王柯;万群;葛林;于晓红;李鸣;郭云;胡敏;马新颖;崔文静;何方
目的 研究Csm4蛋白在重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)中的表达及其影响胞内存活的机制.方法 PCR扩增Csm4基因,构建重组pMV261-Csm4穿梭表达质粒,将重组质粒和空白质粒电穿孔进MS生成重组菌MS_Csm4和对照重组菌MS_V,采用Western blot对重组菌Csm4蛋白表达进行检测.体外培养观察MS Csm4和MS_V生长曲线,并检测活性氮、活性氧环境下的集落形成单位(CFU)变化.MS_Csm4和MS_V重组菌感染人源巨噬细胞THP-1,计数CFU反映胞内存活,实时荧光定量PCR检测诱导性一氧化氮合酶基因(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达.硝酸还原酶法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放指标.结果 Csm4蛋白在MS Csm4中成功表达,且其表达不影响MS_Csm4的生长情况;MS_Csm4在体外活性氮、氧环境中CFU下降,与MS_V相比,差异有统计学意义(P<0.05);重组菌MS_Csm4作用于THP-1细胞后诱导iNOS表达上调,促进NO的释放以及减少胞内生存,与MS_V相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 重组菌MS_Csm4不能耐受体外活性氮、氧压力环境,可诱导宿主细胞iNOS表达上调,促进NO释放,从而影响其胞内生存能力.
作者:翟小倩;鲍朗;罗涛;彭璇;孙长峰;杨国平 刊期: 2018年第03期
目的 评价原发性醛固酮增多症的诊断性试验的临床应用价值,探讨临床诊断醛固酮瘤的佳指标及其切点值.方法 回顾性收集167例高血压患者的临床资料,分为醛固酮瘤组(93例)、原发性高血压组(74例),并比较两组间临床特征的差异.对卧位醛固酮,盐水负荷试验、卡托普利试验后醛固酮绝对值和下降率5项指标进行受试者工作特征(ROC)曲线绘制并比较其曲线下面积(AUC).结果 与原发性高血压组比较,醛固酮瘤组卧位醛固酮水平更高,高血压3级患者的比例更高,血钾均值更低,体位改变和盐水负荷后醛固酮变化率更小(P<0.05).卡托普利试验后醛固酮下降率两组间差异无统计学意义.于167例高血压患者中诊断醛固酮瘤,卧位醛固酮的AUC为0.975,盐水负荷试验后醛固酮绝对值和下降率的AUC为0.984和0.680(P<0.001),卡托普利试验后醛固酮绝对值和下降率的AUC为0.949和0.538(P<0.001).以卧位醛固酮/肾素比值(ARR)>30且卧位醛固酮>17.8 ng/dL为初筛阳性条件时,敏感性96.8%,特异性90.5%.以14.59 ng/dL为盐水负荷试验后醛固酮切点值时,诊断醛固酮瘤的敏感性为90.2%、特异性为97.3%.以19.11 ng/dL为卡托普利试验后醛固酮切点值时,敏感性为88.8%、特异性为95.9%.结论 以卧位ARR> 30加卧位醛固酮>17.8 ng/dL为初筛阳性条件,具有较高的敏感性和特异性.盐水负荷和卡托普利试验后醛固酮水平绝对值是确诊醛固酮瘤更合理有效的指标.
作者:胡枫湫;黄娟;黄慧 刊期: 2018年第03期
目的 探讨抑癌基因p16在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)组织中的表达与临床病理参数间的联系,进一步研究DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在人肺癌A549细胞中对p16表达的影响.方法 采用免疫组化SP法检测76例NSCLC组织及其癌旁正常组织中p16蛋白的表达情况,并分析不同病理参数癌组织中p16蛋白表达的差异;采用MSP法检测不同浓度(0~16 μmol/L) 5-Aza-CdR处理后的A549细胞中p16基因启动子区DNA的甲基化状态,并采用Western blot法检测5-Aza-CdR对A549细胞中p16表达的影响.结果 76例NSCLC组织中,32例(42.11%)p16蛋白表达阳性,低于癌旁正常组织(59例,77.63%)中阳性表达(P<0.05);不同病理组织分级、肿瘤分化程度、临床TNM分期及有无淋巴结转移的NSCLC组织中p16的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);在A549细胞中p16蛋白表达和非甲基化产物均呈低表达状态,5-Aza-CdR作用后,p16蛋白和其非甲基化产物表达均上调,且随着5-Aza-CdR浓度的升高呈增多趋势.结论 p16在鳞癌、低分化、有淋巴结转移及Ⅲ~Ⅳ期NSCLC组织中低表达,提示其失活可能与NSCLC的进一步进展有关,5-Aza-CdR可诱导A549细胞中p16蛋白和非甲基化产物表达增加.
作者:华丛书;马冬春;陈海;张朝东;王文生;丁翔;赵健;吴峰 刊期: 2018年第03期
目的 观察苯丙氨酸对小鼠成肌细胞系C2C12葡萄糖摄取能力的影响,以及刺激后细胞内哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70S6K信号通路分子的变化.方法 体外培养C2C12细胞,分化诱导为多核的肌管细胞后进行饥饿处理,然后分别用不同浓度苯丙氨酸(1.25、2.5、5、10、20 mmol/L)处理细胞,以KRB平衡液作为对照.通过检测2-NBDG评价细胞葡萄糖摄取能力.用Western blot方法检测细胞内mTOR、p70S6K、胰岛素受体底物(IRS)-I、蛋白激酶B(Akt)的表达情况.结果 与KRB平衡液对照相比,5 mmol/L亮氨酸使C2C12细胞的葡萄糖摄取能力下降了约30%(P=0.001),5 mmol/L苯丙氨酸使C2C12细胞摄取葡萄糖的能力上升了约40%(P<0.01),且苯丙氨酸的这种促进作用随浓度增大有逐渐增强的趋势.苯丙氨酸对细胞内mTOR Ser2448磷酸化水平无明显影响.除1.25 mmol/L外,其它浓度苯丙氨酸均能抑制p70S6K Thr389的表达.亮氨酸使IRS-1Ser636/639磷酸化水平表达增高(P<0.01),除1.25 mmol/L外,其它浓度的苯丙氨酸均有抑制IRS-1 Ser636/639表达的趋势,但与对照相比差异无统计学意义(P=0.381).高浓度短时间的苯丙氨酸刺激对C2C12细胞内的AktSer473表达无明显影响.结论 苯丙氨酸可能通过减少p70S6K的磷酸化,继而减少p70S6K对IRS-1的刺激作用而使细胞葡萄糖摄取能力增强.但苯丙氨酸对mTOR-p70S6K通路的抑制作用不通过Akt的激活.
作者:杜蓉;杜涓;田浩明;陈涛;高赟;龙洋;刘丹 刊期: 2018年第03期
目的 初步探讨白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)在诱导卵巢癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)中的作用,为进一步深入研究卵巢癌恶性转移的分子机理奠定基础.方法 实时无标记细胞技术(RTCA)定量分析外源性人重组IL-8诱导卵巢癌细胞株SKOV3的动态迁移情况;Western blot检测IL-8 (100 ng/mL)诱导处理SKOV3细胞48 h后EMT相关蛋白的表达变化情况;采用Transwell分析经IL-8诱导处理后的SKOV3细胞侵袭情况.结果 RTCA定量结果显示,IL-8处理SKOV3细胞48 h后细胞的迁移达到平台期HL-8可使SKOV3细胞的上皮细胞标志物E-eadherin下调,而间质细胞标志物Vimentin和snail的表达上调,促进卵巢癌细胞发生EMT,SKOV3细胞的侵袭能力明显增强(P<0.05).结论 IL-8可促使卵巢癌细胞获得EMT特性,从而增强其侵袭、迁移能力.
作者:王世超;付惠惠;文继锐;赵志伟;聂永梅;苗娅莉;吴江 刊期: 2018年第03期
目的 制备稳定表达pSicoR-β8 shRNA的慢病毒载体系统,并评估其在新生鼠脑内RNA干扰(RNAi)效率.方法 将慢病毒表达载体pSicoR-β8 shRNA、pSicoR-对照序列与慢病毒包装质粒系统pDM2G、g/pRRE和pRSV Rev分别进行扩增及质粒酶切鉴定,然后共转染293T包装细胞株,通过293T细胞的包装和分泌以收集携带目的干扰片段的慢病毒颗粒.利用PEG-it病毒浓缩试剂进行浓缩,50%组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度.将浓缩后的慢病毒颗粒通过侧脑室注射对新生SD乳鼠中枢神经系统野生表达的整合素β8进行干扰,荧光显微镜下观察慢病毒侧脑室注射后脑组织中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,结合RT-PCR和Western blot方法检测β8mRNA和蛋白在干预后表达水平的变化,以评估RNAi效率及选择佳干预时间.结果 质粒扩增及酶切结果显示各质粒片段大小分别与质粒图谱大小一致,浓缩后测得的病毒滴度为LV-对照序列:1.0×108 PFU/mL,LV-β8 shRNA:5.0×108 PFU/mL.慢病毒侧脑室注射后1d,侧脑室周围即可观察到携带GFP的慢病毒整合到宿主细胞基因组并发出绿色荧光,注射后2d、3d和5d可在脑组织切片中观察到较强的绿色荧光.β8 mRNA表达水平在RNAi后1~3 d出现降低(P<0.05),第3天达到大抑制作用,其β8mRNA抑制率约为56%.β8蛋白表达变化趋势与β8 mRNA表达变化趋势基本一致,RNAi后第3天达到大抑制作用,其β8蛋白抑制率约为51%.结论 成功获得滴度达到体内实验要求的含有β8 shRNA的慢病毒颗粒,并具有较好的体内干扰活性,为进一步研究整合素β8在新生鼠脑组织中的生理功能奠定了基础.
作者:唐彬秩;屈艺;赵凤艳;童煜;王德健 刊期: 2018年第03期
目的 本研究旨在探索沉默基膜聚糖(lumican)对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其分子机制.方法 通过shRNA沉默肝癌细胞HepG2和MHCC97H中的lumican.通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lumican的mRNA水平,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移.蛋白印记检测lumican、MMP-9、VEGF、ERK1、JNK、p-ERK1和p-JNK蛋白水平.结果 肝癌细胞HepG2和MHCC97H中lumican的mRNA水平和蛋白质水平高于正常肝细胞L02 (P<0.01).HepG2和MHCC97H细胞中lumican shRNA组mRNA水平和蛋白质水平低于对照组(P<0.01).与scramble组相比,HepG2和MHCC97H细胞中lumican shRNA组细胞侵袭和迁移显著降低(P<0.01).HepG2和MHCC97H细胞中lumican shRNA组MMP-9和VEGF表达低于scramble组(P<0.01).与scramble组相比,HepG2和MHCC97H细胞中lumican shRNA组p-ERK1和p-JNK蛋白水平下降(P<0.01).结论 shRNA干扰lumican通过抑制ERK1/JNK通路激活减弱肝癌细胞侵袭和迁移.
作者:母齐鸣;贺伟;侯桂敏;梁勇;王刚;李春林;廖波;刘欣;叶智;卢建利;王文涛 刊期: 2018年第03期
目的 探讨即释吗啡联合缓释吗啡滴定方案的镇痛效果及患者疼痛控制满意度.方法 采用随机对照研究方法,纳入2014年7~12月的初治中重度肺癌疼痛患者88例,随机分为对照组(44例)和试验组(44例).对照组采用皮下注射即释吗啡(初始剂量:中度疼痛2 mg,重度疼痛5 mg,随后给药时间及剂量参考按常规进行剂量滴定,试验组在与对照组同样方案(剂量及用法同对照组)基础上,联合口服缓释吗啡(中度疼痛10 mg,12h,重度疼痛30 mg,12 h)进行剂量滴定(在第一次注射吗啡同时口服缓释吗啡).比较两组患者在滴定早期即滴定后2h内(包括滴定开始时、滴定后30 min、滴定后2 h)以及滴定后24 h的疼痛数字评分;比较两组滴定期间吗啡解救次数及相关护理时间以及患者的疼痛控制满意度.结果 试验组与对照组患者在性别、年龄、婚姻、吸烟、嗜酒、合并慢性病、肿瘤分期、疼痛程度、心理痛苦及焦虑抑郁状态方面差异无统计学意义(P>0.05).两组患者在入组时及滴定后30 min疼痛程度无差异(P>0.05),在滴定后2h疼痛评分试验组低于对照组(P<0.05),在滴定后24 h,两组患者疼痛评分的差异无统计学意义(P>0.05);试验组的吗啡解救次数及护理时间低于对照组(P<0.05);疼痛控制满意度方面,试验组患者在药物效果以及药物特点方面满意度高于对照组(P<0.05).结论 即释吗啡联合缓释吗啡用于肺癌中重度疼痛患者的早期疼痛缓解率优于即释吗啡,并能提高患者疼痛控制满意度.
作者:陈林;李俊英;郑儒君;余春华 刊期: 2018年第03期
目的 应用结构方程模型评价自行编制的住院患者满意度调查问卷的结构效度.方法 采用系统抽样方法,于2016年4月现场发放问卷,调查四川省某三甲医院住院患者.采用Lisrel8.70软件,应用结构方程模型评价问卷的结构效度.结果 本次调查问卷有效回收率为98.5%,共2562名住院患者纳入分析.自行编制的住院患者满意度调查问卷具有较优的结构效度,终模型拟合结果显示,x2/df=8.36,渐进残差均方和平方根(RMSEA) =0.054,残差均方和平方根(RMR)=0.021,适配度指数(GFI) =0.93,调整后GFI(AGFI) =0.91,比较适配指数(CFI) =0.98,非规准适配指数(NNFI) =0.98,简约GFI(PGFI)=0.74;外生潜变量的各条目因子载荷为0.59~0.94,AVE为0.52~0.87.结论 终模型的拟合指标均达到统计学要求,拟合效果理想,适配度良好,问卷的效度佳,可应用于三甲医院住院患者满意度评价.
作者:陈芍兵;杨薛玉;张黎;张菊英 刊期: 2018年第03期
目的 调查成都地区中老年人肠道菌群组成与其血脂、血糖代谢间的可能关系.方法 于2016年11月在成都市纳入51例中老年人,收集其血液及粪便样本,测定其血糖、血脂,使用Illumina高通量测序技术对粪便样本中肠道菌群的丰度、多样性及菌种组成进行详细分析.结果 受试中老年人粪便细菌主要为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门、放线菌门、疣微菌门.高血糖受试中老年人的粪便细菌多样性(Shannon指数)低于血糖正常的受试中老年人(P<0.05),但是Shannon指数和血脂无明显关系.在粪便细菌门水平上:变形菌门、拟杆菌门分别在高血糖的中年、老年女性受试者粪便中的比例高于血糖正常受试中年、老年女性(P<0.05).在粪便细菌属水平上:粪杆菌在高血糖受试中老年人粪便中的比例降低(P<0.05),且其丰度与血糖水平呈负相关(r=-0.278,P=0.048);普氏菌属、帕拉普氏菌属在高血脂组的比例降低(P<0.05),且均与血脂水平呈负相关(r=-0.357,P=0.10;r=-0.365,P=0.008).结论 不同血糖、血脂水平的中老年人其肠道菌群的构成和数量存在显著差异,表明肠道菌群与中老年人血糖、血脂代谢可能有着密切的关系,在中老年人血糖、血脂相关疾病的预防及治疗中可能有重要意义.
作者:王柯;万群;葛林;于晓红;李鸣;郭云;胡敏;马新颖;崔文静;何方 刊期: 2018年第03期
目的 探讨芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤的影响.方法 将系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠随机分为MRL/lpr组、MRL/lpr+地塞米松(1.5 mg/kg)组,MRL/lpr+芍药苷(20 mg/kg)组,MRL/lpr+芍药苷(40mg/kg)组,每组10只,给药7d;另取10只野生型C57BL/6小鼠作为正常对照组.第8天采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血清炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用HE染色检测肺部病理改变,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测各组小鼠肺组织中磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(P-PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(P-Akt)、磷酸化核因子κB p65 (P-NF-κBp65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(P-IκBα)蛋白的表达.结果 芍药苷能显著降低血清MDA含量;提高血清SOD、CAT、GSH-PX水平,减少血清炎症因子水平,改善肺组织病理改变,并能显著抑制P-PI3K、P-Akt、P-NF-κBp65、P-IκBα蛋白表达.结论 芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤起到保护作用.
作者:谢长好;李志军;陈琳洁;赵萍;张佳佳;白善旺;沈桐;贺文欣;王元元 刊期: 2018年第03期
目的 收集四川省肿瘤医院头颈部肿瘤患者住院病案信息数据,探讨不同缺失场景下数据缺失值通过完成者数据集法、期望-极大化法(EM)、马尔可夫链-蒙特卡洛法(MCMC)3种方法处理后的标准化住院天数对标准化住院费用对数值的回归系数估计值r的优劣.方法 运用R 3.4.1软件,采用蒙特卡洛模拟,通过设定缺失比例和缺失机制模拟不同场景的缺失数据集,运用完成者数据集法、期望-极大化法、马尔可夫链-蒙特卡洛法估计不同缺失场景的模拟数据集中标准化住院天数对标准化住院费用对数值的回归系数估计值r,并与完整数据集的回归系数估计值rc结果进行比较,从准确度(各种方法估计的r与rc比较)和精确度(各种方法的r的变异程度s)两个角度进行评价.结果 3种缺失值处理方法的优劣在不同的缺失场景中均有所差异,完全随机缺失(MCAR)和随机缺失(MAR)(1∶2)机制下,当缺失比例小于30%时3种方法的估计值r均在可接受范围(rc±0.5sc);MAR(比例=2∶1)机制任意缺失比例下3种方法的估计值r均在可接受范围内;任意缺失场景下用EM法估计的r的标准误s小,且与rc的标准误sc为接近.结论 在选择缺失值处理方法时,应该考虑数据的缺失比例和缺失机制.
作者:邱建青;周雨秋;岳廷妍;裴姣;税春燕;李晓松;张韬 刊期: 2018年第03期
目的 比较不同人工瓣膜类型(人工生物瓣和人工机械瓣)对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期及术后远期临床结局的影响.方法 回顾性分析2005年8月至2016年7月在四川大学华西医院行人工瓣膜置换术的患者的临床资料,纳入接受人工生物瓣置换的全部感染性心内膜炎合并瓣膜毁损的患者52例,平均年龄(47±18)岁,平均随访时间(6.2±3.8)年,按年龄±5岁、体质量指数±20%、病变瓣膜位置、男女比例、手术时间±1年等配对条件以1:3频数匹配接受人工机械瓣置换的同类患者156例.比较分析人工生物瓣与机械瓣对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期及远期临床结局的影响.结果 接受生物瓣置换及机械瓣置换患者的围术期死亡率分别为17.3%±2.2%和19.9%±1.8%(P=0.27).两类患者术后10年生存率分别为56.1%±5.2%和61.2%±8.1%(P=0.58),术后10年无并发症生存率分别为75.0%±3.2%和82.3%±4.4%(P=0.29).年龄≤60岁的感染性心内膜炎患者,人工生物瓣与机械瓣术后10年再手术率分别为41.4%±7.2%和30.5%±5.4%(P=0.02),而对年龄>60岁的感染性心内膜炎患者,人工生物瓣与机械瓣的术后10年再手术率分别为24.1%±8.5%和14.7%±5.7%(P=0.36).结论 人工瓣膜类型对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期死亡率及术后远期生存率无明显影响.人工机械瓣膜在年龄≤60岁感染性心内膜炎患者中术后远期再手术率相比人工生物瓣膜更低.
作者:沈嘉渝;张洪伟;范康钧;梁怀民;张尔永;胡佳 刊期: 2018年第03期
患者,女,25岁,G1P0,孕24周,因“阴道不规则出血3d”于我院就诊,2+d前门诊超声提示:胎盘附着于子宫前壁、右侧壁及后壁,覆盖面广,胎盘占据官腔2/3以上(图1),厚度:6.6 cm,成熟度:O级,胎盘下缘覆盖宫颈内口,胎盘增厚明显,几乎未见正常胎盘实质,内似为液性暗区充满细弱点状回声;检查过程中胎儿体位较固定(图2).
作者:文娟;宋清芸;罗红 刊期: 2018年第03期
目的 探讨高频超声定量评估系统性硬皮病(systemic sclerosis,SSc)患者皮肤厚度的价值,为SSc患者皮肤厚度的临床评估寻找一种客观定量、简单可行的评价方法.方法 确诊为SSc患者82例(SSc组),67例健康志愿者为对照组.对照组与SSc患者均行高频超声测量皮肤厚度,测量部位包括双侧手指、双侧前臂,胸壁,腹壁.SSc患者进行改良Rodnan皮肤评分(mRSS).比较SSc组与健康对照组年龄、性别、身高、体质量、体质量指数(BMI)、皮肤厚度有无差异,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价高频超声在SSc中的诊断效能,分析皮肤厚度与mRSS的相关性.结果 SSc组与健康对照组年龄、性别比、身高、体质量及BMI差异均无统计学意义(P>0.05).SSc组皮肤厚度在手指及前臂均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05).ROC曲线分析高频超声评估SSc皮肤厚度,在右、左手指,右、左前臂,胸、腹壁的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.938、0.905、0.608、0.586、0.398、0.321;其中,右、左手指的AUC>0.9,可用于诊断,其皮肤厚度诊断SSc阈值分别为1.35 mm、1.26 mm时,其敏感性分别为84.1%、86.6%,特异性分别为95.5%、89.6%.各检测部位mRSS评分越高,皮肤厚度值越大;皮肤mRSS评分之和(mRTSS)与皮肤厚度总和的相关性为r=0.599 (P<0.001),各部位mRSS评分与其皮肤厚度的相关性为0.400~0.623(P<0.001),相关性在腹壁低,右侧手指高.结论 高频超声能敏感反映SSc患者皮肤受累程度,其诊断SSc在手指具有较高的特异性和敏感性,高频超声有望成为评价SSc病情及治疗随访的有效定量指标.
作者:孙偲;杨裕佳;王丽芸;唐远姣;邱逦;苏白海 刊期: 2018年第03期
目的 观察砷暴露及雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)对雌、雄胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)内雌激素受体β(ERp)表达的影响.方法 孕19~20 d ICR小鼠剖腹取胎鼠,分离、纯化雌性组和雄性组胎鼠AECⅡ.四甲基亚唑蓝(MTT)法确定亚砷酸钠(NaAsO2)染毒AECⅡ细胞的剂量.将AECⅡ细胞分为以不同剂量(低、中、高)NaAsO2染毒的砷暴露组,培养24 h;另取AECⅡ细胞为联合暴露组,分别加入二甲基亚砜(DMSO)(溶剂对照组)、NaAsO25 μmol/L(单独砷染毒组)、NaAsO2(5μmol/L) +ICI182,780(1×10-4 mol/L)(砷十拮抗剂组),培养24 h;均设空白对照组(不加任何试剂).24 h后,砷暴露组行流式细胞术测凋亡率,砷暴露组、联合暴露组行实时荧光定量PCR法和Western blot检测胎鼠AECⅡ内ERβ mRNA和蛋白的表达水平.结果 AECⅡ纯度达(87.0±2.5)%.MTT法将0.5(低)、1.25(中)、5(高)μmol/L的浓度设置为染毒剂量.砷暴露组中:雌、雄中、高剂量组细胞凋亡率均高于空白对照组(P<0.05),而雌、雄各剂量组间比较差异无统计学意义.雌性中、高剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于空白对照组(P<0.05)和同剂量组雄性(P<0.05);雄性各剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义.联合暴露组中:雌性单独砷染毒组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于砷十拮抗剂组(P<0.01)及同剂量组雄性(P<0.05),且高于空白对照组和溶剂对照组(P<0.05),雄性各组间比较差异无统计学意义;雌、雄其余各组间比较差异无统计学意义.结论 砷暴露可使雌性胎鼠AECⅡ内ERβ表达上调且高于雄性,此过程可被雌激素受体拮抗剂阻断.
作者:杨梦平;车望军;程亚龄;熊林森;张浩 刊期: 2018年第03期
目的 探讨钙泵抑制剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)对体外小鼠肺成纤维细胞内钙离子(Ca2+)水平及凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)表达的影响.方法 小鼠肺成纤维细胞(L929)分为3组:空白对照组(不做处理)、转化生长因子β1(TGF-β1)组、TG组,后两组均用5 ng/mL TGF-β1诱导24 h,TG组在诱导后再用4μmol/L TG作用24 h.细胞处理48 h后,分别收集各组细胞,采用透射电子显微镜观察细胞超微结构变化,激光共聚焦显微镜观察各组细胞内Ca2+水平,免疫细胞化学方法检测caspase-3蛋白表达.结果 透射电子显微镜示,空白对照组细胞凋亡较少,TGF-β31组无明显凋亡细胞,TG组有大量成纤维细胞凋亡.TGF-β1组Ca2+水平和caspase-3蛋白水平均低于空白对照组(P<0.05),TG组细胞内Ca2+水平和caspase-3蛋白水平均较TGF-β1组、空白对照组升高(P<0.05).结论 TG可使小鼠肺成纤维细胞细胞内钙稳态失衡,增加caspase-3蛋白表达,促进细胞凋亡.
作者:闫宇;肖坤;梁晓飞;张梦柔;毛凯璇;封帆;肖永红 刊期: 2018年第03期
目的 对比分析艾滋病和非艾滋病患者隐球菌脑膜炎(CNM)的临床特点及治疗效果,为临床诊疗提供参考.方法 回顾性分析2012年1月至2017年1月四川大学华西医院收治的CNM患者共73例(非艾滋病CNM患者30例,艾滋病CNM患者43例).比较两组患者的临床表现、辅助检查结果、治疗方案及临床转归.结果 两组患者均表现头痛、发热、恶心呕吐等非特异性症状.与艾滋病CNM组相比,非艾滋病CNM组脑脊液中有核细胞及蛋白含量高(P=0.000,P=0.041),初次脑脊液墨汁染色阳性率更低(70.0% vs.93.0%,P=0.009),误诊率更高(43.3% vs.14.0%,P=0.005);住院时间更长[(112.27±105.42)d vs.(52.64±39.17) d;P<0.05];在抗真菌治疗过程中不良反应的发生率更高(80% vs.30.2%,P=0.000).而在艾滋病组中,40例患者(93%)首次确诊艾滋病并未行抗病毒治疗,治疗效果较非艾滋病CNM组差,病死率更高(30.2% vs.13.4%,P=0.000).结论 CNM诊疗困难,在不同免疫状况的人群中表现有差异,预后差,建议合并艾滋病的患者在抗病毒治疗前及时行抗真菌治疗.
作者:房晴晴;蒋维;冯萍;陈立宇 刊期: 2018年第03期
目的 通过横断面调查研究,了解脑卒中患者家庭康复状况,比较不同特征下卒中患者的康复效果.方法 采用便利抽样,选取某三甲医院康复医学中心已出院的卒中患者共计234例为研究对象,采用自制的《患者一般资料调查表》及Barthel指数评定(BI)量表、工具性日常生活活动能力(IADL)量表、移动能力评定(MRMI)量表、患者自我感受负担(SPBS)量表、照顾者负担(ZBI)量表对患者进行问卷调查.结果 患者BI得分(61.77士22.83)分,61.11%的患者日常生活轻度依赖;IADL得分(7.25±6.26)分,处于低水平;MRMI得分(28.90±10.22)分;SPBS得分(29.26±7.07)分,超过90%的患者有疾病自我负担感;ZBI得分(43.97±12.28)分.脑梗塞、男性患者各量表得分均优于脑出血、女性患者;年龄<60岁、家庭康复时间超过1年、由亲属照顾、女性照顾的脑卒中患者其家庭康复躯体功能总体优于老年、家庭康复时间少于1年、由非亲属、男性照顾的患者,但患者自我感受负担、照顾者负担无明显差异.结论 我国脑卒中患者家庭康复效果差.卒中类型、性别、年龄和家庭康复时间等对脑卒中患者家庭康复效果产生影响.
作者:刘祚燕;龙纳;倪碧玉;王凤英;吴琳娜 刊期: 2018年第03期
目的 评价腹主动脉球囊阻断术在凶险型前置胎盘患者中的应用价值.方法 回顾性分析2013年1月至2016年1月间因术前诊断凶险型前置胎盘而于四川省人民医院产科行剖官产患者的临床资料.比较实施腹主动脉球囊阻断术(球囊组,72例)与未实施此术患者(对照组,45例)在术中出血量、输血量、手术时间、术后住院天数、子宫切除率、新生儿结局等指标的差异,并对主要结局指标按是否合并胎盘植入以及胎盘主体附着部位进行分层分析.结果 在对所有患者的初步分析中,球囊组患者较对照组具有更低的术中出血量、输血量、手术前后血红蛋白水平差值(P<0.05);而子宫切除率、手术时间、术后住院天数、新生儿结局等指标差异无统计学意义;在是否合并胎盘植入情况的分层分析中,对于合并胎盘植入的凶险型前置胎盘患者,球囊组患者的术中出血量、输血量、子宫切除率更低(P<0.05);而在未合并胎盘植入的凶险型前置胎盘患者中,两组患者在上述指标差异无统计学意义.在对球囊组和对照组患者按胎盘主体不同附着部位的分层分析中发现,前壁型和非前壁型凶险前置胎盘患者的术中出血、输血量、胎盘植入发生率以及子宫切除率的差异均无统计学意义.球囊组中有5例(6.94%)发生并发症,包括1例穿刺部位血肿和4例动脉血栓.结论 腹主动脉球囊阻断术可以明显减少凶险型前置胎盘合并胎盘植入患者的术中出血量、输血量,并可能有助于保留子宫,但有发生血栓并发症的风险;对于无胎盘植入证据凶险型前置胎盘,不建议使用该技术.
作者:罗方媛;田恬;谢兰 刊期: 2018年第03期