陈杏春
罗氏cobas e411全自动电化学发光分析仪是罗氏公司于2008年10月推出的全自动免疫分析系统,该系统是罗氏2010型电化学发光仪的升级版,按样本放置方式分盘式系统和架式系统.我科于2009年3月引进该仪器(盘式系统).罗氏cobas e411电化学发光仪具有操作方便、测定快速、结果准确等特点.笔者将在使用过程中得到的体会及常见报警分析处理介绍给同仁,以资借鉴.
作者:戴晓灵 刊期: 2010年第02期
目的 建立血浆大内皮素-1(Big ET-1)的定量ELISA法测定,并探讨其应用价值.方法 用定量ELISA法测定患者和健康者的血浆Big ET-1.结果 该法检出限为0.023 pmol/L,线性为0.05~10.0 pmol/L,平均回收率为99.1%,批内CV为3.10%,批阀CV为5.23%.39例心绞痛和33例急性心肌梗死及52例原发性高血压患者的血浆Big ET-1值分别为2.89±0.80,4.76±0.84和3.80±0.81 pmol/L.结论 该法灵敏、特异和准确,血浆BigET-1定量测定是诊断心血管疾病较好的实验指标.
作者:汪隆海;夏芳;陈启松 刊期: 2010年第02期
目的 研究气压管道物流传输系统对生化项目检测结果 的影响.方法 对普通住院病人、ICU病人进行采样,一针两管,通过气压管道物流传输系统及人工转运两种方式转送标本,随后进行生化指标的测定,并对测定结果 进行分析比较.结果 普通住院病人两种转运方式对生化项目的 影响差异无统计学意义(P>0.05),ICU重症病人部分项目(AST,TBi,TP,ALB,K+,PHOS)差异有统计学意义(P<0.05).结论 气压管道物流传输系统对普通住院病人生化项目基本没有影响,对lCU人群应慎重.
作者:王建新;王跃国;沈荣春;顾佳佳;王惠民 刊期: 2010年第02期
目的 研究品红亚硫酸法测定甲醇的影响因素,方法 往不同体积的甲醇标准使用注中依次加入各种试剂,静置显色后,生成蓝紫色化合物,以0管调零测定其吸先度,分别研究显色时间、乙醇浓度和显色温度对甲醇测定的影响.结果 保持乙醇浓度6.0 ml/dl,显色温度30℃不变.各管吸光度随显色时间的增加而增加;保持显色时间30 min,显色温度30℃不变,各管吸光度随乙醇浓度的增加而战小;保持乙醇浓度6.0 ml/dl和显色时间30 min不变,各管吸光度随显色温度的增加而增加.结论 当乙醇浓度为6.0 ml/dl,在30℃下显色30 min可以得到好的吸光度值(0.2~0.5),为佳显色条件.
作者:蔡进 刊期: 2010年第02期
目的 将日本血吸虫原肌球蛋白基因(tropomyosin)克隆到原核表达载体pET-28a(+)裁体上,在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中表达其产物,并对其进行免疫原性分析.方法 从日本血吸虫的Expressed Sequence Tag(EST)文库中筛选出包含tropomyosin全长基因的EST,然后用高保真酶PCR扩增,构建到pET-280(+)裁体上,终在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IFTG)诱导表达.表达的his-tropomyosin融合蛋白用镍螯舍树脂蛋白纯化柱(Ni-NTA resin)亲和层析纯化,得到纯度较高的tropomyosin后,通过Western Blotting技术,用感染日本血吸虫的兔血清作为天然抗体来研究tropomyosi的免疫原性.结果 pET-28a(+)-tropomyosin重组质粒在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中成功表达,使用SDS-PAGE分析得到实际Mr约为40 000的his-tropomyosin融合蛋白,Ni-NTA resin的纯化效果很明显,获得的相对纯的目的 蛋白经过Western BIotting方法 检潮显示:tropomyosin融合蛋白能够与感染日本血吸虫6 w的兔血清有较强的免疫反应.结论 Tropomyosin能够在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中高效表达,且抗原免疫原性强,日本血吸虫感染的兔血清能够识别体外表达的tropomyosin,具有与天然的tropomyosin相同的免疫原性.
作者:贺宽耀;陈惠;崔书建;韩泽广;刘锋 刊期: 2010年第02期
目的 研究原发性胆汁性肝硬化患者外用血单个核细胞TNFSF9的表达及其临床意义.方法 以40例健康人群作为对照,采用定量逆转录PCR检测40例原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞TNFSF9的表迭水平,血清中sTNFSF9的水平,并进一步分析其与Mayo评分的相关性.结果 原发挂胆汁挂肝硬化患者外周血TNFSF9的表达在蛋白水平(1 107.00±436.12)显著高于健康对照组(122.70±62.81);TNFSF9 mRNA水平(4.96±0.39)也较健康对照组(1.04±0.22)高,且均与Mayo评分呈负相关(rs=-0.327,P=0.041;rs=-0.400,P=0.013).结论 TNFSF9可能参与了原发性胆汁性肝硬化的发病机制,是潜在的治疗靶点之一.
作者:王淇泓;周晔;胡志德;王爱华;竺蓓;邓安梅;仲人前 刊期: 2010年第02期
目的 利用SELEX技术筛选出来的核酸适配体与脂多糖的高亲和力来对脂多糖进行定量定性分析.方法 以脂多糖的两条核酸适配体与脂多糖的结合构建三明治结构,再利用磁性纳米的磁性分离技术,设计并制作一种新型的荧光纳米生物传感器,用其检测腊多糖.结果 荧光数值随着脂多糖剂量的升高而升高,两者呈线性关系,潮定线性范围为0.0312~4EU/ml,线性方程为△F=8.470 8C+6.679 6(C单位为EU/ml),相关系数为0.996 0,检出限为0.024EU/ml,且测得的荧光信号稳定,24 h后测定并无衰减.结论 在选用磁珠作为基因载体的基础上,运用核酸适配体与目标蛋白的强亲和力的三明治结构来检测内毒素的方法 具有很高的检测特异性和灵敏度.
作者:欧艺;姚朗 刊期: 2010年第02期
目的 了解引起呼吸道感染的流感嗜血杆菌主要生物型及其对常用抗生素的耐药性.方法 收集上海市第七人民医院2005年1月~2009年4月146株流感嗜血杆菌临床分离株,采用API NH细菌鉴定并进行生物学分型,头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶试验,微量稀释法进行药物敏感试验.结果 流感嗜血杆菌Ⅰ型分离率高为39.0%,其次为Ⅰ型29.5%.Ⅰ型27.4%,Ⅳ~Ⅶ型4.1%.产β-内酰胺酶菌株占49.3%,其中Ⅱ型、Ⅲ型产酶率高分别为66.7%和62.8%,Ⅰ型产酶率仅为17.5%,其它生物型中未检出.流感嗜血杆菌对氨苄西林、复方磺胺耐药率高,分别为46.6%,41.1%,对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、头孢噻肟耐药率为0.结论 呼吸道流感嗜血杆菌感染的主要生物型是Ⅰ型,菌株产β-内酰胺酶严重,含酶抑制剂抗生素、氟喹诺酮类、三代头孢菌素可作为产酶菌株的首选药物.
作者:陈碧英;马晨芸;陈佩宏;段爱华 刊期: 2010年第02期
深圳迈瑞公司生产的BC-5500型全自动五分类血细胞分析仪,它配备半导体激光散射和改良的流式分析装置,采用细胞化学染色技术对白细胞进行精确的五分类分析,具有检测结果准确、检测参数多、检测速度快、彩色触摸屏、中文操作、预稀释模式五分类等众多优点.经过两年多的使用发现了几种常见及不常见的故障,现将使用过程中出现的常见、不常见故障及仪器保养介绍给大家,供大家借鉴参考.
作者:张宝华;杨新 刊期: 2010年第02期
目的 了解阿米卡星与夹孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦联合应用对铜绿饭单胞菌(PAE)的体外抗菌活性,为临床治疗PAE感染提供佳联合药物应用的实验室依据.方法 常规培养分离细菌,应用VITEK-2全自动细菌分析仅鉴定细茸,MIC检测采用琼脂平板倍比稀释法,按CLSI法进行.结果 从临床感染的标本中分离出92株PAE,呼吸道感染标本占88.04%.92株PAE中,48.91%产金属β-内酰胺酶;27.17%产AmpC酶,18.48%美罗培南与亚胺培南MIC比值≥1 mg/L.阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦对PAE的抑菌率分别为71.74%,38.04%,70.65%.阿米卡星与头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的协同作用分别为58.70%和60.87%.结论 阿米卡星联合哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦来治疗PAE的感染具有很好的协同效果,但同时应密切结合患者病情和经验用药的药物疗效等综合情况合理应用抗菌药物.
作者:樊新;徐修礼;陈潇;刘家云;孙怡群 刊期: 2010年第02期
目的 了解不同葡萄糖代谢(糖代谢)异常状态患者血脂异常的特点,为不同糖代谢异常状态下血脂监测项目的 选择及干预治疗侧重点提供循证检验医学的证据.方法 选取254名受试者(其中男性149人,女性105人)进行OGTT试验和TC,TG,HDL-C,LDL-C,ApoA1和ApoB等血脂指标的检测.根据OGTT结果 分为正常糖耐量(NGT)、单纯空腹血糖受损(I-IFG)、单纯糖耐量受损(I-IGT)、IFG并发IGT(IFG/IGT)和糖尿病(DM)5组,比较各组血脂指标值及其异常丰,对所有糖代谢异常的各血脂指标与空腹血糖(FPG)和OGTT 2 h血糖(2 hPG)进行Spearman线性相关分析.结果 ①TG,LDL-C水平在DM组、IFG/lGT组和IGT组明显高于NGT组(P<0.01)和IFG组(P<0.05),DM组、IGT/IFG组、I-IGT组和IFG组TC水平和高TC血症检出丰相近(P>0.05),且均明显高于NGT组(P<0.05),HDL-C水平DM组明显低于NGT组(P<0.05),但各组低HDL-C血症检出率差异无统计学意义(P>0.05),各组间ApoA1和ApoB水平及其异常检出率差异无统计学意义(P>0.05).②TG与2 h PG(r=0.201,P<0.01),FPC,(r=0.119,P<0.05)存在明显的正相关,LDL-C与2 h PC,存在着明显的正相关(r=0.132,P<0.05).结论 低HDL-C血症、低ApoA1血症和高ApoB血症可能不是糖代谢异常典型的血脂异常特点之一,高TG,TC,LDL-C血症是DM和IGT,IGT/IFG血脂异常的特点,IFG血脂异常的特点是高TC血症.
作者:伍绍国;黄钰君;陈波;李志海;鲍蓓 刊期: 2010年第02期
目的 为推动国内新生儿苯丙嗣尿症(PKU)筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及,自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统,并对自建系统进行基本的分析性能进行评价.方法 参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件和相关文献,以labsystems配套检测系统作为可溯源参比系统,对自建系统的精密度、灵敏度、线性进行评价,并用临床样本进行比对试验和偏倚评估,回归相关系数大于0.975,偏倚以中国卫生部临检中心苯丙氨酸室间质评的1/4允许系统误差(靶值±30%)作为检测系统可比性的临床接受标准;通过检测1 353例正常新生儿样本,建立参考值,并对引用参考值进行确认.结果 自建检测系统分析内、分析间不精密度均小于15%;检测灵敏度为0.55 mg/dl;在1.00~15.00 mg/dl内,回归系数r=0.999 1;与参比系统比对试验回归方程为Y(自建)=1.007 8X(参比)-0.041 6,r=0.998 7,相对偏倚小于7.50%.参考值可以直接引用2.00 mg/dl作为切值判断.结论 自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的基本性能可以满足临床需要,值得推广应用.
作者:谭玉华;刘海平;张正武;卢顺舵;吴木清;彭中华;朱延彬;吴道贫 刊期: 2010年第02期
目的 确定重氮法、钒酸盐氧化法及胆红素氧化酶法检潮广东茂名地区健康人群血清胆红素的参考范围.方法 同时用前述三种方法 对1 232名健康体检人员做血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的检测,采用x±1.96s计算参考范围并做比较.结果 三种方法 中,重氮法与钒酸盐氧化法所得的TBlL和DBIL参考范围接近,重氮法:TBlL 5.4~26.2μgmol/L,DBIL 0.73~6.89 μmol/L;钒酸盐氧化法:TBIL 5.2~25.8/Jmol/L,DBIL 0.47~6.99 μmol/L.重氮法略高于钒酸盐氧化法,但两者间总体差异无统计学意义(P>0.05).胆红素氧化酶法低,TBIL 3.2~22.4μmol/L,DBIL 0.3~4.8 μmol/L,与其余两法比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 胆红素检测方法 不同参考范围有差异,应根据检测方法 建立相应的参考范围.
作者:杨文杰;柯振符;邱小琼 刊期: 2010年第02期
目的 研究抗凝血标本全血放置以及离心后保存温度和时间对血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)检测结果 的影响.方法 取 PT和APTT正常值标本180例(PT在10.5~14.0 s之间,APTT在22.0~36.0 s之间),异常值(高值)标本120例(PT>14.0s,APTT>36.0s),用SysmexCA7000型全自动血凝分析仅及其配套试剂,分别检测抗凝血标本全血室温(26℃)放置及离心后在室温及冰箱(4℃)保存条件下0,2,4,6,8,12,24 h时PT,APlvr的结果 ,并将所得到的数据用统计学方法 进行处理.结果 全血室温放置时,正常值标本PT在4 h内,APTT在2 h内的测定结果 与0 h测定结果 比较差异无统计学意义(P>0.05);异常值标本PT,APTT在2 h内的测定结果 与0 h测定结果 比较差异无统计学意义(P>0.05).离心后血浆在室温下,正常值标本PT在6 h内,APTT在4 h内的测定结果 与0 h测定结果 比较差异无统计学意义(P>0.05);异常值标本PT,APTT在4 h内的测定结果 与0 h测定结果 比较差异无统计学意义(P>0.05).离心后血浆在冰葙保存条件下,正常值及异常值标本PT,APTT在6 h内的测定结果 与0 h测定结果 比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 凝血标本采集后,如果不能即刻测定,好离心后置于冰箱保存,并保证在6h内完成测定;如果不离心室温放置,应在2 h内完成测定.
作者:李济凯;吴建平;徐根云 刊期: 2010年第02期
目的 了解一种银离子凝胶抑菌剂的抑菌效果及其主要抑菌成分银离子的含量稳定性.方法 采用裁体法抑菌试验和加速稳定性试验现察.结果 银离子凝胶抑菌剂作用5min,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的平均抑菌率均可达到90%以上.该银离子凝肢经37℃恒温箱密封避光保存3个月,银离子的含量由572 μg/g下降为540μg/g,下降5.59%.结论 银离子凝胶抑菌剂对细菌繁殖体和真菌有较强抑菌作用,银离子稳定性好.
作者:董小峰;石德美;张志成 刊期: 2010年第02期
目的 了解肺炎链球菌的临床分布及耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.E-test法检测分离株对青霉素及头孢由松的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MIC).结果 2009年共收集到肺炎链球菌118株,主要分离自呼吸道标本,其次为血液及脑眷液.呼吸道感染和血流感染的青霉素不敏感肺炎链球茼(PNSSP)为30.1%(34/113);4株脑脊液分离菌株均为青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP).肺炎链球菌对克林霉素及红霉素高度耐药,敏感性不足10%,且儿童分离株敏感性明显低于成人(P<0.05);所有茸株对莫西沙星及左氧氟沙星敏感性良好,均在90%以上,未发现耐万古霉素茸株.结论 肺炎链球菌对红霉素和克林霉素耐药性相当高,尤其是儿童分离菌株;呼吸道PNSSP也较高,达30%左右,临床应结合药敏试验结果 合理选择抗菌药物.
作者:朱旭慧;孙自镛;李丽;张蓓;陈中举;田磊;王斌;朱琴 刊期: 2010年第02期
目的 探讨肺炎患儿外用血中免疫球蛋白和T细胞亚群的变化.方法 采用流式细胞术对50例呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿及40例正常儿童外周血T细胞亚群进行检测,采用免疫比浊法对免疫球蛋白进行检测.结果 肺炎组与对照组的IgG,IgM,IgA组同比较差异均有统计学显著性意义(P<0.05).RSV肺炎组与对照组外周血T细胞亚群CD8差异无统计学显著性意义(P>0.05).CD4,CD4/CD8比值RSV肺炎组高于对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.05).结论 RSV肺炎志儿存在比较明显的体液免疫功能和细胞免疫功能紊乱,提示这两者在RSV感染所致的肺炎的发病机制上有一定的临床意义,建议在治疗中可采用免疫干预措施纠正机体存在的免疫失衡,以达到预防RSV肺炎患儿复喘善至发展成为哮喘疾病.
作者:王飞;周新;宋贵波;丁锋;王春芳 刊期: 2010年第02期
目的 通过荧光偏振免疫法(FPIA)对肝素钠和EDTA-K2抗凝血标本环孢素A(CSA)谷浓度测定结果 的比较,了解两种抗凝标本检测结果 的差异,以便更加合理的选择CSA浓度检测血液标本抗凝剂.方法 分别同时采集60例肾移植术后患者肝素钠抗凝血和EDTA-K:抗凝血各一份,采用荧光偏振免疫法(FPIA)对各样本进行检测,井对其结果 作对比分析.结果 肝素钠抗凝血与EDTA-K:抗凝血各60份标本CSA检测结果 比较差异有统计学意义(t=5.407,P<0.01),将检测结果 分为三个不同的浓度段作对比分析,结果 显示,当CSA浓度在45~150 ng/ml和151~250 ng/ml时差异有统计擘意义(t=7.179,t=4.812,P<0.01);而当浓度在251~435 ng/ml时差异无统计学意义(t=0.225,P>0.05).结论 肝素钠抗凝血与EDTA-K:抗凝血检测结果 总体比较差异有统计学意义,当CSA浓度<250 ng/ml时,EDTA-K2抗凝血检测结果 明显低于肝素钠抗凝血,但当CSA浓度在251~435 ng/ml时,二者检测结果 基本一致.
作者:杨万明;石艳;孙圣明 刊期: 2010年第02期
粪便常规检查对于肠道疾病和寄生虫病有很大的诊断意义,目前仍是我国绝大多数医院住院患者初诊必须检查的三大常规项目之一.粪便常规检查主要包括粪便的外观检查和显微镜检查,外观检查主要包括粪便的颜色、性状检查,显微镜检查主要包括粪便的红白细胞及寄生虫检查.
作者:包广杰;兰忠诚 刊期: 2010年第02期
慢性HBV感染者低浓度HBsAg持续存在已引起临床实验室及分子生物学专家的重视和关注,该文就低浓度HB-sAg人群的临床特点、分子生物学及流行病学新研究进展进行综述.
作者:成军;孙长贵;陈瑜 刊期: 2010年第02期