学术投稿

自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的应用评价

谭玉华;刘海平;张正武;卢顺舵;吴木清;彭中华;朱延彬;吴道贫

关键词:苯丙氨酸, 荧光, 检测系统, 性能评价
摘要:目的 为推动国内新生儿苯丙嗣尿症(PKU)筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及,自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统,并对自建系统进行基本的分析性能进行评价.方法 参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件和相关文献,以labsystems配套检测系统作为可溯源参比系统,对自建系统的精密度、灵敏度、线性进行评价,并用临床样本进行比对试验和偏倚评估,回归相关系数大于0.975,偏倚以中国卫生部临检中心苯丙氨酸室间质评的1/4允许系统误差(靶值±30%)作为检测系统可比性的临床接受标准;通过检测1 353例正常新生儿样本,建立参考值,并对引用参考值进行确认.结果 自建检测系统分析内、分析间不精密度均小于15%;检测灵敏度为0.55 mg/dl;在1.00~15.00 mg/dl内,回归系数r=0.999 1;与参比系统比对试验回归方程为Y(自建)=1.007 8X(参比)-0.041 6,r=0.998 7,相对偏倚小于7.50%.参考值可以直接引用2.00 mg/dl作为切值判断.结论 自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的基本性能可以满足临床需要,值得推广应用.
现代检验医学杂志相关文献
  • 甲亢患者血清NT-proBNP水平的测定及与FT3,FT4的相关性研究

    目的 测定甲状腺机能亢进症(以下简称甲亢)患者和正常对照个体的血浆N端脑钠肤激素原(NT-proBNP)水平,探讨NT-proBNP在甲亢患者中的变化.方法 门诊和住院的30例甲亢患者作为甲亢组,另选取31例健康体检者作为正常对照组.测定受检者血清游离T3(FT3)、游离T4(FT4)及NT-proBNP水平.结果 甲亢组和正常对照组NT-proBNP水平分别为121.52 pg/ml(21.05~909pg/ml),44.43 pg/ml(16.39~77.47 pg/ml),甲亢组明显高于正常对照组,两组比较差异有统计学意义(t=6.643,P<0.01),线性相关分析示甲亢组中NT-proBNP与Fr3,FT4有正相关性(r=0.479,P=0.002;r=0.642,P=0.000).结论 血清NT-proBNP水平显著受甲状腺激素(TH)影响,其测定对甲亢辅助诊断和疗效现察具有一定的临床价值.

    作者:赵雅;兰雅娴;王禹;田英 刊期: 2010年第02期

  • TGF-β1,VEGF抗体等与2型糖尿病肾病患者并发高血压肾间质纤维化指标变化的相关性研究

    目的 探讨转化生长因子(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)抗体、肿瘤坏死因子(TNF-α)、透明质酸(HA)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅱ型前胶原(PCⅡ)在2型糖尿病肾病患者并发高血压肾间质纤维化的发病机理及病程进展中表达的相关性.方法 选择经诊断为2型糖尿病肾病并发高血压患者146例;同时选择40例健康正常人作对照组.应用酶联免疫分析法(ELISA)时TGF-β1,VEGF抗体,TNF-α进行检测,用化学发光分析法对HA,FN,LN,CⅣ,PCⅡ进行检测.结果 2型糖尿病肾病并发高血压肾间质纤雏化患者的TGF-β1,VEGF,VEGF抗体,TNF-α,FN,LN,CⅣ,PCⅡ表达显著上调(P<0.01),校正常对照组差异有统计学显著性意义(P<0.01),且与病情的进展呈正相关;而HA表达明显下调,较正常对照组差异有统计学显著性意义(P<0.01),且与病情的进程呈负相关.结论 生长因子(PEDF)是有效的血管生成抑制剂,对保持正常组织透明无血管的状态有重要作用,TGF-β1是促进纤维化的重要细胞因子,调节肌成纤雏细胞分化和胶原合成,在肾纤维化发生发展中起着重要的作用.而VEGF是血管和淋巴内皮细胞的生长和分化及正常争异常血管新生的重要的调节因子,在生理和病理性血管新生中起重要作用.三者同时表达异常,可能提示肾间质纤维化患者免疫病理机理中的细胞活化模式,对肾间质纤维化惠者的免疫机制和指导治疗有指导意义.

    作者:孙凯;陈永生 刊期: 2010年第02期

  • RNA干扰技术及其在乳腺癌研究中的应用

    RNA干扰(RNA interference,RNAi)也称转录后的基因沉默(post-transcriptional-gene silencillg,PTGS),是指将外源性或内源性双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)导人细胞后引起与该段RNA同源的mRNA产生特异性降解,其相应的基因受到抑制.它是一种强有效的基因沉默工具.

    作者:王泽筠;徐成伟 刊期: 2010年第02期

  • 尿红细胞形态分析误差控制二种方法探讨

    普通光镜观察尿红细胞形态对于区别肾小球疾病和非肾小球疾病具有重要价值,已有较多报道[1~4],其方法简便易行、不需特殊设备,但需要有经验的技师,仍有一定的误差.

    作者:李刚 刊期: 2010年第02期

  • 脑脊液Cystatin C在判断脑实质损伤中的价值探讨

    目的 探讨脑脊液胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CSF-Cystatin C)在判断脑实质损伤中的临床价值,方法 收集脑膜炎(n=34)、脑炎(n=29)、脑膜脑炎(n=16)、颅内肿瘤(n=8)、癫痫(n=6)及正常对照组(n=21)脑眷液并分析其Cysmtin C水平,并评价CSF-Cystatin C在判断脑实质损伤中的价值.结果 ①脑炎、脑膜脑炎、颅内肿瘤及癫痫CSF-Cystatin C水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);且均较脑膜炙及正常对照组显著降低(P<0.05),脑膜炎与正常对照组间对比差异无统计学意义(P>0.05).②脑实质受累组CSF-CystatinC水平较脑实质未受累组低,组间比较差异有统计学意义(P=0.000<0.01).③ROC曲线显示曲线下面积(AUC)为0.85,AUC's SE为0.0,4,Cut-off值为4.50 mg/L时其灵敏度(sensitivity)为0.78,特异度(specificity)为0.84.结论 CSF-Cystatin C可以作为脑实质受累检出的生化指标.脑脊液CystatinC低于4.50mg/L时,其对脑实质受累的检出有较好的临床一致性.

    作者:王家驷;舒仁明;王廷杰;周培健 刊期: 2010年第02期

  • 非浓缩尿蛋白电泳在高血压早期肾损伤诊断中的应用

    目的 探讨非浓缩尿蛋白电泳在高血压早期肾损伤诊断中的临床应用.方法 采用十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)对33例高血压患者进行尿蛋白分析.结果 尿蛋白经SDS-AGE电泳后,根据尿蛋白电泳图谱,可区分为生理性、肾小管性、肾小球性、混合性蛋白尿.对照组电泳后有3例出现单纯淡染的清蛋白条带.患者组中2例未检出,生理性蛋白尿2例,肾小管性蛋白尿20例,肾小球性蛋白尿5例,混合性蛋白尿4例.结论 SDS-AGE非浓缩尿蛋白电泳操作筒便,无须浓缩尿渡,省时,尿蛋白按分子量大小予以分离,结果 清晰,便于保存,能正确的反映尿液内各蛋白组分的含量度变化,对高血压早期肾损伤诊断有较高的临床应用价值.

    作者:张银辉;萧晓友;张允奇;曾冬梅 刊期: 2010年第02期

  • 146株流感嗜血杆菌的生物学分型及耐药性分析

    目的 了解引起呼吸道感染的流感嗜血杆菌主要生物型及其对常用抗生素的耐药性.方法 收集上海市第七人民医院2005年1月~2009年4月146株流感嗜血杆菌临床分离株,采用API NH细菌鉴定并进行生物学分型,头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶试验,微量稀释法进行药物敏感试验.结果 流感嗜血杆菌Ⅰ型分离率高为39.0%,其次为Ⅰ型29.5%.Ⅰ型27.4%,Ⅳ~Ⅶ型4.1%.产β-内酰胺酶菌株占49.3%,其中Ⅱ型、Ⅲ型产酶率高分别为66.7%和62.8%,Ⅰ型产酶率仅为17.5%,其它生物型中未检出.流感嗜血杆菌对氨苄西林、复方磺胺耐药率高,分别为46.6%,41.1%,对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、头孢噻肟耐药率为0.结论 呼吸道流感嗜血杆菌感染的主要生物型是Ⅰ型,菌株产β-内酰胺酶严重,含酶抑制剂抗生素、氟喹诺酮类、三代头孢菌素可作为产酶菌株的首选药物.

    作者:陈碧英;马晨芸;陈佩宏;段爱华 刊期: 2010年第02期

  • 肺炎链球菌的分布及耐药性分析

    目的 了解肺炎链球菌的临床分布及耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.E-test法检测分离株对青霉素及头孢由松的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MIC).结果 2009年共收集到肺炎链球菌118株,主要分离自呼吸道标本,其次为血液及脑眷液.呼吸道感染和血流感染的青霉素不敏感肺炎链球茼(PNSSP)为30.1%(34/113);4株脑脊液分离菌株均为青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP).肺炎链球菌对克林霉素及红霉素高度耐药,敏感性不足10%,且儿童分离株敏感性明显低于成人(P<0.05);所有茸株对莫西沙星及左氧氟沙星敏感性良好,均在90%以上,未发现耐万古霉素茸株.结论 肺炎链球菌对红霉素和克林霉素耐药性相当高,尤其是儿童分离菌株;呼吸道PNSSP也较高,达30%左右,临床应结合药敏试验结果 合理选择抗菌药物.

    作者:朱旭慧;孙自镛;李丽;张蓓;陈中举;田磊;王斌;朱琴 刊期: 2010年第02期

  • 呼吸道新发现病毒的研究进展

    儿童呼吸道感染是当前儿科发病率和住院率高的一种疾病,病毒是儿童呼吸道感染重要的致病原.近来新发现的人偏肺病毒,人冠状病毒NL63.HKU1和SARS-相关冠状病毒、人博卡病毒、人多瘤病毒WUPyV,KIPyV都与小儿呼吸道感染有关.该文就这些新发现的呼吸道病毒的流行病学和临床特征及实验室诊断等方面作一综述.

    作者:刘爱玲;陆学东;陈群 刊期: 2010年第02期

  • 流式细胞术分析HCMV-PP65抗原在外周血各有核细胞群上的表达及意义

    目的 研究分析人外周血有核细胞感染人类巨细胞病毒PP65抗原(Human Cytomegalovirus PP65 antigen,HCMV-PP65Ag)的阳性表达率及临床意义.方法 应用漉式细胞术(Flow Cytometry,FCM)对广州军区广州总医院2007年1月~2008年12月共256例患者的外周血有核细胞HCMV-PP65Ag阳性表达百分率进行分析,其中移植组80例,肿瘤组48例,肾功能不全组86例.其它疾病组42例;设门诊健康体检者20例为正常对照组.对HCMV检出阳性患者根据并发细菌感染与否分为两组,观察两组间临床治疗方案的选择.另对26例HCMV现症感染患者进行连续四周检测,动态现察HCMV-PP65Ag的表达与临床症状的关联.结果 256例患者共检出144例HCMV-PP65Ag阳性;HCMV-PP65Ag阳性患者中并发细菌感染与无细茼并发感染两组临床发热症状及临床用药方案问比较差异均有统计学显著性意义(均P<0.05).动态观察组监测结果 显示,持续HCMV-PP65Ag检测阳性患者,尤其是粒细胞群表达阳性时,临床多表现有发热症状及易并发细菌感染.结论 运用FCM检测人外周血有核细胞表面HCMV-PP65Ag,能快速、准确、有效地提供HCMV感染依据;而对HCMV感染的各细胞群进行分析,有利于临床了解疾病情况和制订治疗方案.

    作者:李薇;麦颖;张璇 刊期: 2010年第02期

  • Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪常见故障及排除

    日本东亚希森美康公司生产的全自动血细胞分析仪XE-2100在临床应用已久,每小时可检测150个标本,可分析血液样品的32个参数,还可分析用于研究的4个参数.它提供了4种分析模式:手动模式、末梢血模式、使用进样器装置的进样器模式和手动模式,能满足临床不同标本的检测要求.

    作者:郝婉莹;胡海清;周琳;宓庆梅;林志跃 刊期: 2010年第02期

  • 中国北方汉族人醛糖还原酶基因C(-106)T多态性与2型糖尿病并发冠心病的相关性研究

    目的 探讨中国北方地区汉族人醛糖还原酶(AR)基因C(-106)T基因多态性与2型糖尿病并发冠心病的关系.方法 用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了125例对照者、85例2型糖尿病患者(DM组)和78例糖尿病并发冠心病患者(DM+CHD组)AR C(-106)T多态性基因型和等位基因频率分布,同时检测了糖化血红蛋白(HbAlc),血糖(Glu),血脂水平.结果 三组研究对象的C(-106)T多态性基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05).CC基因型和CT+TT基因型组间HbAlc,Glu,血脂水平无明显差异,未发现AR C(-106)T与2型糖尿病并发冠心病有相关性.结论 AR C(-106)T多态性与糖尿病并发冠心病无明显关联性,不是中国北方地区汉族人糖尿病并发冠心病发病的独立危险因素.

    作者:夏良裕;张麟;金勋;鄢盛恺 刊期: 2010年第02期

  • Shewhart-cusum质控图在酶联法检测HBsAg室内质控中的应用

    目的 探讨ELISA法检测HBsAg的室内质控方法 .方法 用ELISA法检测0.5 ng/ml的HBsAg质控血清,采用Shewhart-cusum联合质控图制作质控图,结果 检测浓度为0.5 ng/ml的HBsAg质控品的s/co均值为1.879,s为0.205,告警限k为均值士1s,分剐是1.674和2.084,失控限h为均值±2.7s,分别是2.433和1.325.结论 Shewhartcusum联合质控图对于容易出现随机误差和系统误差的定性ELISA方法 较为适用,并且准确区分随机误差和系统误差有助于临床实验室采取相应的措施有针对性的进行改正.

    作者:夏勇;吴宗华;谭佩仪;林丽英 刊期: 2010年第02期

  • Elecsys 2010软盘使用故障处理方法

    我科于2004年购进Elecsys2010电化学发光全自动免疫分析仅.该机测试速度快、准确度高、重复性好、检测线性范围宽;脂血、溶血、高胆红素等均不影响测定结果,为临床标本检测甲状腺功能、性激素、肿瘤标志物等指标提供了很好的方法.

    作者:芮桥安 刊期: 2010年第02期

  • APRIL shRNA表达载体的构建与筛选

    目的 构建并筛选有效的、编码短发夹RNA(shRNA)的增殖诱导配体(APRIL)基因特异性真核表达裁体.方法 分别设计、合成4对寡核苷酸单链,经退火、连接得到APRIL-shRNA双链,定向克隆至带有H1启动子、绿色荧先蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和Neo基因的pGCsi-H1/Neo/GFP质粒裁体中,柏建4条含APRIL基因shRNA的pGCsi-H1/Neo/GFP-APRIL-shRNA真核表达裁体,转染高表达APRIL的结直肠癌细胞株SW480.G418筛选,荧光显微镜下现察转染效率,FQ-RT-PCR检测APRIL mRNA水平,Western印迹分析APRIL蛋白表达.结果 测序证实pGCsiH1/Neo/GFP-APRIL-shRNA(APRIL shRNA)构建成功,无碱基突变,4种不同shRNA质粒转染细胞后APRIL mRNA和蛋白表达差别有统计学显著性意义(P<0.01).结论 成功地构建APRIL shRNA真核表达裁体,敲低效率85%以上,可用于后续的实验研究.

    作者:丁伟峰;王峰;王惠民;孙宝兰;丛辉;孙长江;鞠少卿;王跃国 刊期: 2010年第02期

  • 慢性乙型肝炎患者HBV前C区A1896变异和BCP T1762/A1764双变异与临床相关性分析

    目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)前C区和基本棱心启动子(BCP)突变与HBV-DNA裁量之间的关系,明确检测突变的意义.方法 PCR扩增HBV-DNA前C区序列,进行PCR产物直接测序,测序HBV感染者血清中HBV前C区A1896突变及BCP T1762/A1764双突变例教.结果 31例慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA发生ntl896位核苷酸G-A点突变18例;发生nt1762住A-T 16例;发生nt1764 位G>A 18例;发生nt1762位A-T与1764位G-A双突变16例;1762位A-T1764住G-A双变异和1896住G-A变异的联合变异频率明显高于单个变异.用SPSS16.0软件分析突变与HBV-DNA载量的关系.前C区A1896变异,BCP T1762/A1764变异均与HBV-DNA戴量差异无统计学意义.结论 HBV-DNA裁量仅能反映实时病毒裁量,HBV前C区A1896变异和BCP T1762/A1764双变异在各种病毒载量感染者中存在,仅依靠血清学指标及HBV-DNA裁量来判断传染性是不够的.检测HBV-DNA前C区A1896变异和BCP T1762/A1764双变异,可辅助判断传染性及制定抗病毒治疗方案.

    作者:刘成忠;王琴;肖传宇;王建伟;谢强;侯文华 刊期: 2010年第02期

  • JCI临床实验室评审标准在检验科危急值管理中的应用

    探讨应用JCI临床实验室评审标准建立检验科危急值及危急值报告制度的管理.不同的实验室应建立各自的危急值,危急值应满足临床需求,并应涵盖各专业与生命体征密切相关的项目和数值.检验科应高度重视危急值的应用及管理.

    作者:钱净;施茜;胡大春 刊期: 2010年第02期

  • 基于适体的荧光纳米生物传感器用于内毒素的检测

    目的 利用SELEX技术筛选出来的核酸适配体与脂多糖的高亲和力来对脂多糖进行定量定性分析.方法 以脂多糖的两条核酸适配体与脂多糖的结合构建三明治结构,再利用磁性纳米的磁性分离技术,设计并制作一种新型的荧光纳米生物传感器,用其检测腊多糖.结果 荧光数值随着脂多糖剂量的升高而升高,两者呈线性关系,潮定线性范围为0.0312~4EU/ml,线性方程为△F=8.470 8C+6.679 6(C单位为EU/ml),相关系数为0.996 0,检出限为0.024EU/ml,且测得的荧光信号稳定,24 h后测定并无衰减.结论 在选用磁珠作为基因载体的基础上,运用核酸适配体与目标蛋白的强亲和力的三明治结构来检测内毒素的方法 具有很高的检测特异性和灵敏度.

    作者:欧艺;姚朗 刊期: 2010年第02期

  • 新生儿ABO溶血病血清学检测方法比较与结果分析

    目的 采用微柱凝胶技术以及经典抗人球试验进行新生儿ABO溶血病血型血清学检测,以提高早期诊断水平.方法 对1 627例新生儿进行血型血清学分析包括:母婴血型、直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验、红细胞抗体放散及测定试验、ABO血型系统以外的抗体鉴定试验.结果 1 627例病例中确诊为ABO-HDN的有163例,其中母-婴血型为O-A及O-B的多,共占97.55%.确诊为HDN血清学结果 中放散试验和游离抗体试验同时阳性多,占76.07%.诊断为HDN可疑病例血清学结果 中,直接抗人球蛋白试验阳性率多,占79.55%.在出生后3~7天内确诊ABO-HND的患儿教多,占66.26%.微柱凝胶技术以及经典抗人球试验镜下结果 完全相符.结论 红细胞抗体释放试验,直接抗人球蛋白试验和血清游离抗体试验是早期诊断ABO-HDN的有效方法 .ABO-HDN检出率与所采用的实验方法 ,采血时机有很大关系.

    作者:姜志勇;陈卓瑶;欧阳芬;周伟;陆玲埔;陈晓文;陈扬凯 刊期: 2010年第02期

  • 呼吸道合胞病毒肺炎患儿特异性免疫应答指标的测定

    目的 探讨肺炎患儿外用血中免疫球蛋白和T细胞亚群的变化.方法 采用流式细胞术对50例呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿及40例正常儿童外周血T细胞亚群进行检测,采用免疫比浊法对免疫球蛋白进行检测.结果 肺炎组与对照组的IgG,IgM,IgA组同比较差异均有统计学显著性意义(P<0.05).RSV肺炎组与对照组外周血T细胞亚群CD8差异无统计学显著性意义(P>0.05).CD4,CD4/CD8比值RSV肺炎组高于对照组,差异有统计学显著性意义(P<0.05).结论 RSV肺炎志儿存在比较明显的体液免疫功能和细胞免疫功能紊乱,提示这两者在RSV感染所致的肺炎的发病机制上有一定的临床意义,建议在治疗中可采用免疫干预措施纠正机体存在的免疫失衡,以达到预防RSV肺炎患儿复喘善至发展成为哮喘疾病.

    作者:王飞;周新;宋贵波;丁锋;王春芳 刊期: 2010年第02期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院