岑瑛;李凯;刘宁;刘晓雪
目的探究典型的外源性雌激素对-壬基酚(p-NP)的幼雌SD大鼠子宫营养试验敏感指标及其机理.方法用21 d龄SD雌性大鼠50只,随机分为花生油溶剂对照组,p-NP 60 mg/kg、90 mg/kg和120 mg/kg,苯甲酸雌二醇(E2B,0.4 mg/kg)阳性对照组共5组,每天灌胃一次给药,连续3 d.于末次给药后24 h处死动物,取子宫称湿质量.用免疫组化技术检测子宫雌激素基因产物孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况.结果 E2B 0.4 mg/kg、p-NP 90 mg/kg和120 mg/kg组的子宫湿质量、子宫/体质量比与溶剂对照组相比,均有显著性差异(P<0.01),且有明显的剂量效应关系.而p-NP 60 mg/kg组的子宫固有层和肌层细胞核有PR,ER及PCNA表达,且有随剂量递增趋势.结论子宫营养试验检测雌激素基因产物比其它指标敏感,固有层和肌层细胞增生是子宫湿质量增加的原因.
作者:黄毅娜;程薇波;徐培渝;余文三;李琼英;王文东;王正书;庞定国;刘玉清 刊期: 2004年第01期
目的探讨成年猫部分去传入后备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用.方法切断L1、L3、L5和L7背根,术后第7 d摘取L2、 L4和L6背根节做分离细胞培养,对正常背根节、备用背根节和备用背根节加抗体封闭3个实验组中神经元存活、突起生长等情况进行观察比较.结果备用背根节组存活细胞和细胞微团数目以及神经突起长度均明显高于正常组和抗体封闭组.结论备用背根节内神经营养素-3对节内神经元有维持存活、促进突起生长的作用.
作者:章为;周雪;王廷华;王特为;刘苏;陈思秀;欧可群 刊期: 2004年第01期
目的自行组建高效毛细管电泳-激光诱导荧光分析装置.方法以波长543.5 nm He-Ne 激光为激发光源, 滤色片-单色仪分光,光电倍增管检测,用计算机采集和处理电泳图谱.结果优化了毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置的设计和分析参数,用该装置获得了高信噪比毛细管电泳谱.对罗丹明类荧光试剂(Sulforhdamine B)溶液的检出限为10-9 mol/L,线性范围为1×10-6~1×10-9 mol/L.采用该装置检测了分枝杆菌DNA的PCR扩增产物、酶切产物以及人血清白蛋白.结论所组建的高效毛细管电泳-激光诱导荧光分析装置结构合理,灵敏度高,成本低、光路校准方便,分离效能明显高于常规琼脂糖电泳,能作为研究生物样品中DNA片段和蛋白质含量的有效检测手段.
作者:黎源倩;杨经国;周颖;邹晓莉;米建萍;曾红燕 刊期: 2004年第01期
目的研究对比米托蒽醌聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球(DHAQ-PBCA-NS)和米托蒽醌(DHAQ)对小鼠肝癌的抑瘤作用.方法小鼠常位移植肝癌H22后,分别给予不同剂量的DHAQ-FBCA-NS和DHAQ制剂,用抑瘤率比较二者的抑瘤作用;在观察急性毒性的基础上比较二者的化疗指数;同时观察二者在不同时间给药时的抑瘤作用.结果 DHAQ和DHAQ-PBCA-NS抑瘤作用均存在剂量反应关系,半数有效量(ED50)分别为1.04 mg/kg和0.34 mg/kg,半数致死量( LD50)分别为3.670 mg/kg和4.225 mg/kg,由此得出化疗指数分别为3.53和12.43,其化疗指标DHAQ-PBCA-NS是DHAQ的3.52倍,不同给药时间对抑瘤作用的影响结果显示,DHAQ和DHAQ-PBCA-NS在治疗时给药时间越早越好,与同一给药时间相比,DHAQ-PBCA-NS抑瘤率高于DHAQ约20%.结论 DHAQ-PBCA-NS对小鼠肝癌H22抑瘤作用优于DHAQ,其肝靶向作用明显.
作者:杨云霞;朱玲;何晓;包定元;包旭 刊期: 2004年第01期
目的探讨大黄素对体外培养肺成纤维细胞(LF)增殖的作用.方法采用体外细胞培养、透射电镜、流式细胞仪和同位素检测等技术,比较了在大黄素作用下LF的增殖,并检测大黄素作用下LF的细胞增殖周期和电镜下的形态学特征. 结果大黄素能够抑制体外培养LF的增殖(P<0.01),并随着剂量增加抑制效应增强,大黄素可以提高LF细胞周期中G1期细胞的比例(P<0.01),减少S期和G2期细胞的比例(P<0.01).同时,发现大黄素作用组的LF形态上与对照组无明显差异.结论大黄素具有抑制LF增殖和阻止LF由G1期进入S期和G2期的作用,同时,本研究的大剂量大黄素(100 μg/ml)对LF细胞形态无明显损伤.
作者:屈云;姚平;李廷谦 刊期: 2004年第01期
目的了解血管内皮生长因子C(VEGF-C)在喉鳞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法采用免疫组化方法检测60例喉鳞癌患者术后肿瘤组织石蜡标本的VEGF-C蛋白的表达.结果在部分喉鳞癌患者的癌细胞胞浆中可检测到VEGF-C蛋白的表达(45/60).且VEGF-C蛋白的表达在有淋巴结转移的喉鳞癌组织中明显高于无淋巴结转移组织,在低分化喉鳞癌组织中的表达明显高于高、中分化喉鳞癌组织.结论 VEGF-C表达于喉癌中,其表达与喉癌细胞的淋巴结转移密切相关.
作者:王中亮;陈尧;周斌;梁传余;张林;李瑞祥 刊期: 2004年第01期
目的获取D1S549,D3S1754,D12S391,D12S375和D18S865基因座在中国康巴藏族群体中基因型及等位基因频率数据,初步探讨其在遗传学研究及法医学应用中的意义.方法抽取100名地区藏族群体无血缘关系个体的静脉血滴于滤纸上,干燥后剪取少许血痕,chelex法提取DNA.应用PCR技术,扩增产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分型. 结果中国康巴地区藏族群体D1S549基因座发现7个等位基因;D3S1754基因座发现6个等位基因;D12S391基因座发现10个等位基因;D12S375基因座发现6个等位基因;D18S865基因座发现6个等位基因;5个基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).各基因座的杂合度分别为0.86,0.77,0.81,0.69和0.80;个人识别率分别为0.929,0.838,0.934,0.886和0.890;非父排除率分别为0.715,0.545,0.618,0.413和0.599.结论 5个基因座在中国康巴藏族群体中具有较高的非父排除率与个人识别率,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值.
作者:胡羽;廖淼;周斌;贾怡;张林;陈国弟 刊期: 2004年第01期
目的通过反相高效液相色谱法(HPLC)测定血清中结合型胆汁酸的亚组分并探讨肝硬化患者结合型胆汁酸亚组分的变化.方法用反相HPLC测定结合型胆汁酸的亚组分,并评价该方法的精密度、准确度、灵敏度及线性范围.测定肝硬化患者血清中的6种结合型胆汁酸并与对照组进行比较.结果反相HPLC法测定胆汁酸各组分的低检测限为3.125 μmol/L;在浓度为3.5~100 μmol/L内,其日内变异小于10%,日间变异小于15%(除TLCA外),各胆汁酸的回收率在93.3%~106.1%之间(除牛磺石胆酸外).肝硬化患者血清中的胆汁酸水平明显高于正常对照(P<0.05).结论反相HPLC法适用于临床血清胆汁酸的分析.肝硬化患者血中胆汁酸浓度可为临床诊断和治疗提供帮助.
作者:李贵星;李萍;高兵 刊期: 2004年第01期
目的考察基因重组人干扰素α-2a聚氰基丙烯酸丁酯纳米球冻干制剂(rIFNα2a-PBCA-NS)的肝靶向性和缓释性.方法采用乳化聚合法制备纳米球,并制得冻干品,用细胞病变抑制法测定制剂及生物样品中rIFNα2a的含量;经小鼠静脉给药后,观察其在体内分布和在肝脏中的药代动力学.结果制得的纳米球平均包封率为 56.2%±4.3%;rIFNα2a-PBCA-NS的平均粒径为(108±37) nm,跨距为0.55;3~5 ℃,冻干品留样观察6个月生物活性指标基本不变.在肝脏中的分布百分率由原药的13.1%提高到50.6%,在肝脏中的平均滞留时间由原药的1.41 h延长到8.35 h.结论制备的rIFNα2a-PBCA-NS具有明显肝靶向性和缓释特征.
作者:陆彬;奉建芳;杨秀岑 刊期: 2004年第01期
目的评价宫腔粘连的阴道超声(TVS)检查的诊断价值.方法对118例患者进行阴道超声检查,通过与病理结果对照,对阴道超声诊断宫腔粘连的价值进行评价,并对宫腔粘连的阴道超声分级与月经量改变的程度和病理分级作相关统计学分析.结果阴道超声诊断宫腔粘连的敏感性为85.7%,特异性为100%,准确性为88.1%,宫腔粘连的阴道超声分级与月经量改变的程度和病理分级均有较好的相关性(P<0.005).结论阴道超声检查对宫腔粘连有很高的诊断价值,对宫腔粘连的临床治疗的选择有指导意义.
作者:罗红;贺庭富;朱琦;郭文琪;杨帆 刊期: 2004年第01期
目的比较观察杜冷丁加咪唑安定间断静脉给药和微泵持续输注辅助硬膜外麻醉时对呼吸、循环和应激反应的影响.方法硬膜外麻醉下的择期妇科手术患者60例,随机分成间断给药组和持续给药组.两组患者均静滴咪唑安定0.05~0.07 mg/kg、杜冷丁1 mg/kg,必要时少量追加咪唑安定至Ramsay评分4级以上,间断给药组加入咪唑安定以初始剂量的1/3~1/2间断静脉滴注,而持续给药组则用微泵以咪唑安定0.03~0.1 mg/(kg*h)持续输入维持.观察给药前及给药后1、2、5、10、15、20、30 min时心率(HR)、收缩压(S)、舒张压(D)、平均动脉压(M)、呼吸频率(R)、血氧饱和度(SPO2)、潮气量(VT)、每分钟通气量(MV)、呼吸末二氧化碳浓度(EtCO2).测定术前1 d及给药切皮后1 h血浆皮质醇(PT)、生长激素(GH)、泌乳素浓度(PRL).两组焦虑视觉类比评分(AVAT)、用药情况和清醒时间,追踪患者及手术大夫满意情况.结果两组用药后SPO2、VT、MV均较用药前低,5 min时降至低,组间无差异.SPO2下降程度、咪唑安定用药量和AVAT评分两组无差异.持续给药撤药后清醒时间(8.47±3.17) min,用药量(0.07±0.03)mg/(kg*h).持续给药对应激反应抑制明显优于间断给药.手术大夫对持续给药较间断给药更为满意.结论硬膜外麻醉中微泵持续输注咪唑安定可提供较平稳而持续的麻醉镇静,有效地抑制应激反应.清醒快,对循环、呼吸影响小.但应注意首剂咪唑安定给药对呼吸的抑制,尤其在给药后10 min内.
作者:黄蔚;李华凤;黄琰;马玉姗;林远贵 刊期: 2004年第01期
目的构建人釉原蛋白基因真核表达克隆. 方法从胚龄20周的引产胎儿牙胚中提取总RNA,RT-PCR法扩增人釉原蛋白编码区基因,重组到真核表达载体PcDNA3.1中,经酶切和DNA序列分析验证. 结果经RT-PCR扩增后,得到大小约570 bp的特异性产物,与预期的人釉原蛋白mRNA编码区碱基长度一致,重组克隆PcDNA3.1-AMG的测序结果显示,与GenBank中的人釉原蛋白基因(AMELX)序列仅在第485位碱基发生错配(G→C),但不影响氨基酸组成.结论本研究成功的构建了人釉原蛋白基因真核表达克隆,为进一步研究牙周组织再生的基因治疗奠定了基础.
作者:章锦才;殷春一;张蕴惠;赵川江 刊期: 2004年第01期
目的比较不同高密度脂蛋白(HDL)亚类对细胞胆固醇移出的影响.方法利用3H-胆固醇负载的人血管平滑肌细胞(SMC)为材料,通过细胞胆固醇流出时间与清除率的双倒数作图求出大清除率(Emax)及移出时间常数(Ke),以此比较不同HDL亚类促使细胞胆固醇移出的特性和强度.结果前β1-HDL对SMC3H-胆固醇的Emax高于α-HDL及不含apoE的HDL3(P<0.01);而Ke又小于后两者(P<0.01).结论前β1-HDL在清除SMC3H-胆固醇的能力(Emax)及效率(Ke)上均明显高于α-HDL及不含apoE的HDL3,是比α-HDL更为有效的细胞移出胆固醇的接受体.
作者:吴新伟;杨鲁川;徐燕华;傅强;傅明德 刊期: 2004年第01期
目的了解缺氧缺血后新生猪心肌线粒体内钙离子浓度和呼吸链复合物Ⅳ--细胞色素C氧化酶(CCO)活性的动态变化,探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)发生时心肌细胞和胞内线粒体的损伤情况.方法结扎新生猪左颈总动脉并缺氧2 h,制成缺氧缺血性脑损伤模型,并设对照组.于恢复给氧后0 h、24 h、48 h、72 h测定心肌线粒体内Ca2+浓度和呼吸链复合物Ⅳ活性.结果①心肌线粒体Ca2+含量升高,线粒体钙超载,复氧后48 h和72 h Ca2+浓度逐步回降;②心肌线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性下降,复氧后48 h和72 h;其活性回升,但72 h仍未完全恢复正常;③线粒体Ca2+浓度与呼吸链复合物Ⅳ活性呈直线负相关.结论新生猪缺氧缺血性脑损伤发生时心肌细胞线粒体和呼吸链均受到损伤,随着复氧时间的延长损伤逐步恢复.缺氧缺血后心肌线粒体钙超载可能是线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性下降的原因之一.
作者:杨慧明;姚裕家;李炜如 刊期: 2004年第01期
目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, uPA)及其受体(uPA receptor, uPAR)在尿路移行细胞癌组织中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学PicTureTM通用型二步法检测50例肾盂输尿管癌、40例膀胱癌组织中uPA和uPAR的表达及分布.结果随着肿瘤分级、分期的增高,uPA和uPAR的表达水平明显增高(P均<0.05);肾盂输尿管和膀胱癌组织中uPA、uPAR阳性表达明显高于癌周组织(P<0.05),且uPA阳性表达与uPAR阳性表达有高度正相关性(r=0.979,P<0.01).结论 uPA、uPAR的共同表达是尿路移行细胞癌的特征之一,与其浸润和转移情况密切相关,可作为预后重要指标.
作者:李延江;郑宝钟;周尊林 刊期: 2004年第01期
目的研究葡萄球菌肠毒素A(SEA)脂质体(L-SEA)体外激活肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗肿瘤的活性.方法从5例原发性肝癌患者癌组织中分离培养TIL,分别以L-SEA、SEA和IL-2刺激后,观察TIL的增殖曲线,ELISA法检测细胞因子的分泌,流式细胞仪检测细胞亚群的变化,MTT法检测TIL的肿瘤杀伤活性.结果 L-SEA、SEA及IL-2均能有效刺激TIL的增殖,高增殖倍数分别为42.5、51、12.5倍.除第4 d L-SEA组TIL的IFN-γ水平低于游离SEA组外,此两组的细胞因子分泌没有显著性差异(P>0.05),且都高于IL-2组.L-SEA刺激后,TIL的CD8+细胞亚群增殖更快,CD4+细胞/CD8+细胞出现倒置.经过L-SEA培养后的TIL能有效杀伤HepG-2肿瘤细胞.结论 L-SEA仍然具有游离SEA的刺激TIL增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的活性.
作者:李茂德;李志宇;何生;薛华 刊期: 2004年第01期
目的建立能同时测定狗脑积水不同时期脑组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(Crp)、磷酸腺苷酸(ATP、ADP、AMP)含量的方法,了解脑积水不同时期脑组织的能量代谢受损状况.方法采用反相高效液相色谱法同时测定狗脑积水脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量.色谱柱为 Inertsil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm i.d. 5 μm)分析柱,流动相为:KH2 PO4缓冲液(330 mmol/L)-乙腈-TBA(45 mmol/L)(94:5.5:0.5)( pH=6.27),检测波长为210 nm. 结果低检测限为3.55~5.84 μmol/L,Cr 在5.69~3640.50 μmol/L (r=0.9993),Crp 3.47~555.50 μmol/L (r=0.9999),AMP在2.69~1723.00 μmol/L (r=0.9993),ADP在2.66~1704.00 μmol/L (r=0.9999),ATP 在2.94~1883.50 μ mol/L (r=0.9999)范围内均具有良好的线性关系.回收率为90.10%~107.00%,日内精密度为1.58%~3.88%,日间精密度为1.99%~4.24%.应用该方法测定了16只狗脑积水不同时期脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量,获得了良好的结果.结论该方法准确、灵敏、快速,适合于脑积水脑组织中高能磷酸化合物的测定.
作者:孙爱民;王恩任;毛伯镛;晁若冰;黄勋;许秀成 刊期: 2004年第01期
目的通过研究口腔鳞癌诱导化疗中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)在肿瘤细胞和间质细胞中的变化规律,探讨在口腔鳞癌诱导化疗中TGFβ1信息传递的作用机理.方法 40例N0期口腔鳞癌术前经皮下埋植泵进行诱导化疗,采用原位杂交检测治疗前后癌灶与肿瘤间质TGFβ1 mRNA表达.按照统一制定的病例选择标准进行治疗前后对照实验.结果经原位杂交检测表明,TGFβ1在口腔鳞状细胞癌中的表达普遍增强,而癌旁上皮、淋巴细胞、血管内皮细胞有散在阳性表达.经皮下埋植泵诱导化疗后,肿瘤前沿区和间质淋巴细胞TGFβ1 mRNA表达显著增强(P<0.05),治疗有效者间质淋巴细胞TGFβ1 mRNA表达显著高于治疗无效者(P<0.05). 结论 TGFβ1转录水平表达异常是口腔鳞癌发生发展的机制之一.TGFβ1具有调节肿瘤微环境免疫功能的作用.
作者:汤炜;田卫东;李声伟;唐尤超 刊期: 2004年第01期
目的了解环氧化酶(COX)在膀胱移行细胞癌中的表达及其与肿瘤分期和分级的关系. 方法对34例开放手术切除的膀胱癌组织标本及对照组7例肾移植供体正常膀胱组织标本运用COX-1及COX-2的单克隆抗体进行免疫组织化学染色检测表达情况;并运用RT-PCR对COX-1及COX-2的mRNA表达进行检测. 结果正常膀胱中未见COX-2表达,而在膀胱移行细胞癌细胞中均有COX-2表达.在移行细胞癌组织中COX-2的表达强度随肿瘤分级程度的增加呈现升高趋势(P<0.001).肿瘤临床各期的COX-2免疫组织化学染色程度未见明显统计学差异(P值均>0.05). COX-1在膀胱移行细胞癌和正常膀胱中均有表达. 结论环氧化酶-2在膀胱移行细胞癌中异常表达,该异常表达可能与膀胱移行细胞癌的发生发展有关.
作者:王坤杰;李虹;魏强;杨宇如 刊期: 2004年第01期
目的观察α干扰素(IFN-α)对真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)治疗的临床效果.方法对19例确诊为PV的患者单用IFN-α治疗,与17例单纯化疗的PV患者进行疗效比较.IFN-α初始治疗剂量为9 MU/周,平均疗程14.8月(3~42月).结果 IFN-α可以很好地控制PV患者的出血、血栓形成、皮肤瘙痒及脾脏肿大.结合血液学改变,其临床缓解率为36.8%(7/19),好转为26.3%(5/19),总有效率为63.1%,与化疗组结果相似(P>0.05).但治疗组无一例复发、出现骨髓纤维化及白血病变.结论 IFN-α可以作为PV有效的缓解及维持治疗.
作者:梁勇;井丽萍;宋文秀 刊期: 2004年第01期