江凌勇；赵志河；王军；樊瑜波
目的探讨宫颈癌及其癌前病变中 p53 基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18 E6表达之间的关系,以了解 p53 基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子.方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌(高分化13例、中分化24例、低分化44例;Ⅰb期24例、Ⅱa期15例、Ⅱb期37例、Ⅲa期5例)、18例宫颈腺癌、88例宫颈上皮内瘤样病变(CIN Ⅱ 30例、CIN Ⅲ 58例)及60例正常宫颈组织中 p53 基因第72位密码子多态性及HPV16、18 E6的表达.结果 p53 Arg纯合子、 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子在宫颈鳞癌、腺癌和CIN(Ⅱ～Ⅲ)中分别占58.02%、30.86%、11.12%;55.55%、27.78%、16.67%;59.09%、21.59%、19.32%.各组中 p53 Arg纯合子明显高于 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子,且差异有统计学意义( P <0.05; P <0.01).正常宫颈组织中 p53 Arg纯合子、 p53 Arg/Pro杂合子及 p53 Pro纯合子分别为23.33%、40.00%、36.67%,三者间无统计学意义( P >0.05).宫颈癌组(鳞癌及腺癌)、CIN(Ⅱ～Ⅲ)组中 p53 Arg纯合子均高于正常对照组中 p53 Arg纯合子,且差异有统计学意义( P <0.05);宫颈鳞癌中HPV16、18E6(+)亚组中 p53 Arg纯合子显著高于HPV16、18E6(-)亚组及HPV16、18E6(+)正常对照组亚组( P <0.05, P <0.01).各组中 p53 Arg纯合子均高于 p53 Pro纯合子( P <0.05); p53 Arg纯合子及等位基因均未随宫颈癌临床分期及分化程度而变化,与宫颈癌前病变程度亦无关系.结论 p53 Arg纯合子可作为预测宫颈癌及其癌前病变的一项高危因子,与高危型HPV E6同时检测可提示宫颈病变的发展趋势; p53 Arg纯合子与宫颈癌临床分期及分化程度无明显相关性.
作者：侯敏敏；郄明蓉；曹泽毅；杨开选；孙芝琳 刊期： 2006年第03期
目的探讨生长抑素 (SST) 及其类似物奥曲肽对急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 大鼠的治疗作用.方法百草枯灌胃法制作大鼠ARDS模型, 灌注百草枯后24 h,经尾静脉输入SST(1 mg/kg)、奥曲肽(0.1 mg/kg)或注射地塞米松(1 mg/kg),观察动物肺组织病理学、血气、肺系数等改变,同时测定大鼠血浆、肺泡灌洗液 (BALF) 及小肠组织匀浆液肿瘤坏死因子α(TNF-α) 及白细胞介数6 (IL-6) 的含量.结果输注SST、奥曲肽或注射地塞米松后,与ARDS模型组相比,大鼠肺组织炎症病变明显减轻,动脉血氧分压 (PaO2) 有升高趋势(升高75%～84%),二氧化碳分压有降低趋势(降低17%～22%),血浆pH值回升,肺系数有降低趋势(降低13%～15%).血浆TNF-α水平与ARDS模型组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义 ( P >0.05).肺泡灌洗液及小肠匀浆液TNF-α水平SST组、奥曲肽组及地塞米松组较ARDS模型组降低 ( P <0.05).SST组、奥曲肽组及地塞米松组肺泡灌洗液IL-6水平较ARDS模型组均有降低趋势,但差异无统计学意义 ( P >0.05),血浆及小肠匀浆液IL-6水平各组间差异无统计学意义.结论 SST及其类似物奥曲肽有改善ARDS症状,减低肺炎症病变及TNF-α含量的作用,可作为ARDS治疗的辅助药物.
作者：刘瑞；王春晖；黄明慧；李献；强欧；唐承薇 刊期： 2006年第03期
目的构建β防御素2(BD2)融合血管内皮钙粘附素(VE-Cadherin)胞外段重组质粒,以期探讨其免疫后抗肿瘤血管生成作用.方法 PCR扩增成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段.以连接肽连接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通过重叠PCR构建融合分子.将所得三种片段插入到pSecTag2B真核表达质粒.转染CT26肿瘤细胞,RT-PCR检测其表达.取转染COS细胞后的上清液做趋化实验,检测融合分子对树突状细胞(DC)的趋化作用.所得质粒经肌肉注射免疫小鼠后,皮下植入包裹CT26肿瘤细胞的藻酸盐微球,检测血管生成情况.结果测序证实三种质粒构建正确,能在真核细胞中顺利表达.BD2融合重组质粒和未融合的BD2质粒转染细胞后的上清液趋化DC的能力相近( P >0.05).与其余各组质粒免疫相比,融合重组质粒免疫后能够显著抑制藻酸盐微球中肿瘤细胞诱导的血管生成( P <0.01).结论 BD2融合血管生成相关分子后的重组质粒免疫动物后能在体内有效地打破机体对肿瘤新生血管的免疫耐受.
作者：王国庆；王永生；王瑞；吴杨；杜小波；徐建容；刁鹏 刊期： 2006年第03期
目的观察结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用.方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌 ESAT-6与CFP-10 基因,构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10,经酶切分析和DNA测序证实连接片断的正确性后,采用醋酸锂法顺序转染酵母菌AH109.结果共转染pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10的酵母菌AH109可以在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp培养基上生长,β-半乳糖苷酶活性实验阳性.结论结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白可以相互作用.
作者：李岩；鲍朗；张会东；王晓樱；朱海龙；李娅莎 刊期： 2006年第03期
目的考察高强度牙科陶瓷(A型)与松风Vintage AL饰面瓷之间的界面结合及匹配性,为其临床应用奠定基础.方法制作5 mm×5 mm×10 mm的高强度牙科陶瓷(A型)20个,分为两组,分别在端面上烧结松风Vintage AL和Vitadur alpha饰面瓷,剪切实验测定其剪切结合强度;另制作一双层瓷试件,界面做扫描电子显微镜(SEM)和能谱分析;制作上中切牙全瓷单冠10个,作热休克实验考察其抗瓷裂能力.结果高强度牙科陶瓷(A型)与Vintage AL的剪切结合强度为(55.52±14.64) MPa,与Vitadur alpha结合强度为(59.37±13.93)MPa,两者差异无统计学意义;扫描电镜观察及能谱分析,二者紧密接合,并有元素的扩散;全瓷冠的热休克温度为(179±15) ℃,裂纹多出现于牙冠唇面的饰面瓷.结论高强度牙科陶瓷(A型)与松风Vintage AL化学匹配及热匹配性良好,完全满足临床需要.
作者：崔军；巢永烈；孟玉坤 刊期： 2006年第03期
目的研究骨质疏松对老年大鼠牙移动的影响.方法 82只三月龄雌性未育健康SD大鼠随机分为骨质疏松组和健康对照组(各42只);每组大鼠再随机分为0、1、3、5、7、10和14 d加力组.测量不同加力时间段牙移动距离,切片HE染色观察组织学变化、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶组织化学染色计数破骨细胞.结果骨质疏松组牙移动速度和移动距离都大于对照组( P <0.05),骨质疏松大鼠牙移动第一快速期比对照组长,且移动距离更大,停滞期比对照组短.破骨细胞数量和转化聚集速度大于对照组( P <0.05).结论骨质疏松会加速老年大鼠牙移动.
作者：谭理军；王军；赵志河；江凌勇；邹睿 刊期： 2006年第03期
目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)与热休克蛋白90 β(HSP90 β)基因,构建其真核双表达质粒pIRES-LMP1-HSP90 β,并检测其在体外的表达.方法提取鼻咽癌组织总RNA,逆转录PCR获得 LMP1 基因片段和 HSP90 β基因片段,将二者连接于真核双表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Western blot检测 LMP1和HSP90 β的表达.结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90 β分子.结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90 β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90 β分子.
作者：赵菊梅；刘涛；田聆；魏于全；文艳君 刊期： 2006年第03期
目的探讨孕激素(P)通过其受体(PR)及类胰岛素样生长因子结合蛋白1-3(IGFBP 1-3)介导,对胚泡着床的影响.方法选取早孕5～7周行人流术的健康成年妇女蜕膜和绒毛标本共48例,每一孕周分早、中、晚三个时期,每个时期5～6例.以分泌中期(月经周期第21 d)宫内膜标本为对照.采用放射免疫法测定血清P水平;采用免疫组化LsAB法和计算机图像分析法检测IGFBP 1-3和PR在围着床期子宫内膜、蜕膜和绒毛滋养层细胞中的表达.结果血清P值从分泌中期逐渐上升,在孕5～6周时呈现一峰值,高于分泌中期水平( P <0.05).PR在宫内膜腔上皮和蜕膜细胞中表达与血清P存在相关性,但在腺上皮及胚胎滋养层细胞中的表达与血清P无相关性.IGFBP 1-3在子宫内膜腺、腔上皮和蜕膜细胞中的表达与血清P具相关性.但胚胎滋养层细胞中的表达与血清P无相关性.结论 P对早期妊娠发生与维持具有重要作用,其作用可能是通过胎盘界面PR及IGFBP 1-3的介导来完成的.
作者：靳松；李尚为；龙江；李蕾；谭宗建 刊期： 2006年第03期
目的构建人的新基因( PCIA 1)的真核表达载体,并将其载体稳定转染到HeLa细胞株中.方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA为模板,通过RT-PCR扩增 PCIA 1基因编码区cDNA, 并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组质粒pcDNA- PCIA 1,重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将该表达载体导入到HeLa细胞中, 经G418筛选并建立稳定的转染细胞株,用RT-PCR和Western blot检测 PCIA 1基因在HeLa细胞中的表达.结果经RT-PCR及Western blot检测,证实真核表达重组质粒pcDNA- PCIA 1构建成功, PCIA 1基因已经稳定转染到了HeLa细胞中并表达PCIA1蛋白.结论成功建立了人新基因 PCIA 1的稳定转染细胞株,为进一步研究 PCIA 1的功能奠定了基础.
作者：王瑞；邓洪新；王国庆；严飞；彭枫 刊期： 2006年第03期
目的研究成骨生长肽(OGP)在体外对成骨细胞样细胞增殖分化的影响.方法在体外培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞中加入不同浓度的OGP(10-11 mol/L～10-7 mol/L),用MTT法检测细胞增殖,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测核心结合因子1( Cbfa1 ) mRNA的表达.结果 OGP对成骨细胞样细胞增殖有促进作用( P <0.05),大效应浓度为10-9 mol/L;能增加细胞内ALP活性( P <0.05),大效应浓度为10-8 mol/L;可促进 Cbfa1 mRNA的表达( P <0.05),其佳促进表达浓度为10-8 mol/L, Cbfa1 mRNA与β-actin mRNA像素值比值为0.89±0.02.结论 OGP可促进成骨细胞样细胞增殖,增强 Cbfa1 mRNA的表达水平.
作者：徐凌；梁星；黄姣；董强；夏露；胡建；张庆鸿；李小玉 刊期： 2006年第03期
目的研究镁对离体培养的缺氧大鼠脑皮质神经元的影响.方法将大鼠皮质神经元分别给予MgSO4和Mg2+-ATP处理后连续给予97.5%N2和2.5%CO2混合气体,制成大鼠皮质神经元体外缺氧试验模型,分别观察缺氧后1、2、4 h不同时间神经元死亡率、神经细胞内Ca2+浓度(Fluo-3标记,激光共聚焦显微镜检测)的动态变化和培养液中LDH、K+、NSE浓度的变化.结果 MgSO4和Mg2+-ATP能减少缺氧状态下的脑皮质神经元钙内流( P <0.05),降低培养液中LDH、K+、NSE浓度( P <0.05),明显降低神经元死亡率( P <0.05).结论镁对离体培养的皮质神经元缺氧损伤有肯定的保护作用.
作者：郑洪波；罗祖明；羊洁；邹晓毅；孔双艳；张杰；曾虹；何俐 刊期： 2006年第03期
目的探讨人类端粒酶逆转录酶( hTERT )基因表达上调与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系抗原表达的关系.方法采集42例ALL患儿的骨髓标本,分别进行细胞形态学及细胞化学染色,确定其FAB类型,运用一组相关的单克隆抗体,采用流式细胞仪及直接免疫荧光标记技术进行免疫分型,采用吉姆萨G显带技术进行核型分析;同时,采用半定量RT-PCR方法检测其外周血 hTERT 的表达水平.结果儿童ALL髓系抗原表达阳性率26.19%,髓系抗原表达的ALL hTERT -mRNA表达水平高于无髓系抗原表达的ALL,而正常对照组无或低表达 hTERT -mRNA.结论伴髓系抗原表达的儿童急性淋巴细胞白血病 hTERT -mRNA表达上调.
作者：李熙鸿；王晓阳；熊珍玉；刘柏林；张燕 刊期： 2006年第03期
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对体外培养大鼠胚脑皮质神经元在低氧适应过程的保护作用.方法对胚鼠皮质神经元进行体外培养, 观察透射电镜下缺氧诱导大鼠胚脑皮质神经元损伤的超微结构变化;采用MTT比色法检测正常对照组(A组)、不同缺氧时间点皮质神经元缺氧对照组(B组)及缺氧培养前24 h和缺氧即刻加入不同剂量外源性BDNF实验组(C组)神经细胞存活率差别;4'、6-二脒基-2-苯基吲哚盐酸染色法结合凋亡细胞的原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果遭受缺氧损伤的大鼠胚脑皮质神经元超微结构显示缺氧可以诱导神经细胞坏死、凋亡和混合型细胞死亡;以神经元缺氧为敏感的0～10 h为研究时间,C组在缺氧0～6 h时细胞活性显著高于缺氧对照组B组( P <0.05),凋亡神经细胞百分率低于缺氧对照组B组( P <0.05).结论缺氧可诱导体外培养大鼠胚脑皮质神经元死亡,早期加入外源性BDNF可以使神经元对低氧的耐受性增强而发挥其对神经元的保护作用.
作者：罗小丽；毛萌；周晖；孙小妹；李胜富 刊期： 2006年第03期
目的研究壬基酚(NP)对断乳期子代雄性SD大鼠睾丸组织发育及凋亡影响的机制.方法对母鼠孕期第7 d直至产后断乳期染毒NP(50、100、200 mg/kg), 每个剂量组处死F1雄性子代大鼠10只,股动脉取血,测定NP浓度,取雄性子代睾丸进行组织病理学观察,并对睾丸进行Bax、Bcl-2和Caspase-3免疫组织化学分析.结果 F1子代大鼠断乳期血清NP浓度在100、200 mg/kg NP剂量组高于对照组( P <0.05), 组织病理学观察可见200 mg/kg NP组睾丸生精小管与对照组相比显著缩小.免疫组化结果显示,NP组睾丸生精小管Bax和Caspase-3的表达增强,Bcl-2表达减弱.结论母鼠孕期和哺乳期染毒NP能够影响断乳期子代雄性SD大鼠睾丸的正常发育.
作者：张浩；龙冬梅；詹立；吴德生 刊期： 2006年第03期
目的探讨正畸牙移动骨改建过程中成骨细胞调控破骨细胞分化成熟的机制.方法分离培养大鼠股骨骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞,采用膜式动态张应力加载体系进行体外细胞加力,RT-PCR 技术检测不同强度、不同性质、不同作用时间张应力对成骨细胞 ICAM-1 mRNA 表达的影响.结果张应力刺激对成骨细胞 ICAM-1 mRNA的表达有明显抑制作用,强度越大抑制作用越强,(依次为静、动态5 kPa组,静、动态3 kPa组,静态1 kPa组,对照组);静态张应力抑制效应明显弱于动态张应力(静态3 kPa、5kPa组分别弱于动态3 kPa、5 kPa组); ICAM-1 mRNA的表达在动态张应力作用后3 h即显著降低,12 h低(降至未加力时的23%),后有所回升但仍维持在一较低水平,具有时效性.结论机械张应力刺激通过抑制成骨细胞 ICAM-1 mRNA的表达限制破骨细胞的分化成熟.
作者：江凌勇；赵志河；王军；樊瑜波 刊期： 2006年第03期
目的探讨分泌型脑膜瘤的临床病理和免疫表型特点.方法对9例分泌型脑膜瘤分别进行HE、过碘酸-希夫(PAS)和PAS酶消化后(PAS-D)染色;用免疫组织化学SP法检测ER、PR、CEA、CK、EMA和MIB-1等标记;1例肿瘤进行电镜观察.结果 9例分泌型脑膜瘤分别位于碟骨嵴、左顶部或额部;5例有明显的肿瘤周围水肿;9例中7例随访时间6～88月,未见复发;组织学特点:细胞质内或细胞间均可见大小不等的透明包涵体,血管周细胞增生;9例包涵体PAS染色及PAS-D染色均呈阳性;免疫表型检测显示9例肿瘤细胞PR阳性,8例ER阴性,7例包涵体和周围细胞CEA、CK、EMA阳性.1例MIB-1阳性率为5%,余8例MIB阳性率不超过2%.电镜观察见细胞间腔隙形成及含有粘液的细胞.结论分泌型脑膜瘤是一种少见的颅内脑膜瘤亚型,显示腺上皮分化,复发率低,预后较好.
作者：李新军；张红英；郎志强；魏兵；陈卉娇；步宏 刊期： 2006年第03期
目的观察胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在正常猫、部分去背根猫及针刺部分去背根猫的L6手术侧背根节(DRG)表达的时空变化,以了解IGF-Ⅰ与针刺促进脊髓可塑性的关系.方法 25只成年健康雄猫随机分为5组:即正常组、备用根术后7 d组与14 d组(动物行单侧部分去背根手术,即切除一侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6为备用根)、针刺备用根术后7 d组与14 d组(动物行单侧部分去背根术后针刺L6脊神经外周支配区内的两组穴位).动物于术后7 d、14 d分别处死,取各组(手术侧)L6背根节,-20 ℃恒冷箱切片,片厚20 μm,用兔抗IGF-Ⅰ(1∶200)抗体行免疫组化ABC法染色.观察、计数并比较各组背根节IGF-Ⅰ阳性神经元的分布、含量及时空变化.结果针刺备用根7 d组,DRG IGF-Ⅰ阳性神经元数较术后7 d组明显增加( P <0.05),但仍低于正常水平;针刺14 d,DRG阳性神经元比术后14 d亦增多( P <0.01),且恢复至正常水平.与针刺7 d组比较,DRG IGF-Ⅰ阳性神经元在针刺14 d时明显增多( P <0.05).结论针刺可增加针刺侧DRG内IGF-Ⅰ阳性中小神经元数.提示针刺后IGF-Ⅰ在背根节的表达变化可能与针刺促进脊髓可塑性有关.
作者：刘芬；王廷华；张弈；洪孙权；宋新波 刊期： 2006年第03期
目的建立一种检测人类补体 C8A DNA多态性的新方法.方法 C8A 多态性的分子基础是 C8A 基因在第三外显子碱基发生了C→A的突变,通过特异性扩增 C8A 基因第三外显子,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法结合DNA序列分析检测成都地区98份无血缘关系样本DNA C8A 基因型.结果共发现3种基因型, C8A*AA、C8A*BB和C8A*AB, 观测到的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律.结论 PCR-SSCP检测 C8A 多态性快速、简便、可靠、成本低,适用于大样本的筛选,在群体遗传学及法医学实践中有较好的应用价值.
作者：杨志惠；张林；周斌；王闯；贾静 刊期： 2006年第03期
目的建立测定红细胞内6-甲基-巯基嘌呤(6-MMP)浓度的HPLC法,换算出红细胞和肝组织中硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性,探讨猪与人肝脏TPMT酶活性的差异.方法使用岛津2010C系列高效液相色谱仪,Symmetry C 18(150 mm×3.9 mm,5 μm)色谱柱.样品用乙酸乙酯萃取后进样,0.1%的乙酸∶甲醇为流动相梯度洗脱,总流速1.0 mL/min,280 nm波长检测,内标法定量.结果标准曲线在6.25～100 nmol/mL范围内有良好线性,方法回收率为98.08%～100.05%,萃取回收率为88.1%～92.4%,批内RSD为1.0%～1.5%,批间RSD为1.0%～4.4%.测定显示人TPMT活性为(17.45±3.62)U,家猪TPMT活性为(7.65±1.35) U,版纳猪TPMT活性为(8.73±1.55) U.结论本方法适用于临床和科研中测定人和猪红细胞和肝组织TPMT活性.实验结果提示猪对嘌呤类药物的代谢能力低于人类.
作者：王莉娜；张璘；南峰；程惊秋；步宏；梁茂植；陆燕蓉 刊期： 2006年第03期
目的探讨贯叶连翘提取物(HP)在百草枯(PQ)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(rPMVECs)急性损伤中的作用和对活性氧族物质(ROS)产生的影响.方法原代培养rPMVECs,分为PQ中毒组、HP干预组以及空白对照组.同时向PQ中毒组和HP干预组加入PQ溶液(0.1 mmol/L)0.5 h后开始计时,再向HP干预组分别添加三种不同浓度的HP溶液(250 mg/L、10 mg/L、1 mg/L).采用四氮唑盐(MTT)比色法观察不同时间点(3、12、24、48、72 h)和不同浓度的HP对rPMVECs生长抑制率的影响,同时用分光光度比色法测定相应的细胞上清液中总超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果在0.1 mmol/L的PQ诱导rPMVECs损伤后,随着HP浓度的增高和作用时间的增长, HP可明显减缓rPMVECs生长抑制率的升高;三种浓度的HP几乎在各个时间点均能明显减缓总SOD的活力的下降( P <0.05);72 h时,三种浓度的HP均能明显减缓MDA含量的增加( P <0.05),而在其它时间点,三种浓度的HP几乎不能明显减缓MDA含量的增加.结论 HP对PQ诱导的急性rPMVECs损伤具有保护作用.
作者：魏薇；何庆 刊期： 2006年第03期
四川大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
