学术投稿

蛋白指纹技术在肿瘤诊断中的应用与进展

汪隆海

关键词:蛋白指纹技术, 肿瘤诊断, mass spectrometry, 激光解吸离子化, 蛋白指纹图谱, 准确诊断, 种特异性, 质谱技术, 降解产物, 疾病, 飞行时间, 发生发展, 表面增强, 蛋白组, 缩写, 识别
摘要:蛋白指纹技术(protein fingerprinting)是表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,缩写SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)的俗称,它指的就像每个人的指纹不同于他人一样,每种疾病在发生发展过程中所形成的特定蛋白组或其降解产物也不一样,所以对此各种特异性蛋白指纹图谱的识别和判断,就可达到对各类疾病进行准确诊断的目的.
现代检验医学杂志相关文献
  • 国际输血协会血型2004红细胞表面抗原术语

    人类100年以前发现了血型,在20世纪用不同的形式术语表达.1980年国际输血协会建立了一个工作组,采用基于遗传的数字术语对红细胞表面抗原进行分类.1990年工作组出版了专著,用数字术语描述了242个红细胞抗原.

    作者:刘孟黎;牛姗姗 刊期: 2005年第06期

  • 急性心肌梗死患者血清m-AST的变化及意义

    目的探讨线粒体天门冬氨酸转氨酶同工酶(m-AST)在急性心肌梗死(AMI)患者血清的变化及其临床意义.方法用全自动生化分析仪测定了19例AMI患者血清m-AST活性,同时观察其它4种心肌酶AST、CK、CK-MB、LDH动态变化.结果AMI患者,发病6 h血清m-AST即升高,与对照组相比有极显著差异,P<0.001.12 h迅速升高,24 h达峰值(256.5±69.5 IU/L),此后,逐渐下降,120 h时基本正常,与对照组相比无显著差异,P>0.05.m-AST升高的幅度差别较大,6h m-AST升高幅度略低于CK-MB、AST;12 h迅速升高,是正常的16.2倍;48 h达高,是正常的21.9倍;随后迅速下降,120 h时是正常的1.3倍,升高曲线与CK-MB相当,比AST、CK及LDH敏感.与AST、CK、CK-MB、LDH的异常检出率进行比较,发病6 h异常检出率依次为CK-MB>CK>AST>m-AST>LDH,24 h内不断上升,其中以m-AST与CK-MB异常检出率高,达100%,CK、AST次之,为89.5%和84.2%,LDH较低,为73.6%.48 h后检出率逐渐下降,下降速度是AST3.9倍,是CK2.7倍,CK-MB 1.2倍,LDH 5.1倍.结论检测并动态观察m-AST酶活性,可作为诊断AMI并评价疗效、判断预后的一项新的生化指标.

    作者:阴斌霞;王华;王香玲;赵丽华;柴丽华;岳天海;何谦;樊晓燕;王幼利 刊期: 2005年第06期

  • 蛋白指纹技术在肿瘤诊断中的应用与进展

    蛋白指纹技术(protein fingerprinting)是表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,缩写SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)的俗称,它指的就像每个人的指纹不同于他人一样,每种疾病在发生发展过程中所形成的特定蛋白组或其降解产物也不一样,所以对此各种特异性蛋白指纹图谱的识别和判断,就可达到对各类疾病进行准确诊断的目的.

    作者:汪隆海 刊期: 2005年第06期

  • KX-21N血细胞分析仪常见故障及错误信息处理

    KN-21N全自动血细胞分析仪是日本东亚公司生产的产品,我院使用该仪器已有2年多,在临床试验中检测了4万余例,提示该仪器具有自动化程度高、操作简单、重复性好、准确率高,无氰化物试剂、故障低等优点.但随着使用时间的延长,仪器会出现一些问题.现就该仪器在临床操作中出现的几种常见故障及错误信息处理作一分析,以供同行参考和实际操作.

    作者:何爱湘 刊期: 2005年第06期

  • 抗β2-糖蛋白1抗体与狼疮性肾炎的关系研究

    目的探讨抗β2-GP1抗体与狼疮性肾炎(LN)的相关性.方法采用ELISA法测定随机抽取活动期LN患者33例血清中抗β2-GP1,同时检测患者血清IgG、Cs及Cr.结果与正常对照组及其它肾炎组相比,LN组抗β2-GP1水平明显升高(P<0.01),阳性率高达54.55%,显示抗β2-GP1与LN有较强的相关性.结论抗β2-GP1可作为LN早期诊断的重要指标.

    作者:单玉蓉;周红;陈巧林 刊期: 2005年第06期

  • 荧光定量聚合酶链反应检测人乳腺癌C-erbB2基因扩增及过度表达的研究

    目的建立荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测C-erbB2基因表达水平,探讨其在乳腺癌诊断和治疗监测中的应用.方法建立FQ-PCR法,并以β2-微球蛋白为内对照测定15名健康女性体检者、30例良性乳腺疾病患者和81例乳腺癌患者外周血中C-erbB2的表达量.结果C-erbB2表达水平在正常对照组和良性乳腺疾病组间差异无显著性意义(P>0.05),乳腺癌组均高于前两组(P<0.05),β2-微球蛋白在三组间差异无显著性意义(P>0.05).81例乳腺癌患者阳性率为50.6%,良性乳腺疾病组为0.C-erbB2表达与患者年龄和肿瘤大小和类型无关(P>0.05),与乳腺癌临床分期、组织学分级以及腋淋巴结转移相关(P<0.05).结论FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测C-erbB2方法,可有效地诊断乳腺癌并对其疗效、转移和预后进行监测.

    作者:邓君;黄文方;饶绍琴;杨洋 刊期: 2005年第06期

  • 强直性脊柱炎患者HLA-B27、B7、B13、B40抗原表达及免疫学指标的分析

    目的探讨强直性脊柱炎患者HLA-B27、B7、B13、B40的抗原表达,发现抗原相互杂合与交叉反应,以及强直性脊柱炎患者的免疫学指标的变化.方法采用NIH微量淋巴细胞毒法对HLA-B27等抗原进行检测,抗核抗体采用间接免疫荧光法,免疫球蛋白及补体均采用免疫速率散射法测定.结果126例初诊患者中HLA-B27阳性率为34.1%,HLA-B7、B13、B40的阳性率分别为6.3%,13.5%,11.1%.HLA-B27阳性组中HLA-B13阳性率为27.9%,HLA-B40阳性率为23.3%,分别高于HLA-B27阴性组(6.0%,4.8%),而HLA-B7的阳性率两组无显著性差异.HLA-B27阳性组的免疫球蛋白、补体、抗核抗体指标均显著高于HLA-B27阴性组(P均<0.05).结论检测强直性脊柱炎患者HLA-B27及相关B抗原有助于疾病诊断和抗原交叉反应的分析,体液免疫异常及自身抗体的出现与HLA-B27密切相关.

    作者:李士军;袁宏;王滨;曹华军 刊期: 2005年第06期

  • Panasonic多媒体呈像检查阴道分泌物中线索细胞

    阴道分泌物检查是妇科诊断和治疗女性泌尿生殖系统炎症的一种常用的检查方法.传统的生理盐水涂片法是妇科阴道分泌物常规检查方法[1],但由于是多细菌混合感染,给细菌的鉴定带来困难.根据病原体革兰氏染色后易与其它有形成分相区别,我科在原有计算机软件基础上进行开发,利用Panasonic多媒体呈像检测仪呈像后容易观察的特点,提高了细菌性阴道病(BV)检测的灵敏度和准确度,现报告如下:

    作者:汪文明;杨夕;游树林;黄仁河 刊期: 2005年第06期

  • 外周血单个核细胞表面表达MHC分子的研究

    外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),主要为淋巴细胞和单核细胞,其中绝大多数为淋巴细胞.主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)结构十分复杂,其多样性由基因性和多肽性两方面构成.多基因性指复合体由多个位置相邻的基因座位所组成,编码产物具有相同或相似的功能.根据结构和功能,组成MHC的基因传统上分为MHC-Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类.MHC-Ⅰ类分子几乎存在于所有有核细胞,外周血白细胞表达MHC-Ⅰ类抗原量多,且外周血比较容易检测,因此研究MHC分子的表达主要研究外周血单个核细胞表面的表达.

    作者:李向东 刊期: 2005年第06期

  • 不同检测系统血小板测定结果的可比性研究

    目的探讨7个血液分析检测系统血小板测定结果的可比性.方法以可溯源的Bayer120全自动血液分析仪及其配套的校准物、试剂和质控物为目标检测系统,与其它6个检测系统(Coulter、CD3500、Bayer60、3台CD1700血液分析仪及其配套的校准物、试剂和质控物)为待评检测系统.在21个工作日内分别测定3种水平的四川通广全血质控物各10次、7次、7次和不同浓度新鲜全血样本55份.通过医学决定水平和相应回归方程计算目标检测系统与待评系统之间的相对偏差(%SE),以美国临床实验室修正法规(CLIA′88)规定的室间质量评价允许误差(T±25%)范围的1/2(T±12.5%)为标准,判断不同检测系统之间的可比性.结果3种水平的四川通广全血质控物和新鲜血标本经随机区组设计资料的方差分析各组间的总体差异均有显著性(P<0.001),各水平质控物的变异系数(CV%)和总CV值均小于CLIA′88允许误差范围的1/3(T±8.3%).新鲜全血样本各系统间测定结果的信度系数a为0.996 4,各检测系统间相关系数均大于0.975;临床可接受性能评价均为部分或全部超过CLIA′88允许范围的1/2.结论各检测系统血小板测定的精密度符合临床要求,各检测系统间均存在不可比性,应采取改进措施,以保证检验结果具有可比性.

    作者:吕国全;顾耀松;黄宪章;王美兰;卢妙莲 刊期: 2005年第06期

  • KX-21血细胞分析仪维修一例

    1故障现象仪器在自动清洗时,提示空白计数错误,WBC空白计数值高出正常值十多倍.

    作者:秦峰 刊期: 2005年第06期

  • 高纯化RNA分离方法的建立与应用

    目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9~2.0);产量稳定(平均10~15 μg/1×106细胞,1~5μg/mg组织,2.5~5μg/ml全血,50~100 μg/1×109细菌,10~20μg/1×108酵母菌);时间短(20~45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.

    作者:饶国洲;李昂;景娟;姚天华;石建锋 刊期: 2005年第06期

  • Bayer1650全自动生化分析仪测定总胆汁酸交叉污染的解决方案

    我科于2003年4月安装并使用Bayer1650全自动生化分析仪,发现总胆汁酸(TBA)测定受其它项目的影响较大,几乎不能和其它项目同时测定,如同时测定,TBA的结果普遍都增高,只有单独测定时结果才理想,这给日常工作带来巨大的麻烦.为了解决这个问题我们做了如下探索.

    作者:冯磊;年士艳;山德生;徐文波 刊期: 2005年第06期

  • 粪便标本中双歧杆菌定量培养方法的建立与评价

    目的建立粪便标本中双歧杆菌的定量培养方法,旨在提供一种定量检测双歧杆菌的途径.方法自行研制双歧杆菌选择性培养基并进行性能检测.以同龄健康者为对照,定量培养60例便秘、腹泻等患者粪便标本中双歧杆菌.结果自制培养基与对照培养基选择培养双歧杆菌的性能相当.与健康对照组比较,消化道患者粪便标本中的双歧杆菌数量明显减少,肠杆菌数量显著增多,肠道定植抗力(CR)均值小于1,健康者CR均值大于1.两者差异有显著性(P<0.01).结论该方法能定量检测粪便标本中的双歧杆菌且可用CR>1作为人体肠道菌群正常的标准.

    作者:张银旺 刊期: 2005年第06期

  • 影响IFMA效果的常见问题与对策

    IFMA是时间分辨免疫荧光分析测定法的简称,是继免疫吸附试验和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术.它以免疫学反应为基础,将抗原与抗体的特异性反应与金属铕标记抗体作用相结合,再加入增强液将复合物标记抗体上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与溶液中的待测物质的浓度成正比.

    作者:李祥安;杨焕涛 刊期: 2005年第06期

  • 类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群的变化

    目的探讨外周血T淋巴细胞Ag-NORs及T亚群在类风湿性关节炎中的应用价值.方法32例类风湿性关节炎患者,17例病人处于活动期,15例经治疗后处于缓解期.36例健康体检者作为对照.分别检测外周血T淋巴细胞AgNORs、T亚群(CD3+、CD4+、CD8+),计算CD4+/CD8+比值.结果与对照组相比,RA病人活动期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值均升高(P<0.05),而CD8+细胞降低(P<0.05).RA缓解期T淋巴细胞Ag-NORs、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值较活动期下降(P<0.05),CD8+细胞较活动期升高(P<0.05),与对照组相比均无显著性差异(P>0.05).CD3+T细胞在RA活动期、缓解期中与对照组相比均无显著性差异(P>0.05).T淋巴细胞Ag-NORs与CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+4/CD8+比值之间相关系数均小于0.3(P>0.05),无相关性.结论外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量、T细胞亚群分析与RA的发生、发展、治疗有一定关系,结合二者,在观察RA患者的机体免疫状态、疗效方面有一定意义.

    作者:周晖;江楚文;石蕴珍;崔阳;张建军;周茂华 刊期: 2005年第06期

  • 自制改良Miller窥盘计数网织红细胞及应用

    当今网织红细胞(下称网红)计数虽已有先进的自动分析技术的应用,但迄今国内仍以显微镜目测法为主.目测计数原用缩小视野法,费工费时,计数精确性差,用Miller窥盘[1]后有了改善,但仍感不便,且市场上不易购得.本文设计一种改进的窥盘,改变原Miller窥盘大小方格比例和小方格位置,用电脑绘图,打印于透明投影胶片上,制成两方格面积比为10 : 1、小方格居中的改良Miller窥盘,制作简易,经济实用,效果好.

    作者:陈高远;周文良;陈秀华 刊期: 2005年第06期

  • 义务献血前ALT初筛的意义及成本效益分析

    目的探讨义务献血前ALT初筛的意义和分析成本效益.方法用干式生化法进行ALT初筛,并与微板速率法检测结果相比较,同时核算初筛的成本和效益.结果干式生化法与微板速率法检测结果无显著性差异(t=1.108,0.20<P<0.50).初筛组和未初筛组的ALT异常血液报废率分别为0.078%和3.97%,两者有显著性差异(u=22.95,P<0.001).结论实行ALT初筛可大大降低血液报废率和避免浪费血源,具有良好的社会效益和经济效益.

    作者:邬旭群;鲍自谦;陈云龙 刊期: 2005年第06期

  • 斑点杂交法检测结核分枝杆菌的初步报告

    目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本.结果该法至少可检测1.6×102/ml个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性.结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用.

    作者:郭乃洲;周步全;严爱华;王万相 刊期: 2005年第06期

  • 早期西洛他唑治疗对急性冠脉综合征血清可溶性CD40L水平的影响

    目的观察急性冠脉综合征(ACS)早期西洛他唑治疗对血清可溶性CD40L的影响,了解西洛他唑对ACS斑块稳定性和免疫炎症抑制的作用.方法92例初次确诊为ACS患者分为常规治疗组44例和西洛他唑治疗组48例,用ELISA法测定92例ACS患者治疗前后血清sCD40L水平的变化.结果西洛他唑治疗组ACS患者治疗后血清sCD4OL水平明显下降,与常规治疗组比较有显著统计学差异(P<0.01).结论ACS患者早期予以西洛他唑治疗,可以明显降低血清炎症因子水平,从而改善该病进程.

    作者:王维;徐邦牢;黎镇赐;贝春花 刊期: 2005年第06期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院