学术投稿

同时检测脑积水脑组织中多种高能磷酸化合物的反相高效液相色谱法的建立

孙爱民;王恩任;毛伯镛;晁若冰;黄勋;许秀成

关键词:反相高效液相色谱法, 脑积水组织, 肌酸, 磷酸肌酸, 磷酸腺苷酸
摘要:目的建立能同时测定狗脑积水不同时期脑组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(Crp)、磷酸腺苷酸(ATP、ADP、AMP)含量的方法,了解脑积水不同时期脑组织的能量代谢受损状况.方法采用反相高效液相色谱法同时测定狗脑积水脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量.色谱柱为 Inertsil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm i.d. 5 μm)分析柱,流动相为:KH2 PO4缓冲液(330 mmol/L)-乙腈-TBA(45 mmol/L)(94:5.5:0.5)( pH=6.27),检测波长为210 nm. 结果低检测限为3.55~5.84 μmol/L,Cr 在5.69~3640.50 μmol/L (r=0.9993),Crp 3.47~555.50 μmol/L (r=0.9999),AMP在2.69~1723.00 μmol/L (r=0.9993),ADP在2.66~1704.00 μmol/L (r=0.9999),ATP 在2.94~1883.50 μ mol/L (r=0.9999)范围内均具有良好的线性关系.回收率为90.10%~107.00%,日内精密度为1.58%~3.88%,日间精密度为1.99%~4.24%.应用该方法测定了16只狗脑积水不同时期脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量,获得了良好的结果.结论该方法准确、灵敏、快速,适合于脑积水脑组织中高能磷酸化合物的测定.
四川大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 红参循环渗漉提取工艺的优化研究

    目的优化红参的提取工艺. 方法采用正交试验法,以人参皂苷Rg1和Re的收率及提取效率三指标综合评分为评价标准,考察红参循环渗漉提取工艺中的粉碎粒度(A)、循环速度(B)、提取时间(C)三个主要因素. 结果优化工艺条件为:粉碎粒度为粗粉、循环速度0.2 L/min,提取时间6 h.结论红参循环渗漉提取工艺优于回流及浸渍提取工艺.

    作者:王丹;龚涛;孙冰;李莉 刊期: 2004年第01期

  • 血管内皮生长因子C在喉鳞癌中的表达

    目的了解血管内皮生长因子C(VEGF-C)在喉鳞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法采用免疫组化方法检测60例喉鳞癌患者术后肿瘤组织石蜡标本的VEGF-C蛋白的表达.结果在部分喉鳞癌患者的癌细胞胞浆中可检测到VEGF-C蛋白的表达(45/60).且VEGF-C蛋白的表达在有淋巴结转移的喉鳞癌组织中明显高于无淋巴结转移组织,在低分化喉鳞癌组织中的表达明显高于高、中分化喉鳞癌组织.结论 VEGF-C表达于喉癌中,其表达与喉癌细胞的淋巴结转移密切相关.

    作者:王中亮;陈尧;周斌;梁传余;张林;李瑞祥 刊期: 2004年第01期

  • 肝靶向药米托蒽醌毫微球对小鼠肝癌的抑瘤作用

    目的研究对比米托蒽醌聚氰基丙烯酸正丁酯毫微球(DHAQ-PBCA-NS)和米托蒽醌(DHAQ)对小鼠肝癌的抑瘤作用.方法小鼠常位移植肝癌H22后,分别给予不同剂量的DHAQ-FBCA-NS和DHAQ制剂,用抑瘤率比较二者的抑瘤作用;在观察急性毒性的基础上比较二者的化疗指数;同时观察二者在不同时间给药时的抑瘤作用.结果 DHAQ和DHAQ-PBCA-NS抑瘤作用均存在剂量反应关系,半数有效量(ED50)分别为1.04 mg/kg和0.34 mg/kg,半数致死量( LD50)分别为3.670 mg/kg和4.225 mg/kg,由此得出化疗指数分别为3.53和12.43,其化疗指标DHAQ-PBCA-NS是DHAQ的3.52倍,不同给药时间对抑瘤作用的影响结果显示,DHAQ和DHAQ-PBCA-NS在治疗时给药时间越早越好,与同一给药时间相比,DHAQ-PBCA-NS抑瘤率高于DHAQ约20%.结论 DHAQ-PBCA-NS对小鼠肝癌H22抑瘤作用优于DHAQ,其肝靶向作用明显.

    作者:杨云霞;朱玲;何晓;包定元;包旭 刊期: 2004年第01期

  • 大鼠体内青石棉纤维变化特征的谱学研究

    目的观察体内青石棉表面的细微变化,为进一步研究石棉致病机制提供依据.方法大鼠体内染尘后,用电子显微镜观察其在动物体内的变化,并用红外光谱、差热分析等谱学手段分析.结果机体蛋白质在与青石棉的相互作用过程中,组织结构对称性降低;青石棉的硅已与蛋白质中的烷基、胺基交联成键,存在明显的Si-O-C(N)、Si-R新的吸收谱带.机体以吞噬、包裹、缠绕,或以生化溶解方式排解粉尘,纤维自身则出现变短、尖部圆化、折断、分叉现象,也可以溶解、迁移、表面化学反应等.结论石棉纤维表面基团和组织内的某些蛋白反应形成新的表面介体.肺泡内纤维的弱碳酸盐化现象是体内纤维溶解和反应的新形式.青石棉残留的粉尘仅为以Si-O为主的物质.组织膜是体内粉尘迁移的隔离阻滞带.

    作者:董发勤;罗素琼 刊期: 2004年第01期

  • 苯丙酸诺龙对烧伤大鼠肝脏白蛋白与创面前胶原蛋白mRNA表达的影响

    目的研究苯丙酸诺龙对烧伤大鼠肝细胞白蛋白与创面成纤维细胞前胶原蛋白mRNA表达的影响.方法采用随机对照设计,使用苯丙酸诺龙治疗20%体表面积深Ⅱ度烫伤大鼠,分别于伤后第4、7、14、21 d处死,留取肝组织与创面肉芽组织,RNA一步法分别提取二者总RNA,RT-PCR一步法扩增检测白蛋白与α1(Ⅰ)前胶原蛋白mRNA表达水平. 结果实验组肝脏白蛋白mRNA与肉芽组织αl(Ⅰ)前胶原蛋白mRNA表达水平明显提高,在各时间点均明显高于同期对照组(P<0.05),伤后第7、14 d为mRNA快速增长时期(P<0.01). 结论苯丙酸诺龙能有效上调肝脏白蛋白mRNA与肉芽α1(Ⅰ)前胶原蛋白mRNA的表达水平,有利于蛋白合成与逆转负氮平衡,从整体与局部促进创面愈合.

    作者:岑瑛;李凯;刘宁;刘晓雪 刊期: 2004年第01期

  • 同时检测脑积水脑组织中多种高能磷酸化合物的反相高效液相色谱法的建立

    目的建立能同时测定狗脑积水不同时期脑组织中肌酸(Cr)、磷酸肌酸(Crp)、磷酸腺苷酸(ATP、ADP、AMP)含量的方法,了解脑积水不同时期脑组织的能量代谢受损状况.方法采用反相高效液相色谱法同时测定狗脑积水脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量.色谱柱为 Inertsil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm i.d. 5 μm)分析柱,流动相为:KH2 PO4缓冲液(330 mmol/L)-乙腈-TBA(45 mmol/L)(94:5.5:0.5)( pH=6.27),检测波长为210 nm. 结果低检测限为3.55~5.84 μmol/L,Cr 在5.69~3640.50 μmol/L (r=0.9993),Crp 3.47~555.50 μmol/L (r=0.9999),AMP在2.69~1723.00 μmol/L (r=0.9993),ADP在2.66~1704.00 μmol/L (r=0.9999),ATP 在2.94~1883.50 μ mol/L (r=0.9999)范围内均具有良好的线性关系.回收率为90.10%~107.00%,日内精密度为1.58%~3.88%,日间精密度为1.99%~4.24%.应用该方法测定了16只狗脑积水不同时期脑组织中Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量,获得了良好的结果.结论该方法准确、灵敏、快速,适合于脑积水脑组织中高能磷酸化合物的测定.

    作者:孙爱民;王恩任;毛伯镛;晁若冰;黄勋;许秀成 刊期: 2004年第01期

  • 阴道超声检查对宫腔粘连的诊断价值

    目的评价宫腔粘连的阴道超声(TVS)检查的诊断价值.方法对118例患者进行阴道超声检查,通过与病理结果对照,对阴道超声诊断宫腔粘连的价值进行评价,并对宫腔粘连的阴道超声分级与月经量改变的程度和病理分级作相关统计学分析.结果阴道超声诊断宫腔粘连的敏感性为85.7%,特异性为100%,准确性为88.1%,宫腔粘连的阴道超声分级与月经量改变的程度和病理分级均有较好的相关性(P<0.005).结论阴道超声检查对宫腔粘连有很高的诊断价值,对宫腔粘连的临床治疗的选择有指导意义.

    作者:罗红;贺庭富;朱琦;郭文琪;杨帆 刊期: 2004年第01期

  • 中国康巴地区藏族群体5个STR基因座的遗传多态性研究

    目的获取D1S549,D3S1754,D12S391,D12S375和D18S865基因座在中国康巴藏族群体中基因型及等位基因频率数据,初步探讨其在遗传学研究及法医学应用中的意义.方法抽取100名地区藏族群体无血缘关系个体的静脉血滴于滤纸上,干燥后剪取少许血痕,chelex法提取DNA.应用PCR技术,扩增产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分型. 结果中国康巴地区藏族群体D1S549基因座发现7个等位基因;D3S1754基因座发现6个等位基因;D12S391基因座发现10个等位基因;D12S375基因座发现6个等位基因;D18S865基因座发现6个等位基因;5个基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).各基因座的杂合度分别为0.86,0.77,0.81,0.69和0.80;个人识别率分别为0.929,0.838,0.934,0.886和0.890;非父排除率分别为0.715,0.545,0.618,0.413和0.599.结论 5个基因座在中国康巴藏族群体中具有较高的非父排除率与个人识别率,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值.

    作者:胡羽;廖淼;周斌;贾怡;张林;陈国弟 刊期: 2004年第01期

  • 特发性肺纤维化的螺旋CT表现特征与肺功能的相关性

    目的探讨特发性肺纤维化(IPF)的螺旋CT表现特征与肺功能的相关性.方法对经临床病理证实的32例IPF患者行螺旋CT检查,其中17例对兴趣区追加高分辨率CT扫描.所有病例均于CT检查前后5 d内行肺功能检查.观察IPF的CT征象及其解剖分布,评价CT表现特征与肺功能损害的关系. 结果 32例IPF均有不同程度的限制性通气功能障碍.肺功能轻度受损5例,其中4例(80%)有磨玻璃样密度影;中度受损11例中,小叶间隔增厚11例(100%),小叶内间质增厚9例(82%),小叶结构变形11例(100%)和支气管血管束增粗10例(91%);重度受损16例中,蜂窝肺16例(100%)和牵拉性支气管扩张9例(55%).肺功能重度受损的患者有阻塞性合并限制性通气功能障碍. 结论螺旋CT能准确反应IPF的病理变化,IPF不同程度的肺功能受损与螺旋CT征象存在相关性.两者相结合有助于预测IPF的进展、预后以及疗效反应.

    作者:陈楠;杨志刚;余建群 刊期: 2004年第01期

  • 猫部分背根切断后背根节一氧化氮合酶的表达变化

    目的了解一氧化氮合酶(NOS)在背根损伤的背根节及邻近未受损之背根节中表达的变化.方法采用部分去背根传入动物模型,通过免疫组织化学ABC法,观察猫背根节中nNOS及eNOS同工酶阳性免疫产物的分布、阳性神经元的数量及变化.结果猫背根节中nNOS阳性反应物主要分布于小神经元中;背根被切断的L5背根节及邻近完好的L6备用背根节中nNOS阳性小神经元数量较非术侧均有增加; eNOS在成年猫背根节神经元中未见表达.结论在背根节神经元中表达的nNOS及由nNOS催化产生的NO可能与神经损伤和修复的生理病理过程有关.

    作者:覃华丽;周雪;章为;陈思秀 刊期: 2004年第01期

  • 葡萄球菌肠毒素A脂质体激活肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的实验研究

    目的研究葡萄球菌肠毒素A(SEA)脂质体(L-SEA)体外激活肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗肿瘤的活性.方法从5例原发性肝癌患者癌组织中分离培养TIL,分别以L-SEA、SEA和IL-2刺激后,观察TIL的增殖曲线,ELISA法检测细胞因子的分泌,流式细胞仪检测细胞亚群的变化,MTT法检测TIL的肿瘤杀伤活性.结果 L-SEA、SEA及IL-2均能有效刺激TIL的增殖,高增殖倍数分别为42.5、51、12.5倍.除第4 d L-SEA组TIL的IFN-γ水平低于游离SEA组外,此两组的细胞因子分泌没有显著性差异(P>0.05),且都高于IL-2组.L-SEA刺激后,TIL的CD8+细胞亚群增殖更快,CD4+细胞/CD8+细胞出现倒置.经过L-SEA培养后的TIL能有效杀伤HepG-2肿瘤细胞.结论 L-SEA仍然具有游离SEA的刺激TIL增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的活性.

    作者:李茂德;李志宇;何生;薛华 刊期: 2004年第01期

  • 丹参及丹参与生脉合用对阻塞性黄疸术后肾脏的保护作用

    目的探讨丹参及丹参与生脉合用对阻塞性黄疸术后炎症介质及肾功能的影响.方法将阻塞性黄疸与无黄疸的肝胆外科患者分为4组.黄疸对照组及无黄疸对照组术后给予一般治疗,丹参、丹参与生脉合用治疗组术后1~6 d分别给予丹参及丹参与生脉合用,动态观察血浆内毒素(LPS),肿瘤坏死因子(TNF-α),白细胞介质-6、8(IL-6、IL-8)、内皮素(ET)以及尿转铁蛋白(UTFR),尿白蛋白(UALB)和尿视黄醇(URBP).结果丹参治疗组血浆内毒素从术前1 d的(0.24±0.07) EU/ml 降至术后7 d的(0.11±0.06) EU/ml,丹参与生脉合用治疗组血浆内毒素从术前1 d的(0.25±0.10) EU/ml 降至术后7 d的(0.18±0.05) EU/ml.丹参及丹参与生脉合用治疗组术后7 d与术后1 d相比,炎症介质IL-6、IL-8、 ET、TNF-α及肾功能指标UTFR、URBP,UALB明显下降(P<0.05),且低于或接近术前水平.丹参与生脉合用治疗组术后7 d的ET、TNF-α、IL-6及UALB低于丹参治疗组(P<0.05). 结论丹参及丹参与生脉合用对阻塞性黄疸患者术后血浆内毒素均有拮抗作用,同时降低其它炎症介质水平,对肾脏功能有明显的保护作用;丹参和生脉合用效果优于单独应用丹参.

    作者:雷文章;彭兵;吴言涛;罗艳丽;王向东;强鸥 刊期: 2004年第01期

  • 重组人干扰素α-2a聚氰基丙烯酸丁酯肝靶向缓释纳米球冻干剂的研究

    目的考察基因重组人干扰素α-2a聚氰基丙烯酸丁酯纳米球冻干制剂(rIFNα2a-PBCA-NS)的肝靶向性和缓释性.方法采用乳化聚合法制备纳米球,并制得冻干品,用细胞病变抑制法测定制剂及生物样品中rIFNα2a的含量;经小鼠静脉给药后,观察其在体内分布和在肝脏中的药代动力学.结果制得的纳米球平均包封率为 56.2%±4.3%;rIFNα2a-PBCA-NS的平均粒径为(108±37) nm,跨距为0.55;3~5 ℃,冻干品留样观察6个月生物活性指标基本不变.在肝脏中的分布百分率由原药的13.1%提高到50.6%,在肝脏中的平均滞留时间由原药的1.41 h延长到8.35 h.结论制备的rIFNα2a-PBCA-NS具有明显肝靶向性和缓释特征.

    作者:陆彬;奉建芳;杨秀岑 刊期: 2004年第01期

  • 口腔鳞癌诱导化疗中TGFβ1原位表达的研究

    目的通过研究口腔鳞癌诱导化疗中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)在肿瘤细胞和间质细胞中的变化规律,探讨在口腔鳞癌诱导化疗中TGFβ1信息传递的作用机理.方法 40例N0期口腔鳞癌术前经皮下埋植泵进行诱导化疗,采用原位杂交检测治疗前后癌灶与肿瘤间质TGFβ1 mRNA表达.按照统一制定的病例选择标准进行治疗前后对照实验.结果经原位杂交检测表明,TGFβ1在口腔鳞状细胞癌中的表达普遍增强,而癌旁上皮、淋巴细胞、血管内皮细胞有散在阳性表达.经皮下埋植泵诱导化疗后,肿瘤前沿区和间质淋巴细胞TGFβ1 mRNA表达显著增强(P<0.05),治疗有效者间质淋巴细胞TGFβ1 mRNA表达显著高于治疗无效者(P<0.05). 结论 TGFβ1转录水平表达异常是口腔鳞癌发生发展的机制之一.TGFβ1具有调节肿瘤微环境免疫功能的作用.

    作者:汤炜;田卫东;李声伟;唐尤超 刊期: 2004年第01期

  • 雌激素对低切应力作用下内皮细胞基因表达谱的影响

    目的研究雌激素对低切应力作用下人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响, 探讨雌激素对内皮细胞保护作用的机制. 方法用含4096点的cDNA芯片高通量、大范围、高效率地检测经17 β-雌二醇(10-7 mol/L)孵育48 h后再行低切应力(4.20 dyne/cm2, 2 h)作用后的人脐静脉内皮细胞的基因表达谱情况.结果先用雌激素孵育再行低切应力处理的内皮细胞与未经任何处理的对照组比较,共有384条基因出现差异表达,约占芯片基因总数的0.094 %.其中226条基因表达增加,158条基因表达下降.在表达上调的基因中其转录产物涉及PGI2合成、单核/巨噬细胞的吞噬作用等;在表达下调的基因中其转录产物涉及纤维蛋白原的降解、原癌基因产物的生成等.结论生理浓度的雌激素对损伤内皮细胞有保护作用,其机制涉及到多种基因的调节.

    作者:张文胜;成敏;陈槐卿;吴文超;黄华 刊期: 2004年第01期

  • 腹腔镜辅助下脑室腹腔分流术的临床应用

    目的比较腹腔镜辅助下脑室腹腔分流术(VPS)和常规剖腹VPS的临床疗效,探讨腹腔镜辅助下VPS的临床应用经验.方法回顾性总结分析26例腹腔镜辅助下VPS和234例常规剖腹VP分流术的临床资料,分析比较两种手术方式的手术效果及并发症发生率.结果常规剖腹VPS组234例中6例出现腹腔端梗阻、移位,5例出现术后感染,2例儿童患者出现分流管腹腔端穿破直肠脱出肛门.腹腔镜辅助下VPS组26例患者术后均恢复良好,症状均有不同程度的缓解,其中13例采用右肝膈间隙分流术,13例采用盆腔分流术,除1例发生术后感染外,无腹腔端梗阻、移位或穿破腹腔脏器发生者,且无与腹腔镜手术相关的并发症发生.结论腹腔镜辅助下脑室腹腔分流术安全可靠,具有定位准、创伤小、术后并发症少等优点,有良好的临床应用前景.

    作者:姜曙;毛伯镛;周总光;杜景平;舒晔;程永忠 刊期: 2004年第01期

  • 前β1-HDL对细胞胆固醇流出的影响

    目的比较不同高密度脂蛋白(HDL)亚类对细胞胆固醇移出的影响.方法利用3H-胆固醇负载的人血管平滑肌细胞(SMC)为材料,通过细胞胆固醇流出时间与清除率的双倒数作图求出大清除率(Emax)及移出时间常数(Ke),以此比较不同HDL亚类促使细胞胆固醇移出的特性和强度.结果前β1-HDL对SMC3H-胆固醇的Emax高于α-HDL及不含apoE的HDL3(P<0.01);而Ke又小于后两者(P<0.01).结论前β1-HDL在清除SMC3H-胆固醇的能力(Emax)及效率(Ke)上均明显高于α-HDL及不含apoE的HDL3,是比α-HDL更为有效的细胞移出胆固醇的接受体.

    作者:吴新伟;杨鲁川;徐燕华;傅强;傅明德 刊期: 2004年第01期

  • 甲基丙二酸血症1例

    患儿男,13月,因反复气促40 d,复发3 d于2003年2月18日入院.患儿为G1P1足月顺产,不能坐,不能喊爸爸妈妈,其母妊娠期间正常.父母健康,非近亲结婚,家族中无类似疾病患者.

    作者:陶于洪;陈莉娜;张小芳 刊期: 2004年第01期

  • 精氨酸血管加压素 mRNA在不同免疫应答期大鼠下丘脑室旁核的表达变化

    目的研究大鼠下丘脑室旁核(PVN)内精氨酸血管加压素(AVP)mRNA的表达与免疫应答反应间的动态关系.方法建立免疫增强及免疫抑制大鼠模型,应用原位杂交组织化学及图像分析技术检测免疫反应不同时期大鼠PVN内AVP mRNA的动态变化.结果①免疫抑制组大鼠PVN单个细胞内AVP mRNA阳性杂交信号的平均面积明显低于免疫增强组及对照组(P<0.05).②PVN单个细胞内AVP mRNA阳性杂交信号的平均灰度值在免疫反应高峰时显著低于免疫反应开始增强时(P<0.05),在免疫抑制低时却明显高于免疫反应开始受抑制时(P<0.05).③AVP mRNA阳性杂交信号在PVN内所占的总面积在免疫反应高峰时显著大于免疫反应开始增强时和对照组(P<0.05),在免疫抑制低时则明显小于免疫反应开始受抑制时(P<0.05).④AVP mRNA阳性杂交信号在整个PVN内的平均灰度值在免疫反应高峰时明显低于免疫反应开始增强时(P<0.05),在免疫抑制低时却明显高于免疫反应开始受抑制时(P<0.05).结论 PVN内AVP mRNA的含量与免疫应答反应的强度成正比,AVP基因的转录随免疫应答反应的变化而变化.

    作者:朱家媛;欧可群;王蕾;陈文玉;马玉琼 刊期: 2004年第01期

  • 乌拉地尔对大鼠低氧性肺动脉高压的预防作用

    目的探讨α1-肾上腺素受体拮抗剂乌拉地尔(urapidil)对低氧性肺动脉高压的预防作用.方法将21只雄性SD大鼠分为正常对照组、低氧组和低氧+乌拉地尔组,以常压低氧3周建立大鼠肺动脉高压模型,分别称量大鼠心脏右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)质量,计算出右心室肥厚指数RV/(LV+S),并对大鼠肺组织切片进行HE染色,采用图象分析技术测定大鼠肺小动脉管壁厚度(WT)和面积(WA),计算出肺小动脉管壁厚度指标--管壁厚度占外径的百分比(WT%)和管壁面积占总面积的百分比(WA%).结果低氧组大鼠RV/(LV+S)、WT%和WA%分别为(33.06±1.74)%, (25.15±1.47)% 和(73.88±2.93)%, 对照组为 (23.21±2.31)% ,(13.55±1.60)% 和(48.23±4.43)%,两组之间差异有显著意义(P均<0.01);而经乌拉地尔处理的低氧大鼠则分别为 (26.63±1.44)% ,(14.57±2.27)% 和(52.68±3.98)%,均低于低氧组(P<0.01).结论α1-肾上腺素受体参与了低氧性肺动脉高压的形成过程,其拮抗剂乌拉地尔对低氧性肺动脉高压具有明显的预防作用.

    作者:夏秀琼;程德云;关键;陈小菊 刊期: 2004年第01期

四川大学学报(医学版)杂志

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主办:四川大学