学术投稿

多重PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

杨学文;王礼文

关键词:多重PCR, MRSA, mecA, FEMA
摘要:目的建立一种直接、快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重PCR方法.方法设计3对引物,在同一反应管中同时扩增检测mecA、femA和IS431基因,扩增产物经凝胶成像系统分析.结果9株MRSA菌株mecA、fe-mA和IS431均阳性,5株凝固酶阴性的耐甲氧西林的葡萄球菌mecA和IS431阳性,7株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌femA和IS431阳性,11株甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌IS431阳性,而大肠杆菌、肺炎链球菌等非葡萄球菌mecA、femA和IS431均阴性;当MRSA菌浓度达102CFU/ml时就可检出.结论通过同时扩增mecA、femA和IS431基因的多重PCR技术,能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌.
现代检验医学杂志相关文献
  • 一起AC-900血细胞计数仪少见故障的排除

    AC-900是瑞典SWELAB公司的三分类单通道血液分析仪,操作简单,易于调试,我院1999年引进后,在日常工作量不大的情况下,正确使用,能够保证临床血液分析的准确性,但日常维护必不可少,近日我们排除了一起少见的故障很有体会.

    作者:韦云龙 刊期: 2005年第01期

  • 血清中一氧化氮浓度与精子活动度关系的分析

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    作者:朱武军;王义光;杨兴林 刊期: 2005年第01期

  • MEK-6318K型血液分析仪计数异常情况分析

    目前,自动血细胞计数仪已普遍使用于各级医院检验室,尤其三分类血细胞计数仪更为普遍,这种计数仪的原理是电阻抗法,由于目前各级医院使用的仪器型号差异,内设参数不同,使用试剂不同,从而使异常结果存在不同,本文就日本光电工业株式会社生产的MEK-6318K型血液分析仪测定血细胞过程中出现的种种异常情况作如下分析.

    作者:沈丽;吴广忠 刊期: 2005年第01期

  • 早期免疫干预高危哮喘儿的γ-干扰素、白细胞介素及IgE的变化研究

    目的观察高危哮喘儿早期流感疫苗、肺炎疫苗及免疫增强剂斯奇康免疫干预后的γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素5(IL-5)、白细胞介素10(IL-10)及免疫球蛋白IgE水平变化,评价早期免疫干预对预防高危哮喘儿发展为哮喘的意义.方法应用酶联免疫方法测定疫苗干预组、斯奇康干预组及对照组的IFN-γ、IL-2、IL-5、IL-10及IgE水平.结果2 y时两干预组的IFN-γ、IL-2水平明显高于对照组(P<0.05),IL-10及IgE水平明显低于对照组(P<0.05),疫苗干预组IL-5明显低于对照组(P<0.05),两干预组之间无明显区别.结论早期两种免疫干预治疗方法对预防高危哮喘儿发展为哮喘有一定作用.

    作者:胡应龙;李志辉;周凤娟 刊期: 2005年第01期

  • 临床生化实验室试剂性能评价指标探讨

    多年来,临床检验质量一直是检验工作者关注的核心问题,如何提高临床实验室的质量,特别是在与国际临床实验室接轨的同时,这就要求我们实验室必须使用能确保准确和可靠检验结果的检测系统(包括仪器、试剂等),试剂在检测系统中起关键环节,因此,对试剂性能的评价就非常重要,我们对试剂性能评价指标及结果处理做初步探讨,供临床检验工作者参考.

    作者:李顺君 刊期: 2005年第01期

  • IMS-972系列Ⅱ型电解质分析仪一例常见故障排除及保养

    IMS-972系列Ⅱ型电解质分析仪是深圳市希莱恒医用电子有限公司生产的测定人体血液、尿液、脑脊液中钾离子(K+)、钠离子(Na+)、钙离子(Ca2+)、氯离子(Cr)、pH值的自动化分析仪.仪器性能稳定,标本用量少,不需要稀释标本(尿液除外),仪器中设自我诊断程序,具有方便、快速、准确、重复性好、安全、环保等优势.但是,仪器在使用过程中也出现一些故障[1],其中以电极漂移较为常见[2],现将其原因、排除方法及仪器的保养介绍如下,以供同行参考.

    作者:杨琦 刊期: 2005年第01期

  • 组织胞浆菌与黑热病杜利小体骨髓涂片几种染色方法鉴别

    组织胞浆菌病与黑热病分别是组织胞浆菌和黑热病杜利小体引起的疾病,临床表现相似,由于两病原体骨髓涂片中大小、形态接近,较难鉴别,极易引起误诊.笔者复习了相关文献并加以总结,发现组织胞浆菌与黑热病杜利小体骨髓涂片在瑞-姬氏染色、糖原染色(PAS染色)和HE染色中存在一定的差异,仔细辨别,可以将两者区分开.现报道如下,供同道们共飨.

    作者:卢其明 刊期: 2005年第01期

  • 三种不同血细胞分析仪检测系统检测常规血标本结果的分析

    目的通过同一临床实验室不同血细胞分析系统对新鲜血检测结果的比较,了解它们之间对同一标本检测结果的偏差是否在允许误差范围内.方法按照EP9-A文件的要求,以Coulter ACT-diff Ⅱ型血细胞分析仪为比对仪器,以Sys-mex XE-2100型血细胞分析仪、Coulter Gen-s型血细胞分析仪为实验仪器,用门诊病人的新鲜血对WBC、RBC、HB、MCV、PLT等项目进行检测,计算相关系数和直线回归方程,对它们之间的预期偏差和相对偏差进行评估.结果在所检测的5个项目中,检测结果的相对偏差都在允许误差范围内.结论当同一实验室内有不同系统的血细胞分析仪,尤其是系统不匹配的情况下,应以其中一台结果可靠的仪器为比对仪器,定期进行比对,了解检测结果的偏差,并进行校准,才能保证实验室内检测结果的准确稳定.

    作者:周红艳;崔贵成;沈佐君 刊期: 2005年第01期

  • 尿红细胞形态在鉴别肾性与非肾性疾病中的临床应用评价

    目的通过对尿红细胞各种形态的观察,为肾性与非肾性疾病提供快速鉴别诊断依据.方法对尿红细胞进行活体染色(Sternheimer-Malbin,SM染色),采用相差显微镜进行观察和分类计数,对各种尿红细胞形态分类计数值应用ROC曲线进行评价.了解不同形态红细胞在肾性与非肾性血尿中的检测意义.结果棘形、靶形红细胞及变形小红细胞只出现在肾性疾病组;皱缩、环形、影形红细胞在肾性和非肾性组均可出现;用ROC曲线评价正常、皱缩、影形、环形红细胞其AUC面积分别为96.5%,77.5%,63.3%和50%;临床诊断佳分界值分别为13%,11%,12%和36%;灵敏度分别为98%,84%,81%和77%;特异度分别为91%,60%,49%和40%;准确度分别为94%,76%,65%和78%.结论尿红细胞活体染色各种形态分类计数佳分界值对鉴别肾性与非肾性血尿具有较高的诊断价值:同时,棘形、靶形红细胞及变形小红细胞的检出更具有临床诊断价值.

    作者:曹研;陈玲;牛华;孙武;乔树本;苏荟 刊期: 2005年第01期

  • 游离PSA和复合PSA在前列腺癌诊断中的应用

    目的评估三种形式的前列腺特异性抗原:总前列腺特异性抗原(tPSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、复合前列腺特异性抗原(cPSA)及其比值在前列腺癌诊断中的应用.方法150名研究对象分为三组:正常对照组50人,前列腺增生(BPH)组50人,前列腺癌(PCa)组50人.用全自动化学发光免疫法分别测定他们的tPSA、fPSA和cPSA,并计算其比值.结果Pca组的cPSA/tPSA、fPSA/tPSA和fPSA/cPSA比值的均值与BPH组有显著差异(分别为91.0%/68.0%,12.1%/26.3%和13.3%/38.8%,P<0.001),fPSA/cPSA与fPSA/tPSA比值密切相关(r=0.882 0).结论与tPSA相比,cPSA/tPSA、fPSA/tPSA和fPSA/cPSA都可增强其对BPH和PCa的鉴别诊断作用.

    作者:张华;陈华;李永兴 刊期: 2005年第01期

  • 康利AFT-300D电解质分析仪常见故障排除、保养及注意事项

    AFT-300D电解质分析仪是深圳康利公司生产的一种钾、钠、氯三项离子分析仪,因其有自动统计均差和斜率、自动校正、自动进样、自动储存质控结果等功能,且有结果重复性好、标本用量少、测试速度快等优点,为日常工作省出不少时间.但其在使用和保养不当时常出现一些故障,现将几种常见故障产生原因及排除方法介绍如下,以供同行参考:

    作者:曹贤;张静;吕云岗 刊期: 2005年第01期

  • 连续监测法测定腺苷脱氨酶及临床应用

    目的探讨应用连续监测法测定腺苷脱氨酶(ADA)及其临床应用价值.方法根据测定条件的优化实验采用ADA作用于以腺苷为底物的连续监测法直接测定;同时测定200例健康人、32例肝炎病人血清及13例结核性穿刺液的ADA水平.结果批内CV<4.0%,批间CV<4.7%,总CV<4.3%,回收率达101.3%,线性:0~192 U/L(Y=0.9846X+1.1462,r=0.996 8);加入TG<5.6 mmol/L,BIL<165 μmol/L,Hb<100g/L,UA<420μmol/L时无显著干扰;血清正常参考范围(-x±s)3~25 U/L;肝疾病组血清ADA水平显著高于健康对照组(P<0.001),结核病组穿刺液ADA水平显著高于非结核病组(P<0.001).结论该法简便、准确、快速,对肝炎疾病及结核性穿刺液有一定的诊断价值.

    作者:袁平宗 刊期: 2005年第01期

  • 实时定量PCR检测外周血中的巨细胞病毒

    目的建立定量检测外周血中巨细胞病毒的实时定量PCR方法,并对骨髓移植病人进行巨细胞感染监测.方法构建基于LightCycler-TaqMan探针的实时定量PCR方法,对其进行方法学评价,并抽提外周血DNA,检测正常人与骨髓移植病人巨细胞病毒感染状况.结果经反应条件的优化,该方法的敏感性在10个拷贝数以上,批内与批间差异分别控制在较小范围,对骨髓移植病人巨细胞病毒感染的监测发现病毒拷贝数与病程进展和恢复呈较好的相关关系.结论实时定量PCR方法检测巨细胞病毒感染可为临床对移植患者的感染提供一种有效的监测手段.

    作者:刘莉;蔡刚;张军;方超平;李闻捷;沈茜 刊期: 2005年第01期

  • Sysmex SF-300O全自动血细胞分析仪对新生儿黄疸病人白细胞的检测

    新生儿黄疸,又称新生儿高胆红素血症,是指新生儿全身皮肤、黏膜及巩膜出现黄色的症候,分生理性和病理性两种.当血清胆红素高于85.5~102.5 μmol/L时,新生儿即呈现黄疸,使用Sysmex SF-3000血细胞分析仪测定新生儿黄疸病人的白细胞时,增高的胆红素会影响红细胞的溶解而产生较大的误差,本文探讨其检测失败的原因及其解决方法.

    作者:钱英超;梁映亮 刊期: 2005年第01期

  • 尿试纸条检测与尿镜检结果非相关性分析

    目的通过尿试纸条检测与尿镜检结果的非相关性对比观察,多因素分析其结果来源.方法尿试纸条检测参照迪瑞公司的操作标准,尿镜检采用非离心手工混匀直接涂片检查.结果430份尿样中以BLO、LEU、PRO三项任何一项阳性,镜检不到相应成分较为多见,其次是尿试纸条检测全阴性却能发现一些有形成分;二者非相关性总百分率为24.17%.结论出现上述结果的原因除了尿试纸条本身的缺陷外,还有就是操作、仪器等本身的原故.面对如此的非相关性临床现象,认为:无论尿试纸条检测结果如何,每份尿标本都要镜检,且连同结果一起报告.

    作者:尹代玉 刊期: 2005年第01期

  • 血清游离与总前列腺特异抗原比值在前列腺疾病诊断中的应用

    目的探讨游离前列腺特异抗原(F-PSA)与总PSA(T-PSA)的比值(F/T)对鉴别诊断前列腺疾病的临床价值.方法采用化学发光免疫法同时检测123例前列腺癌(Pca)和155例前列腺增生(BPH)患者的血清T-PSA、F-PSA,计算其F/T比值,并比较各F/T比值的总有效率.结果Pca组和BPH组血清T-PSA和F/T比值均有显著差异(P<0.01),当T-PSA在4.0~10.0ng/ml区间时,两组患者血清T-PSA无显著差异(P>0.05),但Pca患者组的F/T比值却明显低于BPH组(P<0.01).通过总有效率的分析,F/T比值取20%作为临界值较为合适.结论F/T比值作为T-PSA的辅助指标在诊断灰区能显著提高前列腺癌的鉴别诊断能力.

    作者:董晖;李明;陈达强;王嬿 刊期: 2005年第01期

  • 肠球菌耐药趋势研究及抗感染用药建议

    目的分析该院各类临床标本中分离的肠球菌对常用抗生素耐药情况,为临床医生提供抗肠球菌感染的治疗对策.方法应用Vitek微生物系统回顾性统计分析近3年来该院肠球菌的耐药情况.结果3年来,肠球菌属的构成比发生改变,屎肠球菌分离率有增加趋势;粪肠球菌和屎肠球菌引起的感染部位有差异,屎肠球菌主要引起泌尿系统感染(47.3%).不同标本来源粪肠球菌对常用抗生素耐药率明显不同,粪肠球菌引起的泌尿系统感染可选用呋喃妥因或万古霉素.万古霉素对粪肠球菌的MIC50呈上升趋势;四环素MIC50呈下降趋势;呋喃妥因、青霉素-G的MIC50无明显变化;氨苄青霉素、环丙沙星对粪肠球菌的MIC50趋势不定.呋喃妥因对屎肠球菌MIC50呈上升趋势;氨苄青霉素、四环素、万古霉素MIC50呈下降趋势;环丙沙星、青霉素-G的MIC50无明显变化.结论临床医生应合理选用抗生素,延长抗生素的使用寿命,使肠球菌耐药得到有效控制.

    作者:颜英俊;刘华;喻华;杜琼;黄文方 刊期: 2005年第01期

  • HBeAg(EIA)质控品的配制

    随着临床免疫质控工作的正常化和规范化,乙肝标志物,尤其是HBeAg检测的室内质控体系的建立已刻不容缓.目前市售HBeAg质控品尚未像HBsAg质控品那样在临床普及使用.

    作者:蔡祥址 刊期: 2005年第01期

  • PCR-RFLP分析HBV核心启动子基因突变的临床意义

    目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测HBV核心启动子(BCP)基因突变的方法,并探讨其临床意义.方法PCR扩增HBV BCP区(nt1642-nt2027)基因片段,经限制性内切酶Mbo Ⅰ酶切,琼脂糖凝胶电泳分析BCP(nt1762/nt1764)基因突变情况,同时应用定量PCR测定了HBV DNA含量.结果149例临床样本的检测结果显示:BCP基因突变在HBeAb(+)慢性乙型肝炎患者(CHB)和HBV无症状携带者(ASC)中的检出率显著高于相应的HBeAg(+)组患者(P<0.01);在HBeAb(+)和HBeAg(+)重症乙型肝炎(Severe hepatitis B,SHB)组中差异无显著性(P>0.05);BCP变异患者血清中HBV-DNA含量比相同模式的野毒株感染高(P<0.05).结论PCR-RFLP检测HBV BCP基因突变方法简单方便,结果与测序分析一致,具有较好的特异性,适合临床应用;BCP区基因突变可能是HBeAb(+)患者HBV感染的重要原因之一;BCP变异可能与乙型肝炎重症化有一定关系.

    作者:祝文彩;张冬雷;鞠少卿;王惠民;李立人;施健;徐云 刊期: 2005年第01期

  • 嗜血细胞综合征细胞形态学诊断分析

    嗜血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)是一类少见的、死亡率很高的疾病[1],该病本质上属于良性疾病,但由于其病因多样,临床表现和病理改变与一些恶性疾病如恶性组织细胞增生症(malignant histiocytosis,MH)相似,加之我国对该病的研究较少,很多基层医务人员对HPS缺乏了解,经常造成误诊和漏诊,耽误治疗时机和佳治疗方案的采用,导致死亡率很高.为提高对该病的认识,我们对我院近期收治的一例患者进行全面分析,报告如下.

    作者:孔晋星;付荣明;周凤珍 刊期: 2005年第01期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院