配平条在ELISA检测中的应用

尹保杰；王晓丽；魏喜典；邵定国；魏聪白

关键词：检测, 洗板机, 实际应用, 手工洗板, 误差, 检验结果, 单位, 实验室, 工作者, 试验, 普及, 配备, 技术, 基层, 方法, 调查, 处理

摘要：随着ELISA技术在基层检验领域的普及应用,洗板问题带来的误差日益引起检验工作者的重视,为解决这一问题,绝大多数单位配备了洗板机.但在实际应用中,经调查发现,90%的检测单位的洗板机仅用于整批检测的洗板,而非整批(不足8或12孔)的检测则采用手工洗板,致使洗板机不能得到良好应用,同时,手工洗板也给检验结果带来很大误差.笔者采用试验废弃的反应条,经过处理后,作为配平条使用的方法,经过长期实验室应用,效果尚好,特介绍如下.

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配平条在ELISA检测中的应用

随着ELISA技术在基层检验领域的普及应用,洗板问题带来的误差日益引起检验工作者的重视,为解决这一问题,绝大多数单位配备了洗板机.但在实际应用中,经调查发现,90%的检测单位的洗板机仅用于整批检测的洗板,而非整批(不足8或12孔)的检测则采用手工洗板,致使洗板机不能得到良好应用,同时,手工洗板也给检验结果带来很大误差.笔者采用试验废弃的反应条,经过处理后,作为配平条使用的方法,经过长期实验室应用,效果尚好,特介绍如下.

作者：尹保杰；王晓丽；魏喜典；邵定国；魏聪白刊期： 2005年第06期
粪便标本中双歧杆菌定量培养方法的建立与评价

目的建立粪便标本中双歧杆菌的定量培养方法,旨在提供一种定量检测双歧杆菌的途径.方法自行研制双歧杆菌选择性培养基并进行性能检测.以同龄健康者为对照,定量培养60例便秘、腹泻等患者粪便标本中双歧杆菌.结果自制培养基与对照培养基选择培养双歧杆菌的性能相当.与健康对照组比较,消化道患者粪便标本中的双歧杆菌数量明显减少,肠杆菌数量显著增多,肠道定植抗力(CR)均值小于1,健康者CR均值大于1.两者差异有显著性(P＜0.01).结论该方法能定量检测粪便标本中的双歧杆菌且可用CR＞1作为人体肠道菌群正常的标准.

作者：张银旺刊期： 2005年第06期
冠心病时血液流变学指标变化及临床意义

冠心病的基本病因是冠状动脉粥样硬化[5],从而引起冠状动脉不同程度的狭窄,进一步引发心绞痛和心肌梗死等一系列临床表现.在动脉粥样硬化形成过程中,血液流变性的改变与疾病的发生发展息息相关,两者密不可分.本文对50例健康人与100例冠心病患者进行血液流变学16项指标的测定与比较,从而证明血液流变学在冠心病的早期诊断中的重要作用,同时为临床医生对疾病的发展、转归和预后提供重要信息.

作者：祁贺栋刊期： 2005年第06期
肌钙蛋白Ⅰ水平与急性心肌梗死患者预后的关系

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水平与近期预后的关系.方法通过测定76例AMI患者的血清cTnI水平,根据cTnI水平分为二组,观察住院期间心力衰竭、心脏性死亡的发生率,测定左心室射血分数(LVEF),分析cTnI水平与它们的关系.结果A、B两组的心力衰竭、心脏性死亡的发生率存在显著差异.结论血清cTnI是AMI患者住院期间预后的独立预测因子.

作者：黄小琪；唐耀平刊期： 2005年第06期
KX-21N血细胞分析仪常见故障及错误信息处理

KN-21N全自动血细胞分析仪是日本东亚公司生产的产品,我院使用该仪器已有2年多,在临床试验中检测了4万余例,提示该仪器具有自动化程度高、操作简单、重复性好、准确率高,无氰化物试剂、故障低等优点.但随着使用时间的延长,仪器会出现一些问题.现就该仪器在临床操作中出现的几种常见故障及错误信息处理作一分析,以供同行参考和实际操作.

作者：何爱湘刊期： 2005年第06期
Bayer1650全自动生化分析仪测定总胆汁酸交叉污染的解决方案

我科于2003年4月安装并使用Bayer1650全自动生化分析仪,发现总胆汁酸(TBA)测定受其它项目的影响较大,几乎不能和其它项目同时测定,如同时测定,TBA的结果普遍都增高,只有单独测定时结果才理想,这给日常工作带来巨大的麻烦.为了解决这个问题我们做了如下探索.

作者：冯磊；年士艳；山德生；徐文波刊期： 2005年第06期
荧光定量聚合酶链反应检测人乳腺癌C-erbB2基因扩增及过度表达的研究

目的建立荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测C-erbB2基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用.方法建立FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定15名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中C-erbB2的表达量.结果C-erbB2表达水平在正常对照组和良性乳腺疾病组间差异无显著性意义(P＞0.05),乳腺癌组均高于前两组(P＜0.05),β2-微球蛋白在三组间差异无显著性意义(P＞0.05).81例乳腺癌患者阳性率为50.6%,良性乳腺疾病组为0.C-erbB2表达与患者年龄和肿瘤大小和类型无关(P＞0.05),与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关(P＜0.05).结论FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测C-erbB2方法,可有效地诊断乳腺癌并对其疗效、转移和预后进行监测.

作者：邓君；黄文方；饶绍琴；杨洋刊期： 2005年第06期
抗β2-糖蛋白1抗体与狼疮性肾炎的关系研究

目的探讨抗β2-GP1抗体与狼疮性肾炎(LN)的相关性.方法采用ELISA法测定随机抽取活动期LN患者33例血清中抗β2-GP1,同时检测患者血清IgG、Cs及Cr.结果与正常对照组及其它肾炎组相比,LN组抗β2-GP1水平明显升高(P＜0.01),阳性率高达54.55%,显示抗β2-GP1与LN有较强的相关性.结论抗β2-GP1可作为LN早期诊断的重要指标.

作者：单玉蓉；周红；陈巧林刊期： 2005年第06期
早期西洛他唑治疗对急性冠脉综合征血清可溶性CD40L水平的影响

目的观察急性冠脉综合征(ACS)早期西洛他唑治疗对血清可溶性CD40L的影响,了解西洛他唑对ACS斑块稳定性和免疫炎症抑制的作用.方法92例初次确诊为ACS患者分为常规治疗组44例和西洛他唑治疗组48例,用ELISA法测定92例ACS患者治疗前后血清sCD40L水平的变化.结果西洛他唑治疗组ACS患者治疗后血清sCD4OL水平明显下降,与常规治疗组比较有显著统计学差异(P＜0.01).结论ACS患者早期予以西洛他唑治疗,可以明显降低血清炎症因子水平,从而改善该病进程.

作者：王维；徐邦牢；黎镇赐；贝春花刊期： 2005年第06期
血液标本的保存条件与保存时间对常规生化检测结果的影响

在实验室质量控制中,分析前质量控制特别是对标本的处理是极为重要的一步,也是保证检验结果可靠性的重要环节.为了获得各检测项目的真实结果,标本处理所造成的误差应尽可能降到低(降至实验允许差异范围内).

作者：章晋林；张小鹏刊期： 2005年第06期
Panasonic多媒体呈像检查阴道分泌物中线索细胞

阴道分泌物检查是妇科诊断和治疗女性泌尿生殖系统炎症的一种常用的检查方法.传统的生理盐水涂片法是妇科阴道分泌物常规检查方法[1],但由于是多细菌混合感染,给细菌的鉴定带来困难.根据病原体革兰氏染色后易与其它有形成分相区别,我科在原有计算机软件基础上进行开发,利用Panasonic多媒体呈像检测仪呈像后容易观察的特点,提高了细菌性阴道病(BV)检测的灵敏度和准确度,现报告如下:

作者：汪文明；杨夕；游树林；黄仁河刊期： 2005年第06期
HITACHI/BM-717全自动生化分析仪常见故障分析及处理

我院引进BM717已一年半,该仪器每小时800个测试,具有操作简单,测试速度快,试剂用量少,控温精度高等特点.自运行以来状态良好,但在使用过程中也遇到一些报警信息提示和故障,影响测试和工作,现就故障现象及处理方法总结如下,供使用该仪器的同行参考.

作者：杨洪芬刊期： 2005年第06期
《HBsAg检测双质控比率质控方法》的商榷

[现代检验医学杂志,2003;18(5)]对批间CV值较大,易受多种因素影响且不易掌握的EIA质控提出新的方法,运用双质控物的比率来控制CV值取得了较好的结果,为EIA质控拓展了思路.但我们对某些观点提出自己的不同意见,供各位同仁在检验医学工作中参考.

作者：肖友益；杨厚清刊期： 2005年第06期
免疫比浊法定量检测D-二聚体的实验程序优化及实际价值

目的优化实验程序以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围.方法分别以未稀释样本及预稀释样本方式在CA1500全自动血凝仪上建立两套程序.应用D-二聚体标准品分别建立两套程序相应的定量标准曲线,一条为未稀释标准曲线,另一为预稀释标准曲线.在两条标准曲线模式下,分别对D-二聚体高值质控血浆和临床收集的43例D-二聚体异常升高血浆样本进行D-二聚体测定.结果未稀释标准曲线与预稀释标准曲线对应的D-二聚体检测线性范围分别是124～3 980μg/L和498～7 960μg/L.在未稀释标准曲线模式下,上述样本的D-二聚体均不能直接测出;而在预稀释标准曲线模式下,所有样本D-二聚体均可直接测出,其中D-二聚体高值质控血浆的D-二聚体测定结果为3 328±194μg/L,43例临床样本D-二聚体结果在1 386～6 185μg/L之间,平均为3 009±1 497μg/L.结论在应用免疫比浊法进行D-二聚体测定中,另外建立一套预稀释程序可以拓展免疫比浊法定量检测D-二聚体的检测范围,而且可以较好地解决D-二聚体异常升高样本不能直接测定的问题.

作者：郑卫东；曾淑燕刊期： 2005年第06期
革兰阴性菌感染患者血脂测定的临床意义

目的探讨革兰阴性菌感染患者血脂水平的改变.方法采用酶法和免疫比浊法检测细菌感染患者的血脂,并相互比较.结果革兰阴性细菌感染组比对照组和革兰阳性细菌感染组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)及载脂蛋白A1/B(apoA1/apoB)均明显降低(P＜0.02),而甘油三酯(TG)有所升高(P＜0.02).感染组白细胞(WBC)均明显升高(P＜0.001),而两感染组之间WBC无差别(P＞0.05).结论细菌感染患者HDL-C及apoA1的明显降低,有助于革兰阴性菌感染的判断,有利于内毒素血症早期合理地使用抗生素.

作者：邹国英；黄露萍；任碧琼刊期： 2005年第06期
蛋白指纹技术在肿瘤诊断中的应用与进展

蛋白指纹技术(protein fingerprinting)是表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,缩写SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)的俗称,它指的就像每个人的指纹不同于他人一样,每种疾病在发生发展过程中所形成的特定蛋白组或其降解产物也不一样,所以对此各种特异性蛋白指纹图谱的识别和判断,就可达到对各类疾病进行准确诊断的目的.

作者：汪隆海刊期： 2005年第06期
血清CysC作为肾小球滤过率指标在慢性肾功能衰竭中的意义

目的探讨血CysC作为肾小球滤过率指标在慢性肾功能衰竭中的应用价值.方法将81例住院病人分为肾功能正常组及慢性肾功能衰竭Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,测定各组病人的血、尿肌奸、血CysC和β2-MG,并与正常对照组比较.结果各期肾衰病人血清CysC、β2-MG及Ccr与肾功能正常组比较有显著性差异(P＜0.01),而各组病人CysC和β2-MG与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.01);血Cr与血β2-MG和CysC的相关系数r分别为0.704 3和0.831 5,Ccr与血β2-MG和CysC的相关系数r分别为-0.672 3和-0.798 2.结论血CysC作为肾小球滤过率指标更为适合.

作者：张耀祖刊期： 2005年第06期
放免检测室内质控血清的制备及初步应用

目的建立一种相对长久、稳定的放免检测室内质控方法.方法将健康体检者的血清样本混合后分装,冷冻保存在-20℃冰箱中.每批次放免检测时,取一支插入常规标本中进行测定后,观察其质控血清的稳定性,并建立放射免疫检测的L-J质控图.结果自制室内质控血清在-20℃条件下保存12 mo结果稳定.结论自制质控血清可以用于放免检测的常规室内质控.

作者：黄绍光；黄学忠；周平；陈晓飞；林佩佩刊期： 2005年第06期
不同检测系统孕酮测定结果的可比性研究

目的探讨不同检测系统测定孕酮(PRGE)结果的可比性.方法取Bayer、德普和自制不同水平的质控物,以及35例不同浓度的患者新鲜血清,在四个不同的化学发光检测系统(强生VITROS ECI、拜尔ACS180、拜尔CENTAUR、德普immulite-1000及其配套的校准物、试剂、质控物等,分别命名为检测系统1～4)上进行PRGE检测,并对数据进行相关的统计学分析.结果经随机区组设计资料的方差分析,不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清PRGE测定结果在各检测系统的组间总体差异均有显著性(P＜0.001);各检测系统PRGE测定结果的可靠性系数a接近1,各检洲系统间的相关系数均大于0.975.以检测系统1作为目标检测系统,对其它检测系统作临床可接受性能评价,检测系统2和3临床均接受,检测系统4临床部分接受.结论4个检测系统测定PRGE结果的精密度符合临床要求,临床可接受性能评价除检测系统4外均有可比性.

作者：冯妙芙；黄宪章；徐宁；庄俊华；张秀明；梁伟雄刊期： 2005年第06期
阿利新蓝染色法检查新型隐球菌

新型隐球菌墨汁染色检测法,一直以来以其操作简便、成本低而延用,尤其在疑为中枢神经系统隐球菌感染的脑脊液标本检测时.但在实际应用中,墨汁染色法受杂质及细胞成分干扰大,检出率低,特别在中枢感染的初期及恢复期,隐球菌数量较少,易漏检.现介绍一种简便快速的特殊染色法,提高隐球菌的检出率,供同行参考.

作者：杜本丽刊期： 2005年第06期