徐勇；周敏；刘欢；张群虎；胡志毅；张宁；任永信
目的 将软骨细胞复合于人脐带Whanon胶取向支架,体外评估该支架对软骨细胞的影响和作用.方法 取成年新西兰大白兔肩关节软骨组织分离培养软骨细胞.取正常新生儿脐带组织,通过湿润粉碎结合化学脱细胞技术脱细胞,利用冷冻干燥及交联等技术制备人脐带Wharton胶取向支架.取第2代软骨细胞与人脐带Wharton胶取向支架复合培养,倒置显微镜、扫描电镜观察细胞在支架上分布及黏附情况;甲苯胺蓝、番红O染色观察细胞细胞外基质分泌情况;二乙酰荧光素-碘化丙啶双色荧光检测法染色及Hoechst33258染色评估细胞在支架上的活力及增殖情况;将体外PKH26荧光标记的软骨细胞与支架复合培养,荧光显微镜观察. 结果 倒置显微镜观察示,培养3d细胞在支架孔隙内分布较均匀,呈圆形或椭圆形;扫描电镜观察示,培养7d大量细胞黏附于支架孔隙间,呈圆形或椭圆形,且细胞沿取向孔道伸展排列,相互聚集,增殖旺盛;组织学观察示,培养7d,细胞在支架中分布均匀且增殖旺盛,细胞分泌大量细胞外基质,取向支架能引导细胞迁徙和增殖,并能有效保留和促进细胞外基质分泌;细胞活力评估结果示,培养3d见支架上黏附的大部分细胞为活细胞,细胞成活率高达90％以上.荧光显微镜观察示,荧光标记细胞与支架复合培养1d,细胞在支架内部均匀分布,增殖旺盛. 结论 人脐带Wharton胶取向支架具有良好的亲和性和细胞相容性,有利于软骨细胞黏附和增殖,细胞存活率高,是一种比较理想的软骨组织工程支架材料.
作者：吕涵宁；徐国娇；盖昱辛；陈礼；刘舒云；赵鹏；卢世璧；张莉；郭全义 刊期： 2014年第08期
目的 探讨几丁糖电纺膜预防脑脊液漏的远期效果. 方法 取健康成年新西兰家兔25只,雌雄不限,体重2.3～3.1 kg,于双侧颅骨顶部制备0.8 cm×0.8 cm大小对称硬膜缺损.右侧硬膜缺损采用几丁糖电纺膜修复(实验组),左侧缺损不修复,作为对照组.术后2～16周每周处死1只动物,观察骨窗周围局部炎性反应和几丁糖电纺膜吸收情况.术后3、6周,分别随机处死5只实验动物取材,行HE及Masson染色观察骨窗及几丁糖电纺膜周围组织病理学改变以及胶原化情况,行免疫组织化学染色观察EGF受体(EGF receptor,EGFR)和bFGF表达情况. 结果 术后两组均无皮肤及皮下红肿、渗出、化脓等炎性反应.实验组几丁糖电纺膜周围无粘连,膜下有新生纤维膜形成,无脑脊液漏,随时间延长几丁糖电纺膜逐渐降解,至16周时完全吸收;对照组骨窗周围组织为厚薄不均的增生瘢痕.组织学观察示,与对照组比较,实验组炎性细胞浸润较少,毛细血管、肉芽组织及胶原纤维大量增生,胶原纤维排列整齐,几丁糖电纺膜与周围胶原纤维有较清晰界限;3、6周时两组炎性细胞计数差异均有统计学意义(P＜0.05);免疫组织化学染色示,术后3、6周实验组见EGFR及bFGF高表达,对照组均为低表达. 结论 采用几丁糖电纺膜修复兔硬膜缺损,能有效重建硬膜,预防脑脊液漏远期效果明确.
作者：郭兴锋；侯春林；窦源东；林晔；雷德桥 刊期： 2014年第08期
目的 总结双套圈交叉加压缝合法治疗手指近侧指间关节侧副韧带损伤的疗效. 方法 2008年12月-2013年2月,采用双套圈交叉加压缝合法治疗18例(20指)近侧指间关节侧副韧带起、止点断裂患者.男10例,女8例;年龄18～56岁,平均36.5岁.致伤原因:扭伤10例(10指),绞伤5例(7指),戳伤3例(3指).损伤指别:示指8指,中指8指,环指4指.患指关节屈伸活动受限;侧方应力试验(+).2例(2指)合并细小撕脱骨块.伤后至手术时间2～10d,平均6.5d. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生.患者均获随访,随访时间8～50个月,平均30个月.术后患指均无疼痛、关节稳定,侧方应力试验(-),关节分别遗留不同程度梭形肿胀.术后8个月,根据总主动活动度系统评定方法:获优12指,良7指,差1指,优良率95％. 结论 双套圈交叉加压缝合法治疗手指近侧指间关节侧副韧带损伤疗效满意.
作者：张净宇；于志亮；张文龙；王力；于俊；高顺红 刊期： 2014年第08期
目的 总结灌注法保存断肢的研究进展,分析不同灌注方法保存断肢的效果. 方法 广泛查阅国内外有关灌注法保存断肢的文献,并进行总结分析. 结果 目前灌注保存法主要包括器官灌注液灌注、自由基清除剂灌注液灌注、能量合剂灌注液灌注、血液代用品灌注及血液灌注,均能不同程度减轻骨骼肌缺血-再灌注损伤. 结论 不同灌注液能不同程度减轻骨骼肌缺血-再灌注损伤,但哪种灌注液保存效果好以及个性化保存方案,仍需进一步研究探讨.
作者：秦新愿；张绍春；高磊；尹叶锋；刘宁；王江宁 刊期： 2014年第08期
目的 综述各种生物来源水凝胶的特性及其在组织工程领域的应用与研究进展. 方法 查阅近年有关生物来源水凝胶的文献,并对其进行分析总结. 结果 生物来源水凝胶大体可分为单一成分(胶原蛋白、透明质酸、壳聚糖、藻酸盐及丝素蛋白等)水凝胶及多成分(基质胶、细胞外基质提取物、脱细胞基质)水凝胶两大类.它们大多来自生物组织的细胞外基质,因此具有良好的生物相容性及生物活性.其中,脱细胞基质水凝胶无论成分还是结构,均更加符合仿生学要求,是目前接近细胞生长天然环境的支架材料. 结论 生物来源水凝胶已广泛应用于组织工程研究,尽管现有水凝胶材料仍存在力学性能欠佳、降解速度过快以及血管化、灭菌方法、免疫原性等方面的问题,但随着优化机制的不断深入研究,有望获得理想的生物来源水凝胶材料,并真正应用于临床.
作者：傅月荷；吕青 刊期： 2014年第08期
目的 探讨一期病灶清除、人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)治疗活动性髋关节结核的近期疗效. 方法 2006年1月-2011年6月,行一期病灶清除THA治疗活动性髋关节结核12例(12髋).其中男7例,女5例;年龄18～60岁,平均46.3岁.病程6～24个月,平均10.5个月.根据Babhulkar和Pande髋关节结核分期:Ⅲ期5例,Ⅳ期7例.1例并发窦道,2例有肺结核病史.术前髋关节屈伸活动度为(35.83±9.25)o,Harris评分为(36.83±6.44)分.红细胞沉降率为45～90mm/1h,平均62.4 mm/1h;C反应蛋白为19～50mg/L,平均33.6 mg/L.手术前后均接受正规抗结核治疗. 结果 病理学检查及结核杆菌PCR检测均为阳性.术后切口均Ⅰ期愈合,无手术相关并发症发生.患者均获随访,随访时间25～60个月,平均40.8个月.患者红细胞沉降率及C反应蛋白均恢复至正常水平,无肝损害表现.随访期间11例无结核复发;1例于术后4个月复发,行二次翻修术后痊愈.X线片检查示,术后无假体移位及松动和窦道形成;18～24个月双侧骨质密度基本相同,至末次随访时双侧骨质密度无明显变化.末次随访时,髋关节屈伸活动度为(107.08±13.56)°,与术前比较差异有统计学意义(t=14.571,P=0.000); Harris评分为(88.00±10.78)分,与术前比较差异有统计学意义(t=16.750,P=0.000). 结论 一期病灶清除THA治疗活动性髋关节结核,可有效缓解关节疼痛、改善关节功能,结核复发率低,近期疗效满意.
作者：毕红宾；王永清；赵志辉；熊庆广；孙晋保；战颖；綦凤桐；郝晓辉 刊期： 2014年第08期
目的 探讨在手术清除椎管内肿瘤的同时行椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植重建椎管后部结构的临床疗效. 方法 2006年2月-2012年5月,收治48例椎管内肿瘤患者,采用在手术清除椎管内肿瘤的同时行椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植重建椎管后部结构治疗.男35例,女13例;年龄17～48岁,平均29.5岁.病程3～16个月,平均10.5个月.肿瘤位于T5、6 3例,T107例,T12、L113例,L3 10例,L4～S1 15例.其中硬膜外脊膜瘤18例,硬膜外脂肪瘤2例,髓外硬膜下神经类肿瘤3例,髓外硬膜下脊膜瘤10例,髓外硬膜下神经鞘瘤6例,髓内室管膜瘤6例,髓内星形细胞瘤3例.术后采用Oswestry功能障碍指数(ODI)评定症状改善情况,脊髓损伤Frankel分级评估神经损伤及恢复程度. 结果 术后8例出现脑脊液漏,4例切口出现淡黄色渗液,经相应处理后均治愈;其余切口均Ⅰ期愈合,无其他术后早期并发症发生.48例均获随访,随访时间18～72个月,平均38个月.CT示椎管后部植骨均生长融合,椎管结构重建良好,无瘢痕组织长入椎管内形成医源性狭窄.脊柱动力位X线片复查示无椎体失稳或滑脱,重建椎板无断裂及移位.MRI示除1例患者复发外,余均无复发.患者术后症状明显改善,末次随访时ODI评分为(16.69±2.53)分,较术前(47.83±7.25)分显著降低(t=0.89,P=0.00);ODI改善率获优36例,良10例,可1例,差1例,优良率达95.83％.末次随访时Frankel分级除1例肿瘤复发(术前Frankel分级为B级)患者无改变外,余均有1～2级改善,与术前比较差异有统计学意义(Z=13.32,P=0.00). 结论 椎管后H形同种异体骨块植骨结合棘突回植能良好重建椎管后部结构,并有效避免医源性椎管狭窄,是治疗椎管内肿瘤的有效术式.
作者：叶青；黄武；贺云松；农明善；梁天森；谭素贞；杨幸 刊期： 2014年第08期
目的 总结窦道型压疮的临床特点及治疗方法和疗效. 方法 回顾分析2009年1月-2013年4月收治的17例外伤性截瘫后发生窦道型压疮患者临床资料.男11例,女6例;年龄17～49岁,平均27.4岁.压疮形成时间6个月～7年,中位时间1.5年.14例为首发压疮,3例为复发.单纯窦道型压疮8例10处;复杂窦道型压疮9例9处,假性滑液囊合并l～4个二级窦道.窦道型压疮主要发生于坐骨结节处.压疮创面范围1.5 cm×1.0 cm～3.0 cm×2.0 cm;二级窦道长8～32 cm,平均17 cm.单纯窦道型压疮完整切除假性滑液囊后,一期或二期分别采用局部潜行或菱形皮瓣修复;复杂窦道型压疮于假性滑液囊切除修复基础上,联合彻底切除二级窦道治疗. 结果 1处单纯窦道型压疮术后4d发生切口裂开,经再次缝合并制动后愈合;3处复杂窦道型压疮分别于术后9、17、23 d发生切口局部感染,皮瓣下积脓,经二次彻底清除残余坏死组织后愈合;其余切口均Ⅰ期愈合,皮瓣均成活.患者均获随访,随访时间6～12个月,平均9.3个月.压疮均无复发. 结论 根据窦道型压疮的临床特点,可分为单纯窦道型压疮和复杂窦道型压疮两种类型,治愈的关键在于彻底切除假性滑液囊和二级窦道.
作者：刘毅；张鲜英；肖斌；宋玫；刘萍；姜疆；张诚；张绪生；陈黎明 刊期： 2014年第08期
目的 探讨Flow-through静脉皮瓣在伴环形皮肤软组织及血管缺损的复杂性断指再植中的应用. 方法 2010年1月-2012年12月,采用前臂Flow-through静脉皮瓣再植治疗伴环形皮肤软组织缺损及血管缺损的复杂性断指11例.其中男8例,女3例;年龄18～42岁,平均24.6岁.致伤原因:冲压伤6例,压砸伤3例,绞勒伤2例.3例伴指神经缺损,缺损长度分别为1.0、2.0、3.5 cm;2例伴肌腱缺损,缺损长度2.0、6.5 cm.环形皮肤软组织缺损宽度3.0～4.5 cm,长度为1/2～1周指体周径,缺损范围2.0 cm×1.0 cm～7.0 cm × 4.5 cm;其中完全环形缺损6例(为指动、静脉均缺损),不完全环形缺损5例(为指动脉缺损),血管缺损长度1.0～4.5 cm.受伤至手术时间1.5～4.5 h. 结果 1例术后2d出现静脉危象,探查行静脉移植后解除;2例皮瓣边缘表皮坏死,其中1例经换药后自愈,1例植皮后愈合;2例出现皮瓣肿胀、水疱,均自行缓解.余6例皮瓣、断指均顺利成活,创面Ⅰ期愈合.术后10例获随访,随访时间12～18个月,平均15.5个月.皮瓣供区仅遗留线形瘢痕,腕关节功能无受限.患指移植皮瓣不臃肿,颜色、质地与周围皮肤相似,皮瓣及手指浅痛觉及触觉恢复,末次随访时两点辨别觉为6.5～13.0 mm,平均8.6 mm.末次随访时按照中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准评定,获优6例,良3例,差1例,优良率90％. 结论 将Flow-through静脉皮瓣应用于伴环形皮肤软组织缺损及指动、静脉缺损的复杂性断指再植,可同时修复血管及环形皮肤软组织缺损,断指再植成活率高,临床疗效满意.
作者：郑大伟；黎章灿；许立；张旭阳；石荣剑；孙峰；寿奎水 刊期： 2014年第08期
目的 通过与持续硬膜外麻醉比较,探讨局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗胭窝囊肿的疗效. 方法 2002年6月-2013年1月,对145例胭窝囊肿患者采用局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗(局麻组);以2000年2月-2005年8月,采用持续硬膜外麻醉全关节镜下手术治疗的51例胭窝囊肿患者作为对照组.两组患者性别、年龄、侧别、病程以及囊肿大小比较,差异均无统计学意义(P＞ 0.05),具有可比性.比较两组麻醉时间、镇痛效果、麻醉满意度、手术时间、术中出血量、术后麻醉并发症发生情况,根据Rauschning和Lindgren胭窝囊肿分级标准评定疗效,记录随访期间囊肿复发情况. 结果 两组术后切口均Ⅰ期愈合,无血管、神经损伤等并发症发生.两组患者均获随访,局麻组随访时间1年1个月～8年,平均3.7年;对照组随访8年～13年7个月,平均10.8年.与对照组相比,局麻组麻醉时间缩短、疼痛视觉模拟评分(VAS)增高、手术时间缩短、术中出血量减少(P＜0.05);麻醉满意度降低,但两组差异无统计学意义(x2=0.071,P=1.000).术后对照组8例(15.7％)发生麻醉并发症,发生率显著高于局麻组(0)(P=0.000).随访期间局麻组12例囊肿复发,治愈率91.7％;对照组5例复发,治愈率90.2％;两组治愈率比较差异无统计学意义(x2=0.111,P=0.774).末次随访时,根据Rauschning和Lindgren分级标准:局麻组0级131例、Ⅰ级13例、Ⅱ级1例,与术前比较差异有统计学意义(Z=10.683,P=0.000);对照组0级37例、Ⅰ级12例、Ⅱ级2例,与术前比较差异有统计学意义(Z=-6.385,P=0.000);两组术后分级比较差异有统计学意义(Z=3.145,P=0.002).结论 与持续硬膜外麻醉相比,局部麻醉全关节镜下胭窝囊肿摘除联合膝关节清理术治疗胭窝囊肿效果更好,可实时动态观察患肢血管、神经情况,且创伤小、复发率低,临床疗效满意.
作者：王江涛；刘玉杰；王俊良；齐伟；曲峰；申学振；肇刚；袁邦拓；刘洋 刊期： 2014年第08期
目的 总结带血管蒂头状骨瓣移位治疗终末期月骨缺血性坏死的远期疗效. 方法 2004年6月-2008年1月,采用带血管蒂头状骨瓣移位治疗16例Lichtman Ⅲ B或Ⅳ期月骨缺血性坏死患者.男10例,女6例;年龄27～59岁,平均38.8岁.发病原因:创伤10例,原因不明6例.主要临床症状为腕关节疼痛伴活动受限;症状持续时间5～32个月,平均26.5个月.患侧腕高度指数为0.88±0.05,桡舟角为(63.8±9.1)°. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合,无感染及神经、血管损伤等并发症发生.16例均获随访,随访时间5年4个月～9年,平均5.8年.末次随访时,腕关节VAS评分为(2.0±1.5)分.腕关节掌屈、背伸活动度均显著小于健侧(P＜0.05);握力及腕关节功能Evans评分与健侧比较,差异均无统计学意义(t=-0.997,P=0.327;t=-1.852,P=0.077).X线片测量示,患侧腕高度指数为0.94±0.03,桡舟角为(48.4±4.8)°,与术前比较差异均有统计学意义(t=-3.927,P=0.000; t=5.987,P=0.000).6例出现桡骨背侧与头状骨背侧硬化带,2例出现舟骨旋转. 结论 采用带血管蒂头状骨瓣移位治疗终末期月骨缺血性坏死,尽管存在不同程度腕关节功能受限,但因腕关节疼痛消失及握力显著改善,远期疗效满意.
作者：唐诗添；刘刚；张定伟；王军；黄富国 刊期： 2014年第08期
目的 探讨D-二聚体异常患者行人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后采用利伐沙班药物抗凝的安全性和有效性. 方法 将2013年8月-9月收治的60例(60膝)符合选择标准的膝关节内翻型骨关节炎患者纳入研究,根据术前D-二聚体水平分为两组:D-二聚体正常组(对照组,41例)和D-二聚体异常组(试验组,19例).两组患者性别、年龄、体重指数、术前膝关节活动度等一般资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性.患者均行常规TKA,术后采用利伐沙班药物抗凝.比较两组术中止血带使用时间、术后住院时间以及总住院时间;术后1、3、5d抽血检测血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血浆凝血酶时间(thrombin time,TT)以及血浆纤维蛋白原(fibnnogen,FIB)和D-二聚体水平;观察切口并发症及双下肢深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)情况. 结果 试验组术后住院时间较对照组显著延长(t=2.327,P=0.031);两组止血带使用时间及总住院时间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).两组患者均获随访,随访时间6～8个月,平均7.2个月.术后对照组3例(7.3％)、试验组2例(10.5％)发生切口并发症,发生率比较差异无统计学意义(x2=0.175,P=0.676).术后两组患者均未出现肺栓塞相关事件,6周行双下肢静脉彩超均未发现DVT.PT、TT、FIB:组内比较手术前后存在时间变化趋势,组间比较差异无统计学意义;APTT、D-二聚体:组内比较手术前后存在时间变化趋势,组间比较差异有统计学意义;各指标时间与组别交互作用均无统计学意义. 结论 术前D-二聚体高于正常值不应视为TKA手术禁忌证;该类患者术后采用利伐沙班药物抗凝,其发生DVT、伤口并发症的几率与D-二聚体正常患者无明显差异;术后定期复查D-二聚体、出凝血时间等指标对于预示和诊断TKA术后DVT无明显临床意义.
作者：孙云波；王磊；神兴勤；张东亮；刘军；孙振辉 刊期： 2014年第08期
目的 对肘管综合征(cubital tunnel syndrome,CTS)的治疗研究进展进行综述. 方法 广泛查阅近年国内外与CTS治疗相关的文献,并进行总结分析. 结果 CTS是临床上常见的周围神经卡压病变之一,临床表现为环指与小指麻木和刺痛感、肘部疼痛以及肘关节长时间弯曲后感觉改变,严重时也可发生手内在肌萎缩、肌力减退、爪形手畸形等.其病因包括各种解剖结构异常导致的尺神经卡压以及肘部外伤后引起的尺神经麻痹等.CTS的治疗方式包括非手术治疗和手术治疗.其中手术治疗包括原位松解术、尺神经前置术、肱骨内上髁切除术和内窥镜下尺神经松解术等. 结论 CTS的治疗方式多种多样,但其适应证和疗效仍不确切,需要更深入研究,以形成一套公认的治疗体系.
作者：郁诗阳；刘坤；范存义 刊期： 2014年第08期
目的 通过观察氯化镧对氧化铝陶瓷颗粒诱导小鼠RAW264.7细胞分泌炎性因子IL-1β、TNF-a的影响,探讨氧化铝陶瓷颗粒与无菌性炎症的关系以及氯化镧对其影响. 方法 体外培养小鼠RAW264.7细胞,根据培养液不同将实验分成4组:A组为细胞培养液,B组加入1 mg/mL氧化铝陶瓷颗粒悬液,C组加入1 mg/mL氧化铝陶瓷颗粒悬液和10 μmol/L氯化镧溶液,D组加入10 μmol/L氯化镧溶液.采用MTT法检测细胞生长情况,RT-PCR、ELISA及Western blot检测炎性因子IL-1β、TNF-α、NF-κB基因及蛋白表达. 结果 MTT检测示,各组细胞活性差异无统计学意义(F=2.180,P=0.142).RT-PCR检测示,B组IL-1β、TNF-α、NF-κB mRNA相对表达量显著高于其余3组(P＜0.05);D组各基因表达量低于A组(P＜0.05).ELISA检测示,B组IL-1β和TNF-α含量显著高于其余3组(P＜0.05);D组显著低于A组(P＜0.05).Western blot检测示,B组NF-κB蛋白表达量显著高于其余3组(P＜ 0.05). 结论 氧化铝陶瓷颗粒可刺激巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-α,而氯化镧可一定程度抑制巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-a.
作者：聂涛；戴闽；江川；刘翔 刊期： 2014年第08期
目的 探讨髋关节重度骨关节炎行人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中偏心距重建方法以及疗效. 方法 2009年7月-2011年6月,收治18例(18髋)髋关节重度骨关节炎患者.男14例,女4例;年龄47～72岁,平均55.4岁.病程11～74个月,平均33.6个月.左髋11例,右髋7例.髋关节Harris评分为(34.6±5.3)分.托马斯征、“4”字试验以及Trendelenburg征均为阳性.术前肢体不等长15例.患者均行THA,术中采用股骨距标准截骨、选择正确的旋转中心及合适长度股骨距重建偏心距. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.1例出现腓总神经牵拉损伤,经对症治疗3个月后恢复;其余患者均无手术相关并发症发生.18例均获随访,随访时间30～53个月,平均43.5个月.术后髋关节疼痛明显缓解,步态恢复正常.X线片复查示:关节无脱位,假体在位良好、无松动;6例双下肢不等长.患者健、患侧偏心距差值为0.1～0.7mm,平均0.4 mm.末次随访时,髋关节Harris评分为(83.0±7.1)分,与术前比较差异有统计学意义(t=-22.96,P=0.01);关节活动度均较术前显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 髋关节重度骨关节炎行THA,通过术前模板测量选择合适假体,术中保留适当股骨距长度、调节股骨颈长度和颈干角,适度软组织松解,可准确重建偏心距,术后关节功能恢复满意.
作者：班照楠；黄富国；顾琪珊；许冰；李永奎；李正疆 刊期： 2014年第08期
目的 探讨烧伤对小鼠棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)的影响. 方法 取3～4月龄雄性BALB/c小鼠40只,体重(20±3)g,随机分为实验组和对照组(n=20).实验组小鼠将背部置于90℃热水9s制备30％总体表面积Ⅲ度烫伤模型,对照组小鼠背部置于37℃热水中9s,作为对照.造模前后检测小鼠空腹体重、体温;造模后7d取BAT及白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)称重并行大体、组织学及透射电镜观察,实时定量PCR及免疫组织化学染色检测脂肪组织解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP-1)基因及蛋白表达水平. 结果 造模前两组小鼠空腹体重、体温比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);造模后1、2、3、4周实验组小鼠空腹体重显著低于对照组(P＜0.05),1、2、3、7d实验组体温显著高于对照组(P＜0.05).造模后7d,与对照组相比,实验组WAT重量明显降低、BAT重量增加(P＜0.05),WAT及BAT细胞均变小,细胞数增多,细胞质及线粒体较紧密;实验组BAT及WAT中UCP-1基因相对表达量及蛋白表达均显著高于对照组(P＜0.05). 结论 小鼠烧伤后BAT参与了机体的高代谢反应.
作者：庄淑波；柴家科；郁永辉；尹回男；刘玲英；樊军；王一贺；侯玉森 刊期： 2014年第08期
目的 综述MSCs老化研究进展,总结在MSCs老化研究中取得的成就和当前面临的困境. 方法 广泛查阅国内外有关MSCs老化研究的文献,并进行综述. 结果 人工转导使MSCs表达端粒酶延缓老化,甚至使细胞永生,但也存在潜在安全隐患;年龄相关的细胞老化研究由于研究对象选择不规范,导致结果不一;从多方面改善细胞体外培养条件有助于延缓老化;氧化应激学说似乎并不能很好说明细胞老化现象. 结论 MSCs老化机制研究仍是组织工程种子细胞研究难点,针对MSCs老化机制的研究有助于加速组织工程向临床应用转化.
作者：杨海堂；赵珩 刊期： 2014年第08期
目的 通过对C3H10T1/2细胞进行成骨及成软骨分化,利用微小RNA (microRNA,miRNA)芯片技术筛选成骨分化和成软骨分化中差异miRNA,以期寻找调节C3H10T1/2细胞成骨及成软骨分化的特异性miRNA. 方法 取C3H10T1/2细胞系,分别行成骨和成软骨诱导分化,对诱导组和对照组进行鉴定.然后通过miRNA芯片技术筛选分化前后2倍变化幅度且平均标准化信号值＞2的差异miRNA,并行实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)验证. 结果 诱导7d成骨诱导组较对照组有明显ALP表达(P＜0.05);诱导7、14、21d,RT-qPCR检测成骨诱导组成骨标志物Runx2、丝氨酸蛋白酶7(serine protease 7,Sp7)、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白(osteopontin,OPN) mRNA相对表达量均显著高于诱导0d时(P＜ 0.05);诱导21d,Western blot检测成骨诱导组Runx2、Sp7、Ⅰ型胶原、OPN蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05).成软骨诱导5、10、15d,RT-qPCR检测成软骨诱导组软骨标志物SOX9、Ⅱ型胶原、蛋白多糖(Aggrecan)、透明质酸合成酶(Has2) mRNA相对表达量均显著高于诱导0d时(P＜0.05);诱导15d,Western blot检测成软骨诱导组SOX9、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Has2蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05).通过miRNA芯片技术分别筛选出10个成骨和3个成软骨2倍变化幅度且平均标准化信号值＞2的差异miRNA.除miR-455-3p之外,其余差异miRNA验证结果与芯片结果比较有较好一致性. 结论 通过miRNA芯片技术对C3H10T1/2细胞系以及其诱导成骨和成软骨分化细胞进行检测对比,发现部分miRNA表达量在诱导后细胞中发生变化,为进一步挑选成骨和成软骨特异性miRNA进行功能验证和靶基因预测奠定了基础.
作者：幸嵘；孔清泉；项舟；杨婧；罗静聪；邓力；解慧琪 刊期： 2014年第08期
目的 研究雪旺细胞(Schwann cells,SCs)对BMSCs来源内皮细胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)功能的影响,为进一步探究组织工程骨成骨过程中神经因素对血管因素的作用奠定实验基础. 方法 取1日龄SD乳鼠坐骨神经及臂丛神经,体外分离获取SCs,采用S-100免疫组织化学染色鉴定;取2周龄SD大鼠胫骨及股骨骨髓,体外分离获取BMSCs,诱导分化成为内皮细胞,采用血管性血友病因子与CD31免疫荧光染色鉴定.采用Transwell共培养板对SCs与BMSCs来源内皮细胞进行非接触共培养作为实验组,单纯培养BMSCs来源内皮细胞作为对照组,分别于1、3、5、7d检测培养液中NO浓度,1、3、7、10d采用实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测一氧化氮合酶2(nitric oxide synthetase 2,NOS2)、NOS3 mRNA表达. 结果 分离及诱导分化的细胞通过形态学及免疫组织化学和免疫荧光染色鉴定为SCs和内皮细胞.实验组及对照组内各时间点间释放NO浓度比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);除3d外,其余各时间点实验组释放NO浓度均显著高于对照组(P＜0.05).RT-qPCR检测结果示,培养各时间点实验组NOS2 mRNA相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05);两组内各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).除10d外,其余各时间点实验组NOS3 mRNA相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05);实验组内各时间点间NOS3 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(F=6.673,P=0.062),对照组内各时间点间比较差异均有统计学意义(F=36.581,P=0.000). 结论 SCs可促进BMSCs来源内皮细胞释放NO,可能与SCs促进NOS活性有关.
作者：蔡喜雨；张鑫鑫；姜晓锐；江汕；裴国献 刊期： 2014年第08期
目的 探讨应用Pax6基因转染诱导脂肪来源间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)分化为角膜上皮样细胞的可行性. 方法 取健康5～6周龄C57BL/6小鼠双侧腹股沟脂肪,分离、培养ADMSCs,取第3代细胞进行基因转染.设未转染组(A组)、pcDNA3.1空质粒组(B组)和pcDNA3.1-Pax6重组质粒组(C组),转染48 h后取B、C组进行G418筛选,倒置显微镜下观察细胞形态学改变;Western blot检测各组Pax6蛋白以及角膜上皮细胞特异性标志分子——细胞角蛋白12 (cytokeratin 12,CK-12)表达;实时荧光定量PCR检测各组CK-12mRNA表达. 结果 A、B组细胞形态无改变;C组筛选出两类不同形状的细胞克隆,一类呈“铺路石”状,形态类似角膜上皮细胞,命名为筛选克隆1;另一类呈网状,有3～7个细胞突起,命名为筛选克隆2.Western blot检测示,A、B组Pax6蛋白表达均为阴性,C组两类细胞克隆均有Pax6蛋白表达;仅C组筛选克隆1CK-12蛋白表达为阳性,其余3组均为阴性.实时荧光定量PCR检测示,C组筛选克隆1的CK-12 mRNA相对表达量为8.64±0.73,高于筛选克隆2(0.55±0.42)、B组(1.36±0.40)和A组(1.00±0.00)(P＜0.05);A、B组以及C组筛选克隆2比较差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 Pax6基因转染能够诱导小鼠ADMSCs分化为角膜上皮样细胞,同时促进CK-12表达,为组织工程角膜构建提供了一种有效的上皮细胞来源.
作者：刘卫华；刘漪沦；刘海荣；罗永慧；徐金眉 刊期： 2014年第08期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
