万里；刘兴会；张静；李娟；王永红；李唐春；王国玉；綦小蓉
目的 研究Csm4蛋白在重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)中的表达及其影响胞内存活的机制.方法 PCR扩增Csm4基因,构建重组pMV261-Csm4穿梭表达质粒,将重组质粒和空白质粒电穿孔进MS生成重组菌MS_Csm4和对照重组菌MS_V,采用Western blot对重组菌Csm4蛋白表达进行检测.体外培养观察MS Csm4和MS_V生长曲线,并检测活性氮、活性氧环境下的集落形成单位(CFU)变化.MS_Csm4和MS_V重组菌感染人源巨噬细胞THP-1,计数CFU反映胞内存活,实时荧光定量PCR检测诱导性一氧化氮合酶基因(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达.硝酸还原酶法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放指标.结果 Csm4蛋白在MS Csm4中成功表达,且其表达不影响MS_Csm4的生长情况;MS_Csm4在体外活性氮、氧环境中CFU下降,与MS_V相比,差异有统计学意义(P＜0.05);重组菌MS_Csm4作用于THP-1细胞后诱导iNOS表达上调,促进NO的释放以及减少胞内生存,与MS_V相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重组菌MS_Csm4不能耐受体外活性氮、氧压力环境,可诱导宿主细胞iNOS表达上调,促进NO释放,从而影响其胞内生存能力.
作者：翟小倩；鲍朗；罗涛；彭璇；孙长峰；杨国平 刊期： 2018年第03期
目的 观察砷暴露及雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)对雌、雄胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)内雌激素受体β(ERp)表达的影响.方法 孕19～20 d ICR小鼠剖腹取胎鼠,分离、纯化雌性组和雄性组胎鼠AECⅡ.四甲基亚唑蓝(MTT)法确定亚砷酸钠(NaAsO2)染毒AECⅡ细胞的剂量.将AECⅡ细胞分为以不同剂量(低、中、高)NaAsO2染毒的砷暴露组,培养24 h;另取AECⅡ细胞为联合暴露组,分别加入二甲基亚砜(DMSO)(溶剂对照组)、NaAsO25 μmol/L(单独砷染毒组)、NaAsO2(5μmol/L) +ICI182,780(1×10-4 mol/L)(砷十拮抗剂组),培养24 h;均设空白对照组(不加任何试剂).24 h后,砷暴露组行流式细胞术测凋亡率,砷暴露组、联合暴露组行实时荧光定量PCR法和Western blot检测胎鼠AECⅡ内ERβ mRNA和蛋白的表达水平.结果 AECⅡ纯度达(87.0±2.5)％.MTT法将0.5(低)、1.25(中)、5(高)μmol/L的浓度设置为染毒剂量.砷暴露组中:雌、雄中、高剂量组细胞凋亡率均高于空白对照组(P＜0.05),而雌、雄各剂量组间比较差异无统计学意义.雌性中、高剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于空白对照组(P＜0.05)和同剂量组雄性(P＜0.05);雄性各剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义.联合暴露组中:雌性单独砷染毒组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于砷十拮抗剂组(P＜0.01)及同剂量组雄性(P＜0.05),且高于空白对照组和溶剂对照组(P＜0.05),雄性各组间比较差异无统计学意义;雌、雄其余各组间比较差异无统计学意义.结论 砷暴露可使雌性胎鼠AECⅡ内ERβ表达上调且高于雄性,此过程可被雌激素受体拮抗剂阻断.
作者：杨梦平；车望军；程亚龄；熊林森；张浩 刊期： 2018年第03期
目的 分析探讨胎儿淋巴水囊瘤(fetal cystic hygroma,FCH)的胎儿染色体情况及妊娠结局,为临床优生优育咨询及决策提供依据.方法 回顾性分析185例FCH相关病例资料,随访其妊娠结局、新生儿情况或引产胎儿病检结果.结果 超声检查发现FCH包块大径中位数为2.3 cm (0.7～9.6 cm),多集中分布于1.0～4.0 cm.FCH包块多发生于颈背部,占95.1％(176/185).孤立性FCH占39.5％(73/185),非孤立性FCH占60.5％(112/185).有分隔FCH 121例,占65.4％(121/185),其中有75.2％(91/121)合并胎儿其他异常;无分隔FCH 64例,占34.6％(64/185),其中有32.8％(21/64)合并胎儿其他异常,有、无分隔FCH合并胎儿其它异常率差异有统计学意义(P＜0.005).进行胎儿染色体检查的96例FCH中有38例(38/96,39.6％)染色体异常,以45X0(Turner综合征)多见.孤立性FCH染色体异常率(24.0％,12/50)低于非孤立性FCH染色体异常率(56.5％,26/46),差异有统计学意义(P＜0.005).进行胎儿染色体检查的68例有分隔水囊瘤胎儿中染色体异常率(44.1％,30/68)高于无分隔水囊瘤胎儿染色体异常率(28.6％,8/28),但差异无统计学意义(P=0.25).185例FCH中,引产137例,官内死亡24例,自然流产9例,14例孤立性FCH及1例非孤立性FCH胎儿染色体检查结果正常,且足月生产后或生后行儿外科治疗后随访正常.孤立性FCH宫内死亡十自然流产率(16.4％,12/73)与非孤立性FCH宫内死亡十自然流产率(18.8％,21/112)比较,差异无统计学意义(P=0.68),孤立性FCH足月生产率(19.2％,14/73)较非孤立性FCH足月生产率(0.9％,1/112)高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 FCH易合并胎儿其它异常及胎儿染色体异常.相对孤立性FCH,非孤立性FCH更易发生胎儿染色体异常,预后更差.
作者：蔡越；罗红；宋清芸；杨太珠；杨帆 刊期： 2018年第03期
目的 探讨芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤的影响.方法 将系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠随机分为MRL/lpr组、MRL/lpr+地塞米松(1.5 mg/kg)组,MRL/lpr+芍药苷(20 mg/kg)组,MRL/lpr+芍药苷(40mg/kg)组,每组10只,给药7d;另取10只野生型C57BL/6小鼠作为正常对照组.第8天采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血清炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用HE染色检测肺部病理改变,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测各组小鼠肺组织中磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(P-PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(P-Akt)、磷酸化核因子κB p65 (P-NF-κBp65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(P-IκBα)蛋白的表达.结果 芍药苷能显著降低血清MDA含量;提高血清SOD、CAT、GSH-PX水平,减少血清炎症因子水平,改善肺组织病理改变,并能显著抑制P-PI3K、P-Akt、P-NF-κBp65、P-IκBα蛋白表达.结论 芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤起到保护作用.
作者：谢长好；李志军；陈琳洁；赵萍；张佳佳；白善旺；沈桐；贺文欣；王元元 刊期： 2018年第03期
目的 调查成都地区中老年人肠道菌群组成与其血脂、血糖代谢间的可能关系.方法 于2016年11月在成都市纳入51例中老年人,收集其血液及粪便样本,测定其血糖、血脂,使用Illumina高通量测序技术对粪便样本中肠道菌群的丰度、多样性及菌种组成进行详细分析.结果 受试中老年人粪便细菌主要为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门、放线菌门、疣微菌门.高血糖受试中老年人的粪便细菌多样性(Shannon指数)低于血糖正常的受试中老年人(P＜0.05),但是Shannon指数和血脂无明显关系.在粪便细菌门水平上:变形菌门、拟杆菌门分别在高血糖的中年、老年女性受试者粪便中的比例高于血糖正常受试中年、老年女性(P＜0.05).在粪便细菌属水平上:粪杆菌在高血糖受试中老年人粪便中的比例降低(P＜0.05),且其丰度与血糖水平呈负相关(r=-0.278,P=0.048);普氏菌属、帕拉普氏菌属在高血脂组的比例降低(P＜0.05),且均与血脂水平呈负相关(r=-0.357,P=0.10;r=-0.365,P=0.008).结论 不同血糖、血脂水平的中老年人其肠道菌群的构成和数量存在显著差异,表明肠道菌群与中老年人血糖、血脂代谢可能有着密切的关系,在中老年人血糖、血脂相关疾病的预防及治疗中可能有重要意义.
作者：王柯；万群；葛林；于晓红；李鸣；郭云；胡敏；马新颖；崔文静；何方 刊期： 2018年第03期
目的 报道真菌性眼内炎的临床特征、敏感药物、治疗措施和预后.方法 回顾性分析四川大学华西医院2005～2017年真菌培养阳性眼内炎住院患者的临床资料和培养结果.结果 真菌培养阳性眼内炎病例共14例(18眼):外源性6例(6眼),全部为眼球穿通伤所致;内源性8例(12眼)中,其中4例原因不明,2例继发上呼吸道感染,2例继发泌尿系统感染.共培养出4个真菌属:念珠菌属9例,曲霉菌属3例,枝顶孢属1例,粘束孢属1例;内源性眼内炎的主要致病菌为白色念珠菌(75％),外源性眼内炎的主要病原体为曲霉菌(33.3％).在可测视力的13例患者(17眼)中,内源性眼内炎通过治疗有8眼(66.7％)视力提高,而外源性眼内炎只有1眼(20％)视力改善.行玻璃体切除术的患眼,61.5％有视力提高.5-氟胞嘧啶和两性霉素B的念珠菌敏感率为100％.结论 外源性真菌眼内炎较内源性预后差.两性霉素B敏感率高.
作者：杨旭波；黄志翾；毛宇；徐筑萍 刊期： 2018年第03期
目的 评价三维超声成像技术测量青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者椎骨在水平面上旋转角度的信度与效度.方法 16例AIS女性患者纳入研究.由2位测评者进行三维超声扫描3次.所有三维超声图像随机分配,盲法测量3次,测量间隔1周.三维超声成像通过计算椎骨两侧的椎板中心连线与水平参考线之间的夹角,测量顶椎旋转角度;同时采用核磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)Aaro-Dahlborn方法测量AIS患者顶椎旋转角度作为对照.采用组内相关系数(ICC[2,k])、平均测量差值和标准误评价三维超声测量结果的信度;通过与MRI测量结果比较,采用配对t检验、Bland-Altman方法及Pearson相关系数进行其效度评价.结果 三维超声成像技术测量AIS顶椎旋转角度的评测者内与评测者间ICC[2,k]＞0.9,平均测量差值小于3.0°.三维超声和MRI测量结果之间差异无统计学意义(P＞0.05);且两种方法之间具有较高的一致性和相关性(r＞0.9).结论 三维超声成像技术作为一种无辐射的影像学方法,可用于AIS顶椎在水平面上旋转角度的评估.
作者：王谦；李梦；柳学明；黄文生；何成奇 刊期： 2018年第03期
患者,女,40岁,因“停经32+5周,四肢皮肤瘙痒,伴纳差、厌油2周”转入我院.入院查肝功示:丙氨酸转氨酶(ALT)1584 U/L,天冬氨酸转氨酶(AST) 1358 U/L,血清谷氨酰转移酶(GGT) 72 U/L,总胆汁酸(TBA)30.2 umol/L,胆红素水平正常,肝炎标记物(甲、乙、丙、丁、戊肝),EB病毒、巨细胞病毒均为阴性,细胞免疫、体液免疫全套及自身免疫性肝炎检查未见异常,血常规、凝血功能筛查均未见异常,肝胆超声未见异常.入院后诊断为肝功能异常待诊:妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)?遂联合熊去氧胆酸及S腺苷蛋氨酸(SAMe)降胆汁酸治疗,还原型谷胱酰泰、多烯磷酸胆碱保肝治疗.
作者：李涛；万里；游泳；李林；彭冰 刊期： 2018年第03期
目的 探讨短发夹RNA(shRNA)降低人上皮性卵巢癌SKOV3细胞中长链非编码RNA (lncRNA)HOTAIR基因表达后对SKOV3细胞的侵袭、裸鼠致瘤能力及锌指转录因子snail基因表达的影响.方法 RT-PCR检测SKOV3细胞lncRNA HOTAIR的表达;构建靶向人lncRNA HOTAIR基因表达的干扰质粒shHOTAIR,经脂质体转染SKOV3细胞后筛选稳定转染细胞株,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNAHOTAIR在SK()V3转染细胞中的表达.利用Transwell小室基质胶侵袭试验及裸鼠致瘤实验,检测不同转染SKOV3细胞侵袭及裸鼠致瘤能力,获取荷瘤鼠肿瘤组织块,进行免疫组化染色及Western blot检测荷瘤鼠肿瘤组织中snail蛋白的表达,qRT PCR检测E-cadherin、snail mRNA的表达.结果 RT-PCR检测结果显示SKOV3细胞表达lncRNA HOTAIR;成功构建干扰质粒shHOTAIR,稳定转染SKOV3细胞(sh HOTAIR-SKOV3)后,与对照组scramble-SKOV3细胞比较,lncRNA HOTAIR表达下降(P＜0.01);shHOTAIR-SKOV3细胞与对照组scramble-SKOV3细胞相比,对transwell小室基质胶侵袭能力、裸鼠致瘤能力下降、荷瘤鼠肿瘤体积下降(P＜0.01),荷瘤鼠肿瘤组织免疫组化染色及Western blot检测结果显示,snail蛋白表达降低(P＜0.05),qRT-PCR检测显示,荷瘤鼠肿瘤组织snail表达降低(P＜0.05)、E-cadherin表达增高(P＜0.05).结论 lncRNA HOTAIR表达下调可引起上皮性卵巢癌细胞snail表达降低、E-cadherin表达增高,并使卵巢癌细胞侵袭及裸鼠致瘤能力降低,提示lncRNA HOTAIR作为治疗靶点,可能具有靶向治疗上皮性卵巢癌细胞的潜在应用价值.
作者：周育夫；陈登宇；褚一凡；郑庆委；徐志本 刊期： 2018年第03期
目的 探讨儿童肺部病灶行胸腔镜精准肺叶切除的可行性及效果.方法 回顾性分析2013年10月至2017年3月于四川大学华西医院接受胸腔镜精准肺叶切除的儿童患者的临床资料.结果 本组共128例患儿,其中男69例,女59例;术前诊断为先天性肺囊肿62例,囊性腺瘤样畸形47例,隔离肺17例,肺部肿瘤2例;病灶位于肺上叶28例,下叶98例,中叶2例.术中均对肺叶动静脉、支气管及叶间裂组织进行精准处理.除1例因反复感染胸腔粘连严重而转开放外,其余患儿均在腔镜下顺利完成手术,术中出血3～5 mL,手术时间35～120 min,平均55 min.34例近期手术患儿术毕未安置胸腔闭式引流管,其余患儿均在术后24 h内拔除胸腔闭式引流管,无肺不张、出血、支气管胸膜瘘、肺部感染等并发症发生,术后3～4 d出院.术后随访6～36月,所有病例均恢复良好,无复发病例.结论 胸腔镜精准肺叶切除在儿童病例中有较好的可行性,且通过对各主要结构的精准处理,能有效避免各类常见术后并发症的发生,加快患儿恢复,缩短住院时间,值得推广应用.
作者：张杰；袁淼；徐畅；杨纲；李飞 刊期： 2018年第03期
目的 初步探讨白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)在诱导卵巢癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)中的作用,为进一步深入研究卵巢癌恶性转移的分子机理奠定基础.方法 实时无标记细胞技术(RTCA)定量分析外源性人重组IL-8诱导卵巢癌细胞株SKOV3的动态迁移情况;Western blot检测IL-8 (100 ng/mL)诱导处理SKOV3细胞48 h后EMT相关蛋白的表达变化情况;采用Transwell分析经IL-8诱导处理后的SKOV3细胞侵袭情况.结果 RTCA定量结果显示,IL-8处理SKOV3细胞48 h后细胞的迁移达到平台期HL-8可使SKOV3细胞的上皮细胞标志物E-eadherin下调,而间质细胞标志物Vimentin和snail的表达上调,促进卵巢癌细胞发生EMT,SKOV3细胞的侵袭能力明显增强(P＜0.05).结论 IL-8可促使卵巢癌细胞获得EMT特性,从而增强其侵袭、迁移能力.
作者：王世超；付惠惠；文继锐；赵志伟；聂永梅；苗娅莉；吴江 刊期： 2018年第03期
目的 研究华蟾素对U87胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其中的分子机制.方法 不同浓度的华蟾素(0.5～20 μmol/L)处理U87细胞6h、12 h、24 h、48 h后,用CCK-8试剂盒进行做细胞活性检测,观察华蟾素对U87胶质瘤细胞活性的影响.不同浓度的华蟾素(1～20 μmol/L)分别处理12 h、24 h后,用Hochest33342试剂检测U87胶质瘤细胞的凋亡情况.免疫荧光染色观察华蟾素处理24 h后与细胞增殖相关蛋白p-AKT(T308)的表达情况.Western blot检测不同浓度的华蟾素(1～20 μmol/L)处理24 h后与细胞增殖相关蛋白{磷酸化的磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、苏氨酸308位点磷酸化的蛋白激酶B[p-AKT(T308)]、丝氨酸473位点磷酸化的蛋白激酶B[p-AKT(S473)]、磷酸化核糖体S6蛋白激酶(PS6)、磷酸化的真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1 (p-4EBP1)}和凋亡相关蛋白(BAX、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)的表达情况.结果 华蟾素可抑制U87胶质瘤细胞的活性、诱导U87胶质瘤细胞的凋亡,呈浓度和时间依赖性反应.华蟾素作用后可使凋亡相关蛋白cleaved-caspase 3、BAX的表达水平增高,PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT(T308)的表达水平降低.结论 华蟾素可抑制U87胶质瘤细胞的增殖、诱导U87胶质瘤细胞的凋亡,这可能经由影响PI3K-AKT-4EBP1与BAX-caspase的信号通路实现.
作者：孔冰；左明荣；刘艳辉 刊期： 2018年第03期
目的 通过横断面调查研究,了解脑卒中患者家庭康复状况,比较不同特征下卒中患者的康复效果.方法 采用便利抽样,选取某三甲医院康复医学中心已出院的卒中患者共计234例为研究对象,采用自制的《患者一般资料调查表》及Barthel指数评定(BI)量表、工具性日常生活活动能力(IADL)量表、移动能力评定(MRMI)量表、患者自我感受负担(SPBS)量表、照顾者负担(ZBI)量表对患者进行问卷调查.结果 患者BI得分(61.77士22.83)分,61.11％的患者日常生活轻度依赖;IADL得分(7.25±6.26)分,处于低水平;MRMI得分(28.90±10.22)分;SPBS得分(29.26±7.07)分,超过90％的患者有疾病自我负担感;ZBI得分(43.97±12.28)分.脑梗塞、男性患者各量表得分均优于脑出血、女性患者;年龄＜60岁、家庭康复时间超过1年、由亲属照顾、女性照顾的脑卒中患者其家庭康复躯体功能总体优于老年、家庭康复时间少于1年、由非亲属、男性照顾的患者,但患者自我感受负担、照顾者负担无明显差异.结论 我国脑卒中患者家庭康复效果差.卒中类型、性别、年龄和家庭康复时间等对脑卒中患者家庭康复效果产生影响.
作者：刘祚燕；龙纳；倪碧玉；王凤英；吴琳娜 刊期： 2018年第03期
患者,女,25岁,G1P0,孕24周,因“阴道不规则出血3d”于我院就诊,2+d前门诊超声提示:胎盘附着于子宫前壁、右侧壁及后壁,覆盖面广,胎盘占据官腔2/3以上(图1),厚度:6.6 cm,成熟度:O级,胎盘下缘覆盖宫颈内口,胎盘增厚明显,几乎未见正常胎盘实质,内似为液性暗区充满细弱点状回声;检查过程中胎儿体位较固定(图2).
作者：文娟；宋清芸；罗红 刊期： 2018年第03期
目的 观察苯丙氨酸对小鼠成肌细胞系C2C12葡萄糖摄取能力的影响,以及刺激后细胞内哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70S6K信号通路分子的变化.方法 体外培养C2C12细胞,分化诱导为多核的肌管细胞后进行饥饿处理,然后分别用不同浓度苯丙氨酸(1.25、2.5、5、10、20 mmol/L)处理细胞,以KRB平衡液作为对照.通过检测2-NBDG评价细胞葡萄糖摄取能力.用Western blot方法检测细胞内mTOR、p70S6K、胰岛素受体底物(IRS)-I、蛋白激酶B(Akt)的表达情况.结果 与KRB平衡液对照相比,5 mmol/L亮氨酸使C2C12细胞的葡萄糖摄取能力下降了约30％(P=0.001),5 mmol/L苯丙氨酸使C2C12细胞摄取葡萄糖的能力上升了约40％(P＜0.01),且苯丙氨酸的这种促进作用随浓度增大有逐渐增强的趋势.苯丙氨酸对细胞内mTOR Ser2448磷酸化水平无明显影响.除1.25 mmol/L外,其它浓度苯丙氨酸均能抑制p70S6K Thr389的表达.亮氨酸使IRS-1Ser636/639磷酸化水平表达增高(P＜0.01),除1.25 mmol/L外,其它浓度的苯丙氨酸均有抑制IRS-1 Ser636/639表达的趋势,但与对照相比差异无统计学意义(P=0.381).高浓度短时间的苯丙氨酸刺激对C2C12细胞内的AktSer473表达无明显影响.结论 苯丙氨酸可能通过减少p70S6K的磷酸化,继而减少p70S6K对IRS-1的刺激作用而使细胞葡萄糖摄取能力增强.但苯丙氨酸对mTOR-p70S6K通路的抑制作用不通过Akt的激活.
作者：杜蓉；杜涓；田浩明；陈涛；高赟；龙洋；刘丹 刊期： 2018年第03期
目的 比较不同人工瓣膜类型(人工生物瓣和人工机械瓣)对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期及术后远期临床结局的影响.方法 回顾性分析2005年8月至2016年7月在四川大学华西医院行人工瓣膜置换术的患者的临床资料,纳入接受人工生物瓣置换的全部感染性心内膜炎合并瓣膜毁损的患者52例,平均年龄(47±18)岁,平均随访时间(6.2±3.8)年,按年龄±5岁、体质量指数±20％、病变瓣膜位置、男女比例、手术时间±1年等配对条件以1:3频数匹配接受人工机械瓣置换的同类患者156例.比较分析人工生物瓣与机械瓣对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期及远期临床结局的影响.结果 接受生物瓣置换及机械瓣置换患者的围术期死亡率分别为17.3％±2.2％和19.9％±1.8％(P=0.27).两类患者术后10年生存率分别为56.1％±5.2％和61.2％±8.1％(P=0.58),术后10年无并发症生存率分别为75.0％±3.2％和82.3％±4.4％(P=0.29).年龄≤60岁的感染性心内膜炎患者,人工生物瓣与机械瓣术后10年再手术率分别为41.4％±7.2％和30.5％±5.4％(P=0.02),而对年龄＞60岁的感染性心内膜炎患者,人工生物瓣与机械瓣的术后10年再手术率分别为24.1％±8.5％和14.7％±5.7％(P=0.36).结论 人工瓣膜类型对感染性心内膜炎合并瓣膜毁损患者围术期死亡率及术后远期生存率无明显影响.人工机械瓣膜在年龄≤60岁感染性心内膜炎患者中术后远期再手术率相比人工生物瓣膜更低.
作者：沈嘉渝；张洪伟；范康钧；梁怀民；张尔永；胡佳 刊期： 2018年第03期
目的 制备稳定表达pSicoR-β8 shRNA的慢病毒载体系统,并评估其在新生鼠脑内RNA干扰(RNAi)效率.方法 将慢病毒表达载体pSicoR-β8 shRNA、pSicoR-对照序列与慢病毒包装质粒系统pDM2G、g/pRRE和pRSV Rev分别进行扩增及质粒酶切鉴定,然后共转染293T包装细胞株,通过293T细胞的包装和分泌以收集携带目的干扰片段的慢病毒颗粒.利用PEG-it病毒浓缩试剂进行浓缩,50％组织培养感染剂量法(TCID50)测定病毒滴度.将浓缩后的慢病毒颗粒通过侧脑室注射对新生SD乳鼠中枢神经系统野生表达的整合素β8进行干扰,荧光显微镜下观察慢病毒侧脑室注射后脑组织中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,结合RT-PCR和Western blot方法检测β8mRNA和蛋白在干预后表达水平的变化,以评估RNAi效率及选择佳干预时间.结果 质粒扩增及酶切结果显示各质粒片段大小分别与质粒图谱大小一致,浓缩后测得的病毒滴度为LV-对照序列:1.0×108 PFU/mL,LV-β8 shRNA:5.0×108 PFU/mL.慢病毒侧脑室注射后1d,侧脑室周围即可观察到携带GFP的慢病毒整合到宿主细胞基因组并发出绿色荧光,注射后2d、3d和5d可在脑组织切片中观察到较强的绿色荧光.β8 mRNA表达水平在RNAi后1～3 d出现降低(P＜0.05),第3天达到大抑制作用,其β8mRNA抑制率约为56％.β8蛋白表达变化趋势与β8 mRNA表达变化趋势基本一致,RNAi后第3天达到大抑制作用,其β8蛋白抑制率约为51％.结论 成功获得滴度达到体内实验要求的含有β8 shRNA的慢病毒颗粒,并具有较好的体内干扰活性,为进一步研究整合素β8在新生鼠脑组织中的生理功能奠定了基础.
作者：唐彬秩；屈艺；赵凤艳；童煜；王德健 刊期： 2018年第03期
目的 探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因与卵巢癌对紫杉醇耐药的相关性.方法 以5、10、20、40、80、160、320 ng/mL的紫杉醇处理卵巢癌紫杉醇敏感细胞A2780和耐药细胞A2780/T,噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的抑制率(IR),逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质印记(Western blot)检测紫杉醇100 ng/mL处理A2780和A2780/T细胞后XIAP基因和蛋白的表达;将A2780/T细胞分为空转染组(转染空载体质粒)、小干扰RNA(siRNA)-XIAP(siRNA-XIAP)组(转染siRNA-XIAP质粒)、非特异性转染组(转染非特异性质粒)、空白对照组(不转染质粒),RT-qPCR和Western blot检测各组细胞XIAP基因和蛋白的表达,并加入含不同质量浓度的紫杉醇(0、1 000、1 500、2 000、2 500 ng/mL),流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 不同质量浓度紫杉醇处理后,A2780细胞IR随紫杉醇质量浓度的增加而增高(P＜0.05),A2780/T细胞IR无明显变化.紫杉醇100 ng/mL处理A2780和A2780/T细胞后,A2780细胞XIAP mRNA的表达低于紫杉醇未处理组(P＜0.05),A2780/T细胞中XIAP mRNA的表达与紫杉醇未处理组差异无统计学意义(P＞0.05),但A2780/T细胞XIAPmRNA和蛋白表达均高于A2780紫杉醇处理组(P均＜0.05);siRNA-XIAP组XIAP mRNA和蛋白的表达均低于其他各组(P＜0.05),在紫杉醇2 000 ng/mL及2 500 ng/mL作用下,siRNA-XIAP组凋亡率高于其他各组(P＜0.05).结论 卵巢癌对紫杉醇耐药与XIAP基因的高表达有关,特异性的siRNA可通过降低XIAP的表达,促进细胞凋亡,增加耐药癌细胞对紫杉醇的敏感性.
作者：岳驰；李冉红；陈晨；刘辉 刊期： 2018年第03期
目的 观察正常成年小鼠耳蜗毛细胞中miR-30b的表达,研究其对靶基因(Dynamin1,DNM1)的调控是否会影响内毛细胞中突触囊泡内吞关键蛋白Dynamin的表达.方法 取正常成年C57小鼠耳蜗基底膜行原位杂交,观察耳蜗毛细胞中miR-30b的表达分布;构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化明确DNM1是否为miR-30b的靶基因;通过耳蜗圆窗显微注射过表达miR-30b的腺相关病毒(adenoassociated virus,AAV),14 d后通过real time-PCR检测miR-30b和DNM1的mRNA表达,免疫印迹实验(Western blot)检测Dynamin蛋白表达.结果 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞胞质和胞核均有表达;miR-30b可抑制DNM1载体的荧光表达(P＜0.05),而突变型DNM1载体的荧光表达无抑制作用;转染AAV-miR-30b后miR-30b的相对表达量增高,DNM1和Dynamin蛋白表达降低.结论 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞均有表达;miR-30可以靶向下调DNM1基因从而抑制Dynamin蛋白表达.
作者：李洋；唐小林；余菲；李华君；袁伟 刊期： 2018年第03期
目的 探讨胞外酸中毒对小鼠大脑皮层γ-氨基丁酸(GABA)能神经元动作电位发放和突触传递功能的影响.方法 选择出生后27～30 d的小鼠20只,做大脑冠状切片,随后分为正常对照组和细胞外酸中毒组:大脑冠状切片灌流pH值为7.4的人工脑脊液,采用膜片钳全细胞电流钳模式记录动作电位阈电位、绝对不应期和动作电位峰间距,电压钳模式记录自发性兴奋性突触后电流,为正常对照组;随后将灌流人工脑脊液的pH值调为6.5,模拟胞外酸中毒,为细胞外酸中毒组.再次记录神经元动作电位和自发性兴奋性突触后电流,比较两组间以上各项指标的差异.结果 与正常对照组对比,胞外酸中毒使GABA能神经元动作电位峰间距和绝对不应期延长(P＜0.01),阈电位升高(P＜0.01),自发性兴奋性突触后电流幅度和频率增加(P＜0.01).结论 胞外酸中毒损伤大脑皮层GABA能神经元动作电位的发放和突触传递,这可能是酸中毒诱导脑功能损伤的机制之一.
作者：黄丽；王春；李言；赵士弟 刊期： 2018年第03期
四川大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
