曾浪清；陈云丰；王磊；陆叶；张闻；陈强；刘燕洁；章伟
目的 总结空心钉锁定钢板治疗青壮年股骨颈骨折的近期疗效. 方法 2009年2月-2011年5月采用牵引复位、空心钉锁定钢板内固定术治疗23例青壮年股骨颈骨折患者.男15例,女8例;年龄17～54岁,平均32.2岁.骨折分型:股骨颈头下型8例,经颈型10例,基底型5例; Garden Ⅰ型2例,Ⅱ型4例,Ⅲ型9例,Ⅳ型8例. 结果 术后患者切口均Ⅰ期愈合.23例均获随访,随访时间12～32个月,平均18.3个月.1例于术后6个月复查见骨折不愈合并股骨头缺血性坏死关节面塌陷,行人工全髋关节置换术; 其余患者均获骨性愈合,愈合时间6～11个月,平均9.1个月.未出现内固定物松动、断裂等并发症.术后6个月Harris评分为(89.39±6.29)分,与术前(40.83±9.07)分比较差异有统计学意义(t=17.38,P=0.00). 结论 空心钉锁定钢板具有固定可靠、退钉率低、骨折愈合率较高等优势,是治疗青壮年股骨颈骨折的一种有效方法.
作者：叶永杰；银毅；王志强；阳波 刊期： 2012年第12期
目的 综述细胞老化及老化表型改变在椎间盘退行性变中的研究进展. 方法 查阅椎间盘退行性变领域细胞老化相关的国内外文献并回顾分析,综述椎间盘细胞的老化现象、老化表型改变、老化信号激活与椎间盘退行性变的相互关系,评价抗老化治疗对椎间盘退行性变的修复作用. 结果 随着机体衰老与椎间盘退行性变,椎间盘细胞通过选择性地激活p53-p21-视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)或p16INK4A-RB信号通路而老化.老化细胞的聚集不仅弱化了椎间盘的自我修复能力,同时上调表达炎性因子、基质降解酶等老化分泌表型,从而进一步恶化邻近细胞赖以生存的微环境.寻找老化细胞特异性的生化标记物是进一步探明椎间盘细胞老化分泌表型的关键,安全且高效的抗老化治疗依赖于对椎间盘细胞老化机制的深入认识. 结论 从细胞老化及老化表型改变角度认识椎间盘细胞活性丢失与功能改变的病理机制,为理解椎间盘退变性变的细胞学病因提供了新思路.
作者：王锋；郑陈静美；吴小涛 刊期： 2012年第12期
目的 综述细胞治疗策略在促进牵张成骨(distraction osteogenesis,DO)方面的研究进展. 方法 广泛查阅近年来国内外关于细胞治疗策略促进DO、缩短治疗周期的研究文献,对常用方法进行分析总结. 结果 常用的促进骨再生的细胞治疗策略有细胞注射治疗、细胞-外源性载体支架复合物/可注射组织工程骨、微组织或多细胞聚集体技术、细胞基因治疗,各有优缺点.除自体BMSCs与富血小板血浆复合注射的方法有临床应用报道外,其他方法仍处于基础研究阶段. 结论 细胞治疗策略在骨再生、促进DO及缩短其治疗周期等方面具有广阔前景,应用于临床前需严谨设计临床前试验来评价其安全性并规范应用方法.
作者：马东洋；毛天球 刊期： 2012年第12期
目的 探讨风筝样切口联合全厚皮片移植修复严重指蹼瘢痕挛缩畸形的疗效. 方法 2008年6月-2011年9月,收治指蹼瘢痕挛缩畸形患者31例(87个指蹼).男24例,女7例; 年龄5～43岁,中位年龄22岁.致伤原因:火焰烧伤26例,热液烫伤3例,电弧烧伤1例,化学烧伤1例.损伤分度:深Ⅱ度14例,Ⅲ度17例.受伤至该次手术时间10个月～17年,中位时间2.2年.设计风筝样切口,切除相邻掌指关节间的菱形瘢痕并充分松解指蹼间瘢痕粘连,继发创面采用全厚皮片移植修复.供皮区拉拢缝合. 结果 术后全厚皮片均成活,供皮区切口Ⅰ期愈合.29例(82个指蹼)获随访; 随访时间6～18个月,平均13个月.再造指蹼大小及深度均类似正常指蹼,无继发挛缩,各手指活动度良好. 结论 采用风筝样切口联合全厚皮片移植修复严重指蹼瘢痕挛缩畸形可获得较好近期疗效,远期疗效需进一步观察.
作者：梁黎明；柴家科；贾晓明；王祎蓉；孟素玉；刘韬 刊期： 2012年第12期
目的 探讨手术治疗前向鹰嘴骨折脱位的方法及临床疗效. 方法 回顾分析2007年1月-2010年12月收治且获完整随访的10例前向鹰嘴骨折脱位患者临床资料.男6例,女4例; 年龄27～68岁,平均46.1岁.交通事故伤7例,高处坠落伤2例,跌伤1例.新鲜骨折9例,陈旧性骨折1例.尺骨鹰嘴粉碎性骨折9例,斜形骨折1例.合并Regan-Morrey Ⅲ型冠状突骨折5例,Mason Ⅱ型和Ⅲ型桡骨头骨折各1例.行切开复位内固定,其中采用重建钢板4例,张力带加重建钢板5例,张力带加1/3管状钢板1例; 2例行一期植骨. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.患者均获随访,随访时间12～26个月,平均19.8个月.X线片检查示骨折均愈合,愈合时间12～24周,平均16.4周; 随访期间无内固定失效、肱尺关节不稳定、创伤后关节炎发生.末次随访时,肘关节功能根据Broberg-Morrey功能评价标准评分为69～100分,平均89.1分; 获优4例,良4例,可2例,优良率80％.上肢功能评定表(DASH)评分为0～22分,平均9分.疼痛视觉模拟评分(VAS)为0～3分,平均0.5分. 结论 对于前向鹰嘴骨折脱位,应用钢板进行坚强内固定、解剖重建滑车切迹及术后早期主动活动锻炼,可获得满意疗效.
作者：胡晓川；向明；陈杭；杨顺；唐浩琛；杨国勇 刊期： 2012年第12期
目的 建立一套在腰椎MRI短时间反转恢复(short time inversion recovery,STIR)序列图像上评价腰椎间盘退变程度的改良STIR序列八级分级系统,并检验其效度及可重复性. 方法 根据改良Pfirrmann八级分级系统及MRI检查结果建立并优化一套基于STIR序列图像的腰椎间盘矢状位分级系统.以2011年4月-2012年2月收治的60例腰椎间盘退行性变患者作为研究对象,其中男32例,女28例; 年龄17～85岁,平均50岁.对每例研究对象5个腰椎间盘(L1、2～L5、S1)行T2加权像及STIR序列扫描.由3位分级者独立分级后再共同分级,分级者之间的效度及可重复性采用一致率和Kappa系数进行分析. 结果 共同分级示,所有椎间盘中无1级椎间盘,2级83个(27.7％),3级87个(29.0％),4级66个(22.0％),5级31个(10.3％),6级15个(5.0％),7级12个(4.0％),8级6个(2.0％).分级者自身达极强一致性(Kappa值0.822～0.952),组间达高度至极强一致性(Kappa值0.749～0.843).分级者两次分级与共同分级比较,分级一致率为82.7％～92.7％,平均85.6％; 13.9％的分级差异发生于相邻1个级别,0.5％为相邻2个或以上级别. 结论 对于腰椎间盘退变程度可以采用改良STIR序列八级分级系统,提高了不同退变程度椎间盘分级的准确度.
作者：潘文琦；王建；刘杰；陆焱；黄博 刊期： 2012年第12期
目的 对近年先天性漏斗胸的治疗进展作一综述. 方法 广泛查阅近年国内外治疗先天性漏斗胸的相关文献,总结治疗现状及进展. 结果 先天性漏斗胸矫正方法主要有胸廓成形术(Ravitch胸骨抬高术和Nuss微创手术)和假体植入术,磁力推进和无创负压吸引治疗尚处于研究阶段. 结论 先天性漏斗胸的矫正除改善功能外,对外观要求也在提高,微创和无创治疗是下一步研究重点.
作者：吉恺；栾杰 刊期： 2012年第12期
目的 总结1例应用游离双侧双叶骨间背动脉穿支皮瓣修复4指掌侧皮肤缺损的方法及疗效. 方法 2011年10月收治1例35岁左手机器绞伤男性患者,清创后示、中、环、小指掌侧皮肤软组织缺损范围为5.0 cm×2.5 cm～10.0 cm×3.0 cm,采用大小为6.0 cm×3.0 cm～10.0 cm × 3.5 cm的游离双侧双叶骨间背动脉穿支皮瓣修复创面.供区游离植皮修复. 结果 术后皮瓣及植皮均成活,创面Ⅰ期愈合.患者获随访7个月,皮瓣外形、质地良好.末次随访时示、中、环、小指关节主动活动度分别为210、90、90、70°. 结论 游离双侧双叶骨间背动脉穿支皮瓣修复4指掌侧皮肤软组织缺损可获得较好近期疗效.
作者：李匡文；刘俊；黄新峰；刘鸣江；伍鹏；张欣 刊期： 2012年第12期
目的 通过与传统康复治疗患者比较,探讨骨折治疗与运动康复一体化对股骨粗隆间骨折术后疗效的影响. 方法 将2007年1月-2009年12月56家医院收治并符合选择标准的3 873例股骨粗隆间骨折患者纳入研究.根据骨折内固定术后康复治疗方法的不同将患者分为两组,其中1970例根据《骨折病人早期运动康复安全性评定量表》评分制定康复治疗方法(试验组),1903例术后采用传统康复治疗(对照组).两组患者性别、年龄、骨折类型、内固定类型、安全性评分等一般资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性. 结果 两组患者均获随访,随访时间13～49个月,平均30.5个月.术后两组骨不连或延迟愈合以及全身并发症发生率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),切口并发症、下肢深静脉血栓形成及总并发症发生率比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).术后6个月及12个月试验组髋关节屈伸活动恢复程度、疗效分级及优良率均显著优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 骨折治疗与运动康复一体化可明显改善股骨粗隆间骨折患者的预后,提高疗效,降低并发症发生率.
作者：张斌；戴闽；唐亚敏；邹帆；刘虎诚；聂涛 刊期： 2012年第12期
目的 探讨关节镜下治疗膝关节外侧盘状半月板损伤的方法及近期疗效. 方法 2010年1月-2011年5月,收治38例(42膝)外侧盘状半月板损伤患者.男23例(24膝),女15例(18膝); 年龄7～62岁,中位年龄32.8岁.病程7d～40年,中位病程8.6个月.根据Watanabe盘状半月板分型标准,完全型22膝,不完全型19膝,Wrisberg型1膝.于关节镜下行半月板成形联合缝合术25例(28膝),半月板次全切除术12例(13膝),半月板全切除术1例(1膝).术后早期开始肌力训练和关节活动练习. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合.患者3～4周基本恢复正常活动.38例均获随访,随访时间12～18个月,平均14.3个月.无关节交锁及弹响症状; 未出现再撕裂或因症状复发再手术的患者.术后3、6个月及1年膝关节屈曲及伸直活动范围均较术前显著改善(P＜0.05);术后1年手术疗效按照Ikeuchi的评价方法,获优22膝,良16膝,可4膝,优良率为90.4％.术前及术后即刻、3、6个月、1年的Lysholm评分分别为(69.38±4.59)、(88.57±2.95)、(91.02±4.17)、(92.90±3.36)、(94.74±3.52)分,术后各时间点评分均较术前显著改善(P＜ 0.05). 结论 关节镜下治疗外侧盘状半月板损伤创伤小,能够精确切除或缝合失稳及破裂的半月板,大限度保留半月板功能,延缓膝关节退变,术后配合正规康复训练可获得良好近期疗效.
作者：胡柯嘉；冯德宏；王凌；孙振中；芮永军 刊期： 2012年第12期
目的 评价使用纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(nano-hydroxyapatite/polyamide-66,n-HA/PA66)椎间融合器行椎间融合术治疗下腰椎退变性疾病的近期疗效. 方法 2011年1月-10月,对20例下腰椎退变性疾病患者行经椎间孔入路n-HA/PA66椎间融合器支撑植骨融合内固定术治疗.男8例,女12例; 年龄22～80岁,平均51岁.病程1～24个月,平均4个月.手术融合节段:L4、58例,L5、S19例,L4～S13例.腰椎间盘突出症术后复发3例,腰椎退变性滑脱症5例,腰椎峡部裂滑脱症9例,腰椎管狭窄症3例.手术前后行X线片及CT三维重建检查,测量患者融合节段椎间隙高度及前凸曲度以评价手术效果,观察植骨融合情况.采用Oswestry功能障碍指数(ODI)下腰痛评分及简明健康调查量表(SF-36)评分评价患者症状改善情况. 结果 术后患者切口均Ⅰ期愈合,腰腿疼痛、麻木等症状均有不同程度缓解,未出现脑脊液漏、神经根损伤、伤口感染等并发症.20例均获随访,随访时间6～9个月,平均7个月.未发生椎间融合器移位、塌陷等情况.术后3d,3、6个月及末次随访时所有融合节段的椎间隙高度及前凸曲度均较术前显著改善(P＜0.01); 术后各时间点间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).椎间植骨融合时间3～9个月,平均4个月.术后3个月椎间植骨融合率为74％,术后6个月为96％.患者术后3d及6个月时的ODI及SF-36评分均较术前显著提高(P＜0.01),术后两时间点间比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 应用n-HA/PA66椎间融合器行椎间融合术治疗下腰椎退变性疾病安全有效; n-HA/PA66椎间融合器具有植骨融合率高、下沉率低及透射X线等优点,是一种较为理想的椎间支撑植骨材料,但远期疗效有待进一步观察.
作者：杨曦；宋跃明；孔清泉；龚全；裴福兴；屠重棋 刊期： 2012年第12期
目的 探讨合并颅面畸形的小耳畸形行耳廓再造术的方法及疗效. 方法 回顾分析2000年7月-2010年7月收治的1300例合并Ⅱ度以上半侧颅面短小征的小耳畸形患者临床资料.男722例,女578例; 年龄5岁8个月～33岁5个月,中位年龄12岁2个月.一期行耳后扩张器植入术,注水扩张完成3～4周后行二期皮肤扩张法耳廓再造术,二期术后6个月～1年1 198例行再造耳修整术. 结果 28例患者二期术后再造耳外缘部分区域切口愈合不良; 其余1272例切口愈合良好,二期手术拆线后1个月复查,再造耳结构显露,位置及形态符合术前设计要求.术后200例获随访,随访时间1～9年,平均3年.1例因外伤造成耳轮丧失,1例因耳前瘘管感染致再造耳结构大部分丧失.其余患者末次随访时手术疗效评定:优110例,良65例,欠佳23例; 手术疗效优良率为88.4％. 结论 对合并颅面畸形的小耳畸形行耳廓再造的难点是如何达到再造耳与参照耳的对称,应注意再造耳的定位、耳支架雕刻、残耳组织的恰当利用.
作者：何乐人；张晋光；蒋海越；杨庆华；庄洪兴 刊期： 2012年第12期
目的 介绍一种矫正Ⅰ、Ⅱ型杯状耳的改良术式并总结其疗效. 方法 2006年5月-2011年11月,收治23例(27侧)Ⅰ、Ⅱ型杯状耳患者.男14例,女9例;年龄7～16岁,平均10岁.单侧19例,双侧4例.临床表现为耳轮、耳舟变平,耳廓上1/3下垂.按照Tanzer的杯状耳分型标准,Ⅰ型6侧,Ⅱ型21侧.手术采用耳颅沟内弧形切口,脱套剥离耳软骨前、后方皮肤,重新定位耳舟在颅面的起始位置及耳甲腔位置,处理畸形耳软骨,重建耳轮、对耳轮及其上、下脚. 结果 术后切口均Ⅰ期愈合,无血肿、切口感染、皮瓣坏死等并发症发生.术后患者均获随访,随访时间9个月～6年,中位时间36个月.耳廓无下垂,外耳轮轮廓无变形,随年龄增长无萎缩.耳舟显现清晰,耳轮、对耳轮及其上、下脚走行流畅自然,瘢痕位于耳颅沟内,无明显增生且位置隐蔽. 结论 改良法能基本矫正杯状耳解剖缺陷,是治疗Ⅰ、Ⅱ型杯状耳的有效方法之一.
作者：刘全；游晓波；张家建 刊期： 2012年第12期
目的 探讨原位微波消融术治疗骨肿瘤的常见并发症发生原因及防治策略. 方法 2009年3月-2012年7月,采用原位微波消融术治疗骨肿瘤73例,其中54例符合标准纳入研究.男31例,女23例; 年龄9～74岁,中位年龄27岁.恶性肿瘤37例,良性肿瘤17例.49例原发骨肿瘤参照Enneking分期标准:3期17例,Ⅱ A期13例,Ⅱ B期19例.总结患者术后并发症发生情况、治疗方法及转归. 结果 术后54例均获随访,随访时间12～40个月,平均24个月.21例(38.9％)出现7项手术相关并发症,其中3例出现2项及以上并发症.其中病理性骨折4例(7.4％),深部感染2例(3.7％),神经损伤7例(13.0％),下肢深静脉血栓形成1例(1.9％),膝关节内侧副韧带热损伤1例(1.9％),切口血肿2例(3.7％),切口脂肪液化、皮缘坏死8例(14.8％). 结论 病理性骨折是导致原位微波消融术后再次手术的首要并发症,深部感染是造成保肢失败的主要并发症,神经损伤及切口愈合不良是常见并发症,对微波高温的控制是手术成功的关键,相应的预防措施可降低并发症的发生.
作者：杨小明；张余；张涛；徐亮；柯晋；马立敏；蓝国波；姚子龙；欧阳兰飞；黄华扬；夏虹；尹庆水 刊期： 2012年第12期
目的 探讨椎间盘镜下后路椎管减压联合椎体支柱块植入治疗胸腰椎陈旧性骨折的疗效.方法 2006年2月-2009年11月,采用椎间盘镜下后路椎管减压、骨折块复位,联合经椎弓根植入椎体支柱块治疗胸腰椎陈旧性骨折30例.男22例,女8例; 年龄17～58岁,平均36.2岁.受伤至手术时间6周～14个月,平均5.3个月.均为单椎体压缩骨折; T91例,T112例,T125例,L111例,L25例,L35例,L41例.术前伤椎Cobb角(27.5±7.5)°,伤椎高度(26.67±5.34) mm,疼痛视觉模拟评分(VAS)为(5.8±1.4)分; 椎管狭窄按Wolter分级法:1级17例,2级10例,3级3例; Frankel分级:A级3例,B级8例,C级13例,D级6例. 结果 手术时间40～120min,平均70 min;术中出血量100～400 mL,平均180mL.除1例出现切口皮下血肿外,其余患者切口均Ⅰ期愈合,无下肢深静脉血栓形成等并发症发生.30例均获随访,随访时间24～46个月,平均26个月.术后3d及末次随访时Cobb角和伤椎高度均较术前显著改善(P＜ 0.01).末次随访时椎管狭窄按Wolter分级法:0级27例,1级3例; 术后24个月脊髓神经功能均有明显恢复,Frankel分级:A级1例,B级1例,C级3例,D级9例,E级16例; 与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05).术后1个月VAS评分显著高于术前(P＜ 0.01),随时间延长评分呈下降趋势,术后24个月时显著低于术前(P＜0.01).结论 椎间盘镜下后路椎管减压联合椎体支柱块植入治疗胸腰椎陈旧性骨折,具有手术时间短、出血少、椎体复位满意等优点,但对椎间盘镜下操作技术要求较高.
作者：吕辉照；赵枫；曹杰；张冬福；肖飞鹏；李传玲 刊期： 2012年第12期
目的 构建人分泌的凋亡相关蛋白1(secreted apoptosis-related protein 1,SARP1)基因酵母双杂交诱饵载体,为鉴定SARP1基因相互作用蛋白、探讨SARP1基因在瘢痕组织中的生物学功能奠定基础. 方法 根据GenBank中SARP1的mRNA序列,设计分别带有Nde Ⅰ和SalⅠ酶切位点的上、下游引物,人工合成SARP1基因片段,扩增SARP1基因片段,构建含pGBKT7-SARP1基因的重组质粒,用NdeⅠ和SalⅠ进行双酶切、PCR,凝胶电泳及测序.用醋酸锂法将序列正确的重组质粒pGBKT7-SARP1(卡那霉素抗性筛选)转化入AH109酵母菌株,在缺陷型培养基上观察pGBKT7-SARP1在AH109中的表达情况. 结果 SARP1基因扩增后的片段大小符合预期,并成功克隆入pGBKT7载体中; 酶切后凝胶电泳及DNA测序显示pGBKT7-SARP1基因重组载体构建正确,对酵母菌株AH109无毒性,且不具自主激活报告基因的效应. 结论 成功构建了pGBKT7-SARP1基因酵母双杂交诱饵载体.
作者：张伟；贺光照；马兵 刊期： 2012年第12期
目的 总结不同程度耳廓撕脱伤修复方法的选择及疗效. 方法 2005年8月-2010年12月,收治26例耳廓撕脱伤患者.男10例,女16例; 年龄5～63岁,平均27.5岁.致伤原因:机器绞伤9例,交通事故伤5例,暴力撕脱伤6例,动物咬伤6例.损伤部位:全耳廓撕脱6例,耳廓上1/3～2/3撕脱8例,耳廓外1/5～2/3撕脱6例,耳垂撕脱6例.受伤至手术时间1～12h,平均4.5 h.直接清创原位缝合8例,血管吻合再植7例,一期清创、二期皮瓣再造5例,残端修整缝合6例. 结果 术后6例残端修整缝合切口均Ⅰ期愈合; 其余患者中耳廓完全成活14例,部分成活3例,坏死3例. 26例均获随访,随访时间6～24个月,平均16个月.直接清创原位缝合及血管吻合再植成活者耳廓外观优于其余方法.患者听力均正常. 结论 对于全耳廓撕脱伤应首选血管吻合再植修复,对于耳廓撕脱组织小且无可供吻合血管者可选择原位直接缝合.
作者：孙广峰；王达利；魏在荣；邹文；金文虎；唐修俊；邓呈亮 刊期： 2012年第12期
目的 构建新型自组装多肽纳米凝胶支架RGDmx,探讨支架的细胞相容性及其对前软骨干细胞(precartilaginous stem cells,PSCs)增殖和向软骨细胞方向分化的影响. 方法 取新生SD大鼠四肢长骨干骺端组织分离培养PSCs,采用免疫磁珠分选系统分选纯化原代细胞,并进行鉴定.取KLD-12、KLD-12-PRG多肽冻干粉,以体积比1:1复合构建RGDmx.将纯化后的第3代PSCs接种至KLD-12(对照组)和RGDmx(实验组)培养,1、3、7、14d用细胞计数(cell counting kit,CCK)-8法检测支架细胞增殖-毒性; 制备不同混合比(0、20％、40％、60％、80％、100％)RGDmx,观察其对PSCs增殖的影响;采用无血清软骨形成培养液(complete chondrogenie medium,CCM)诱导两组支架内PSCs向软骨细胞方向分化,培养14d时行甲苯胺蓝染色法鉴定,并用RT-PCR法检测两组软骨分化特异性基因Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达情况. 结果 成功分离纯化获得成纤维细胞生长因子受体3表达阳性细胞,免疫组织化学染色及免疫荧光染色鉴定为PSCs.CCK-8检测结果显示,复合培养后实验组细胞吸光度(A)值随培养时间延长逐步提高,7d达峰值; 其中7、14d时细胞A值高于对照组(P＜0.05); 复合培养7d时,混合比为40％组细胞A值较其他混合比组高,差异有统计学意义(P＜ 0.05).CCM诱导培养14 d时,两组支架内细胞甲苯胺蓝染色均呈阳性;RT-PCR检测示实验组细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 自组装多肽纳米凝胶支架RGDmx具有良好的细胞相容性,可有效促进PSCs增殖及向软骨细胞方向分化,是组织工程较理想的细胞载体系统.
作者：罗文；范建楠；叶川 刊期： 2012年第12期
目的 研究人BMP-4腺病毒表达载体(adenovirus human BMP-4,Ad-hBMP-4)转染体外培养人退变腰椎间盘细胞后,对细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Sox9表达的影响. 方法 取Ad-hBMP-4重组腺病毒进行扩增,并检测病毒滴度.取Modic Ⅲ级、27～50岁腰椎间盘突出症患者自愿捐赠的退变椎间盘体外分离、培养椎间盘细胞,激光共聚焦显微镜观察Ⅱ型胶原在细胞中的表达.取第1代椎间盘细胞转染Ad-hBMP-4重组腺病毒(实验组),应用RT-PCR和Western blot法分别检测病毒转染后3、6d细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、Sox9基因及蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白的表达,与未转染细胞(对照组)进行比较. 结果 Ad-hBMP-4重组腺病毒滴度为5×106 PFU/mL.激光共聚焦显微镜观察示Ⅱ型胶原主要表达于椎间盘细胞质.Ad-hBMP-4重组腺病毒转染后细胞形态无明显变化.转染3、6d后实验组蛋白多糖、Ⅱ型胶原、Sox9 mRNA表达以及蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白表达均显著高于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05); 实验组各指标3、6d间比较差异亦有统计学意义(P＜0.05). 结论 Ad-hBMP-4可有效转染体外培养人退变椎间盘细胞,促进细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Sox9表达,提示hBMP-4可能对早期退变的椎间盘具有修复功能.
作者：曹德军；权正学；蒋电明；罗小辑；钟伟洋；刘港 刊期： 2012年第12期
目的 探讨角质形成细胞(keratinocytes,KC)热损伤后对真皮成纤维细胞(fibroblasts,Fb)Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)表达的影响. 方法 分离培养人正常Fb及KC,分别建立KC、Fb热损伤模型; 收集正常及热损伤12h后细胞培养上清,并配制成浓度为50％的细胞条件培养液.根据培养液不同将第3～5代Fb分为3组,分别采用含50％热损伤KC培养上清(A组)、含50％正常KC培养上清(B组)的条件培养液及单纯DMEM(C组)培养,24 h后收集3组细胞; 另于培养0、1、2、6、12、24、48 h分别收集A组细胞.采用含50％热损伤Fb培养上清的条件培养液培养Fb,于0、1、2、6、12、24、48 h收集细胞.采用实时荧光定量PCR检测各时间点KC热损伤条件培养上清对Fb Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA表达影响,以及Fb热损伤条件培养上清对Fb MMP-1mRNA表达影响. 结果 KC热损伤条件培养上清培养24 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均显著高于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05).培养2、6、12、24、48 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均高于0h (P＜0.05),1h与0h差异无统计学意义(P＞0.05); 随培养时间延长相对表达量逐渐增高,2h后各时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Fb热损伤条件培养上清培养1、2、6、12、24、48 h,MMP-1 mRNA相对表达量与0h比较,差异均有统计学意义(P＜0.05); 培养2h后相对表达量逐渐降低,各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 热损伤后KC培养上清对Fb Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1的表达具有调控作用.
作者：杨薛康；白晓智；张月；李小强；石继红；汤朝武；胡大海 刊期： 2012年第12期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
