程相俊；刘浩；张霆；黄巧蓉
目的 对乳猪窦房结所在部位进行准确定位,建立一套可靠的窦房结细胞取材、分离、纯化培养技术;观察窦房结细胞与Col Ⅰ纤维支架的相容性. 方法 24h内新生纯种长白山乳猪5只,雌雄不拘,体重0.45～0.55 kg.实验动物采用多导电生理记录仪标记房波早出现的部位,在该位置取材行原代窦房结细胞培养,分别采用常规方法 培养和差速贴壁分离技术、5-BrdU处理纯化培养;于左心房部位取材行心房肌细胞纯化培养作为对照.倒置显微镜观察细胞形态、细胞贴壁时间、单细胞出现搏动时间、搏动频率等.将纯化培养的窦房结细胞以5 × 105个/mL密度接种至经预湿处理的Col ×纤维支架复合培养5 d,行HE染色观察及扫描电镜观察. 结果 房波早出现的位置即为窦房结所在部位.纯化培养的窦房结细胞有3种形态,即梭形、三角形与不规则形,其中梭形细胞多;心房肌细胞主要为三角形及不规则形,而无梭形细胞.窦房结细胞纯化培养与常规培养比较,梭形细胞所占比例分别为73.0%±2.9%、44.7%±2.3%,二者差异有统计学意义(P<0.01);不规则形细胞分别为7.0%±1.7%、36.1%±2.6%,二者差异有统计学意义(P<0.01);三角形细胞分别为20.0%±2.1%、19.2%±2.5%,二者差异无统计学意义(P>0.05).窦房结细胞复合Col Ⅰ纤维支架培养5 d,HE染色观察示Col Ⅰ纤维支架材料中有大量细胞;扫描电镜见细胞成团吸附于支架表面及孔隙侧壁,并可见细胞间通过突起相互连接,或伸出伪足贴附于支架孔隙壁上. 结论 通过准确窦房结定位,采用差速贴壁结合5-BrdU处理的纯化培养可明显提高乳猪窦房结梭形细胞比例,是一种可靠的窦房结细胞纯化培养技术.窦房结细胞和Col Ⅰ纤维支架有较好的细胞相容性.
作者：万居易；钟晓琳；廖斌；王明勇；邓明彬 刊期： 2009年第08期
我从事整形外科医学专业已有60多个岁月,为千万伤残患者做了数不清的手术,特别是在1958年,参加上海广慈医院(现瑞金医院)抢救大面积烧伤患者邱财康成功以后,开始接触更多的烧伤后头颈胸及双手瘢痕挛缩、瘢痕畸形患者,为他(她)们进行了修残补缺的外科治疗,修复外形和重建功能.
作者：张涤生 刊期： 2009年第08期
目的 研究Footscan USB2平板式足底压力分析系统对两种内固定方法 治疗跟骨骨折术后疗效的评定价值. 方法 2006年2月-9月,收治64例单侧新鲜闭合性跟骨骨折患者.随机分为两组,实验组32例,男28例,女4例;年龄20～53岁,平均36.7岁.病程3～14 d.骨折根据Sanders分型,Ⅱ型19例,Ⅲ型11例,Ⅳ型2例.采用微创切开复位改良钢板螺栓加压内固定治疗.对照组32例,男29例,女3例;年龄18～56岁,平均37.1岁.病程4～15 d.骨折根据Sanders分型,Ⅱ型18例,Ⅲ型11例,Ⅳ型3例.采用标准L形切口AO钢板内固定治疗.两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性.分别于术后1、2年,采用Footscan USB2平板式足底压力分析系统对两组患者行动态双足足底压力测试,比较两组患者Maryland足部功能评分情况,并对所测参数行统计学分析. 结果 两组患者均获2年随访,实验组未见切口感染、皮缘坏死及腓肠神经终末支损伤.对照组3例出现切口皮缘局部坏死,经换药后切口愈合;1例腓肠神经终末支损伤,局部皮肤感觉减退.术后1、2年,对照组健患足双足站立相的冲量、足弓指数、距下关节活动范围、足底压力中心外移及足跟宽度指标间差异均有统计学意义(P<0.05),实验组健患足上述指标间差异均无统计学意义(P>0.05),上述指标两组健患足间比较差异均有统计学意义(P<0.05).术后1年实验组Maryland评分为(86.74 ±8.56)分,对照组为(71.24 ±10.06)分;术后2年实验组为(87.35 ±8.49)分,对照组为(72.41 ±9.69)分:两组组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 Footscan USB2足底压力分析系统可对跟骨骨折患者手术疗效进行定量评价;改良加压钢板内固定治疗跟骨骨折疗效优于传统Ao钢板.
作者：陈占法；张英泽；郑占乐；郭明珂 刊期： 2009年第08期
目的 研究PRP对兔BMSCs在体外向SC分化中的作用,并对分化细胞的分泌功能进行检测. 方法 取2月龄新西兰大白兔骨髓5 mL,应用密度梯度离心和贴壁筛选方法 分离培养BMSCs.取兔股静脉血5 mL,采用改良Appel法制备PRP.取第3代BMSCs分为3组,联合诱导组:采用β-巯基乙醇和维甲酸序贯诱导后用含PRP完全培养基培养:单纯诱导组:行β-巯基乙醇和维甲酸序贯诱导后,采用不含PRP的L-DMEM完全培养基培养;对照组:不行诱导,仅采用L-DMEM完全培养基培养.倒置显微镜下观察各组细胞生长情况,于培养4、7、9、11 d采用免疫荧光染色法对细胞进行鉴定,ELISA法检测NGF含量,并于培养11 d行RT-PCR检测NGF mRNA表达. 结果 联合诱导组和单纯诱导组培养4 d,大部分细胞不具备BMSCs典型细胞形态结构;9 d联合诱导组细胞均不具备BMSCs典型细胞形态,呈类似SC形态和外观;对照组细胞形态一直无明显改变.联合诱导组和单纯诱导组诱导培养后,各时间点均有S-100蛋白表达;随时间延长,两组阳性表达率逐渐提高;培养7、9、11 d,联合诱导组与单纯诱导组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组表达呈阴性.培养后4、7、9、11 d,NGF含量联合诱导组和单纯诱导组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);培养4 d联合诱导组与单纯诱导组比较,差异无统计学意义(P>0.05);培养7、9和11 d,联合诱导组与单纯诱导组比较差异均有统计学意义(P<0.05).培养11 d,NGF mRNA表达相对强度联合诱导组较单纯诱导组高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 兔BMSCs在体外一定条件下能诱导分化为可分泌NGF的SC;诱导培养时联合PRP能明显提高BMSCs向SC诱导的效率.
作者：夏长所；陈玉华；孙康；田少奇；杨选影；洪光祥 刊期： 2009年第08期
目的 总结带蒂阴囊纵隔皮瓣尿道成形术在长段后尿道狭窄中的应用价值及疗效. 方法 2003年1月-2007年12月,收治24例年龄6～54岁的长段后尿道狭窄患者.病程1～5年.狭窄原因:外伤引起后尿道损伤或断裂22例,耻骨上经膀胱前列腺摘除术后1例,长期留置尿管反复尿道感染1例.尿道镜检或膀胱尿道造影均确诊为后尿道狭窄,狭窄长度2.0～5.5 cm.其中11例合并尿道假道形成,6例伴尿瘘,2例伴肠瘘,6例合并勃起功能障碍.双侧上尿路排泄性造影检查结果 均正常.术中切取大小为2.5 cm × 2.0 cm～6.5 cm×2.5 cm带蒂阴囊纵隔皮瓣尿道成形术治疗. 结果 术中出血100～500 mL,平均270 mL.手术时间90～220 min,平均135 min.患者皮瓣均成活,切口均I期愈合,术后均能正常排尿.24例均获随访,随访时间12～36个月,平均18.6个月.术后1例出现轻度尿失禁,2例尿道狭窄,1例尿道狭窄合并尿瘘,1例远端吻合口旁尿道憩室,均对症处理后能正常排尿.无尿道结石形成,无尿失禁发生,未新增勃起功能障碍患者.术后16个月大尿流率为14～21 mL/s,平均17.6 mL/s;术后22个月排尿性造影检查示尿路通畅,未见狭窄及窦道形成. 结论 带蒂阴囊纵隔皮瓣尿道成形术操作简便,皮瓣易成活,是一种治疗长段后尿道狭窄的安全有效方法 .
作者：魏强；刘久敏 刊期： 2009年第08期
目的 介绍一种修复前臂与手大面积皮肤缺损的手术方法. 方法 2003年7月-2008年9月,应用双髂腹股沟及腹部联合皮瓣修复前臂合并手部大面积皮肤缺损11例.男7例,女4例;年龄17～55岁,平均33.5岁.梳棉机损伤5例,车祸伤4例,受伤至手术时间90 min～6 h,平均3.5 h;烧伤晚期上肢严重瘢痕挛缩畸形2例,受伤至手术时间分别为7个月和19个月.皮肤缺损范围42 cm × 12 cm～60 cm × 16 cm.术中切取皮瓣范围45.0 cm ×10.5 cm～62.0 cm × 18.0 cm,术后4周联合皮瓣断蒂.供区创面直接缝合7例,游离植皮修复4例. 结果 术后皮瓣均顺利成活,切口均Ⅰ期愈合.供区切口均Ⅰ期愈合,植皮均成活.患者术后均获随访,随访时间为2个月～3年.皮瓣质地柔软、外形饱满、色泽正常.根据英国医学研究会评定标准,皮瓣感觉恢复:S1级4例,S2级6例,S3级1例.手部功能按照中华医学会手外科分会手功能评定试用标准综合评价:优7例,良2例,差2例,优良率81.8%. 结论 应用双髂腹股沟及腹部联合皮瓣修复前臂与手大面积皮肤缺损,操作简便,修复效果好,是一种较好方法.
作者：龚志鑫；田德虎；张经岐；张桂生；张冰；王世辉；刘建敏 刊期： 2009年第08期
目的 评价颈前路术中植骨块过高,椎间隙过度撑开对颈椎曲度及术后颈部轴性症状(axial symp-tom,AS)的远期影响. 方法 2001年6月-2004年6月,采用颈前路减压、自体髂骨植骨、钛板内固定治疗神经根型颈椎病患者30例.男14例,女16例;年龄32～73岁,平均54.7岁.病程1～31个月,平均7个月.病变节段均为C5、6.颈椎动力位X线片检查示无颈椎不稳.根据术后即刻测量椎间高度将患者分为两组:植骨块过高、椎间隙过度撑开为过撑组(11例),椎间高度较术前增加>3 mm;植骨块高度合适、对椎间隙无过度撑开为无过撑组(19例),椎间高度较术前增加<3 mm.术后1周,3、24、48个月定期摄X线片随访,分析患者术后植骨块骨性融合情况及融合节段椎间高度的变化、颈椎生理曲度的改变情况,并参照曾岩等拟定的颈部AS评定标准,对两组患者术后颈部AS进行观察. 结果 无过撑组无并发症发生;过撑组1例术后出现C5神经根麻痹,经积极治疗术后3个月逐渐恢复.30例患者均获随访,随访时间48～66个月,平均54.5个月.术后两组患者症状均明显缓解.除无过撑组1例术后12个月植骨未融合,余均于术后3～6个月植骨达骨性融合,无钢板和螺钉松动或断裂,无植骨块移位.术后48个月无过撑组椎间高度较术前增加(1.9±1.8)mm,过撑组增加(3.5 ±2.7)mm,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).颈椎手术固定节段生理曲度均维持良好,末次随访时无过撑组较术前增加(2.17 ±1.83)°,过撑组增加(3.32 ±2.71)°,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).颈椎整体生理曲度末次随访时无过撑组较术前增加(4.57 ±3.71)°,过撑组较术前减少(2.43 ±2.13)°,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).术后48个月颈部AS发生情况:过撑组优3例,良2例,可5例,差1例,AS发生率为54.55%;无过撑组优11例,良5例,可3例,AS发生率为15.79%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 颈前路术中植骨块过高、颈椎间隙过度撑开,不利于颈椎整体生理曲度维持,会增加术后颈部AS的发生.术中选用高度合适的植骨块在颈前路手术中非常关键.
作者：孟宪中；曹俊明；中勇；孟宪国；杨大龙；杨柳 刊期： 2009年第08期
目的 制备并评价羧甲基壳聚糖-HA-聚乙烯醇[carboxymethyl-chitosan/HA/poly(vinyl alcohol),CHP]共混膜片的理化性质、眼内生物相容性,探讨其用于青光眼滤过手术的可行性. 方法 取羧甲基壳聚糖、HA、聚乙烯醇按5:4:1(M/M)共混交联,用流延法制备CHP共混膜片.测定膜片吸水率、溶胀比、通透性及力学性能.取新西兰白兔结膜下组织,分离培养兔眼结膜下成纤维细胞,取第4代细胞以5 × 103个/mL密度接种于贴附CHP共混膜片(实验组)及不加膜片(对照组)的细胞培养板中培养,于培养24、48、72 h取细胞行MTT检测.将6只新西兰白兔随机分为2组(n=3),将CHP共混膜片及SK胶分别植入兔眼前房及结膜下,作为实验组及对照组.术后第1、3、5、9、11、20、30、45、60天进行裂隙灯观察,记录双眼反应,第15天实验组取角膜组织行扫描电镜观察,以研究共混膜片生物相容性和降解性. 结果 CHP共混膜片吸水率为83.8%±1.3%,溶胀比为3.59 ±0.50,干、湿态时抗张强度分别为(20.59 ±1.73)、(0.51 ±0.13)MPa,断裂伸长率分别为10.69%±1.16%,53.15%±2.46%.CHP共混膜片对NaCl、L-酪氨酸均有良好的通透性.接种后24、48、72 h实验组吸光度(A)值分别为0.207 ±0.083、0.174 ±0.080、0.181 ±0.048,对照组分别为0.284±0.01 1、0.272±0.083、0.307±0.056,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).术后第1天实验组前房植入共混膜片周围有少量絮状物渗出;第3天渗出物吸收;第11天无明显炎性反应:第60天植入共混膜已大部分降解.术后15 d,扫描电镜观察示角膜内皮细胞六边形形态完整,表面无降解颗粒附着.对照组因SK胶质地软,易断裂,未能成功植入至前房.术后第l天实验组结膜植入处结膜局部有轻度充血,第9天恢复正常,至第60天无角膜水肿、前房炎性反应.对照组观察结果 与实验组相似. 结论 CHP共混膜片具有较好的理化性质及眼内生物相容性,在青光眼滤过手术中具有潜在应用价值.
作者：刘文；李树宁；常菁；韩宝芹；刘万顺 刊期： 2009年第08期
目的 探讨关节镜下应用微创经皮钢板内固定术(minimally invasive percutaneous plate osteosynthesis,MIPPO)治疗胫骨平台骨折的临床疗效. 方法 2005年9月-2007年12月,采用关节镜下MIPPO治疗29例胫骨平台骨折患者.男18例,女11例;年龄18～59岁,平均34.7岁.Schatzker Ⅱ型8例,Ⅲ型10例,Ⅳ型5例,Ⅴ型3例,Ⅵ型3例.合并半月板损伤13例,前交叉韧带损伤4例,内侧副韧带损伤3例.受伤至手术时间为2～10 d.术中先在关节镜下处理合并损伤,然后复位胫骨平台骨折,骨缺损处植骨,通过皮肤小切口建立皮下隧道,此隧道插入支持钢板行内固定,术后次日即行功能锻炼. 结果 术后无切口愈合不良、感染、骨筋膜间室综合征等早期并发症发生.患者均获随访,随访时间12～39个月,平均24个月.骨折愈合时间3～4.5个月,平均3.5个月.随访期内无内固定物失效、创伤性关节炎和膝内外翻畸形.采用Lysholm评分标准评价临床疗效,优23例,良4例,可2例,优良率93.1%. 结论 关节镜监视下MIPPO治疗胫骨平台骨折手术创伤小,恢复快,并发症少,亦可同时处理关节内合并损伤,是一种治疗胫骨平台骨折安全有效的方法 .
作者：田孟强；王立德；张宇；刘军 刊期： 2009年第08期
目的 总结肱骨近端肿瘤大块切除人工肩关节置换术中采用聚四氟乙烯(polytetrafluethlene,PTFE)材料行动力起止点重建,以及周围软组织修复的方法 及疗效. 方法 2004年1月-2006年6月,收治肱骨近端骨肿瘤5例.男4例,女1例,年龄23～72岁.骨肉瘤3例,骨巨细胞瘤2例.MTS(musculoskeletal tumor society)外科分期ⅠB型2例,Ⅱ B型3例.肿瘤大小为6 cm×4 cm×4 cm～9 cm×7 cm×7 cm.病程3～19个月.经影像学检查证实侵犯周围软组织.术中距肿瘤边界3～5 cm连同周围软组织行大块肿瘤切除术,并予以定制人工肩关节肿瘤假体置换,骨水泥固定.采用PTFE材料修复肩袖等软组织缺损并重建动力起止点. 结果 术后患者引流量为250～600 mL,伤口均I期愈合.5例均获随访,随访时间24～47个月,平均38个月.末次随访时4例假体位置良好,无松动、下沉、磨损等并发症;1例肩关节假体术后27个月出现向上轻度脱位,外展功能受限明显,未作特殊处理.患者肿瘤均未见复发.末次随访时关节功能采用美国肌肉骨骼肿瘤学会保肢评分系统进行评定:优2例,良1例,可2例. 结论 PTFE材料可在肱骨近端恶性肿瘤大块切除人工肩关节置换中应用,以帮助解决肩关节周围软组织缺损修复以及动力起止点重建的问题.
作者：卫晓恩；张琥；张如明；洪海平；沈敬松；陈凯 刊期： 2009年第08期
目的 总结青少年胸椎半椎体合并脊髓纵裂的手术治疗方法 . 方法 2003年1月-2007年12月,应用一期后路半椎体、骨嵴切除,椎弓根钉棒系统内固定、自体骨植骨融合治疗下胸椎脊柱侧凸合并脊髓纵裂患者15例.其中男6例,女9例;年龄16～24岁,平均21.2岁.均为先天性完全分节半椎体,脊髓纵裂均位于半椎体.病椎位于T113例,T12 12例.病程9～61个月,平均22个月.术前侧凸Cobb角48.6～106.4°,平均52.3°. 结果 术中无脊液漏,无胸膜损伤.切口Ⅰ期愈合14例;1例发生感染,经抗炎、切口换药后愈合.15例均获随访,随访时间9～45个月,平均34个月.术后10个月Cobb角0～14°,平均10.20°矫正率平均76.3%,术后脊柱畸形明显改善.术后X线片示患者均获良好骨融合,融合时间3～5个月.无内固定失败及假关节形成. 结论 一期后路手术截除半椎体及纵裂骨嵴可达到脊柱矫形目的 ,同时完成截骨间隙植骨融合以重建脊柱稳定性,是一种治疗完全分节的胸椎半椎体合并脊髓纵裂脊柱侧凸畸形的有效方法 .
作者：邢文华；霍洪军；肖宇龙；杨学军；赵岩；付裕 刊期： 2009年第08期
目的 对比研究经后路显微镜辅助下椎间盘切除术(microsurgery lumbar discectomy,MSLD)与传统开窗手术治疗单节段腰椎间盘突出症的方法 与疗效. 方法 2001年1月-2008年1月,收治230例单节段腰椎间盘突出症患者.其中采用MSLD治疗114例(A组),男77例,女37例;年龄15～76岁,平均41岁.病程6个月～28年,平均51个月.腰椎间盘突出位于L4、552例,L5、S162例.椎间盘左侧突出50例,右侧突出54例,中央型突出10例.术前JOA评分为6～18分,平均11.8分.采用传统后路开窗手术治疗116例(B组),男78例,女38例;年龄14～78岁,平均42岁.病程8个月～26年,平均52个月.腰椎间盘突出位于L4、556例,L5、S160例.椎间盘左侧突出53例,右侧突出52例,中央型突出11例.术前JOA评分为5～19分,平均12.3分.两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.01).分别记录两组手术时间、术中出血量、手术切口长度、术后住院时间、单病种总医疗费用.术后随访时采用JOA评分进行疗效评估. 结果 手术时间A组(40±9)min,B组(47±11)min;术中出血量A组(26±5)mL,B组(60±6)mL;手术切口长度A组(2.6 ±0.8)cm,B组(5.6 ±0.5)cm;术后住院时间A组(4.0±2.6)d,B组(8.0±2.9)d;单病种总医疗费用A组(5 500 ±1 800)元,B组(6 300 ±1 500)元;以上各指标两组比较差异均有统计学意义(P<0.01).术后两组切口均Ⅰ期愈合.无手术间隙定位错误、神经根损伤、马尾神经损伤及感染等并发症发生.术后A组102例获随访,随访时间12～37个月,平均26个月;B组98例随访,随访时间12～35个月,平均24个月.术后12个月A组JOA评分为21～28分,平均24.8分;B组22～27分,平均25.2分;均较术前有显著改善(P<0.01),两组间比较差异无统计学意义(P>0.01). 结论 两种手术方式临床效果相似,但MSLD具有创伤小、出血少、手术时间短、术后住院时间短、医疗费用少等优点,是治疗单节段腰椎间盘突出症的一种理想微创手术.
作者：陆晓生；彭昊；凌尚准；韦文 刊期： 2009年第08期
目的 总结前路经腹腔一期病灶清除植骨融合内固定治疗腰骶段脊柱结核的临床疗效. 方法 2002年2月-2007年4月,采用经腹腔入路～期病灶清除,取2块大小为5 cm×3 cm的髂骨植骨及内固定治疗腰骶段结核16例,其中男4例,女12例;年龄27～63岁,平均38岁.病程6～18个月,平均10个月.均有不同程度腰骶部疼痛和结核中毒症状,9例伴下肢放射痛,3例鞍区麻木.2例曾按腰椎间盘突出诊治.结核受累节段均为L5、S1.血沉47～89 mm/h,平均61 mm/h.影像学检查诊断为脊柱结核.术前使用四联抗结核及营养神经支持治疗,待结核中毒症状改善或血沉呈下降趋势,肝、肾功能基本正常后行手术治疗. 结果 患者均安全完成手术,术中未出现腹腔脏器、大血管、马尾神经及输尿管损伤.术后切口均Ⅰ期愈合,结核无复发,无窦道形成.16例均获随访,随访时间12～37个月,平均21个月.无结核性腹膜炎、肠梗阻等并发症发生.4例男性患者均无勃起功能障碍、逆行射精等症状.术后3～6个月血沉恢复正常,定期复查X线片及CT,未见植骨块移位.患者术后12个月均获骨性融合,无钛板、螺钉断裂或松动发生.下肢放射性疼痛、鞍区麻木症状消失.仅有4例髂骨供骨区疼痛,2例轻度腰骶部疼痛,对症处理后疼痛缓解.按Chen等疗效评定标准:优14例,良2例. 结论 前路经腹腔一期病灶清除植骨融合内固定治疗腰骶段脊柱结核,可获得良好的骨性融合,重建脊柱稳定性.
作者：肖联平；江毅；田永刚；李晓东；尹庆伟；刘智；韩立强；福嘉欣 刊期： 2009年第08期
目的 综述经皮360°轴向腰椎融合(axial lumbar interbody fusion,AxiaLIF)技术的特点、生物力学研究和临床应用. 方法 广泛查阅近年来有关经皮360°AxiaLIF技术生物力学研究与临床应用的文献,并进行综述. 结果 经皮360°AxiaLIF技术主要包括手术入路、轴向技术和后路固定三部分,相对于其他腰椎融合技术,它保持了双侧关节突关节、前后纵韧带和纤维环的完整性,依靠3D轴向螺杆融合器完成椎体间轴向支撑和坚强固定,恢复椎间隙正常高度、腰椎整体高度和生理弯曲,解除椎间孔狭窄.同时由于椎间隙高度的恢复,原来折叠或皱褶的黄韧带、后纵韧带和突出的纤维环复位,使神经根管或中央椎管的狭窄症状得到改善. 结论 经皮360°AxiaLIF技术的减压和融合疗效满意,但适应证较窄,远期疗效有待长期随访观察.
作者：段向东；邵仲达；谢坤南；王志强 刊期： 2009年第08期
目的 观察肌肉游离移植后泛素连接酶(MAFbx)mRNA和蛋白表达的变化,以及肌肉萎缩和肌肉功能的动态恢复情况,并探讨三者之间的关系. 方法 雌性SPF级SD大鼠36只,体重(250 ±25)g.随机选取一侧行股薄肌原位游离移植手术,作为实验侧;另一侧不行手术作为对照侧.术后观察大鼠一般情况,于术后1、2、4、10、15和30周,分别取6只大鼠测量实验侧和对照侧股薄肌肌肉收缩能力、肌湿重维持率,HE染色观察肌纤维横截面积,实时定量PCR检测MAFbx/Atrogin-1 mRNA相对表达量,Western blot检测MAFbx蛋白表达. 结果 36只大鼠全部成活,切口愈合好,实验侧肢体功能无障碍.实验侧肌纤维横截面积、肌肉湿重维持率、肌肉大单收缩力维持率和肌肉强直收缩力维持率均呈先降低(术后1～4周)后增加(术后4～30周)的趋势.MAFbx mRNA相对表达量术后2周高,为对照侧7倍;术后15～30周逐渐下降,为对照侧1.1～1.5倍;各时间点实验侧与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05).Westernblot检测结果 显示术后1～15周,实验侧肌肉内MAFbx蛋白相对表达量与对照侧相比,差异均有统计学意义(P<0.05);术后30周差异无统计学意义(P>0.05).肌湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率分别与大单收缩力维持率和大强直收缩力维持率的相关系数为0.95、0.75和0.93、0.68(P<0.05).MAFbx mRNA及蛋白相对表达量分别与肌肉湿重维持率、肌纤维横截面积恢复率、大单收缩力维持率、大强直收缩力维持率的相关系数为-0.62(P<0.05)、-0.45(P>0.05)、-0.72(P<0.05)、-0.78(P<0.05)和-0.95(P<0.05)、-0.82(P<0.05)、-0.89(P<0.05)、-0.54(P>0.05). 结论 移植肌肉功能降低与肌肉萎缩密切相关.MAFbxmRNA和蛋白表达增高,尤其在获得神经支配后4～15周仍持续升高,可能是肌肉萎缩引起肌肉功能降低的一个联系点.
作者：刘安堂；于大志；张盈帆；朱鴷；陈欢；任安经；方超平；蔡在龙；江华 刊期： 2009年第08期
目的 探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia.inducible factor 1α,HIF-1α)及细胞外调节蛋白激酶1/2(extra-cellular signal-regulated kinasel/2,ERK1/2)在体外培养的胎鼠大脑皮质神经元缺氧缺血再灌注后变化的趋势及其相互关系. 方法 取15只16～18 d孕龄SD大鼠的大脑皮层,进行皮质神经元原代培养,取培养5 d的原代神经元建立氧糖剥离(oxygen and glucose deprivation,OGD)模型.实验分为实验组1:OGD模型制备后,更换培养液为含葡萄糖的神经元完全培养基,以形成再灌注;取再灌注0、2、4、8、12、24 h观察;对照组1:正常培养液孵育的神经元;实验组2:U0126预处理神经元后制备OGD模型,于再灌注后4、8 h观察;对照组2:DMSO预处理神经元后制备OGD模型,余同实验组2.应用Western blot定量测定各组HIF-1α、VEGF蛋白及ERKl/2、p-ERK1/2的表达变化,SABC免疫细胞化学法检测p-ERK1/2、HIF-1α蛋白表达及分布情况. 结果 培养5 d的皮质神经元突起间互相连接成网状.实验组1 HIF-1α、VEGF蛋白表达逐渐升高,8h表达量高,12 h后逐渐下降,与对照组1比较差异有统计学意义(P<0.05).各时间点实验组1与对照组1 ERK1/2蛋白表达无明显差异(P>0.05).实验组1 P-ERK1/2蛋白表达在2 h时开始增加,4 h达高峰,8 h开始下降,与对照组1比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组2 p-ERK1/2蛋白表达下降,HIF-1α及VEGF蛋白表达也随之下调,与对照组2比较差异均有统计学意义(P<0.05).各时间点实验组2和对照组2 ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).免疫细胞化学染色显示神经元黄棕色着色减弱,p-ERK1/2、HIF-1α表达下降. 结论 HIF-1α及其靶基因VEGF蛋白在OGD再灌注后的皮质神经元表达具有一定时间规律性,抑制ERK1/2信号通路后这两个蛋白表达均下降,提示该通路在神经元OGD后诱导HIF-1α及VEGF的调控中起重要作用.
作者：张莉；屈艺；张筱岚；杨春蕾；毛萌；母得志 刊期： 2009年第08期
目的 观察几丁糖预防腹部术后肠粘连的效果. 方法 2000年1月-2008年12月,收治再次剖腹手术患者127例,其中69例前次术中应用几丁糖(应用组),男41例,女28例,年龄13～82岁.前次手术原因:胃肠、胆道及胰腺部癌30例,弥漫性腹膜炎21例,外伤性血腹8例,粘连性肠梗阻及腹茧症6例,大肠破裂4例.58例前次术中未应用几丁糖(对照组),男34例,女24例,年龄15～84岁.前次手术原因:胃肠、胆道及胰腺部癌24例,弥漫性腹膜炎18例,外伤性血腹7例,粘连性肠梗阻及腹茧症6例,大肠破裂3例.两组患者再次手术距前次手术时间为3个月～9年. 结果 根据Phillips和仲剑平分级标准评定粘连程度:应用组获0级61例,Ⅰ级6例,Ⅱ级2例;对照组获Ⅰ级5例,Ⅱ级27例,Ⅲ级16例,Ⅳ级10例;两组比较差异有统计学意义(P<0.01). 结论 几丁糖是一种预防术后肠粘连的较理想生物材料.
作者：郭健；余亮；余生元；周国强；彭建；黄世良 刊期： 2009年第08期
目的 通过两种间歇性压力作用于兔后肢形成压力性溃疡的比较,探讨波浪床产生的渐变间歇性压力预防压力性溃疡的机制. 方法 成年日本大耳白兔12只,于两侧后肢3 cm2大小股薄肌部位随机给予渐变间歇性压力(50～160 mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)和持续性压力(100 mm Hg)作为实验组和对照组.施压2 h,去除压力30 min为1个周期,重复4个周期.在施压前及各周期去除压力间歇中的每隔10 min(0、10、20、30 min),使用双向多普勒血流探测仪和激光多普勒血流灌注成像系统探测两组后肢血流速度和创面血流灌注.施压完成后大体观察创面情况,于受压部位取材,HE染色观察;比色法测定受压肌肉组织匀浆中NO、丙二醛(maiondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量. 结果 施压前两组血流速度差异无统计学意义(P>0.05);每个周期0 min时两组血流速度均显著下降,但两组间差异无统计学意义(P>0.05);实验组于10、20、30 min时血流速度均较对照组高(P<0.05).施压前两组创面血流灌注差异无统计学意义(P>0.05),每个周期0 min时两组创面血流灌注均显著下降,但两组间差异无统计学意义(P>0.05);第1个周期10 min时,两组差异无统计学意义(P>0.05),20、30 min时实验组高于对照组(P<0.05);之后3个周期实验组创面血流灌注较对照组恢复快(P<0.05).大体观察可见实验组创面渗出较对照组少,镜下见无明显溃疡形成,皮肤附属器完整,炎性细胞浸润少;对照组皮肤存在明显溃疡,皮肤附属器缺失,较多炎性细胞浸润.两组NO、MDA及SOD含量比较,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 渐变间歇性压力可以维持组织血流灌注,减轻缺血再灌注损伤,减少细胞凋亡,预防压力性溃疡的形成.
作者：刘江辉；王维平；王科科；陈锡林；李强；戴强生；王永谦；姬忠良 刊期： 2009年第08期
目的 探讨局部应用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对动脉缺损静脉移植后内膜增生的影响. 方法 64只5月龄雄性新西兰大白兔,体重2.8～3.0 kg,随机分为A、B、C、D 4组(n=16).游离左侧颈总动脉,中间切除长约1 cm,建立动脉缺损模型.切取右侧颈外静脉3 cm,将切取的静脉远近端倒置后用9-0无损伤缝线端端吻合于动脉缺损.吻合结束后A、B、C组动物分别用经50.0、25.0、12.5 mg/mL 5-FU浸泡的脑棉(大小为12 mm×30 mm×1 mm)完全包裹移植静脉外膜,共5次,每次1 min,D组用生理盐水同法处理.分别于术后1、2、4、6周切取移植静脉,行HE、Masson染色观察移植静脉管壁组织学变化,增殖性细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组织化学染色、TUNEL标记染色观察移植静脉平滑肌细胞增殖和凋亡情况,透射电镜观察细胞超微结构变化. 结果 术后1、2、4、6周,HE染色、Masson染色、PCNA免疫组织化学染色均示A、B组移植静脉内膜增厚明显小于C、D组,术后I、2、4周A、B组增殖细胞少于C、D组.内膜厚度、内膜增生程度、管腔狭窄程度:术后1周A组分别为(12.69 ±1.68)μm、0.73±0.05、0.025 ±0.003;B组分别为(17.52 ±2.01)μm、0.86 ±0.06、0.027±0.004;C组分别为(21.92±1.85)μ、1.06 ±0.09、0.036±0.006:D组分别为(26.45±3.86)μm、1.18±0.08、0.041±0.005.术后2周A组分别为(24.61 ±2.91)μm、0.86±0.06、0.047±0.003;B组分别为(37.28 ±2.78)μm、1.17±0.09、0.060±0.004;C组分别为(46.52 ±2.25)μm,1m44 ±0.08、0.073 ±0.003:D组分别为(52.07±3.29)μm、1.45 ±0.05、0.081 ±0.006.术后4周A组分别为(61.09±6.84)μm、1.38±0.08、0.106±0.007;B组分别为(63.61±8.25)μm、1.40 ±0.07、0.107±0.010;C组分别为(80.04±7.65)μm、1.64±0.07、0.129±0.011;D组分别为(84.45 ±9.39)μm、1.68 ±0.10、0.139±0.014.术后6周A组分别为(65.27±5.25)μm、1.46±0.07、0.113±0.005;B组分别为(65.82±7.12)μm、1.45±0.05、0.112±0.011;C组分别为(84.45±9.39)μm、1.69 ±0.09、0.135±0.007;D组分别为(87.27 ±9.96)μm、1.76 ±0.05、0.140±0.012.上述指标及术后1、2、4周细胞增殖指数均为A、B组小于C、D组,且差异有统计学意义(P<0.05);术后1、2周,内膜、中膜细胞凋亡指数A、B组均大于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05).透射电镜示A、B组相对于C、D组粗面内质网、高尔基体、核糖体等合成细胞器含量明显减少. 结论 局部应用5-FU可有效抑制移植静脉内膜增生.
作者：郭明珂；张英泽；田德虎；吴啸波；陈占法；马利杰；郑占乐 刊期： 2009年第08期
目的 利用重组腺病毒载体将生长分化因子5(growth and differentiation factor 5,GDF-5)基因导入hBMSCs,研究GDF-5基因的表达和对hBMSCs成骨分化的影响. 方法 将重组腺病毒GDF-5(adenovirus GDF-5,Ad-GDF-5)[含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记]和空载腺病毒Ad-GFP进行扩增并测定滴度,并以不同滴度两种病毒感染第3代hBMSCs,干预后2 d荧光显微镜下观察GFP表达情况,RT-PCR检测GDF-5在hBMSCs中的表达.取第3代贴壁hBMSCs随机分为4组:实验组(GDF-5基因转染组)、成骨诱导组、空载组和对照组.于干预后不同时间行倒置相差显微镜观察、荧光显微镜观察、荧光定量RT-PCR、免疫荧光染色和von Kossa染色检测细胞分化情况. 结果 Ad-GDF-5滴度为1.0 × 109 pfu/mL,Ad-GFP滴度为1.2×109pfu/mL.Ad-GDF-5及Ad-GFP均能对hBMSCs有效感染,并使其表达目的 基因和GFP基因.干预后1～7 d实验组和成骨诱导组hBMSCs细胞形态及生长方式向成骨细胞转化,而对照组和空载组hBMSCs仍保持原有形态及生长方式.荧光定量RT-PCR检测示,干预后4 d实验组GDF-5基因表达明显高于其余各组(P<0.05);实验组和成骨诱导组ALP、Col Ⅰ、骨钙素基因表达均高于空载组和对照组(P<0.05),成骨诱导组Col Ⅰ基因表达高于实验组(P<0.05).干预后4 d,免疫荧光染色示成骨诱导组和实验组细胞表达并分泌Col Ⅰ,空载组和对照组细胞未见Col Ⅰ表达.干预后10 d,成骨诱导组和实验组细胞von Kossa染色为阳性,对照组和空载组为阴性. 结论 GDF.5基因可通过腺病毒载体导入hBMSCs稳定表达,并促使其成骨分化,为进一步研究这种转基因hBMSCs修复骨组织奠定了基础.
作者：程相俊；刘浩；张霆；黄巧蓉 刊期： 2009年第08期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
