陈军浩；欧阳建；孙雪梅；耿东进
目的建立粪便标本中双歧杆菌的定量培养方法,旨在提供一种定量检测双歧杆菌的途径.方法自行研制双歧杆菌选择性培养基并进行性能检测.以同龄健康者为对照,定量培养60例便秘、腹泻等患者粪便标本中双歧杆菌.结果自制培养基与对照培养基选择培养双歧杆菌的性能相当.与健康对照组比较,消化道患者粪便标本中的双歧杆菌数量明显减少,肠杆菌数量显著增多,肠道定植抗力(CR)均值小于1,健康者CR均值大于1.两者差异有显著性(P＜0.01).结论该方法能定量检测粪便标本中的双歧杆菌且可用CR＞1作为人体肠道菌群正常的标准.
作者：张银旺 刊期： 2005年第06期
瑞典Boule Medical AB公司生产的AC-920EO+全自动血细胞分析仪,性能良好,操作方便.笔者就多年的使用经验,探索和总结了该仪器部分常见故障及排除,供使用该仪器的同行参考.
作者：张体永；杨夕 刊期： 2005年第06期
Sysmex-CA530全自动血凝仪因操作简单,耗材少,结果准确而被广泛使用,但是在工作中也遇到一些问题,现将一次仪器检修过程中遇到的两例故障介绍如下.
作者：陈风 刊期： 2005年第06期
当今网织红细胞(下称网红)计数虽已有先进的自动分析技术的应用,但迄今国内仍以显微镜目测法为主.目测计数原用缩小视野法,费工费时,计数精确性差,用Miller窥盘[1]后有了改善,但仍感不便,且市场上不易购得.本文设计一种改进的窥盘,改变原Miller窥盘大小方格比例和小方格位置,用电脑绘图,打印于透明投影胶片上,制成两方格面积比为10 : 1、小方格居中的改良Miller窥盘,制作简易,经济实用,效果好.
作者：陈高远；周文良；陈秀华 刊期： 2005年第06期
我科于2003年4月安装并使用Bayer1650全自动生化分析仪,发现总胆汁酸(TBA)测定受其它项目的影响较大,几乎不能和其它项目同时测定,如同时测定,TBA的结果普遍都增高,只有单独测定时结果才理想,这给日常工作带来巨大的麻烦.为了解决这个问题我们做了如下探索.
作者：冯磊；年士艳；山德生；徐文波 刊期： 2005年第06期
使用日本光电公司生产的血细胞分析仪MEK-4200,购买原装试剂成本高,其稀释液用量大,为解决依赖进口试剂价格昂贵、运输不便等问题,查阅了大量资料[1～4],自配了稀释液,经几次改动,经过一段时间使用,效果良好.其实验评价报告如下:
作者：郝万鹏；沈萍 刊期： 2005年第06期
AVL COMPACT2型血气分析仪,是一台微型全自动血气分析仪,该仪器具有精密度高、操作简单、方便、标本用量少等特点.我院引进已有多年,临床反应良好.但笔者在实际工作中遇见了该仪器经常出现的几个故障,并探索了一些解决办法,现作如下介绍.
作者：罗书久；唐中 刊期： 2005年第06期
目的探讨检测标本中血红蛋白(Hb)浓度对PCR扩增管中Taq酶活性的影响及消除影响的方法;探讨胰酶消化痰液的应用价值;比较淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、十二烷基硫酸钠(SDS)溶血液处理全血标本对检测结果敏感性的影响;观察SDS在结核分枝杆菌DNA(TB DNA)提取液中存在的价值及对Taq酶的影响.方法将经梯度稀释的Hb标准品与结核分枝杆菌(TB)定值质控品混匀制备成待检标本进行PCR检测;将定值Hb标准品与TB质控品混匀制备成待检标本,观察提取时100℃煮沸时间对Hb抑制Taq酶能力的影响;将结核患者的痰液分成两管,分别用4 g/dl NaOH消化、1 g/dl胰酶消化、1 g/dl胰酶消化+4 g/dl NaOH处理,比较PCR检测结果的敏感性;将结核患者的外周抗凝血分别用淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、SDS溶血剂处理,比较PCR检测结果的敏感性;用10 g/LSDS、1%(v/v)Triton、1 g/LSDS的1%(v/v)Triton、0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton提取液对相同的TB质控品进行TB DNA提取,观察PCR检测结果敏感性;56份痰液、34份全血按痰液、全血标本的方法处理,进行PCR扩增,比较检测结果的阳性率.结果当Hb≥10-5g/L时,Hb对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强;提取时100℃煮沸40 min与煮沸10 min的对照管结果完全一致;痰液标本处理方法的敏感性顺序为:胰酶消化+NaOH处理＞胰酶消化＞NaOH消化;全血标本处理方法的敏感性顺序为:红细胞裂解液法=淋巴细胞分离法＞SDS溶血法;提取方法PCR检测结果敏感性顺序为:0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞1%(v/v)Triton＞1 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞10 g/L SDS,SDS对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强.56份痰标本按上述方法处理的阳性率分别为57.1%(32/56),82.1%(46/56),91.0%(51/56),通过配对资料卡方检验,胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理与NaOH消化法之间具有显著性差异(P＜0.005),胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理之间差异无显著性(0.1＜P＜0.25);34份全血标本按上述方法处理的阳性率分别为79.4%(27/34),79.4%(27/34),47.0%(16/34),通过配对资料卡方检验,红细胞裂解液法和淋巴细胞分离法与SDS溶血法之间具有显著性差异(0.005＜P＜0.01).结论检测TB DNA标本的预处理有必要规范化.
作者：周步全；朱建峰；王迎春；王义凤；董川 刊期： 2005年第06期
上海迅达医疗仪器公司产的DSI-905电解质分析仪是一种具有自动定标、自动进样、操作简便、分析速度快、一次进样可同时测出K+、Na+、Cl-、Ca2+、nCa2+、pH等六项参数的分析仪,深受检验工作者欢迎.由于用户维护使用不当,该机也常常出现一些故障,现介绍一些日常维护必须注意的事项,以及几例常见故障的原因及排除方法.
作者：游跃星 刊期： 2005年第06期
在实验室质量控制中,分析前质量控制特别是对标本的处理是极为重要的一步,也是保证检验结果可靠性的重要环节.为了获得各检测项目的真实结果,标本处理所造成的误差应尽可能降到低(降至实验允许差异范围内).
作者：章晋林；张小鹏 刊期： 2005年第06期
目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本.结果该法至少可检测1.6×102/ml个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性.结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用.
作者：郭乃洲；周步全；严爱华；王万相 刊期： 2005年第06期
随着ELISA技术在基层检验领域的普及应用,洗板问题带来的误差日益引起检验工作者的重视,为解决这一问题,绝大多数单位配备了洗板机.但在实际应用中,经调查发现,90%的检测单位的洗板机仅用于整批检测的洗板,而非整批(不足8或12孔)的检测则采用手工洗板,致使洗板机不能得到良好应用,同时,手工洗板也给检验结果带来很大误差.笔者采用试验废弃的反应条,经过处理后,作为配平条使用的方法,经过长期实验室应用,效果尚好,特介绍如下.
作者：尹保杰；王晓丽；魏喜典；邵定国；魏聪白 刊期： 2005年第06期
目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水平与近期预后的关系.方法通过测定76例AMI患者的血清cTnI水平,根据cTnI水平分为二组,观察住院期间心力衰竭、心脏性死亡的发生率,测定左心室射血分数(LVEF),分析cTnI水平与它们的关系.结果A、B两组的心力衰竭、心脏性死亡的发生率存在显著差异.结论血清cTnI是AMI患者住院期间预后的独立预测因子.
作者：黄小琪；唐耀平 刊期： 2005年第06期
目的优化实验程序以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围.方法分别以未稀释样本及预稀释样本方式在CA1500全自动血凝仪上建立两套程序.应用D-二聚体标准品分别建立两套程序相应的定量标准曲线,一条为未稀释标准曲线,另一为预稀释标准曲线.在两条标准曲线模式下,分别对D-二聚体高值质控血浆和临床收集的43例D-二聚体异常升高血浆样本进行D-二聚体测定.结果未稀释标准曲线与预稀释标准曲线对应的D-二聚体检测线性范围分别是124～3 980μg/L和498～7 960μg/L.在未稀释标准曲线模式下,上述样本的D-二聚体均不能直接测出;而在预稀释标准曲线模式下,所有样本D-二聚体均可直接测出,其中D-二聚体高值质控血浆的D-二聚体测定结果为3 328±194μg/L,43例临床样本D-二聚体结果在1 386～6 185μg/L之间,平均为3 009±1 497μg/L.结论在应用免疫比浊法进行D-二聚体测定中,另外建立一套预稀释程序可以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围,而且可以较好地解决D-二聚体异常升高样本不能直接测定的问题.
作者：郑卫东；曾淑燕 刊期： 2005年第06期
目的采用荧光产物增强逆转录酶活性分析(STF-PERT),建立逆转录酶活性荧光定量方法,用于临床标本和献血员中逆转录病毒的检测.方法用荧光产物增强逆转录酶活性分析方法检测500份献血员血液样本;同时测定此方法的敏感性.结果将AMV逆转录酶经连续梯度稀释后,经PCR循环反应,得到与理论值完全相符合的PCR荧光值曲线.500份献血员样本有19份逆转录酶(RT)活性阳性,阳性率为3.8%;用常规筛选方法检测,有1份HIV可疑结果,2份HCv阳性,5份HBV阳性,共8份,筛检率为1.6%.结论常规的献血员血样筛选方法,并不能完全包含所有被检测献血员血样中的逆转录病毒;STF-PERT对及时发现逆转录病毒感染,提高临床输血安全性有着十分重要的意义.
作者：岳乔红；苏明权；杨柳；王宝燕；周萍；李银太；郝晓柯 刊期： 2005年第06期
目的了解HBV感染后,9种常见血清学组合模式下,如何选择HBV-DNA荧光定量检测.方法对照545份血清标本同时进行ELISA方法测定HBV-M及PCR荧光定量检测HBV-DNA.结果①HBsAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(+)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,185份标本HBV-DNA在5×102～107copies/ml之间,阳性率为100%(185/185);②HB-sAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,42份标本HBV-DNA在5×102～107copies/ml之间,阳性率为59.15%(42/71);③HBsAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,79份标本HBV-DNA在5×102～106copies/ml之间,阳性率为34.80%(79/227);④HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,8份标本HBV-DNA为5×102～103copies/ml,阳性率为38.10%(8/21);⑤HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,2份标本HBV-DNA在5×102～104copies/ml之间,阳性率为40.00%(2/5);⑥HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,1份标本HBV-DNA为5×102～103copies/ml,阳性率为33.33%(1/3);⑦HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(-)组,3份标本HBV-DNA在5×102～104copies/ml之间,阳性率为16.67%(3/18);⑧HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,1份标本HBV-DNA小于5×102copies/ml,阳性率为0%(0/1);⑨HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(-)组,14份标本HBV-DNA小于5×102copies/ml,阳性率为0%(0/14).结论在常见9种血清学组合模式中,只有HBsAg(+)的血清学组合模式下,行HBV-DNA荧光定量检测,对临床诊断治疗HBV感染有重要价值.因其它血清学组合模式下,应结合肝功能状况或为进一步确诊HBV是否感染而行HBV-DNA的荧光定量检测.
作者：李庆科；杨含腾；王兴昌 刊期： 2005年第06期
目的探讨强直性脊柱炎患者HLA-B27、B7、B13、B40的抗原表达,发现抗原相互杂合与交叉反应,以及强直性脊柱炎患者的免疫学指标的变化.方法采用NIH微量淋巴细胞毒法对HLA-B27等抗原进行检测,抗核抗体采用间接免疫荧光法,免疫球蛋白及补体均采用免疫速率散射法测定.结果126例初诊患者中HLA-B27阳性率为34.1%,HLA-B7、B13、B40的阳性率分别为6.3%,13.5%,11.1%.HLA-B27阳性组中HLA-B13阳性率为27.9%,HLA-B40阳性率为23.3%,分别高于HLA-B27阴性组(6.0%,4.8%),而HLA-B7的阳性率两组无显著性差异.HLA-B27阳性组的免疫球蛋白、补体、抗核抗体指标均显著高于HLA-B27阴性组(P均＜0.05).结论检测强直性脊柱炎患者HLA-B27及相关B抗原有助于疾病诊断和抗原交叉反应的分析,体液免疫异常及自身抗体的出现与HLA-B27密切相关.
作者：李士军；袁宏；王滨；曹华军 刊期： 2005年第06期
目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9～2.0);产量稳定(平均10～15 μg/1×106细胞,1～5μg/mg组织,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109细菌,10～20μg/1×108酵母菌);时间短(20～45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.
作者：饶国洲；李昂；景娟；姚天华；石建锋 刊期： 2005年第06期
目的检测临床分离的65株大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE-sull的存在情况.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测65株大肠埃希菌及1株ATCC25922的qacE-sull基因.结果65株大肠埃希菌的qacE-sul1基因的阳性率为58.46%.结论大肠埃希菌耐消毒剂的qacE-sull基因携带率较高,可能是该菌引起院内感染的重要原因,应引起我国医院消毒界的重视.
作者：王家平；王苏建；张洪亚；张晓梅；糜祖煌 刊期： 2005年第06期
目的观察急性冠脉综合征(ACS)早期西洛他唑治疗对血清可溶性CD40L的影响,了解西洛他唑对ACS斑块稳定性和免疫炎症抑制的作用.方法92例初次确诊为ACS患者分为常规治疗组44例和西洛他唑治疗组48例,用ELISA法测定92例ACS患者治疗前后血清sCD40L水平的变化.结果西洛他唑治疗组ACS患者治疗后血清sCD4OL水平明显下降,与常规治疗组比较有显著统计学差异(P＜0.01).结论ACS患者早期予以西洛他唑治疗,可以明显降低血清炎症因子水平,从而改善该病进程.
作者：王维；徐邦牢；黎镇赐；贝春花 刊期： 2005年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
