陈风
目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9～2.0);产量稳定(平均10～15 μg/1×106细胞,1～5μg/mg组织,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109细菌,10～20μg/1×108酵母菌);时间短(20～45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.
作者：饶国洲；李昂；景娟；姚天华；石建锋 刊期： 2005年第06期
[现代检验医学杂志,2003;18(5)]对批间CV值较大,易受多种因素影响且不易掌握的EIA质控提出新的方法,运用双质控物的比率来控制CV值取得了较好的结果,为EIA质控拓展了思路.但我们对某些观点提出自己的不同意见,供各位同仁在检验医学工作中参考.
作者：肖友益；杨厚清 刊期： 2005年第06期
冠心病的基本病因是冠状动脉粥样硬化[5],从而引起冠状动脉不同程度的狭窄,进一步引发心绞痛和心肌梗死等一系列临床表现.在动脉粥样硬化形成过程中,血液流变性的改变与疾病的发生发展息息相关,两者密不可分.本文对50例健康人与100例冠心病患者进行血液流变学16项指标的测定与比较,从而证明血液流变学在冠心病的早期诊断中的重要作用,同时为临床医生对疾病的发展、转归和预后提供重要信息.
作者：祁贺栋 刊期： 2005年第06期
在使用SYNCHRON LX20全自动生化分析仪器时,常出现SUB DEPL、IR HI、SAMP REF DRIFT等异常分析值[1],正确分析和处理这些异常分析值,有针对性的对标本进行处理和重新检测显得尤其重要,现将结果后面标识的各种情况分析及处理介绍如下:
作者：李永臣；单淑萍；袁凯 刊期： 2005年第06期
IFMA是时间分辨免疫荧光分析测定法的简称,是继免疫吸附试验和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术.它以免疫学反应为基础,将抗原与抗体的特异性反应与金属铕标记抗体作用相结合,再加入增强液将复合物标记抗体上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与溶液中的待测物质的浓度成正比.
作者：李祥安；杨焕涛 刊期： 2005年第06期
目的探讨抗β2-GP1抗体与狼疮性肾炎(LN)的相关性.方法采用ELISA法测定随机抽取活动期LN患者33例血清中抗β2-GP1,同时检测患者血清IgG、Cs及Cr.结果与正常对照组及其它肾炎组相比,LN组抗β2-GP1水平明显升高(P＜0.01),阳性率高达54.55%,显示抗β2-GP1与LN有较强的相关性.结论抗β2-GP1可作为LN早期诊断的重要指标.
作者：单玉蓉；周红；陈巧林 刊期： 2005年第06期
目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本.结果该法至少可检测1.6×102/ml个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性.结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用.
作者：郭乃洲；周步全；严爱华；王万相 刊期： 2005年第06期
目的建立粪便标本中双歧杆菌的定量培养方法,旨在提供一种定量检测双歧杆菌的途径.方法自行研制双歧杆菌选择性培养基并进行性能检测.以同龄健康者为对照,定量培养60例便秘、腹泻等患者粪便标本中双歧杆菌.结果自制培养基与对照培养基选择培养双歧杆菌的性能相当.与健康对照组比较,消化道患者粪便标本中的双歧杆菌数量明显减少,肠杆菌数量显著增多,肠道定植抗力(CR)均值小于1,健康者CR均值大于1.两者差异有显著性(P＜0.01).结论该方法能定量检测粪便标本中的双歧杆菌且可用CR＞1作为人体肠道菌群正常的标准.
作者：张银旺 刊期： 2005年第06期
目的探讨检测标本中血红蛋白(Hb)浓度对PCR扩增管中Taq酶活性的影响及消除影响的方法;探讨胰酶消化痰液的应用价值;比较淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、十二烷基硫酸钠(SDS)溶血液处理全血标本对检测结果敏感性的影响;观察SDS在结核分枝杆菌DNA(TB DNA)提取液中存在的价值及对Taq酶的影响.方法将经梯度稀释的Hb标准品与结核分枝杆菌(TB)定值质控品混匀制备成待检标本进行PCR检测;将定值Hb标准品与TB质控品混匀制备成待检标本,观察提取时100℃煮沸时间对Hb抑制Taq酶能力的影响;将结核患者的痰液分成两管,分别用4 g/dl NaOH消化、1 g/dl胰酶消化、1 g/dl胰酶消化+4 g/dl NaOH处理,比较PCR检测结果的敏感性;将结核患者的外周抗凝血分别用淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、SDS溶血剂处理,比较PCR检测结果的敏感性;用10 g/LSDS、1%(v/v)Triton、1 g/LSDS的1%(v/v)Triton、0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton提取液对相同的TB质控品进行TB DNA提取,观察PCR检测结果敏感性;56份痰液、34份全血按痰液、全血标本的方法处理,进行PCR扩增,比较检测结果的阳性率.结果当Hb≥10-5g/L时,Hb对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强;提取时100℃煮沸40 min与煮沸10 min的对照管结果完全一致;痰液标本处理方法的敏感性顺序为:胰酶消化+NaOH处理＞胰酶消化＞NaOH消化;全血标本处理方法的敏感性顺序为:红细胞裂解液法=淋巴细胞分离法＞SDS溶血法;提取方法PCR检测结果敏感性顺序为:0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞1%(v/v)Triton＞1 g/L SDS的1%(v/v)Triton＞10 g/L SDS,SDS对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强.56份痰标本按上述方法处理的阳性率分别为57.1%(32/56),82.1%(46/56),91.0%(51/56),通过配对资料卡方检验,胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理与NaOH消化法之间具有显著性差异(P＜0.005),胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理之间差异无显著性(0.1＜P＜0.25);34份全血标本按上述方法处理的阳性率分别为79.4%(27/34),79.4%(27/34),47.0%(16/34),通过配对资料卡方检验,红细胞裂解液法和淋巴细胞分离法与SDS溶血法之间具有显著性差异(0.005＜P＜0.01).结论检测TB DNA标本的预处理有必要规范化.
作者：周步全；朱建峰；王迎春；王义凤；董川 刊期： 2005年第06期
目的建立一种相对长久、稳定的放免检测室内质控方法.方法将健康体检者的血清样本混合后分装,冷冻保存在-20℃冰箱中.每批次放免检测时,取一支插入常规标本中进行测定后,观察其质控血清的稳定性,并建立放射免疫检测的L-J质控图.结果自制室内质控血清在-20℃条件下保存12 mo结果稳定.结论自制质控血清可以用于放免检测的常规室内质控.
作者：黄绍光；黄学忠；周平；陈晓飞；林佩佩 刊期： 2005年第06期
在实验室质量控制中,分析前质量控制特别是对标本的处理是极为重要的一步,也是保证检验结果可靠性的重要环节.为了获得各检测项目的真实结果,标本处理所造成的误差应尽可能降到低(降至实验允许差异范围内).
作者：章晋林；张小鹏 刊期： 2005年第06期
AVL COMPACT2型血气分析仪,是一台微型全自动血气分析仪,该仪器具有精密度高、操作简单、方便、标本用量少等特点.我院引进已有多年,临床反应良好.但笔者在实际工作中遇见了该仪器经常出现的几个故障,并探索了一些解决办法,现作如下介绍.
作者：罗书久；唐中 刊期： 2005年第06期
当今网织红细胞(下称网红)计数虽已有先进的自动分析技术的应用,但迄今国内仍以显微镜目测法为主.目测计数原用缩小视野法,费工费时,计数精确性差,用Miller窥盘[1]后有了改善,但仍感不便,且市场上不易购得.本文设计一种改进的窥盘,改变原Miller窥盘大小方格比例和小方格位置,用电脑绘图,打印于透明投影胶片上,制成两方格面积比为10 : 1、小方格居中的改良Miller窥盘,制作简易,经济实用,效果好.
作者：陈高远；周文良；陈秀华 刊期： 2005年第06期
目的了解HBV感染后,9种常见血清学组合模式下,如何选择HBV-DNA荧光定量检测.方法对照545份血清标本同时进行ELISA方法测定HBV-M及PCR荧光定量检测HBV-DNA.结果①HBsAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(+)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,185份标本HBV-DNA在5×102～107copies/ml之间,阳性率为100%(185/185);②HB-sAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,42份标本HBV-DNA在5×102～107copies/ml之间,阳性率为59.15%(42/71);③HBsAg(+)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,79份标本HBV-DNA在5×102～106copies/ml之间,阳性率为34.80%(79/227);④HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,8份标本HBV-DNA为5×102～103copies/ml,阳性率为38.10%(8/21);⑤HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(+)组,2份标本HBV-DNA在5×102～104copies/ml之间,阳性率为40.00%(2/5);⑥HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,1份标本HBV-DNA为5×102～103copies/ml,阳性率为33.33%(1/3);⑦HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(-)组,3份标本HBV-DNA在5×102～104copies/ml之间,阳性率为16.67%(3/18);⑧HBsAg(-)、抗HBs(+)、HBeAg(-)、抗HBe(+)、抗HBc(+)组,1份标本HBV-DNA小于5×102copies/ml,阳性率为0%(0/1);⑨HBsAg(-)、抗HBs(-)、HBeAg(-)、抗HBe(-)、抗HBc(-)组,14份标本HBV-DNA小于5×102copies/ml,阳性率为0%(0/14).结论在常见9种血清学组合模式中,只有HBsAg(+)的血清学组合模式下,行HBV-DNA荧光定量检测,对临床诊断治疗HBV感染有重要价值.因其它血清学组合模式下,应结合肝功能状况或为进一步确诊HBV是否感染而行HBV-DNA的荧光定量检测.
作者：李庆科；杨含腾；王兴昌 刊期： 2005年第06期
阴道分泌物检查是妇科诊断和治疗女性泌尿生殖系统炎症的一种常用的检查方法.传统的生理盐水涂片法是妇科阴道分泌物常规检查方法[1],但由于是多细菌混合感染,给细菌的鉴定带来困难.根据病原体革兰氏染色后易与其它有形成分相区别,我科在原有计算机软件基础上进行开发,利用Panasonic多媒体呈像检测仪呈像后容易观察的特点,提高了细菌性阴道病(BV)检测的灵敏度和准确度,现报告如下:
作者：汪文明；杨夕；游树林；黄仁河 刊期： 2005年第06期
蛋白指纹技术(protein fingerprinting)是表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,缩写SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)的俗称,它指的就像每个人的指纹不同于他人一样,每种疾病在发生发展过程中所形成的特定蛋白组或其降解产物也不一样,所以对此各种特异性蛋白指纹图谱的识别和判断,就可达到对各类疾病进行准确诊断的目的.
作者：汪隆海 刊期： 2005年第06期
目的探讨革兰阴性菌感染患者血脂水平的改变.方法采用酶法和免疫比浊法检测细菌感染患者的血脂,并相互比较.结果革兰阴性细菌感染组比对照组和革兰阳性细菌感染组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)及载脂蛋白A1/B(apoA1/apoB)均明显降低(P＜0.02),而甘油三酯(TG)有所升高(P＜0.02).感染组白细胞(WBC)均明显升高(P＜0.001),而两感染组之间WBC无差别(P＞0.05).结论细菌感染患者HDL-C及apoA1的明显降低,有助于革兰阴性菌感染的判断,有利于内毒素血症早期合理地使用抗生素.
作者：邹国英；黄露萍；任碧琼 刊期： 2005年第06期
1故障现象仪器在自动清洗时,提示空白计数错误,WBC空白计数值高出正常值十多倍.
作者：秦峰 刊期： 2005年第06期
KN-21N全自动血细胞分析仪是日本东亚公司生产的产品,我院使用该仪器已有2年多,在临床试验中检测了4万余例,提示该仪器具有自动化程度高、操作简单、重复性好、准确率高,无氰化物试剂、故障低等优点.但随着使用时间的延长,仪器会出现一些问题.现就该仪器在临床操作中出现的几种常见故障及错误信息处理作一分析,以供同行参考和实际操作.
作者：何爱湘 刊期： 2005年第06期
使用日本光电公司生产的血细胞分析仪MEK-4200,购买原装试剂成本高,其稀释液用量大,为解决依赖进口试剂价格昂贵、运输不便等问题,查阅了大量资料[1～4],自配了稀释液,经几次改动,经过一段时间使用,效果良好.其实验评价报告如下:
作者：郝万鹏；沈萍 刊期： 2005年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
