学术投稿

不同接种方法下hBMSCs在生物珊瑚支架中的空间分布和基因表达分析

朱慧勇;孙蕾;陈建芬;王慧明

关键词:生物珊瑚支架, 纤维蛋白凝胶, hBMSCs, 细胞分布, 成骨分化基因
摘要:目的 比较采用两种不同方法 接种的hBMSCs在生物珊瑚支架中的三维空间分布和基因表达.方法 采用传统接种法(A组)和纤维蛋白凝胶接种法(B组)构建hBMSCs和生物珊瑚支架复合体.A组孵育3 h,B组孵育30 min后检测两组细胞接种效率.培养后2、7、14、21 d,两组分别取材行DAPI染色后,荧光显微镜观察,采用AxioVision图像分析软件测量每个切片10倍物镜视野中的细胞数量,以切片的不同水平区域(从表面到底部为L1~L5)和垂直区域(从中心到边缘)比较两组细胞分布情况;采用实时荧光RT-PCR检测成骨分化基因骨凝集素(osteonectin,ON)、核心结合因子α1(corebindingfactoral,Cbfα1)和骨钙素(osteocalcin,OC)表达.结果 B组细胞接种效率为88.32%±4.20%,明显高于A组66.51%±12.33%(P<0.01).培养后2d,两组细胞水平区域分布由L1~L4逐渐减少(P<0.05);垂直区域细胞数目比较,A组差异无统计学意义(P>0.05),B组差异有统计学意义(P<0.05);两组间各成骨分化基因表达比较差异无统计学意义(P>0.05).培养后7 d,A组细胞数目较2 d时逐步减少,各水平区域间细胞数目比较差异均有统计学意义(P<0.05),而B组细胞数目和各成骨分化基因表达量迅速增加,各水平区域细胞数目趋于平衡,细胞分布均匀(P>0.05),ON和Cbfal基因表达量明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).培养后14d,A组各水平及垂直区域内的细胞数目均较7 d时急速减少(P<0.05),B组细胞增殖良好且细胞总数与7 d时相近;B组OC基因表达量达峰值,两组间各基因表达比较差异均有统计学意义(P<0.05).培养后21 d,两组各水平区域细胞数目和两组间各基因表达比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组各垂直区域细胞数目比较差异均无统计学意义(P>0.05).培养后7、14、21 d,B组大部分区域细胞数目均较A组多,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 通过纤维蛋白凝胶接种较传统方法 接种可使hBMSCs在支架中空间分布更均匀,能达到更快的细胞增殖和更有效的成骨分化.
中国修复重建外科杂志相关文献
  • 长柄全涂层股骨假体结合同种异体骨植骨术在髋关节翻修中的应用

    目的 探讨在髋关节翻修中长柄全涂层股骨假体结合同种异体骨植骨术的临床应用疗效.方法 1997年1月-2004年1月,收治20例非感染性股骨假体松动患者.男12例,女8例:年龄58~77岁,平均65岁.均为单髋初次翻修.关节置换至该次翻修手术时间为3~18年,平均12年.股骨侧骨缺损按Paprosky骨缺损分类标准:Ⅱ型10例,ⅢA型6例,ⅢB型3例,Ⅳ型1例.术中采用长柄全涂层股骨假体结合异体骨颗粒打压植骨12例,异体皮质骨结构植骨加打压植骨8例.颗粒骨植骨量5~35 g,平均20 g;异体骨板长度10~22 cm.结果 术后伤口均Ⅰ期愈合.1例于术后5 d脱位,经闭合复位牵引固定后未再脱位.20例均获随访,随访时间16~48个月,平均36个月.末次随访时Harris评分为(90.0 ±2.5)分,与术前(50.0 ±2.3)分比较差异有统计学意义(P<0.05).术后3年1例股骨假体周围出现3 mm透亮带;2例股骨假体分别下沉5 mm和7 mm;均无明显临床症状,未作处理.患者均未见骨溶解,颗粒骨融合时间3~9个月,平均5个月.7例骨板于术后3年内与宿主骨融合,1例末次随访(术后48个月)仍未融合.结论 采用长柄全涂层股骨假体结合同种异体骨植骨术对髋关节置换术后无菌性松动下沉及假体周围骨折进行翻修,可实现假体初始稳定与远近端同时固定.中短期临床和影像学结果 满意,远期疗效有待观察.

    作者:赵秀祥;于建华;卜延民;郑得志 刊期: 2009年第07期

  • 肩胛盂骨性解剖结构的三维CT测量及分析

    目的 测量分析部分国人肩胛盂的三维解剖结构,为设计适合国人解剖特点的肩胛盂假体提供可靠的解剖数据.方法 重庆地区健康成年志愿者90名,男52名,女38名;年龄19~60岁,平均39.6岁.采用CT三维重建、容积再现技术及多平面重组测量双侧盂前后大径、盂前后曲率半径、盂上下大径、盂上下曲率半径和盂扭转角.每个参数测量2次,所测结果 分别进行左右侧、男女性别比较,分析参数间的相关性.结果 90名志愿者盂前后大径为(2.51±0.32)cm,盂前后曲率半径为(5.50±1.21)cm,盂上下大径为(3.45±0.29)cm,盂上下曲率半径为(3.98±0.55)cm,盂扭转角为(-0.03±4.66)°.以上参数左右侧间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).盂前后大径、盂上下大径、盂上下曲率半径、盂扭转角,男女性之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);盂前后曲率半径男女性之间比较差异无统计学意义(P>0.05).盂前后大径与对应的前后曲率半径间、盂前后大径与上下大径间、盂前后率半径与盂上下曲率半径间均存在相关性(P<0.01),相关系数分别为0.298、0.495及0.262.结论 所测肩胛盂参数及其统计学分析结果 对国人肩胛盂假体的设计具有一定参考价值.

    作者:汪华清;唐康来;龚继承;李锦青;陈伟;许建中 刊期: 2009年第07期

  • c-kit在自体中厚移植皮片中的表达

    目的 检测c-kit在人自体移植中厚皮片中与正常皮肤中的表达差异,初步探讨c-kit在自体移植皮片色素沉着发生机制中的作用.方法 取患者自愿捐赠面颈部自体中厚皮片移植术后1年的色素沉着皮片16例,以自体移植皮片受区周围及原供区皮肤作为对照.采用Envision免疫组织化学染色方法,检测c-kit在各皮片的表达与分布;使用医学图像定量分析系统定量检测各标本中c-kit蛋白的阳性染色指数(positive index,PI).结果 c-kit的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞胞浆或细胞膜表面及真皮中的腺体上皮细胞.c-kit在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,在表皮基底层处形成棕褐色条带;在受区周围正常皮肤及原供区周围皮肤中有局灶性阳性表达.c-kit在自体移植中厚皮片、受区周围及原供区周围正常皮肤中的PI值分别为131 216±19 130、92 958±16 208、91 306±8 135,自体移植中厚皮片c-kit表达与周围皮肤比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 c-kit在自体中厚移植皮片中的表达较自体正常皮肤中显著增高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用.

    作者:曹芳;薛春雨;邢新 刊期: 2009年第07期

  • 川芎嗪浓度对大鼠异体坐骨神经玻璃化保存后神经再生影响的实验研究

    目的 探讨不同浓度川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对玻璃化保存的大鼠异体坐骨神经再生的影响.方法 取3月龄雄性清洁级成年健康SD大鼠48只,体重200~250 g,作为供体;3月龄雄性清洁级成年Wistar大鼠96只,体重200~250 g,作为受体.取供体动物,切取双侧坐骨神经,制成15 mm神经段,按玻璃化保存液中TMP浓度不同随机分为A、B、C、D组,A组不含TMP,作为对照,B、C、D组玻璃化液中分别含100、200、400 mg/LTMP,作为实验组.-196℃液氮保存3周.取受体动物,制备右侧坐骨神经10 mm缺损模型,随机分为4组(n=24).取上述保存神经段复温后移植至相应组的受体.术后4、8、12周行大体观察,术后16周取移植神经行透射电镜、电生理、轴突图像分析等检查.结果 术后大鼠均存活至实验完成.术后4周A、B组移植神经与周围组织粘连严重;术后8周A组粘连严重,其余各组逐渐减轻;术后12周A组仍有粘连,B组与周围组织部分粘连,C、D组无粘连.术后16周,A、B组再生神经远端肌肉复合动作电位潜伏期及波幅、运动神经传导速度、单位面积髓鞘数、平均灰度值、单位面积髓鞘密度值及运动终板检测,均显著低于C、D组(P<0.01),A、B组间及C、D组间差异无统计学意义(P>0.05).透射电镜示C、D组有髓神经纤维粗,髓鞘较A、B组厚,板层结构清晰.结论 坐骨神经玻璃化保存液中加入200 mg/L TMP可改善大鼠异体神经再生效果.

    作者:陈增刚;蒋电明;欧云生;黄英如;袁新;刘建文 刊期: 2009年第07期

  • 冷保存对大鼠供肾结缔组织生长因子表达的影响

    目的 探讨大鼠供肾在不同冷保存时间,其肾小管近端上皮细胞结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)的表达.方法 健康SPF级Wistar雄性大鼠40只,体重230~250 g.采取原位灌注切取整块双侧肾脏,置于0~4℃高渗枸橼酸盐嘌呤肾保存液中保存.根据保存时间不同,分为0、12、24、36、48h组(n=8).采用免疫组织化学、原位杂交方法 分别检测肾小管近端上皮细胞CTGF表达水平.结果 在0、12 h组大鼠供肾肾小管近端上皮细胞中CTGF极少表达,经图像分析两组CTGF蛋白阳性单位值(positive unit,PU)分别为5.91±2.30、5.57±2.40:CTGF mRNAPU值分别6.24±2.79、6.51±2.43,差异均无统计学意义(P>0.05).随着冷缺血时间延长,24、36、48 h组CTGF蛋白和CTGF mRNA表达均逐渐增加,24h组PU值分别为10.25±2.92、15.24±3.95;36 h组分别为14.31±2.83、19.20±4.73;48 h组分别为18.11±3.94、23.09±4.40;各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),与0、12 h组比较差异亦均有统计学意义(P<0.05).结论 冷缺血损伤促进大鼠肾脏CTGF表达增加,可能在肾小管上皮细胞损伤再生与修复中起重要作用.

    作者:何文芳;丁泓文;苏泽轩 刊期: 2009年第07期

  • 纤维蛋白凝胶对成骨细胞增殖与分化的影响

    目的 分析MC3T3E1细胞在纤维蛋白凝胶(fibrin gel,FG)内的细胞形态学、细胞增殖和成骨细胞分化作用,为将FG应用于组织工程奠定基础.方法 将MC3T3E1细胞接种于3种不同浓度(20、10、5 mg/mL)的FG内,分别设为实验组A、B、C组,对照组(D组)采用无凝胶正常培养基培养.于不同时间点通过倒置相差显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在凝胶内的形态学变化,荧光分光光度计测定细胞增殖状态,酶标仪和yon Kossa染色分析细胞ALP活性和钙盐沉积;培养14 d和21 d行RT-PCR检测ALP和骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)mRNA的表达.结果 MC3T3E1细胞在A、B、C组FG内培养至21 d,细胞具有较长突起且连接成网,而D组细胞呈纺锤形或立方形.D组细胞随培养时间延长荧光强度逐渐增高,至14 d达高,28 d降至低;A、B、C组细胞培养至28 d时荧光强度达高,与D组比较差异有统计学意义(P<0.05).D组细胞随培养时间延长ALP活性逐渐升高,至28 d达高:A、B组培养21 d时ALP活性强,与D组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余各组各时间点与D组比较差异均无统计 学意义(P>0.05).von Kossa染色示培养21、28 d,A组在细胞附近的凝胶区出现矿化结节,D组至28 d仍未见矿化结节形成.RT-PCR检测示培养后21 d,A组的ALPmRNA和BSPmRNA表达均较D组增强(P<0.05).结论 MC3T3E1细胞在FG内培养21 d后成骨细胞分化明显,细胞增殖维持活跃状态.

    作者:陈莉;买霞;扎拉嘎胡;王英惠;陈小义 刊期: 2009年第07期

  • 陈旧性跖跗关节脱位的足弓重建

    目的 总结陈旧性跖跗关节脱位足弓重建的治疗方法 及效果.方法 2004年9月-2008年1月,收治陈旧性跖跗关节骨折脱位26例.男19例,女7例;年龄18~56岁,平均38.4岁.交通伤8例,重物砸伤10例,高处坠落伤8例.根据Myerson分类法的X线分型:A型6例,B型5例,C型2例,D型6例,E型3例,F型4例.受伤至手术时间4周~9个月,平均9周.采取切开复位、内固定术9例,足弓重建跖跗关节原位融合术17例.结果 术后切口均Ⅰ期愈合.26例均获随访,随访时间12~48个月,平均22个月.4例术后5个月发生足部转移性疼痛,应用足弓垫治疗,2例1年后疼痛缓解,2例扩大关节融合后疼痛缓解.按Maryland足部评分标准测定:优5例,良17例,可4例;优良率84.6%.关节融合全部愈合.结论 伤后4~6周的陈旧性跖跗关节脱位可行切开复位内固定术,疗效满意;6周以上陈旧性跖跗关节脱位,宜行足弓重建跖跗关节原位融合术.

    作者:赵敦旭 刊期: 2009年第07期

  • 改良经椎间孔腰椎椎体间融合术治疗下腰椎退变性疾患

    目的 总结应用改良经椎间孔腰椎椎体间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)治疗下腰椎退变性疾患的临床效果.方法 2003年10月-2006年12月,应用改良TLIF手术治疗L3~S1退变性患者33例.其中男14例,女19例;年龄33~70岁,平均52.2岁.病程4个月~15年,中位时间1.8年.共融合42个节段,其中单节段24例,双节段9例.退变性滑脱伴椎管狭窄8例,峡不连性滑脱5例,退变性腰椎管狭窄症16例,巨大椎间盘脱出合并椎间失稳3例,腰椎术后失败综合征1例.术中切除整个下关节突,切除上关节突上部的内侧半,部分开放椎间孔后壁,椎间隙内预置自体骨3~5 mL,取1枚矩形Cage斜向中线30~40°方向植入椎间隙,辅以椎弓根螺钉固定完成TLIF,根据病情需要同时施以中央管和对侧减压.结果 发生术中硬脊膜撕裂、术后脑脊液漏、术后切口深部感染和一过性神经根刺激症状各1例,均经治疗后好转.术后无永久性神经损伤或症状加重患者.33例均获随访,随访时间20~58个月,平均27.2个月.所有患者于术后1年随访时均达椎体间融合,无螺钉断裂和Cage移位沉陷.13例腰椎滑脱者滑脱完全复位并维持良好.根据JOA评分法,术前(14.9±5.1)分,末次随访时(25.9±3.0)分(P<0.05);临床改善程度达优24例,良7例,可2例,平均改善率80.5%.结论 改良TLIF手术较传统TLIF简化了操作环节,在一定程度上扩大了适应证,在开放手术中贯彻了微创原则,用于下腰椎退变性疾患的治疗效果满意.

    作者:李建江;邓树才;赵栋;赵合元;孙志明;郝永宏;马毅 刊期: 2009年第07期

  • PRP促进骨折修复的临床实验研究

    目的 通过临床随机对照研究,探讨PRP促进骨折修复的作用效果.方法 2007年1月-3月,将采用改良二次离心法制作的PRP用于治疗新鲜骨折29例(PRP组),并与采用常规手术切开复位内固定治疗的30例新鲜骨折患者(对照组)进行疗效比较.PRP组男19例,女10例;年龄18~57岁,平均43.6岁.骨折部位:股骨8例,胫腓骨12例,肱骨2例,尺桡骨3例,手足部2例,锁骨2例.对照组男19例,女11例;年龄22~57岁,平均35岁.骨折部位:股骨7例,胫腓骨9例,肱骨5例,尺桡骨7例,手足部1例,锁骨1例.所有患者均为外伤后24 h内入院,入院至手术时间24~48 h,平均36 h.两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05).术后评价两组伤口炎性反应程度、伤口愈合等级及住院时间,并行统计学分析.结果 术后5 d,PRP组伤口炎性反应程度为无22例,轻6例,中1例;对照组为无17例,轻8例,中3例,重2例;两组比较差异无统计学意义(P>0.05).术后PRP组伤口均达甲级愈合,不良反应率为0.对照组甲级愈合29例;乙级愈合1例,伤口出现红肿并有少许渗液,经3 d换药后正常愈合;不良反应率为3.33%,与PRP组比较差异无统计学意义(P>0.05).PRP组住院时间为(8.21±1.52)d,对照组为(11.67±1.48)d,比较差异有统计学意义(P<0.05).两组患者均获随访,随访时间6~12个月,平均10个月.术后X线片随访示,PRP组患者于术后6~8个月达骨性愈合,对照组于术后8~10个月达骨性愈合,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 临床使用PRP后未增加术后并发症,可加快伤口愈合,缩短住院时间;但其在新鲜骨折中是否促进骨折愈合尚需进一步评估.

    作者:仇建军;张长青;郭彦杰;袁霆;谢宗平 刊期: 2009年第07期

  • 自体鼻中隔软骨-硅胶复合体移植修复单侧唇裂鼻畸形

    目的 应用自体鼻中隔软骨-硅胶复合体二期修复先天性单侧唇裂鼻畸形,评价其疗效.方法 2001年6月-2007年6月,收治单侧唇裂修复术后鼻畸形伴鼻中隔偏斜患者38例.男21例,女17例;年龄14~23岁,平均17.6岁.其中左侧26例,右侧12例;完全性21例,不完全性17例.畸形主要为鼻小柱偏向健侧、鼻尖低平圆钝、鼻孔不对称及患侧鼻翼塌陷.均为二期修复.患者曾行手术1~4次,上次手术至此次手术时间3~10年,平均5.5年.术中根据鼻畸形取自体鼻中隔软骨1.8 cm×1.2 cm,植入鼻尖部假体表面以延长鼻小柱,抬高鼻尖,将多余的软骨植于塌陷鼻翼处,同时行鼻尖部脂肪结缔组织瓣移位,固定后将患侧鼻翼软骨和软组织复位至正常解剖位置.结果 患者术后切口均Ⅰ期愈合,供软骨区无并发症发生.鼻外形美观,鼻尖高度及形态自然、双鼻孔大小基本对称,鼻小柱居中,鼻尖扁平及鼻翼塌陷均不同程度矫正,鼻唇角生理弧度恢复.38例均获随访,随访时间12~18个月,平均15.6个月.随访12个月时患者满意30例(78.9%),较满意8例(21.1%).患者均无移植软骨移位及外露,无出血、感染等并发症,外形良好.结论 应用自体鼻中隔软骨-硅胶复合体移植是修复单侧唇裂鼻畸形一种较理想的术式.

    作者:李庆伟;盛遵启;唐胜建;杨彪炳;于潇华 刊期: 2009年第07期

  • 激素性股骨头坏死BMSCs骨保护素/NF-κB受体活化因子配基mRNA的表达

    目的 观察激素性股骨头坏死患者BMSCs骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/NF-κB受体活化因子配基(receptor activator ofnuclear factor kappa B ligand,RANKL)mRNA表达情况,探讨长期应用激素导致股骨头坏死的另一病理机制.方法 取2007年3月-2008年3月激素性股骨头坏死患者自愿捐赠的骨髓及股骨头骨组织35例(实验组)和股骨颈骨折患者自愿捐赠的骨髓及股骨头骨组织21例(对照组).两组男女比例均为4∶3;年龄41~70岁,其中实验组平均55.34岁,对照组平均55.33岁.实验组患者近2年内接受糖皮质激素治疗超过3周或大剂量冲击治疗超过1周,对照组患者从未接受超过1周的激素治疗.骨组织标本行多聚甲醛固定后石蜡包埋,HE染色.所取骨髓采用贴壁法分离培养BMSCs,采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RTQ-PCR)技术检测BMSCs OPG mRNA和RANKL mRNA的表达水平,并计算OPG mRNA/RANKI,mRNA比值.结果 HE染色示实验组未见完整的骨小梁和骨单位,可见不连续骨碎片,碎片骨陷窝内骨细胞大部分消失,周围有大量炎性肉芽组织.对照组可见完整骨单位由板层骨构成,板层骨连续完整,围绕血管呈同心圆排列,小梁骨陷窝内可见骨细胞.BMSCs RTQ-PCR检测:实验组OPGmRNA表达量为0.37±0.12,RANKLmRNA 1.12 ±0.39,OPGmRNA/RANKLmRNA比值为0.37±0.17;对照组OPG mRNA 0.47±0.13,RANKLmRNA0.84 ±0.24,OPG tuRNA/RANKLmRNA比值为0.61 ±0.26;两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 长期应用糖皮质激素致股骨头坏死可能与其调控BMSCs OPG和RANKL表达有关.

    作者:王建忠;高鸿雁;王坤正;李伟;时志斌;张明宇 刊期: 2009年第07期

  • 反复(慢性)注射阿米替林和布比卡因对坐骨神经结扎大鼠痛行为学及神经病理学的影响

    目的 观察坐骨神经局部反复(慢性)注射阿米替林和布比卡因对慢性坐骨神经结扎损伤(chronicconstriction mjury,CCI)大鼠机械和热痛阈的影响,及神经组织病理学的改变,探讨其对外周抗痛觉过敏作用及神经组织的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,体重(200±20)g,按照Bennett等的方法 制备CCI模型,5 d后随机分为3组(n=8).阿米替林组(A组)、布比卡因组(B组)、生理盐水组(C组).模型制备后5、7、9 d分别经留置导管给予0.5 mL的0.5%阿米替林、0.5%布比卡因及生理盐水.观察大鼠一般情况,根据Hwang等标准行运动功能评分;于注药前及第3次注药后1、3、5、7 d测定机械刺激缩足反射阙值(mechanical withdrawal threshold,MwT)和热缩腿反射潜伏期(thermalwithdrawal latency,TWL).于模型制备后16 d取坐骨神经标本,行大体观察及组织学观察,采用Estebe评分方法 行组织学评分.结果 大鼠均存活至行为学实验观察完成.A、B组大鼠于每次注药后均出现不同程度运动障碍,A组在8 h内、B组在2 h内运动功能评分与C组和注药前比较差异均有统计学意义(P<0.05);但第3次注药A组在8 h后、B组在2 h后大鼠运动功能均完全恢复.A组第3次注药完成后1、3 d的MWT和TWL较注药前及注药后5、7 d显著升高,也较1、3 d的B、C组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);B组各时间点MWT和TWL与注药前及C组比较差异均无统计学意义(P>0.05).3组大鼠坐骨神经光镜下组织学观察可见神经外膜、神经束膜完整,轴索排列大致整齐,无明显脱髓鞘改变,少量炎性细胞浸润,各组坐骨神经组织学评分均为1分,差异无统计学意义(P>0.05).结论 坐骨神经局部反复(慢性)注射0.5%阿米替林对神经病理性疼痛大鼠具有外周抗痛觉过敏的作用,其作用具有累加效应,且未见坐骨神经发生明显病理学改变.

    作者:宋莉;肖红;杨帆;杨邦祥;康仙慧;文传兵;刘慧 刊期: 2009年第07期

  • CT血管造影及可视化研究在背阔肌肌皮瓣移植中的临床应用

    目的 探讨CT血管造影(computedtomographyangiography,CTA)技术用于背阔肌肌皮瓣(latissimusdorsi myocutaneous flap,LDM)移植的可行性及临床意义.方法 2007年9月-2008年8月,收治3例四肢大面积皮肤肌肉缺损需行LDM移植的患者.男2例,女1例;年龄23~42岁.均为外伤后皮肤缺损:其中前臂2例,小腿1例,范围17 cm×8锄~20 cm×10 cm.采用CTA观测胸背动脉分布及彼此吻合情况,计算机三维重建并立体显示LDM结构,根据结果 进行术前设计.结果 三维重建技术可准确反映LDM的解剖学结构特点.术中见3例患者血管走行、分布与术前设计一致,LDM均顺利切取,切取范围19 cm × 10 cm~22 cm×12 cm.3例均获随访,随访时间4~12个月.皮瓣质地、色泽良好.结论 重建的图像可提供正常LDM三维动态解剖,为临床术前LDM设计提供直观的数字化解剖依据.

    作者:陆声;徐永清;张元智;李军;严睿;陈玉兵;郭海;孙林辉 刊期: 2009年第07期

  • 隐匿阴茎的手术矫治

    目的 探讨隐匿阴茎分型,以提高对其认识和临床治疗效果,选择合适的手术矫治方法.方法 2004年6月-2008年4月,收治196例隐匿阴茎患儿(患者).年龄1岁4个月~44岁.临床症状均表现为阴茎外观短小,外显异常,呈圆锥状皮肤堆积或阴茎体隐匿.4例合并尿道下裂,为阴茎头型;3例合并尿道上裂,为阴茎型.根据阴茎外显程度分为轻、中、重型,其中轻型49例,中型109例,重型38例.根据不同程度的解剖特征采取相应的手术矫治.结果 术毕阴茎外显明显改善,排尿功能正常,无皮瓣感染和坏死.术后患儿(患者)均获随访,随访时间6~48个月,平均16个月.1例中型和1例重型阴茎轻度回缩,无阴茎弯曲、扭转,无束缚包茎,未见明显瘢痕挛缩.1例中型术后3个月复发,包皮口缩窄、阴茎回缩,术后5个月再次行手术矫治,1年随访外观满意.其余患儿(患者)阴茎外显满意,阴茎头外露,外观与包皮环切患者外观相似.结论 根据严重程度对隐匿阴茎进行分型,有助于深入认识该病,并有利于选择恰当的手术方式,提高其治疗效果.

    作者:武鹏;王坤杰;唐耘熳;陈绍基;王明和 刊期: 2009年第07期

  • 髓核细胞修复椎间盘退行性变的研究进展

    目的 综述髓核细胞修复椎间盘退行性变的研究进展.方法 查阅近年有关髓核细胞修复椎间盘退行性变的国内外相关文献,进行回顾及综合分析.结果 椎间盘髓核细胞不仅是残留脊索细胞,其对于整个椎间盘功能的维持起到重要作用,生物治疗对退变椎间盘的修复一方面试图改善髓核细胞的生存微环境,另一方面通过补充髓核细胞数量,包括移植干细胞分化为类髓核细胞来缓解椎间盘退行性变.结论 基于髓核细胞或干细胞来源类髓核细胞的细胞移植技术为扭转椎间盘退行性变提供了可能.

    作者:王锋;王运涛;吴小涛 刊期: 2009年第07期

  • 超顺磁性氧化铁标记兔BMSCs生物学特性及MRI成像研究

    目的 探讨不同浓度超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxid,SPIO)颗粒标记兔BMSCs的标记率和对细胞活力的影响,及MRI成像显示磁标记干细胞的可行性.方法 健康成年家兔10只,体重2.5~3.0kg,取髂骨骨髓常规培养BMSCs.将SPIO-多聚赖氨酸复合物按不同比例与DMEM培养基混合,使Fe2+终浓度分别为150、100、50、25μg/mL,依次定为A、B、C、D组,加入第3代BMSCs培养液中进行标记;以未标记细胞作为对照E组.行普鲁士蓝染色观察细胞内Fe2+的标记率,并检测标记后的细胞活力.应用1.5T MRI系统行磁标记干细胞成像,检测各组T1WI和T2WI图像信号强度.结果 A~D组标记细胞胞质内均可见普鲁士蓝染色颗粒,随浓度增加蓝染颗粒增多;E组染色呈阴性.A~E组细胞活力分别为69.20%±6.11%、80.41%±2.42%、94.32%±0.67%、96.24%±0.34%和97.43%±0.33%,A、B组细胞活力与C、D、E组比较,及A、B组间比较差异有统计学意义(P<0.05);C、D组与E组比较,及C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05).T1WI图像各组间无明确信号差异;T2WI图像A、B、C组信号均有明显下降,D组信号略下降,E组信号改变不明显.A~E组T2WI信号强度分别为23.37±6.21、26.73±3.60、29.63±2.82、45.03±6.76和783.15±7.38,A~D组与E组比较差异均有统计学意义(P<0.05),A、B、C组与D组比较差异有统计学意义(P<0.05),A、B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 SPIO可简便标记BMSCs,在20~50μg/mL的Fe<2+>标记浓度下对细胞活力无影响,可为BMSCs移植的MRJ活体内示踪奠定基础.

    作者:张瑞平;刘强;李健丁;张琨;李晶 刊期: 2009年第07期

  • 重建股骨距人工股骨头置换术治疗高龄股骨粗隆间骨折

    目的 探讨重建股骨距结合人工股骨头置换治疗高龄不稳定性股骨粗隆间骨折的手术方法 及疗效.方法 回顾分析2005年10月-2007年10月收治的113例高龄不稳定性股骨粗隆间骨折患者,采用复位固定股骨大、小粗隆,修复稳定股骨近端,重建股骨距结合骨水泥型人工股骨头置换术治疗58例(修复组);采用切开复位γ钉内固定术治疗55例(对照组).修复组:男21例,女37例;平均年龄75岁.骨折按Evans-Jenson分型:ⅢA型10例,ⅢB型16例,Ⅳ型32例.对照组:男17例,女38例;平均年龄72.5岁.骨折按Evans-Jenson分型:ⅢA型13例,ⅢB型14例,Ⅳ型28例.两组均为摔伤,受伤至手术时间为3 h~7.5 d,平均1.4 d.两组均合并骨质疏松,合并冠心病、高血压病、糖尿病、慢性支气管炎等慢性疾病的1种或几种;无其他部位骨折.两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05).结果 两组患者均顺利完成手术,修复组手术时间、术中出血量、输血量均明显少于对照组(P<0.05).术后两组切口均Ⅰ期愈合.两组患者均获随访,随访时间12~36个月.术后12个月修复组并发症发生率为3.4%,对照组为16.4%,比较差异有统计学意义(P<0.05);按照Harris标准评定髋关节功能,修复组优良率93.1%,对照组70.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 人工股骨头置换治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床效果良好,稳定近端、重建及修复股骨距是手术关键.

    作者:董立明;廖文波 刊期: 2009年第07期

  • 缺血再灌注损伤对在体兔窦房结细胞特异性通道蛋白表达的影响

    目的 研究缺血再灌注损伤对在体窦房结细胞超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(hyperpolarization activated cyclienucleotide gated cation channel 4,HCN4)表达的影响,探讨缺血再灌注损伤对窦房结组织功能障碍影响的可能机制.方法 取家兔85只(体重2~3 kg)制作右冠状动脉缺血再灌注损伤模型.将实验动物随机分为3组,实验组A组缺血30min后行再灌注,实验组B组缺血1 h后行再灌注,均分别于再灌注后2、4 、8、 16h取材,每个时间点10只;对照组C组(n=5)未行血流阻断,16 h后取材.于各时间点取窦房结组织行HE染色、免疫组织化学染色及透射电镜观察.结果 HE染色示A、B组窦房结细胞再灌注2 h均发生病理损伤;4、8 h窦房结细胞病理损伤随时间延长而逐渐加重;8、16 h窦房结细胞病理损伤达高峰;相同再灌注时间,B组病理损伤重于A组.免疫组织化学染色观察示:窦房结细胞HCN4表达主要位于窦房结中央区,向周边表达渐减少.A组再灌注后2、4、8、16 h HCN4表达的积分吸光度(LA)值分别为306.20 ±35.77、216.60±18.59、155.40 ±19.11、135.00 ±12.30,B组分别为253.70±35.66、138.70±13.28、79.10±9.60、69.20±8.42,均较C组(397.40±34.11)低(P<0.05);随再灌注时间延长,HCN4表达逐渐降低,至8 h时低,之后无明显变化,再灌注后2、4、8 h间比较差异均有统计学意义(P<0.05),再灌注8 h与16 h比较差异无统计学意义(P>0.05);相同再灌注时间,B组HCN4表达较A组低.透射电镜观察示A、B组窦房结细胞超微结构发生损伤改变,随再灌注时间延长损伤加重,至8h达高峰,再灌注8、16h改变不明显.相同再灌注时间,B组窦房结细胞超微结构损伤重于A组.结论 缺血再灌注损伤引起在体窦房结细胞形态结构及HCN4表达改变,可能与缺血再灌注造成窦房结功能障碍和心律失常有关.

    作者:付勇;廖斌;于风旭;邓明彬;冯志强;詹福生;李新;万居易 刊期: 2009年第07期

  • 不同接种方法下hBMSCs在生物珊瑚支架中的空间分布和基因表达分析

    目的 比较采用两种不同方法 接种的hBMSCs在生物珊瑚支架中的三维空间分布和基因表达.方法 采用传统接种法(A组)和纤维蛋白凝胶接种法(B组)构建hBMSCs和生物珊瑚支架复合体.A组孵育3 h,B组孵育30 min后检测两组细胞接种效率.培养后2、7、14、21 d,两组分别取材行DAPI染色后,荧光显微镜观察,采用AxioVision图像分析软件测量每个切片10倍物镜视野中的细胞数量,以切片的不同水平区域(从表面到底部为L1~L5)和垂直区域(从中心到边缘)比较两组细胞分布情况;采用实时荧光RT-PCR检测成骨分化基因骨凝集素(osteonectin,ON)、核心结合因子α1(corebindingfactoral,Cbfα1)和骨钙素(osteocalcin,OC)表达.结果 B组细胞接种效率为88.32%±4.20%,明显高于A组66.51%±12.33%(P<0.01).培养后2d,两组细胞水平区域分布由L1~L4逐渐减少(P<0.05);垂直区域细胞数目比较,A组差异无统计学意义(P>0.05),B组差异有统计学意义(P<0.05);两组间各成骨分化基因表达比较差异无统计学意义(P>0.05).培养后7 d,A组细胞数目较2 d时逐步减少,各水平区域间细胞数目比较差异均有统计学意义(P<0.05),而B组细胞数目和各成骨分化基因表达量迅速增加,各水平区域细胞数目趋于平衡,细胞分布均匀(P>0.05),ON和Cbfal基因表达量明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).培养后14d,A组各水平及垂直区域内的细胞数目均较7 d时急速减少(P<0.05),B组细胞增殖良好且细胞总数与7 d时相近;B组OC基因表达量达峰值,两组间各基因表达比较差异均有统计学意义(P<0.05).培养后21 d,两组各水平区域细胞数目和两组间各基因表达比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组各垂直区域细胞数目比较差异均无统计学意义(P>0.05).培养后7、14、21 d,B组大部分区域细胞数目均较A组多,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 通过纤维蛋白凝胶接种较传统方法 接种可使hBMSCs在支架中空间分布更均匀,能达到更快的细胞增殖和更有效的成骨分化.

    作者:朱慧勇;孙蕾;陈建芬;王慧明 刊期: 2009年第07期

  • 关节镜下自体骨-髌腱-骨移植重建前交叉韧带

    目的 总结关节镜下可吸收界面螺钉固定自体骨-髌腱-骨移植重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)的临床疗效.方法 2005年6月-2007年12月,应用关节镜下可吸收界面螺钉固定自体骨-髌腱-骨移植重建ACL30例.男19例,女11例;年龄19~56岁,平均33岁.左膝19例,右膝11例.运动伤19例,车祸伤8例,摔伤3例.受伤至手术时间为7~35 d,平均12.6 d.结果 术后切口均Ⅰ期愈合,无术后相关并发症发生.术后患者均获随访,随访时间6~18个月,平均10个月.膝关节不稳及无力症状消失.膝关节功能Lysholm评分由术前(23.62±10.85)分升至术后(88.00±3.15)分,差异有统计学意义(P<0.01).结论 关节镜下可吸收界面螺钉固定自体骨-髌腱-骨移植重建ACL手术操作简便、固定牢固、并发症少、功能恢复满意、无需二次手术.

    作者:米琨;刘武;欧伦;刘鹏飞;伏春华;朱传奇 刊期: 2009年第07期

中国修复重建外科杂志

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主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会

主办:中国康复医学会,四川大学