杨展；刘银；张文婕；李宁秀
目的 了解循环游离DNA在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的水平以及与疗效的关系.方法 收集DLBCL患者治疗前后的血浆标本及临床资料,同步采集体检的健康人群血液标本作为对照,采用荧光染料法对循环游离DNA进行定量,分析循环游离DNA水平与患者临床特征及疗效的关系.结果 共纳入98例初诊DLBCL患者,80例健康体检者.DLBCL患者诊断时循环游离DNA水平为845.0(321.5～2 195.0) ng/mL,高于健康对照组[209.0(157.5～266.8)ng/mL](P＜0.000 1);疾病处于晚期、伴有B症状、乳酸脱氢酶(LDH)升高以及国际预后指数(IPI)评分为高风险的患者其血浆循环游离DNA水平更高(P＜0.05).化疗后获得完全缓解或部分缓解的患者其循环游离DNA水平较化疗前降低,且低于未缓解患者(P＜0.001);完全缓解患者循环游离DNA水平较部分缓解患者降低(P＜0.001);与健康对照组相比,缓解后的血浆循环游离DNA水平仍升高(P＜0.05).缓解后复发的患者其循环游离DNA水平再次明显升高.结论 循环游离DNA的定量检测对DLBCL患者的疗效判断以及疾病监测具有重要价值.
作者：李茂；徐娟；曹迪；蒋昱；徐才刚 刊期： 2018年第01期
目的 评价支气管肺泡灌洗液(BALF)半乳甘露聚糖(GM)质量浓度对侵袭性肺曲霉病的诊断价值.方法 参照欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协作组(EORTC/IFICG)和美国真菌病研究组(MSG)标准、美国感染病学会(IDSA)指南,将我校华西医院295例高危感染侵袭性肺曲霉病(IPA)患者分为IPA确诊组(42例)、临床诊断组(68例)、拟诊组(61例)和排除组(124例).采用酶联免疫吸附法试剂盒检测患者BALF中GM质量浓度(BALF GM试验)、血清中GM的质量浓度(血清GM试验),以临床确诊和临床诊断侵袭性肺真菌感染(invasive pulmonary fungal inffection,IPFI)为金标准(+),以排除为金标准(一),以GM试验中GM值≥拟定的GM阈值为诊断性试验阳性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),了解BALF GM检测在不同阈值下对IPFI的诊断效率,以约登指数大确定本研究BALF GM的佳诊断点.结果 以BALF GM结果做ROC曲线,曲线下面积为0.932,当BALF GM值为1.5 ng/mL时,以此为值诊断点,其敏感性为87.5％,特异性96.7％,阳性预测值为87.5％,阴性预测值为96.7％.BALF GM值和血清GM值均为确诊组＞临床诊断组＞排除组,差异有统计学意义(P＜0.05);血清GM阈值以0.5 ng/mL为临界值,BALF的GM阈值以1.5 ng/mL为临界值,计算阳性率,发现BALF GM在确诊组、临床诊断组的阳性率高于血清组(P＜0.05);并且血清GM中存在较高的假阳性及假阴性.结论 测定BALF的GM浓度具有快速、准确、高灵敏度和特异性的优点,有助于IPA的早期诊断.
作者：邓劲；吴思颖；刘雅；马莹；谢轶；陈知行；戴仲秋；邓杰伦；康梅 刊期： 2018年第01期
目的 研究CYP2D6基因多态性对国产磷酸二甲啡烷片在中国健康人体内药代动力学的影响.方法 采用PCR方法对12例健康受试者CYP2D6* 10基因型进行分组.12例受试者在两个研究周期分别单次及连续口服20 mg磷酸二甲啡烷片.给药后不同时间点采集血样,高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)法检测二甲啡烷血药浓度,计算药代动力学参数.结果 12例受试者中,CYP2D6* 10 CC型2例,CYP2D6* 10 CT型4例,CYP2D6* 10 TT型6例.与CYP2D6* 10 CC和CYP2D6* 10 CT基因型相比,CYP2D6* 10 TT基因型受试者的峰浓度(Cmax)和药时曲线下面积(AUC)增加,表观分布容积(V/F)和清除率(Cl/F)降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CYP2D6* 10基因多态性影响国产磷酸二甲啡烷片在中国健康人的药代动力学特征.
作者：罗柱；余勤；王颖；向瑾；苗佳 刊期： 2018年第01期
目的 总结分析感染性心内膜炎培养阳性病例的临床特点,为临床合理诊治提供依据.方法 收集2008年1月至2015年8月住院的符合Duke标准且培养阳性的157例感染性心内膜炎患者的临床资料进行回顾性分析.结果 157例患者平均发病年龄为40.85岁,101例(64.3％)存在各种基础心脏病,其中以先天性心脏病为主[44例(28.0％)],风湿性心脏病15例(9.6％).临床表现以贫血(147例,93.6％)、发热(137例,87.3％)、心脏杂音(120例,76.4％)为主.12例(7.6％)经胸壁心脏超声(TTE)未发现赘生物而经食管心脏超声(TEE)发现赘生物.链球菌感染76例(48.4％)居首位(其中草绿色链球菌70例),其次为葡萄球菌感染33例(21.0％)(其中金黄色葡萄球菌18例,11.5％).所有患者均给予抗菌药物治疗.85例(54.1％)患者接受了手术治疗,其中72例进行了换瓣手术.27例患者痊愈出院,88例患者显效,38例患者无效,4例患者死亡.其中手术组疗效优于非手术组(P＜0.05).结论 感染性心内膜炎的特点包括发病年龄较往年增大,基础疾病以先天性心脏病为主,发热仍是主要的临床表现之一,草绿色链球菌是常见的病原体.外科手术治疗可有效改善患者预后.
作者：赵菲菲；陆杨；叶慧；钟册俊；黄亮；吕晓菊 刊期： 2018年第01期
目的 研究石榴叶提取物(pomegranate leaves extract,PLE)对前列腺癌细胞增殖、凋亡及转移能力的影响.方法 采用MTT法检测不同质量浓度PLE(终质量浓度分别为12.5、25、50、100、200 μg/mL)干预作用不同时间(24、48、72 h)对前列腺癌细胞TRAMP-C1、DU145、PC3增殖的影响,克隆形成实验验证PLE对DU145、PC3细胞增殖的长期影响.PLE干预PC3细胞48 h后,Hoechst-33258染色观察细胞核内染色质变化,流式细胞术检测细胞凋亡率变化,细胞划痕实验测试细胞迁移运动能力的变化.结果 与对照组比较,PLE在12.5～200 μg/mL范围内对TRAMP-C1、DU145、PC3细胞增殖具有抑制作用(P＜0.05);PLE在6.25～100 μg/mL范围内使DU145和PC3集落形成数明显减少(P＜0.01).PLE干预48 h后,PC3出现细胞核断裂、产生凋亡小体的现象,随着PLE质量浓度增大,凋亡率逐渐上升(P＜0.05),同时PC3细胞向划痕区域迁移生长的能力比对照组低(P＜0.01).结论 PLE能抑制前列腺癌细胞增殖,同时促进PC3细胞凋亡,减弱其迁移能力.
作者：邓远乐；李亚丽；郑婷婷；户明星；叶庭洪；谢永美；阴文娅 刊期： 2018年第01期
目的 用壳聚糖及胶原这两种可降解生物材料,制备能用于131I标记的放射性核素微球并探究其对肝癌的治疗效果.方法 以Ⅰ型胶原蛋白和壳聚糖为主要材料,戊二醛为交联剂,利用乳化交联法制备胶原-壳聚糖复合微球.电镜下观察微球表征,测量并统计微球的粒径.通过氯胺T法对微球进行131I标记,计算标记率.等量1a1I-微球分别置于PBS和人血清中192 h,探究其体外稳定性.BALB/C裸鼠皮下一次性注射人肝癌细胞HepG2约106个,构建裸鼠人肝癌细胞模型.28d后,131I-微球、空白微球、PBS分别一次性注入荷人肝癌裸鼠模型的皮下瘤中(每组5只),治疗7d后处死裸鼠.取血和心、肺、肝、脾、胃、小肠、肾、肌肉、脑、骨、甲状腺、皮下肝癌组织检测标记微球在裸鼠体内的分布,同时对皮下肝癌组织进行组织病理学HE染色,检测标记微球对肝癌细胞的杀伤效果.结果 本研究成功制得胶原-壳聚糖微球,电镜显示微球成球性好,表面光滑,粒径较均匀,平均粒径为(5.1±1.2) μm.其131I标记率为86.10％,置于PBS及血清192 h后,碘标记率分别为92.00％、83.00％,131I-微球依然保持高稳定性.治疗7d后裸鼠体内分布实验显示放射性主要集中在皮下肿瘤组织,其他组织几乎没有放射性计数.皮下肿瘤组织病理切片显示PBS组见大量肝癌细胞,标记微球后周围的肝癌细胞大量死亡,空白微球组中微球周围仅有少量的炎性细胞,未引起局部强烈的免疫反应.后两组微球均未见明显降解.结论 本研究制得的胶原-壳聚糖具有很高的131I标记率、体内外稳定性及良好的肿瘤杀伤效果.
作者：庞富文；蔡华伟；李玉豪；张文杰；李林 刊期： 2018年第01期
目的 研究糖尿病前期及2型糖尿病(T2DM)患者的血尿酸(SUA)水平与胰岛功能的关系.方法 纳入受试者4 112例,根据口服葡萄糖耐量试验(OGTT)将受试者分为3组:正常糖调节组(NGR) 493例、糖调节受损组(IGR)1 251例和T2DM组2 368例,分别测定3组SUA、空腹胰岛素(FIns)、餐后2h胰岛素(2 h-Ins)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA IR),比较3组间SUA、胰岛素水平及HOMA-IR的差异;进一步对不同性别的SUA水平进行分层,比较各分层组间胰岛功能;通过双变量关联性分析IGR患者中SUA与胰岛功能异常的相关性.结果 IGR组SUA水平高于NGR及T2DM组(P＜0.000 1),同时IGR组2 h Ins水平高于NGR组及T2DM组(P＜0.0001);T2DM组FIns、HOMA-IR及糖化血红蛋白(HbA1c)水平高于NGR及IGR组(P＜0.000 1).对SUA水平分层分析发现,在男性不同SUA水平组,2 h-Ins水平在IGR组高,而HOMA-IR及HbA1c在T2DM组高.在女性不同SUA水平组,均是2 h-Ins水平在IGR组高,而FIns、HOMA-IR及HbA1c在T2DM组高.在男性和女性各SUA分组中,FIns及2 h-Ins随SUA水平的增高呈上升趋势.HOMA-IR在各SUA水平分组中,也随SUA增高呈上升趋势,且T2DM组高.在相关性分析中,IGR组及T2DM组的FIns、2 h-Ins及HOMA-IR均与SUA有相关性,而HbA1c仅在T2DM组与SUA呈负相关.结论 SUA水平可能与糖尿病前期患者胰岛功能异常相关,因此SUA水平的检测对评估糖尿病前期患者进展为T2DM有潜在的应用价值.
作者：吴伊恬；何訸；王霞；张玫；安振梅；黄亨建 刊期： 2018年第01期
目的 研究转铁蛋白(Tf)基因多态性对毛细管电泳检测血清糖缺失性转铁蛋白(CDT)的影响,探讨其临床应用价值.方法 选择51例健康体检者,17例非酒精性肝病者,65例酗酒者作为研究对象,均为汉族成年男性.首先采用毛细管电泳(CE)获取样本的CDT电泳图,选取会影响毛细管电泳对血清中CDT含量检测并且在中国人群中较为常见的Tf基因变异体:Tf-Dchi(A＞G)、Tf-D1 (A＞G)与Tf-B2 (G＞A),应用高分辨熔解曲线(HRM)初步检测所有标本的基因型,对HRM筛选出的样本进行测序验证.结果 133例标本经毛细管电泳后显示:127例峰分离良好,6例未能完全分离(健康组2例,非酒精性肝病3例,酗酒组1例),导致所得CDT结果不可信.133例样本经HRM分析,可疑突变样本经测序确认后,分别检出3例Tf-Dchi (A＞G)杂合突变型,0例Tf-D1 (A＞G)突变型,0例Tf-B2 (G＞A)突变型,其余3例均为C型.Tf-Dchi、Tf-D1、T产B2突变型在被检测人群中出现概率分别为2.3％(3/133),0,0.结论 Tf基因多态性中Tf-Dchi型变异体会导致毛细管电泳中Tf异构体分离不佳,影响检测准确性.
作者：陆杨；李静；何英；黄志刚；晏青；姚傲；郭琴；贾成瑶；干伟 刊期： 2018年第01期
目的 检测胃癌组织中轴蛋白(AXIN)和结肠癌转移相关基因1(MACCl)蛋白的表达,分析其相互间及与胃癌临床病理参数以及预后的关系.方法 采用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测100例胃癌组织(胃癌组)和60例正常胃黏膜组织(对照组,胃癌患者手术切除标本的切缘组织,距离胃癌肿块＞5.0crn,确认无癌细胞)中AXIN和MACC1蛋白的表达.结果 在胃癌组织中AXIN和MACC1蛋白阳性表达率分别为37.0％和58.0％,对照组中AXIN和MACC1蛋白表达的阳性率分别为83.3％和6.7％,其表达差异均有统计学意义(P＜0.05).AXIN和MACC1在胃癌组织中的表达均与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移以及不同Duke分期等有关(P＜0.05),且AXIN蛋白表达的阳性率与MACC1蛋白表达的阳性率之间呈负相关(r=-0.355,P＜0.001).Kaplan-Meier法生存分析显示,AXIN和MACC1蛋白表达阳性组与阴性组之间的5年生存率差异均有统计学意义(P均＜0.001).Cox多因素分析显示,AXIN的阴性表达和MACC1的阳性表达及Duke分期(Ⅲ～Ⅳ期)是影响胃癌患者预后的独立危险因素.结论 AXIN和MACC1蛋白的表达与胃癌患者的预后有关,参与了胃癌的侵袭及转移.
作者：朱博；王丹娜；龚晓萌；俞岚；武世伍；陶仪声 刊期： 2018年第01期
目的 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中伏立康唑的方法,并进行伏立康唑片生物等效性研究.方法 采用双周期随机交叉自身对照试验设计,48例健康男性受试者分别单次空腹口服两种伏立康唑片200 mg,采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中伏立康唑质量浓度,以WinNonlin(R) 6.1软件计算主要药动学参数,并评价两种伏立康唑片的生物等效性.结果 伏立康唑标准曲线范围均为1～5 000 ng/mL,日内及日间精密度[相对标准偏差(RSD)]均小于11％,准确度在100.00％～109.73％之间,以内标基质效应校准后的伏立康唑基质效应RSD小于15％,萃取回收率大于50％,各项稳定性考察结果合格.伏立康唑峰浓度(Cmax)和药-时曲线下面积(A UC0-t 、A UC0-∞)的90％置信区间在80.00％～125.00％等效区间之内,受试制剂与参比制剂间达峰时间(Tmax)差异无统计学意义(P＞0.05).结论 所建立的HPLC-MS/MS方法可用于人血浆中伏立康唑质量浓度的测定,伏立康唑片受试制剂与参比制剂生物等效.
作者：向瑾；余勤；梁茂植；秦永平；南峰 刊期： 2018年第01期
目的 探讨老年脓毒症患者远期病死率及生活质量的影响因素.方法 纳入重症监护病房(ICU)内年龄≥60岁的脓毒症患者238例,转出ICU 1年后进行电话随访,统计院内病死率及1年累计病死率;采用单因素及多因素分析影响患者1年病死率的危险因素,采用欧洲五维健康量表(EQ5D)进行生活质量的评估,单因素及多因素分析影响远期生活质量的因素.结果 238例老年脓毒症患者住院期间共有58例(24.4％)患者死亡,1年累计病死率为59.7％(142例).单因素分析显示急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)、脓毒症、真菌感染、入ICU 24 h内拔管以及使用血管活性药物、连续性肾脏替代治疗(CRRT)、机械通气时间与患者1年病死结局相关,多因素Cox回归分析提示,APACHEⅡ评分升高、使用CRRT、存在真菌感染是预测患者1年病死结局的独立危险因素;生活质量评估的单因素分析显示:患者APACHEⅡ评分、腹腔感染、住院时间、24 h内气管导管是否拔除是影响远期生活质量的因素,而多因素logistic回归分析显示:入ICU 24 h拔管对1年后的生活质量起保护作用,住院时间越长1年后的生活质量越差.结论 老年脓毒症患者1年病死率高.ICU内早期拔除气管内导管及住院时间是其远期生活质量的预测因素.
作者：曹兴；廖雪莲；贺小丽；谢志超；陆枚竹；康焰 刊期： 2018年第01期
目的 研究参附注射液减轻紫杉醇外周神经毒性的作用,探讨其可能的作用机制.方法 28只成年雄性Wister大鼠均分为4组(n=7):空白对照组、紫杉醇组、紫杉醇+参附低剂量组、紫杉醇+参附高剂量组.除空白对照组外,各组大鼠腹腔注射紫杉醇8 mg/kg,每4日一次,共注射4次.于实验第1天起,紫杉醇+参附低、高剂量组每日腹腔注射参附注射液(4 mL/kg、8 mL/kg),共21 d;空白对照组于实验第1天起,每日子等容量生理盐水腹腔注射,共21 d.分别于紫杉醇首次注射前(0 d),首次注射后6d、14d测定机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);于第22天测定血清中神经生长因子(NGF)值后处死大鼠,用透射电镜观察坐骨神经超微结构.结果 紫杉醇组14 d时,大鼠MWT和TWL值较0d时及同期空白对照组升高(P＜0.05);与同期紫杉醇组相比,参附低、高剂量组MWT和TWL值下降,且与参附高剂量组的差异有统计学意义(P＜0.05);与同期空白对照组相比,参附低、高剂量组MWT和TWL值均无明显升高(P＞0.05).与空白对照组相比较,紫杉醇组NGF值下降明显(P＜0.05),参附低、高剂量组NGF值均较紫杉醇组升高,高剂量组升高明显(P＜0.05).与空白对照组比较,紫杉醇组大鼠坐骨神经纤维结构普遍破坏,髓鞘肿胀、碎裂、空泡化,雪旺氏细胞中内质网肿胀,基质结构紊乱,参附低剂量组破坏程度较紫杉醇组轻,参附高剂量组神经纤维结构较完整.结论 参附注射液具有减轻紫杉醇外周神经毒性的作用,其机制可能与促进血清中NGF的表达有关.
作者：熊绍权；邹晓玲；郑巧；晋帅；谢美；王莉娟；宋婷婷；何成诗；万里 刊期： 2018年第01期
目的 分析儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的分子遗传学改变与临床特征的关系.方法 收集并分析初诊ALL患儿的临床及实验室资料,所有患儿均完善骨髓细胞学、免疫分型、染色体核型分析并利用多重巢式RT-PCR检测29种白血病基因,检测为阳性者采用split-out RT-PCR验证.结果 纳入255例ALL,其中男性153例,女性102例,平均年龄(63.07±2.67)月.共104例检出白血病基因(阳性率40.78％),包括ETV6/RUNX1基因42例、E2A/PBX1基因17例、BCR/ABL基因15例、MLL基因16例、SIL/TAL1基因5例、HOX 11基因6例、EVI1基因4例、FL T3/ITD基因1例及SET/CAN基因1例.T-ALL基因检出率低于B-ALL(32.26％ vs.41.96％,P＜0.05);ETV6/RUNX1、BCR/ABL基因C-B-ALL多见,E2A/PBX1和MLL基因分别多见于pre-B-ALL和pro-B-ALL.B-ALL中,BCR/ABL基因阳性患儿白细胞计数高(P＜0.05);白血病融合基因在各个年龄组中的阳性率不同:＜1岁组MLL基因阳性率(62.50％)高(P＜0.05);1～10岁组ETV6/RUNX1基因阳性率(21.13％)高(P＜0.05);＞10岁组BCR/ABL基因阳性率(22.73％)高(P＜0.05);＞10岁组E2A/PBX1基因阳性率(18.18％)高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 T-ALL基因检出率较低,提示T-ALL可能需要其它方法进行分子遗传学分型.B-ALL不同年龄组分子遗传学改变存在差异,可能是不同年龄儿童B-ALL化疗效果存在差异的原因之一.
作者：邓俊琳；温贤浩；郭玉霞；管贤敏；宪莹；于洁；肖剑文 刊期： 2018年第01期
病例1,52岁女性,因慢性肾功能不全进展至尿毒症期于2012～2013年维持性血液透析1年,并于2013年进行同种异体肾移植术,术后1年出现肝功能异常并呈进行性加重,查肝肾功能:谷丙转氨酶(ALT) 241 IU/L、谷草转氨酶(AST) 151 IU/L、肌酐80 μmol/L,完善HCV-RNA为4.8×106拷贝/mL,鉴于干扰素可能带来的不良反应,未行抗病毒治疗.
作者：杨国丽；雷学忠 刊期： 2018年第01期
目的 应用经食管超声心动图(TEE)和血流向量成像(VFM)技术研究非瓣膜性心房颤动(简称房颤)患者左心耳流场向量、涡流及能量损耗(EL)的特点.方法 选取接受TEE检查的非瓣膜性房颤患者35例,包括阵发性房颤组20例和持续性房颤组15例,对照组为同期接受TEE检查的窦性心律者12例,采用VFM技术分析不同心律状态下左心耳的血流动力学变化.结果 ①房颤组与窦性心律组相比,心率、左房内径、左心耳内径及血流速度的差异有统计学意义(P＜0.05).②窦性心律组及阵发性房颤组收缩早期和舒张晚期左心耳向量分布规则均匀,收缩晚期和舒张早期向量稀疏、紊乱;持续性房颤组多数于整个心动周期出现规则均匀的向量,但向量方向持续变化.③窦性心律组及阵发性房颤组舒张晚期观察到左心耳开口处的小涡流.④窦性心律组和阵发性房颤组左心耳流场EL于收缩早期及舒张晚期出现峰值,持续性房颤组左心耳流场EL多数在各时相均维持较高值.结论 VFM技术可以清晰显示不同心律状态下左心耳的流场特点,为评估房颤患者左心耳血流动力学提供了一种新方法.
作者：蔡宇燕；魏薪；张晓玲；刘古月；李茜；唐红 刊期： 2018年第01期
目的 探讨生物型同种异体骨-假体复合物(allograft-prosthetic composite,APC)重建股骨近端肿瘤切除后骨缺损的手术方法和中期疗效.方法 收集2007～2011年在我科接受股骨近端肿瘤切除、生物型APC重建的15例患者资料及病理结果;术后第1、3、6、9、12月及之后每半年对患者进行影像学检查及功能随访评估.影像学评估主要包括骨-骨界面愈合情况及大转子骨吸收情况;采用骨与软组织肿瘤协会评分(MSTS)及Harris髋关节评分(HHS)评估患者关节功能,采用查体评估患者外展肌肌力.结果 本组15例患者中,男7例,女8例,平均年龄25.1岁(17～56岁);平均随访时间32.8月(18～48月);病理学诊断:骨巨细胞瘤4例,骨肉瘤3例,软骨肉瘤3例,恶性纤维组织细胞肿瘤2例,骨母细胞瘤2例,尤文氏肉瘤1例.15例患者异体骨-宿主骨界面均获骨性愈合,愈合时间为5～9月;至末次随访时,未出现感染、异体骨-宿主骨愈合处骨吸收、髋关节脱位、异体骨超敏反应、髋臼磨损及肿瘤复发和转移等并发症.3例患者术中出现假体周围骨折,以钢丝环扎术固定.术后6例患者出现大转子骨吸收.15例患者平均MSTS评分和HHS评分,术前为11.3分(7～15分)和47.3分(40.3～58.5分),末次随访时为26.1分(24～29分)和80.1分(66.2～92.7分).结论 生物型APC应适用于年龄轻、预期生存时间长及术后功能要求高的股骨近端骨肿瘤患者.
作者：王延岭；闵理；段宏；周勇；张闻力；石锐；罗翼；屠重棋 刊期： 2018年第01期
目的 构建并鉴定含有铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)外膜蛋白I(OprI)基因与两歧双歧杆菌(Bi idobacterium bi idum,Bb)疫苗(Bb-pGEX-OprI),并研究该疫苗对小鼠Pa感染的保护作用.方法 PCR扩增OprI抗原编码基因并将其定向克隆至pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-OprI,将pGEX-OprI电穿孔转化Bb,构建Bb-pGEX-OprI疫苗,进行双酶切、PCR和测序鉴定后,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分别分析并鉴定表达产物.21只小鼠随机分为3组,分别灌胃接种Bb-pGEX-OprI疫苗、空载体疫苗(Bb-pGEX-1λT)和Bb.首次免疫后4周用PA01株攻击.攻击后2周处死小鼠取肺组织,计数肺组织的细菌菌落数.免疫前、首次免疫后4周和PA01株攻击后2周采小鼠静脉血,常规ELISA检测血清IgG及其亚类和IgE.结果 PCR成功扩增出194 bp的OprI抗原编码基因;双酶切、PCR和测序证实OprI基因成功克隆入pGEX-1λT中,并且pGEX-OprI成功转化Bb,构建为Bb-pGEX-OprI疫苗;SDS-PAGE显示Bb-pGEX-OprI表达相对分子质量约32×103的OprI-谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白;Western blot证实融合蛋白能被Pa感染的鼠血清特异性识别.Bb-pGEX-OprI疫苗组小鼠肺组织的细菌菌落数低于Bb-pGEX-1λT组和Bb组(P＜0.01),Bb-pGEX-OprI疫苗组小鼠血清IgG、IgG2b、IgG3和IgE水平在首次免疫后4周和攻击后2周依次升高,相同时间点Bb-pGEX-OprI疫苗组小鼠血清抗体水平均高于Bb-pGEX-1λT和Bb组(P＜0.01或P＜0.05).结论 成功构建了重组疫苗Bb-pGEX-OprI,其在小鼠抗Pa感染过程中可产生有效的体液免疫应答.
作者：刘潇；李文桂；罗广旭 刊期： 2018年第01期
目的 探究青少年药物难治性癫痫经切除性外科治疗的疗效及术后癫痫未控制的危险因素.方法 回顾性分析2005年1月至2014年1月间接受切除性手术治疗的152例18岁以下药物难治性癫痫病例.分析患者的临床资料(性别、年龄、发病年龄、手术间期、发作类型、脑电图、影像学、皮层脑电图、致痫灶切除程度等),进行多因素logistic回归分析.结果 152例患者术后门诊随访(2.8±0.1)年,119例患者术后完全缓解,占78.3％.多因素分析指出致痫灶部分切除[标准偏回归系数(B) =0.656,比值比(OR)=134.400,P＜0.001,95％可信区间(CI):14.000～250.240]、功能区受累(B=0.194,OR=21.254,P=0.003,95％CI:2.189～41.286)和有致痫危险因素(B=0.118,OR=7.333,P=0.028,95％CI:1.199～25.339)是术后癫痫未控制的危险因素.结论 青少年药物难治性癫痫经切除性手术治疗能取得良好的疗效,致痫灶部分切除是造成术后癫痫未控制的主要危险因素.
作者：黄军；周良学；雷町 刊期： 2018年第01期
目的 探讨侵袭性癌(IBC)癌组织中天冬氨酰-β-羟化酶基因(ASPH) mRNA的表达和基因启动子区域甲基化与临床病理参数的关系.方法 收集91例IBC患者癌组织与配对的癌旁正常组织(MNT),使用逆转录实时荧光定量PCR(qRT PCR)技术检测ASPH基因mRNA在组织中的表达,使用甲基化特异性PCR(MSP)法检测ASPH基因启动子区CpG岛甲基化状态,进一步分别分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系.结果 在IBC中ASPH mRNA的表达量高于MNT(P＜0.001),ASPH mRNA的表达与乳腺癌中的标志物E-cadherin阳性表达有关(r=0.195,P=0.041).ASPH基因在癌组织与MNT中的启动子甲基化阳性率分别为47.3％(43/91)和89.0％(81/91),差异有统计学意义(P＜0.05).基因启动子甲基化率与E-cadherin和肿瘤大小相关(P＜0.05).结论 ASPH基因的表达及启动子甲基化率可能参与了乳腺癌的发生发展.
作者：黎川；李宏江；陈璩；张雪梅；李昌龙 刊期： 2018年第01期
目的 建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila (A.muciniphila)的方法,为A.muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持.方法 建立SYBR Green Ⅰ荧光PCR定量检测A.muciniphila的方法,利用A.muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测.结果 标准曲线线性关系良好(R2=0.999);方法灵敏度可达到1.0×102 CFU/mL;该方法可特异性扩增A.muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2％;30例人粪便样品中A.muciniphila阳性率为73％,Ct值为17.40～31.77.结论 本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A.muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测.
作者：秦倩倩；张玲；王国庆 刊期： 2018年第01期
四川大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
