12h应用荧光显微镜观察A、B组绿色荧光表达,ELISA法检测A组胭绳肌腱中TGF-β1蛋白表达量.术后2、4、6、8周取材,应用实时荧光定量PCR及Western blot法检测腘绳肌腱中hTGF-β1基因及蛋白表达.结果 A、B组胭绳肌腱经转染后均可见绿色荧光表达;ELISA法检测示,A组胭绳肌腱中TGF-β1蛋白表达量为(221.0±12.2) ng/mL.实时荧光定量PCR检测示,术后各时间点B、C组均未能检测到hTGF-β1mRNA表达;术后2、4、6、8周,A组hTGF-β1 mRNA相对表达量逐渐下降,分别为1.004±0.072、0.785±0.038、0.469±0.053、0.172±0.021,各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测示,术后各时间点B、C组TGF-β1蛋白条带均为弱阳性,A组TGF-β1蛋白表达量均显著高于B、C组(P＜0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).A组TGF-β1蛋白表达量随时间延长逐渐降低,各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在腺病毒载体介导下,hTGF-β1基因能成功转染至腘绳肌腱并能在ACL重建术后有效表达.
作者：王晓旭；何敏；谭文甫；谭光华；杨俊涛；洪亮 刊期： 2016年第10期
目的 通过观察脑信号蛋白3A (Semaphorin 3A,Sema3A)在创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后胫骨骨折愈合中的表达变化,探讨Sema3A在神经损伤后骨折愈合中的作用机制.方法 取8～ 10周龄Wistar雌性大鼠192只,体质量220～250g,随机分为胫骨骨折组(A组)、TBI组(B组)、TBI伴胫骨骨折组(C组)、对照组(D组),每组48只.A组制备右侧胫骨骨折模型,B组采用改进后的Feeney法自由落体颅脑损伤装置制备TBI模型,C组制备TBI合并胫骨骨折模型,D组不作处理.分别于术后3、5、7、14、21、28 d处死8只动物取材,采用HE染色、免疫组织化学染色及Western blot法对骨痂组织中Sema3A进行定位、定量检测.结果 HE染色示D组各时间点未见明显变化.术后3、5d,A、C组骨折断端无明显骨痂生长,可见炎性细胞及纤维组织填充;B组与D组无差异.7、14d,A、C组纤维组织自骨膜下向断端间隙生长,骨外膜软骨细胞增生,逐渐向断端生成软骨痂,C组与A组相比骨外膜软骨细胞体积大、排列疏松,类骨质多;B组与D组相比,骨膜稍紊乱,骨膜下骨质轻度增生,骨小梁未见明显差异.21、28 d,A、C组软骨痂逐渐被新生骨小梁代替,C组与A组相比,骨小梁排列疏松、结构紊乱、密度低,骨痂面积较大,残存少量软骨细胞及类骨质;B组与D组比较无明显差异.免疫组织化学检测示,Sema3A阳性染色在C组软骨细胞表达高于A组,尤其在7、14、21 d;Sema3A阳性染色在A组新生骨小梁成骨细胞表达较C组高,尤其在14、21 d;差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测示,Sema3A在A、C组骨折愈合过程中表达趋势相同,术后7、14、21、28dC组Sema3A蛋白相对表达量高于A组(P＜0.05);B组Sema3A蛋白相对表达量在术后7、14、21、28 d显著高于D组(P＜0.05).结论 Sema3A在神经损伤后骨折愈合中表达异常,可能通过促进软骨细胞增殖、降低感觉神经纤维分布及成骨细胞分化,在神经损伤后骨折愈合中发挥作用.
作者：李争争；赵军伟；移志刚；罗伟；李康；汪玉良；汪静；安丽萍；马靖林 刊期： 2016年第10期
目的 探讨一种优化的猪骨骼肌脱细胞制备方法,以期制备理想的猪骨骼肌来源无细胞基质(decellularized porcine muscle tissue,DPMT)支架材料.方法 取市售新鲜健康成年家猪腰部骨骼肌组织,采用匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方案制备DPMT.行组织学观察脱细胞、脱脂效果,天狼猩红染色分析胶原成分,扫描电镜观察材料内部微结构;测定材料中DNA含量及总蛋白质含量.取人脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)、小鼠成纤维细胞(NIH3T3)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),置于不同浓度DPMT浸提液中,培养后第1、3、5天采用细胞计数试剂盒8法测算细胞相对增殖率,评价材料细胞毒性;通过DPMT表面接种HUVECs体外共培养3d后,行活死细胞染色评价其体外细胞相容性.采用SPF级雄性SD大鼠建立DPMT大鼠背部皮下植入模型,于植入3、7、14、28 d取材,大体观察材料降解情况,并测量其横径;行HE染色和CD31免疫组织化学染色观察其生物相容性和血管新生情况.结果 匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方法操作简便,制备DPMT仅需ld时间;检测显示DPMT脱细胞、脱脂完全,主要成分为Ⅰ型胶原及Ⅳ型胶原;DPMT中DNA含量为(15.902±1.392) ng/mg干重,总蛋白质含量占其干重的68.94％,显著低于新鲜猪骨骼肌组织[分别为(140.724±10.422) ng/mg干重及93.14％] (P＜0.05);DPMT内部呈均质疏松网状结构.体外细胞相容性实验显示DPMT细胞毒性评级均为0～1级,HUVECs在DPMT表面能稳定生长.DPMT大鼠皮下植入后14 d内可保持大体结构的稳定性,至28 d时完全降解;炎性反应在3d时明显,7d时明显减轻,两时间点炎性细胞数量比较差异有统计学意义(P＜0.05);植入后7d即可见DPMT内部新生血管环结构形成,14 d时新生血管环数量显著增加,比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方案省时高效、可重复性佳,所制备的DPMT脱细胞、脱脂完全,蛋白质成分保存良好,具有良好的体内外生物相容性,且可能具有一定诱导血管新生潜能.
作者：张迪；谭秋雯；汤沈力；罗静聪；张忆；吕青 刊期： 2016年第10期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
