乙型肝炎病毒聚合酶基因变异检测及临床应用

王永忠；李夏亭；周志武；周国平；周胜生

关键词：乙型肝炎病毒, 序列分析, 聚合酶基因, 拉米夫定

摘要：目的检测乙型肝炎病毒聚合酶基因变异并探讨其与拉米夫定疗效的关系.方法对38例拉米夫定治疗(100 mg/d)48 w后血清HBV DNA阳性患者,采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序技术,检测其血清中HBV DNA P基因序列,并推导为相对应的氨基酸序列,同时和Genbank中标准株序列相比较.结果G473→R和D477→N变异14例,M550→I变异12例,M550→V变异8例,L526→M变异10例,M550→V变异均伴有L526→M变异2例,M550→I变异伴有L526→M变异,未曾发现L526→M单独变异株,另外发现N(D)480→E 2例,N(D)480→S 2例,R485→H 1例,S505→T 2例,L510→M 1例,V537→I 1例,有11例HBV DNA阳性标本未检出变异.结论乙型肝炎病毒P基因区YMDD变异和L526→M变异是影响拉米夫定疗效的主要因素,G473→R和D477→N联合变异可能是影响拉米夫定疗效的又一重要原因,P基因变异的检测有助于临床疗效观察.

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在克隆表达了丙型肝炎病毒不同区抗原(HCV-C、NS-3、NS-4、NS-5)的基础上,研制出抗HCV抗体分片段酶联免疫检测试剂.对该试剂特异性、灵敏度进行了临床评价.结果显示该试剂具有良好的特异性和灵敏度.

作者：张贺秋；陈坤；宋晓国；凌世淦；王国华；刘荷中刊期： 2002年第04期
偶氮氯膦Ⅰ测定血清钙

目的建立灵敏度高、选择性好、试剂稳定的血清钙测定方法.方法在pH9.6的2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇(AMP)缓冲介质中,以偶氮氯膦I作显色剂,8-羟基喹啉-5-磺酸为掩蔽剂,分光光度法测定血清钙.对反应条件和方法性能进行系统研究.结果该方法显色络合物大吸收波长为580 nm,线性范围达5.0 mmol/L,回收率为98.8%～99.1%,平均99.0%.批内变异系数(CV)和批间变异系数(CV)分别为0.95%和1.74%.与邻甲酚酞络合酮(OCPC)(X1)比较:Y=1.003X1-0.036,r=0.996;与偶氮胂Ⅲ(X2)比较:Y=1. 001X2-0.030,r=0.997;与酶速率(X3)法比较:Y=0.999X3-0.045,r=0.998.在血清胆红素高达412 μmol/L,血红蛋白7 g/L,镁2.50 mmol/L及Intralipid高达8 g/L时均对该法无显著干扰.结论该法具有简便、快速、试剂稳定和灵敏可靠的优点,适合血清钙的手工测定和自动分析.

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全自动生化分析仪的预防维护及报警故障的处理方法

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作者：华巧霞刊期： 2002年第04期
吸毒者红细胞免疫功能与脂质过氧化关系的研究

目的探讨了吸毒者红细胞免疫功能的变化及其脂质过氧化的关系.方法应用红细胞酵母花环法测定55例吸毒者红细胞免疫功能和化学比色法测定血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量,并以35名正常健康人作对照.结果吸毒者RBC-IC花环率和MDA明显升高(P＜0.05～0.01),而RBCC3b-RR、SOD、GSH-PX、SOD/MDA低于正常(P＜0.01),相关分析显示:RBC-C3b花环与MDA呈显著负相关r=-0.431 5,P＜0.05),RBC-ICR与MDA呈正相关(r=0.536 8,P＜0.05).结论吸毒者红细胞免疫黏附功能降低,与活性氧代谢紊乱密切相关.

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微波技术在尿蛋白谱检测中的应用

蛋白尿是肾脏疾病的一个重要症状,其性质和组成(尿蛋白谱)是肾脏疾病诊断和治疗方案选择的重要参考指标之一[1].

作者：崔艳丽；王生余；张真刊期： 2002年第04期
PCR扩增特定SSUrRNA片段检测疟原虫的研究进展

众所周知,疟疾的诊断迄今为止仍主要依靠血片镜检,该方法虽然简便、经济、适于基层;但费时费力,易于漏检,特别对低原虫血症者,漏检率高,不利于快速诊断和大批标本检测,临床应用受到许多限制.

作者：王少海；郭亮刊期： 2002年第04期
BT-2000生化分析仪常见问题及处理

BT-2000是意大利生产的适合中小型医院使用的全自动生化分析仪,它具有准确度高、重复性好等优点.

作者：王剑锋；张碧莹；张伟刊期： 2002年第04期
用酶标仪作TSGF过筛试验

恶性肿瘤相关物质群(TSGF),它是数种国际公认的与恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物的统称.

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AFT-400型电解质分析仪,是由深圳康立公司生产,采用具有先进测量技术的离子选择电极(ISE),由微处理机控制,层级菜单式软件结构,操作方便,自动化程度高,适用于测量血清、血浆、全血、尿液、脑脊液等体液中的K+、Na+、Cl+、iCa2+离子含量.我科自1996年购进康立AFT-400型电解质分析仪,现就五年多使用过程中遇到的一些故障及处理方法总结如下,供同行参考:

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我科应用奥地利产BLOCELL-2010型酶标仪及BLO-CELL-AW1型洗板机,该洗板机具有使用方便,维护简单,洗涤效果好,可自编洗涤程序等优点,节省了人力物力,适合中级以上规模医院使用.

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丙型肝炎病毒优势表位抗原不同嵌合表达蛋白的血清反应性研究

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作者：王国华；张贺秋；陈坤；宋晓国；朱翠侠；刘荷中；凌世淦刊期： 2002年第04期
筑巢式PCR检测22例慢性粒细胞白血病患者bcr/abl融合基因结果分析

目的探讨bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病(CGL)的诊断、治疗和预后判断的价值.方法对22例CGL患者作筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcr/abl融合基因.结果22例CGL患者中21例bcr/abl融合基因阳性,阳性率为95.5%.结论筑巢式PCR是一种快速、敏感而准确的检测方法.

作者：杜冰；徐开林；王林；鹿群先；潘秀英刊期： 2002年第04期
不育男性沙眼衣原体感染与血清五种自身抗体检测及分析

目的探讨沙眼衣原体(CT)感染与血清中抗精子抗体(AsAb)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗核抗体(ANA)、抗甲状腺球蛋白抗体(ATG)、抗甲状腺微粒体抗体(ATM)之间的关系.方法用ELISA法、放射免疫分析法和间接免疫荧光法分别检测50例正常生育男性(正常对照组)和108例CT感染不育男性(CT感染组)的血清中AsAb、ACA、ANA、ATG、ATM.结果CT感染组AsAb检出率明显高于对照组,具有显著性差异(P＜0.01),ACA次之(P＜0.05),而ANA、ATG、ATM两组间无显著性差异(P＞0.05).结论生殖道CT感染可引起机体免疫反应而产生AsAb,是其导致男性不育的重要原因之一.

作者：万长春；汪泓；商学军；阮长华；郝宝金刊期： 2002年第04期
一种本周氏蛋白测定的简易对照

本周氏蛋白是一种免疫球蛋白的轻链或及聚合体,可大量出现在多发性骨髓瘤或轻链病患者的尿液中.

作者：谢晏如刊期： 2002年第04期
感染致不孕症精浆MDA分析

目的探讨丙二醛(MDA)测定在生殖系统感染中的诊疗价值.方法比色测定35例白细胞精子症不育患者和26例正常对照者精浆MDA含量.结果白细胞精子症组精浆MDA含量明显高于对照组(P＜0.01),且与精液中白细胞数呈正相关(r=0.895,P＜0.01).抗感染治疗前后精浆MDA含量有明显差异,且与精液中WBC下降同步.结论MDA含量为反映生殖系统感染的诊断及疗效判断、了解精子膜功能的良好指标.

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AC-920血细胞计数仪,为国内引进瑞典的全自动血细胞计数仪.我们在使用该仪器过程中,曾遇到计数仪面板按键操作失灵,致使仪器不能进入正常工作状态的故障.

作者：赵英壁；樊玉锁；梅桂杰；孙作胜刊期： 2002年第04期
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作者：胡晓芳；孟冬娅；郭大文；郑威；高洪福刊期： 2002年第04期
半自动生化分析仪使用问题一例分析

北京市朝阳区某医院在使用中生公司生产的Cre试剂(苦味酸法)时发现所有样本的测试结果相近,均在140μmol/L左右.

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