龙怀聪；王曾礼
目的建立人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)原代、传代培养的佳方法,并初步建立其永生株.方法采用人脐动脉血管中膜组织块贴壁法原代培养,比较不同培养基对原代及传代细胞增殖的影响;选择标记为新霉素(G418)的带有端粒酶催化亚基(hTERT)基因的重组质粒导入人脐动脉血管平滑肌细胞.结果经α-肌动蛋白鉴定,组织块贴壁法可获得高纯度的HUASMC.原代培养的HUASMC 1～4代细胞增殖能力强、生长旺盛,此后细胞的增殖能力逐渐降低,到第10代几乎丧失增殖力.原代培养以MCDB131为佳培养基.hTERT转染细胞克隆由长梭形变为短梭形,接触抑制消失,生长速度快,目前已传至20代,增殖能力与第1代无差别.转染前后平滑肌特异的α-肌动蛋白表达阳性.结论 hTERT转染的HUASMC保留了HUASMC的基本生物学特征,能保持较强的增殖能力持续传代.
作者：李胜富；田佳；刘瑾；万琳；卢晓风；冯莉；孙明菡；樊瑜波；步宏；李幼平 刊期： 2003年第02期
目的评价血清恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)在肺癌的诊断及鉴别诊断中的价值.方法随机选择60例肺癌患者及50例肺部良性疾病患者进行血清TSGF检测,并与癌胚抗原(CEA)进行比较,分析TSGF和CEA诊断肺癌的敏感性、特异性和准确性.结果肺癌组血清TSGF和CEA水平明显高于肺部良性疾病组,两组间有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论 TSGF在恶性肿瘤的诊断方面具有良好的敏感性、特异性和准确性,在肺癌的早期诊断及鉴别诊断中,是一项具有参考价值的肿瘤标志物.
作者：肖敏；冯玉麟；王佑娟；何川；陆燕蓉 刊期： 2003年第02期
目的研究脑源性神经营养因子(BDNF) 对过氧化氢(H2O2)诱导人动脉平滑肌细胞(SMC)凋亡的作用.方法 BDNF基因经脂质体介导转染SMC,Ⅰ型胶原基因调节元件(COLIA1)驱动该基因在SMC中异位表达,用MTT法检测细胞增殖,吖啶橙(AO)荧光染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,琼脂糖电泳检测DNA图谱.结果 100～800 μmol/L浓度的H2O2明显抑制SMC增殖,200 μmol/L H2O2作用24 h后,可见典型的细胞凋亡形态学及生物化学改变即胞浆固缩、核染色质断裂、DNA电泳呈梯形条带;经BDNF基因修饰的SMC则未显示上述改变.结论 H2O2能有效诱导SMC凋亡, 转BDNF基因的SMC对H2O2 诱导凋亡具有明显的拮抗作用.
作者：陈建业；刘戟；王若菡；刘智敏；李忌；陈俊杰 刊期： 2003年第02期
目的探讨骨微环境骨髓中CD44表达水平以及与绝经后骨质疏松发生的相关性.方法成年去势大鼠50只,随机分为去势组和假手术组,术后3、5、6、8、 11周各处死一组大鼠.通过免疫组化SABC法检测CD44的表达水平.利用计算机图象分析系统进行骨组织形态计量学测定.结果相关关系分析提示:骨髓细胞CD44表达水平与骨小梁退变参数呈正相关.去势大鼠于6周后CD44的表达明显降低,仅限于骨髓中融合的多核巨噬细胞/破骨样细胞表面表达,并且这类细胞的数目呈增加趋势.结论去势后大鼠骨小梁退变可能与骨髓微环境中CD44表达量减少,以致骨髓中融合的多核巨噬细胞/破骨样细胞数目增多有关.
作者：王松；张晓；王凡；王中亮；邓世山；张本斯；李瑞祥 刊期： 2003年第02期
目的评价甲泼尼龙治疗颅内肿瘤瘤周水肿的临床疗效和安全性.方法 58例具有不同程度瘤周水肿的颅内肿瘤患者随机分为试验组和对照组,两组患者术前、术后分别静脉给予常规等效剂量甲泼尼龙和地塞米松治疗3～5 d,观察两组患者在术前治疗过程中临床神经症状及体征的改善程度,在术前治疗前后作KPS评分,并观察两组患者在治疗过程中可能出现的副作用.结果试验组30例中有19例的临床症状得到改善,有效率为63%,其中9例有明显改善,显效率为30%,对照组28例中有17例的临床症状得到改善,有效率为60.7%,其中4例有明显疗效,显效率为14.3%.两组比较,有效率无明显差别,但显效率比较则有显著性差别(P<0.05).治疗期间,两组均无明显副作用发生. 结论甲泼尼龙可有效地减轻颅内肿瘤所致的瘤周水肿,且无明显副作用.
作者：丁新民；毛伯镛；鞠延；刘艳辉 刊期： 2003年第02期
目的研究雷公藤多甙对肌肉本身收缩力的作用.方法用电子刺激器刺激30只大鼠膈神经-膈肌标本的膈神经和直接刺激45只蟾蜍腓肠肌标本的方法,研究雷公藤多甙对肌肉本身收缩力的影响.结果在三分之一适刺激强度时,雷公藤多甙在20 mg/L组,前60 min使大鼠膈肌收缩幅度增大,此后至90 min为止,收缩幅度无增大;在40 mg/L、60 mg/L组中前60 min未引起大鼠膈肌收缩幅度减小.在三分之一适刺激强度直接刺激蟾蜍腓肠肌标本时,雷公藤多甙在60 mg/L组前30 min未引起蟾蜍腓肠肌收缩张力减小.而溶剂二甲亚砜在三分之一适刺激强度时使大鼠膈肌收缩幅度和蟾蜍腓肠肌收缩张力均明显减小.结论雷公藤多甙对肌肉本身收缩力有一定增强作用;溶剂二甲亚砜对肌肉本身收缩有抑制作用.
作者：张云；喻璟瑞；吕广能；李克勇；徐建国 刊期： 2003年第02期
目的研究猪皮组织胶原原纤维的三维结构,为猪皮组织作为组织工程材料提供基础数据.方法应用扫描探针显微镜和透射电镜对猪皮组织胶原原纤维进行观察.结果原纤维的表面存在着周期约为67 nm凹凸结构,原纤维的直径57～135 nm,在猪皮组织的乳头层、网状层和下网状层间存在很大差异;观察到的原纤维的端头为膨大的球形,原纤维的长度为5～13 μm,原纤维之间的侧向聚集与其周期性横纹结构相吻合并在其首尾间存在搭接.结论获得了猪皮组织胶原原纤维三维结构的数据,这些数据对于组织工程材料的研究有重要意义.
作者：李志强；王英梅；陈敏；廖隆理；向涛；杨果；赵纯培；田云飞 刊期： 2003年第02期
目的为研究抗肿瘤基因工程药物的表达奠定基础.方法根据Genbank中人血小板反应素-1(TSP-1) mRNA序列,设计和合成了两对特异引物,利用逆转录聚合酶反应扩增出人TSP-1中的两个活性片段,大小分别为728 bp和257 bp,分别命名为TSP-1-Ⅰ和TSP-1-Ⅲ.将此片段纯化后插入PMDT载体.结果限制酶切分析表明:这两个片段已插入载体中,其大小与预期值相符.序列分析显示:TSP-1-Ⅰ长728 bp,编码的多肽长212个氨基酸残基,推测其相对分子质量为23.6×103;TSP-1-Ⅲ长257 bp,编码的多肽长86个氨基酸残基, 推测其相对分子质量为9.5×103.结论同源性分析表明:TSP-1-Ⅰ和TSP-1-Ⅲ与Genbank中的TSP-1序列完全相同.
作者：陈尧；张义正 刊期： 2003年第02期
目的探讨抗菌肽APS的体外抗病原真菌的活性及可能的抗菌机理.方法微量稀释法测定APS对不同真菌的低抑菌浓度(MIC)及低杀菌浓度(MBC),并检测APS对脂质平面膜电学性质的影响.结果除过烟曲霉菌外,APS对其它受试病原真菌有较低的MIC及MBC.同时,经APS作用后,脂质平面膜上形成跨膜电流.结论 APS对多种常见病原真菌均有较强的抑制和杀灭作用.APS抗真菌的可能机制是在膜上持续形成孔道(pores),破坏了膜的完整性,引起细胞内容物的外流,终导致真菌的死亡.
作者：陈刚；丘小庆；卢晓风；裴炎；魏启欧；程惊秋 刊期： 2003年第02期
目的评价微卫星DNA序列在人-鼠脐血异种移植中的应用价值.方法采用PCR扩增短串联重复序列(PCR-STR)技术及克隆形成细胞体外培养方法,观察移植后受鼠体内的造血细胞植入情况、造血生长因子对其的影响.结果①静脉输注1～5×107个MNC/只鼠可使受鼠体内表达供者DNA,而经腹腔注射不能建立人-鼠移植模型.②人脐血细胞移植SCID小鼠可以重建小鼠造血功能,其表达水平与外源细胞因子的使用无关.结论STR-PCR分析可以从分子水平对移植物植入状态进行微量和准确的鉴定,该方法为人-鼠脐血移植模型的鉴定提供了简便、快捷的手段.
作者：刘兴会；潘小玲；黄宁；彭芝兰；吴谨 刊期： 2003年第02期
目的调查D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族群体中的遗传分布规律.方法采集308份血及唾液标本应用PCR技术,扩增产物用非变性聚丙酰胺凝胶电泳分离,银染显色分析.结果两位点各群体基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡,每一位点等位基因频率分布在各群体间均无显著差异;通过对10个汉族家系的遗传模式分析,证实了两位点等位基因传递遵循孟德尔遗传规律. 结论 D4S1647、D6S2414基因座在中国汉族、蒙古族、藏族群体均具有高度遗传多态性.
作者：汤智育；廖淼；胡羽；梁伟波；张林；陈国弟 刊期： 2003年第02期
目的构建C3d的真核表达质粒,以期将其作为分子佐剂,提高核酸疫苗的免疫效能.方法采用PCR技术扩增小鼠补体C3d基因(897 bp),并将其克隆至pGEM-T载体上; 经鉴定其DNA序列正确;再将其亚克隆至真核表达载体pVAX1上.结果经DNA测序证实了该克隆片段为小鼠补体C3d基因,可进一步用于基因表达和基因治疗的研究.结论构建了C3d真核表达质粒,为高效核酸疫苗的研究打下了良好的基础.
作者：孙梅芹；赵连三；陈守春；王松；周陶友；唐红；陈毅荣；闫娟 刊期： 2003年第02期
目的对两种中国地方猪种(五指山猪和版纳微型猪近交系)的86头个体进行猪内源性逆转录病毒(PERV)亚型分析. 方法取引物EnvA、EnvB和EnvC分别用于鉴定PERV的A、B和C亚型,并对86头个体进行PCR法分析. 结果在所有被检测个体中,77.9%的个体的基因组中同时有PERV的A、B两种亚型,另外22.1%的个体的基因组中则只有PERV的A或B亚型;所有个体的外周血白细胞中均未检测到PERV的C亚型. 结论 PERV在中国五指山猪和版纳微型猪近交系的外周血白细胞中只有A、B两种亚型,并且以AB的混合亚型为主.
作者：张立；步宏；李胜富；于萍；李幼平；程惊秋 刊期： 2003年第02期
目的探讨绿茶对60Coγ射线诱发小鼠辐射损伤的保护作用.方法将小鼠35只随机分为正常对照组、辐射对照组、三个饮茶试验组,饮茶试验组动物分别饮用 1.25%、2.5%、5%绿茶水浸液两周后,除正常对照动物组外,其余各组均以5Gy60Coγ射线进行一次全身照射,并继续饮茶一周后处死全部动物,测定小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力、股骨骨髓细胞DNA含量、有核细胞数及胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率.结果三个饮茶试验组小鼠血清MDA含量、骨髓嗜多染红细胞微核率显著低于辐射对照组(P<0.05), 血清SOD活力、骨髓细胞DNA含量和有核细胞数明显高于辐射对照组(P<0.05).结论绿茶对辐射损伤具有一定的防护作用.
作者：王舟；曾令福；肖元梅；吕素玲；高翔 刊期： 2003年第02期
目的探讨十二指肠胃反流(DGR)的症状与胃内胆红素含量的相关性.方法采用胃内胆红素检测仪Bilitec 2000,监测18例伴有烧心、上腹痛、恶心、呕吐4项症状中的一项或一项以上的功能性消化不良患者胃内24 h胆红素,观察患者症状与胃内胆红素之间的关系.结果 DGR症状出现的时间与Bilitec 2000监测到的胃内胆红素高峰时间十分吻合,且症状的程度与反流的程度具有良好的相关性. 结论用Bilitec 2000诊断DGR,检测时间可不必长达24 h.为获得DGR的客观证据,可在患者自述症状较重时检测数小时.此检测时间的改进有利于在临床试验中提高患者依从性.
作者：古赛；唐承薇；刘纯伦 刊期： 2003年第02期
目的探讨高脂血症患者血清HDL亚类组成和相对百分含量的变化及其与血脂水平的关系. 方法采用双向电泳-免疫印迹检测法分析168例高脂血症患者血清HDL亚类组成及相对百分含量. 结果高脂血症患者血清中前β1-HDL、前β2-HDL、HDL3c、HDL3b及HDL3a含量显著增加(P均<0.01或<0.05),而HDL2a及HDL2b含量显著减少(P<0.01).高脂血症患者中男性前β1-HDL及HDL3b含量显著高于女性(P<0.01),HDL2a及HDL2b含量显著低于女性(P<0.01).正常对照者中男性前β1-HDL含量显著高于女性(P<0.05),HDL2b含量显著低于女性(P<0.05).高脂血症患者血清TG含量与前β1-HDL、前β2-HDL、HDL3b及HDL3a水平呈正相关(r=0.583、r=0.196、r=0.130及r=0.370),而与HDL2a及HDL2b水平呈负相关(r=-0.293及r=-0.456);TC含量与前β1-HDL及HDL3b水平呈正相关(r=0.348及r=0.219),而与HDL2b水平呈负相关(r=-0.276);LDL-C含量与HDL3b水平呈正相关(r=0.187);HDL-C含量与前β1-HDL及HDL3a水平呈负相关(r=-0.354及r=-0.292),而与HDL2a及HDL2b(r=0.254及r=0.256)水平呈负相关.TG/HDL-C比值与前β1-HDL、前β2-HDL、HDL3b及HDL3a水平呈正相关(r=0.593、r=0.225、r=0.123及r=0.394),而与HDL2a及HDL2b水平呈负相关(r=-0.317及r=-0.459). 结论高脂血症患者血清HDL颗粒直径呈变小趋势,提示其HDL成熟代谢过程受阻.高脂血症患者血清HDL亚类的变化趋势可能与冠心病具有密切的相关性.
作者：徐燕华；傅明德；刘秉文；徐勇霞；姚佳；张雪梅 刊期： 2003年第02期
目的了解水环境中邻苯二甲酸酯(PAEs)的迁移转化和归宿.方法以HPLC为分析手段,用UV-TiO2-H2O2光催化氧化体系研究了5种PAEs的光降解.结果 PAEs光降解的适宜条件为pH 6.0、TiO2 2.0 g/L、H2O2 2.0%;影响PAEs光催化氧化反应因素的顺序为PAEs初始试浓度>光照时间>试液pH> H2O2浓度>TiO2浓度;PAEs的光降解过程符合一级动力学方程.结论 UV -TiO2-H2O2光催化氧化体系对于PAEs有较好的降解作用.
作者：胡晓宇；张克荣；郑波；吴德生 刊期： 2003年第02期
目的研究人绒毛膜促性腺激素(hCG)对卵巢癌细胞株3AO体外生长及细胞周期的影响.方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术(FCM),观察卵巢癌细胞株3AO在加入含不同浓度hCG培养液后细胞活性和生长周期的变化.结果①浓度为0.1、1 μg/ml 的hCG可刺激3AO细胞株的生长,生长率分别增加到109%和121%;hCG浓度为10 μg/ml时对细胞的生长几乎没有影响,浓度为100 μg/ml则抑制细胞生长.② hCG可使3AO细胞株G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例增加,S期细胞变化不明显.结论 hCG在卵巢癌的发生和发展过程中有潜在的促进作用.
作者：邢艳；廖英；陈曼玲 刊期： 2003年第02期
目的了解食管癌切除行食管胃分层吻合和吻合器吻合术后的生命质量.方法用改良EORTC QLQ C-30法对切除食管癌行食管胃分层吻合术后3～6月的生命质量进行测评,并与器械吻合者比较.结果分层吻合在躯体功能,情感功能,吞咽症状,反流症状四个维度得分[中位数(中间四分位间距)]分别为70(50～100),85(58～100),0(0～0),13(0～44),器械吻合在四个维度得分分别为62(40～100),79(50～100),0(0～33),25(0～50),两种吻合方法在这四个维度方面差别有统计学意义(P<0.05),其余维度差别无统计学意义.结论分层吻合术后生命质量高于器械吻合,主要表现在身体功能和情感功能好于器械吻合,吞咽症状和反流症状低于器械吻合.
作者：付茂勇；赵雍凡；阎齐；姚玉春；解晨浩 刊期： 2003年第02期
目的从人子宫颈粘液分离纯化新的抗菌多肽. 方法用5%乙酸提取人子宫颈粘液可溶物,经电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验发现,子宫颈粘液酸溶性提取物有一条主带对大肠杆菌耐氨苄株ML-35P有强抗菌活性,命名为HCP.应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及洗脱电泳技术得到构成该主带的混合物,后应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽.经Tricine-SDS-PAGE鉴定其相对分子质量,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性.结果从子宫颈粘液酸溶性提取物中纯化出一多肽,相对分子质量约为14×103,命名为HCP-1,具有抗耐药性大肠杆菌和绿脓杆菌的活性. 结论 HCP-1可能是宫颈粘液天然免疫机制中的新的效应分子.
作者：杨华蓉；潘小玲；黄宁；吴琦；冯云；王伯瑶 刊期： 2003年第02期
四川大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：四川大学
