吕国全；顾耀松；黄宪章；王美兰；卢妙莲
IFMA是时间分辨免疫荧光分析测定法的简称,是继免疫吸附试验和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术.它以免疫学反应为基础,将抗原与抗体的特异性反应与金属铕标记抗体作用相结合,再加入增强液将复合物标记抗体上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与溶液中的待测物质的浓度成正比.
作者：李祥安；杨焕涛 刊期： 2005年第06期
在使用SYNCHRON LX20全自动生化分析仪器时,常出现SUB DEPL、IR HI、SAMP REF DRIFT等异常分析值[1],正确分析和处理这些异常分析值,有针对性的对标本进行处理和重新检测显得尤其重要,现将结果后面标识的各种情况分析及处理介绍如下:
作者：李永臣；单淑萍；袁凯 刊期： 2005年第06期
目的检测严重自体免疫病(SAID)患者自身造血干细胞移植(AHSCT)前后外周血中CD4+CD45RA+(naive Th细胞)及CD4+CD45RO+(记忆Th细胞)T辅助淋巴细胞亚群的变化,探讨naive Th细胞和记忆Th细胞在AHSCT诱导自身免疫病缓解中的作用.方法使用三色流式细胞术检测SAID患者AHSCT前1 w及移植后1～3 mo外周血中CD4+CD45RA+及CD4+CD45RO+T辅助淋巴细胞亚群的改变,naive Th细胞表型为CD4+CD45RA+,记忆Th细胞表型为CD4+CD45RO+.分析各细胞亚群占CD4+T辅助淋巴细胞的百分比,并比较移植前后naive Th、记忆Th细胞的变化.结果AHSCT后,患者外周血中记忆Th细胞显著增高,P＜0.05;naive Th细胞和CD45RO+CD45RA+双阳性细胞均显著下降,P＜0.05.结论AHSCT治疗SAID患者,患者体内naive Th细胞和CD45RO+CD45RA+双阳性Th细胞百分率显著减少,这是AHSCT诱导SAID缓解的机制之一.
作者：陈军浩；欧阳建；孙雪梅；耿东进 刊期： 2005年第06期
目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本.结果该法至少可检测1.6×102/ml个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性.结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用.
作者：郭乃洲；周步全；严爱华；王万相 刊期： 2005年第06期
目的探讨义务献血前ALT初筛的意义和分析成本效益.方法用干式生化法进行ALT初筛,并与微板速率法检测结果相比较,同时核算初筛的成本和效益.结果干式生化法与微板速率法检测结果无显著性差异(t=1.108,0.20＜P＜0.50).初筛组和未初筛组的ALT异常血液报废率分别为0.078%和3.97%,两者有显著性差异(u=22.95,P＜0.001).结论实行ALT初筛可大大降低血液报废率和避免浪费血源,具有良好的社会效益和经济效益.
作者：邬旭群；鲍自谦；陈云龙 刊期： 2005年第06期
Y染色体的异态性是否会导致生殖异常,是近年来医学遗传界一直争论的议题.有些学者认为大Y是一种正常的遗传多态变异,没有什么临床意义;但是很多的研究指出大Y与流产频率增加有关,有学者认为大Y是由于异染色质中的DNA过多重复,造成有丝分裂发生错误或影响基因调节及细胞分化,从而导致不良妊娠.本文将对大Y染色体核型与不良生育之间的关系进行探讨研究.
作者：张玲；史化民；周友泉 刊期： 2005年第06期
目的探讨不同检测系统测定孕酮(PRGE)结果的可比性.方法取Bayer、德普和自制不同水平的质控物,以及35例不同浓度的患者新鲜血清,在四个不同的化学发光检测系统(强生VITROS ECI、拜尔ACS180、拜尔CENTAUR、德普immulite-1000及其配套的校准物、试剂、质控物等,分别命名为检测系统1～4)上进行PRGE检测,并对数据进行相关的统计学分析.结果经随机区组设计资料的方差分析,不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清PRGE测定结果在各检测系统的组间总体差异均有显著性(P＜0.001);各检测系统PRGE测定结果的可靠性系数a接近1,各检洲系统间的相关系数均大于0.975.以检测系统1作为目标检测系统,对其它检测系统作临床可接受性能评价,检测系统2和3临床均接受,检测系统4临床部分接受.结论4个检测系统测定PRGE结果的精密度符合临床要求,临床可接受性能评价除检测系统4外均有可比性.
作者：冯妙芙；黄宪章；徐宁；庄俊华；张秀明；梁伟雄 刊期： 2005年第06期
1故障现象仪器在自动清洗时,提示空白计数错误,WBC空白计数值高出正常值十多倍.
作者：秦峰 刊期： 2005年第06期
目的探讨外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群在类风湿性关节炎中的应用价值.方法32例类风湿性关节炎患者,17例病人处于活动期,15例经治疗后处于缓解期.36例健康体检者作为对照.分别检测外周血T淋巴细胞AgNORs、T亚群(CD3+、CD4+、CD8+),计算CD4+/CD8+比值.结果与对照组相比,RA病人活动期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值均升高(P＜0.05),而CD8+细胞降低(P＜0.05).RA缓解期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值较活动期下降(P＜0.05),CD8+细胞较活动期升高(P＜0.05),与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).CD3+T细胞在RA活动期、缓解期中与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).T淋巴细胞Ag-NORs与CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+4/CD8+比值之间相关系数均小于0.3(P＞0.05),无相关性.结论外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量、T细胞亚群分析与RA的发生、发展、治疗有一定关系,结合二者,在观察RA患者的机体免疫状态、疗效方面有一定意义.
作者：周晖；江楚文；石蕴珍；崔阳；张建军；周茂华 刊期： 2005年第06期
目的建立适合临床常规使用的自动化凝胶电泳系统.方法用自制点样条、透明的胶片及其自己设计的电泳缓冲液,制成自动化凝胶电泳试剂盒,同时,应用丙酮沉淀法和考马斯亮兰G250染色等技术,使此试剂盒用于脑脊液蛋白电泳,并分析常见神经系统疾病的脑脊液蛋白.结果丽春红S染色灵敏度为2.25 g/L,氨基黑10B的灵敏度为0.28 g/L,考马斯亮兰G250的灵敏度为0.14g/L.应用丙酮沉淀法和考马斯亮兰G250染色等技术,电泳测定脑脊液蛋白,其参考值范围为前清蛋白2.29%～8.77%,清蛋白39.90%～63.66%,a10.93%～6.33%,a22.20%～12.48%,β 18.23%～28.61%,γ 4.75%～15.72%;各区带批内变异系数(CV)为前清蛋白13.7%,清蛋白带4.34%,a1带7.76%,α2带6.88%,β带3.70%和γ带6.51%;平均批间变异系数(CV)为前清蛋白18.47%,清蛋白带5.54%,α1带13.31%,a2带14.14%,β带10.49%和γ带14.01%.结论自制凝胶电泳试剂盒将为脑-神经系统疾患的诊断和鉴别诊断提供一种有用的辅助手段.
作者：李勇；胡望平；朱忠勇 刊期： 2005年第06期
目的探讨检测标本中血红蛋白(Hb)浓度对PCR扩增管中Taq酶活性的影响及消除影响的方法;探讨胰酶消化痰液的应用价值;比较淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、十二烷基硫酸钠(SDS)溶血液处理全血标本对检测结果敏感性的影响;观察SDS在结核分枝杆菌DNA(TB DNA)提取液中存在的价值及对Taq酶的影响.方法将经梯度稀释的Hb标准品与结核分枝杆菌(TB)定值质控品混匀制备成待检标本进行PCR检测;将定值Hb标准品与TB质控品混匀制备成待检标本,观察提取时100℃煮沸时间对Hb抑制Taq酶能力的影响;将结核患者的痰液分成两管,分别用4 g/dl NaOH消化、1 g/dl胰酶消化、1 g/dl胰酶消化+4 g/dl NaOH处理,比较PCR检测结果的敏感性;将结核患者的外周抗凝血分别用淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、SDS溶血剂处理,比较PCR检测结果的敏感性;用10 g/LSDS、1%(v/v)Triton、1 g/LSDS的1%(v/v)Triton、0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton提取液对相同的TB质控品进行TB DNA提取,观察PCR检测结果敏感性;56份痰液、34份全血按痰液、全血标本的方法处理,进行PCR扩增,比较检测结果的阳性率.结果当Hb≥10-5g/L时,Hb对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强;提取时100℃煮沸40 min与煮沸10 min的对照管结果完全一致;痰液标本处理方法的敏感性顺序为:胰酶消化+NaOH处理＞胰酶消化＞NaOH消化;全血标本处理方法的敏感性顺序为:红细胞裂解液法=淋巴细胞分离法＞SDS溶血法;提取方法PCR检测结果敏感性顺序为:0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞1%(v/v)Triton＞1 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞10 g/L SDS,SDS对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强.56份痰标本按上述方法处理的阳性率分别为57.1%(32/56),82.1%(46/56),91.0%(51/56),通过配对资料卡方检验,胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理与NaOH消化法之间具有显著性差异(P＜0.005),胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理之间差异无显著性(0.1＜P＜0.25);34份全血标本按上述方法处理的阳性率分别为79.4%(27/34),79.4%(27/34),47.0%(16/34),通过配对资料卡方检验,红细胞裂解液法和淋巴细胞分离法与SDS溶血法之间具有显著性差异(0.005＜P＜0.01).结论检测TB DNA标本的预处理有必要规范化.
作者：周步全；朱建峰；王迎春；王义凤；董川 刊期： 2005年第06期
我科于2001年购置的美国MD-100+自动生化分析仪,是一种通过溶液样品对光谱敏感吸收这一原理来检测各种溶液浓度指标的智能仪器.它由微计算机控制,从测试到打印又快又准,试剂用量少,成本低,适用国产试剂,存储量大,是实验室及医疗机构检验的常用设备之一.四年的使用过程中总体运行良好,但也遇到一些常见故障,我们对这些故障的处理积累了一点经验,现介绍如下供同行参考.
作者：骆泉娥；胡熙金 刊期： 2005年第06期
目的探讨线粒体天门冬氨酸转氨酶同工酶(m-AST)在急性心肌梗死(AMI)患者血清的变化及其临床意义.方法用全自动生化分析仪测定了19例AMI患者血清m-AST活性,同时观察其它4种心肌酶AST、CK、CK-MB、LDH动态变化.结果AMI患者,发病6 h血清m-AST即升高,与对照组相比有极显著差异,P＜0.001.12 h迅速升高,24 h达峰值(256.5±69.5 IU/L),此后,逐渐下降,120 h时基本正常,与对照组相比无显著差异,P＞0.05.m-AST升高的幅度差别较大,6h m-AST升高幅度略低于CK-MB、AST;12 h迅速升高,是正常的16.2倍;48 h达高,是正常的21.9倍;随后迅速下降,120 h时是正常的1.3倍,升高曲线与CK-MB相当,比AST、CK及LDH敏感.与AST、CK、CK-MB、LDH的异常检出率进行比较,发病6 h异常检出率依次为CK-MB＞CK＞AST＞m-AST＞LDH,24 h内不断上升,其中以m-AST与CK-MB异常检出率高,达100%,CK、AST次之,为89.5%和84.2%,LDH较低,为73.6%.48 h后检出率逐渐下降,下降速度是AST3.9倍,是CK2.7倍,CK-MB 1.2倍,LDH 5.1倍.结论检测并动态观察m-AST酶活性,可作为诊断AMI并评价疗效、判断预后的一项新的生化指标.
作者：阴斌霞；王华；王香玲；赵丽华；柴丽华；岳天海；何谦；樊晓燕；王幼利 刊期： 2005年第06期
当今网织红细胞(下称网红)计数虽已有先进的自动分析技术的应用,但迄今国内仍以显微镜目测法为主.目测计数原用缩小视野法,费工费时,计数精确性差,用Miller窥盘[1]后有了改善,但仍感不便,且市场上不易购得.本文设计一种改进的窥盘,改变原Miller窥盘大小方格比例和小方格位置,用电脑绘图,打印于透明投影胶片上,制成两方格面积比为10 : 1、小方格居中的改良Miller窥盘,制作简易,经济实用,效果好.
作者：陈高远；周文良；陈秀华 刊期： 2005年第06期
新型隐球菌墨汁染色检测法,一直以来以其操作简便、成本低而延用,尤其在疑为中枢神经系统隐球菌感染的脑脊液标本检测时.但在实际应用中,墨汁染色法受杂质及细胞成分干扰大,检出率低,特别在中枢感染的初期及恢复期,隐球菌数量较少,易漏检.现介绍一种简便快速的特殊染色法,提高隐球菌的检出率,供同行参考.
作者：杜本丽 刊期： 2005年第06期
我科于2003年4月安装并使用Bayer1650全自动生化分析仪,发现总胆汁酸(TBA)测定受其它项目的影响较大,几乎不能和其它项目同时测定,如同时测定,TBA的结果普遍都增高,只有单独测定时结果才理想,这给日常工作带来巨大的麻烦.为了解决这个问题我们做了如下探索.
作者：冯磊；年士艳；山德生；徐文波 刊期： 2005年第06期
上海迅达医疗仪器公司产的DSI-905电解质分析仪是一种具有自动定标、自动进样、操作简便、分析速度快、一次进样可同时测出K+、Na+、Cl-、Ca2+、nCa2+、pH等六项参数的分析仪,深受检验工作者欢迎.由于用户维护使用不当,该机也常常出现一些故障,现介绍一些日常维护必须注意的事项,以及几例常见故障的原因及排除方法.
作者：游跃星 刊期： 2005年第06期
使用日本光电公司生产的血细胞分析仪MEK-4200,购买原装试剂成本高,其稀释液用量大,为解决依赖进口试剂价格昂贵、运输不便等问题,查阅了大量资料[1～4],自配了稀释液,经几次改动,经过一段时间使用,效果良好.其实验评价报告如下:
作者：郝万鹏；沈萍 刊期： 2005年第06期
目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9～2.0);产量稳定(平均10～15 μg/1×106细胞,1～5μg/mg组织,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109细菌,10～20μg/1×108酵母菌);时间短(20～45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.
作者：饶国洲；李昂；景娟；姚天华；石建锋 刊期： 2005年第06期
目的探讨遗传性血液病地中海贫血(mediterranean anemia)的基因诊断.方法运用聚合酶链式反应(polymerase chin reaction,PCR)、反向斑点杂交法(reverse dot blot,RDB)对不明原因的33例溶血性贫血、重型贫血患儿进行基因分型、突变点位检测.结果通过对33例全血标本的检测,19例确诊为地中海贫血,其中4例为α-地中海贫血,15例为β-地中海贫血.β-地中海贫血患儿中,男11例,女4例;α-地中海贫血患儿中,男3例,女1例;19例患儿中单基因位点突变有16例,双重基因位点突变有3例.结论运用基因检测技术对血液病地中海贫血的临床诊断及治疗具有重要意义.
作者：胡双林；倪林仙；樊茂；奎莉越 刊期： 2005年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
