张建明;周杨杨;程建平;金跃
目的 采用自行设计的颈环结构引物,建立外周血检测microRNA-34a(miR-34a)的检测方法,并初步应用于类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood monocytes,PBMCs)样品的检测.方法 用TRIzol提取外周血单个核细胞的总RNA,以颈环结构的RT引物逆转录出相应的cDNA,然后以miR-34a的PCR引物进行PCR检测,电泳观察结果.结果 建立的颈环RT-PCR能正确检测miR-34a.在RA患者外周血中检测到miR-34a的表达,其中初发者检出率较高(2/6),复发者检出率为(1/9);而健康志愿者外周血和治疗好转者未见表达.结论 成功建立检测miR-34a的方法,miR-34a检测可能对RA的诊断有一定意义,但尚需进一步深入研究.
作者:陈晓旦;刘秀雯;吴琳;成静;阴晴;李晶;吴忠;钱晖;许文荣;邵启祥 刊期: 2010年第01期
目的 研究血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ) 及其比值(PGⅠ/PGⅡ) 对老年人胃癌诊断的价值.方法 采用免疫增强比浊法检测48例老年胃癌患者和34例正常老年人血清胃蛋白酶原(PGⅠ,PGⅡ)含量并计算其比值,采用软件SPSS13.0行两独立样本t检验、各指标对患病诊断价值的非条件向前逐步选择自变量的Logistic回归分析以及研究对象的特征ROC曲线统计分析.结果 ①老年胃癌组血清PGⅠ水平及PGⅠ/PGⅡ分别为35.10±31.34 ng/ml,1.91±1.83,较正常对照组明显降低(P<0.01,P<0.05),两组间血清PGⅡ水平没有显著性差异(P>0.05);②非条件向前逐步选择自变量的Logistic回归分析显示PGⅠ进入回归方程,其降低对老年人胃癌诊断价值较高,方程分类能力为62.2%.③根据研究对象特征ROC曲线,PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ诊断老年人胃癌的佳界值分别为28.00 ng/ml(敏感度58.33%,特异度76.47%)和1.28(敏感度47.92%,特异度79.41%).结论 老年人胃黏膜癌变与胃蛋白酶原的分泌多少密切相关,血清PGⅠ水平及PGⅠ/PGⅡ低下可以作为老年高危人群的血清学筛查指标,对胃癌的诊断具有高度特异性.
作者:赵枰;张秀琳;吴俊渊;许利华;孙峰 刊期: 2010年第01期
目的 探讨新型肿瘤标志物AFP-IgM免疫复合物和甲胎蛋白(AFP)对肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)诊断的互补作用.方法 用酶联免疫吸附法与电化学发光法同步检测113名正常人、85例HCC患者、23例肝硬化和63例肝炎患者血清AFP-IgM与AFP含量.应用ROC曲线确立AFP-IgM和AFP的佳切割值分别为300 AU/ml和20 μg/L作为有诊断学意义的临界值.在此切割值下,对AFP诊断为阴性的患者血清进行AFP-IgM检测以及对AFP-IgM诊断为阴性的患者血清进行AFP检测,探讨两种诊断方法对HCC诊断的互补作用.结果 在AFP诊断为阴性的HCC患者中AFP-IgM诊断的敏感度为68.0%,特异度为83.6%,有效率为81.6%;在AFP-IgM诊断阴性的HCC患者中AFP诊断的敏感度为74.2%,特异度为91.7%,有效率为88.8%.结论 AFP与AFP-IgM联合检测将提高对HCC诊断的效率,AFP和AFP-IgM在HCC的诊断中具有较好的互补性.
作者:徐斌;蒋敬庭;吴昌平 刊期: 2010年第01期
目的 探讨浆细胞膜糖蛋白(PC-1)基因4号外显子K121Q多态性及血管紧张素转换酶(ACE)基因与2型糖尿病肾病的相关性分析,寻找与糖尿病发病相关的致病基因.方法 用多聚酶链反应(PCR)结合限制性酶切技术检测青岛地区50例2型糖尿病患者和48例正常人的PC-1基因和ACE基因的多态性分布情况.结果 正常对照组中PC-1基因KK基因型38例(79.2%),KQ基因型10例(20.8%),QQ基因型0例(0.00%),K,Q等位基因频率分别为89.6%和10.4%;糖尿病患者中KK基因型41例(82%),KQ基因型9例(18%),QQ基因型0例(0.00%),K,Q等位基因频率分别为91%和9%,2组人群的基因型和等位基因频率差异无统计学显著性意义(P>0.05).正常对照组、糖尿病组、糖尿病肾病组之间ACE基因型构成、等位基因频率以及DD型与非DD型构成均无显著性差异.但ACE基因和PC-1基因对糖尿病肾病的发展进程存在协同作用.结论 PC-1基因4号外显子K121Q多态性与2型糖尿病及2型糖尿病肾病无明显相关性,QQ基因型不是2型糖尿病及2型糖尿病肾病发病的危险因子;ACE基因DI多态性与2型糖尿病及糖尿病肾病无明显相关性,DD基因型不是2型糖尿病及糖尿病肾病发病的危险因子.
作者:兰翠霞 刊期: 2010年第01期
目的 分析慢性乙肝患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平低于80U/L时,患者体内HBV病毒的复制情况,探讨该类患者有无必要进行抗病毒治疗.方法 选取179例慢性乙肝患者,分别测定ALT,HBV病毒载量,HBeAg,并按ALT水平分为三组:Ⅰ组ALT≥80U/L,Ⅱ组40U/L<ALT<80U/L,Ⅲ组ALT≤40U/L.结果 ①ALT≥40U/L的共130例(72.6%),其中≥80U/L的标本53例(29.6%).②Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组中,HBV-DNA载量均有阳性出现,分别为16.8%(30/179),10%(18/179),1.7%(3/179),说明各组均有患者处于病毒复制阶段.Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组中,均有HBeAg阴性出现,分别为17.3%(31/179),35.2%(63/179),25.7%(46/179).③随着ALT水平增高,HBV-DNA载量数值增大,病毒复制处于高水平的标本增多.结论 慢性乙肝患者ALT水平80U/L时,尤其是HBeAg阴性的患者,仍可能存在病毒复制.在决定抗病毒治疗前应对此类患者给予关注.
作者:魏长林;许立丽;刘倩;肖路延 刊期: 2010年第01期
目的 对检测出的17份肠出血性大肠埃希菌O157:H7阳性菌株进行毒力基因分析.方法 收集江苏省建湖地区2008年5月~9月监测出的17株肠出血性大肠埃希菌O157:H7阳性菌株,利用单一和多重PCR法检测不同来源菌株O157抗原编码(rfbE)、H7鞭毛抗原编码(fliC)、志贺样毒素(stx1和stx2)、溶血素(hly)和黏附抹平因子(eaeA).结果 通过血清学方法确定的17株肠出血性大肠埃希菌O157:H7阳性菌株,再通过PCR法检测,其中15株大肠埃希菌rfbE和fliC基因检测为阳性,确认为EHEC O157:H7,其中9株菌株扩增出全部毒力基因,5株菌株扩增出除stx1外其它全部毒力基因,1株仅检出stx2,hly毒力基因;2株大肠埃希菌rfbE基因检测阳性、fliC基因检测为阴性,确认为O157:H7-大肠埃希菌,无毒力基因检出.结论 该地区存在O157:H7大肠埃希菌强毒株污染,从流行病学角度看具潜在的流行性危险,当地疾控部门应加强O157:H7的综合监测.
作者:朱根忠;吴芹 刊期: 2010年第01期
目的 了解急性淋巴细胞白血病患者治疗中bcr/abl融合基因的情况, 探讨检测bcr-abl融合基因的临床意义.方法 应用反转录-巢式聚合酶链反应(nest-PCR)检测52例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓标本bcr-abl融合基因.结果 52例ALL 患者bcr/abl融合基因阳性18例,其中bcr-abl融合基因阳性者7例缓解,CR率为38.9%;阴性者27例缓解,CR率为79.4%.对34例缓解患者进行短期随访,共有13例复发.7例诊断时bcr/abl(+)的缓解期患者,证实仍有6例存在bcr/abl残余克隆.此6例CR期有MRD存在的患者在随访时间内全部复发.而27例缓解期不存在MRD的患者有7例复发.MRD阴性者复发率为25.9%,MRD阳性者复发率为100%,复发率差异有统计学意义(P<0.05).结论 急性淋巴细胞白血病患者治疗过程中检测bcr-abl融合基因有助于ALL病情观察;对于缓解期患者MRD的检测,增加了预后评估价值.
作者:吴兆勇;周君纯;郑丽;刘家华;龙亚银 刊期: 2010年第01期
目的 调查分析该站连续3年无偿献血者血型鉴定经过初检、复检和确认后的准确率,为东莞地区实现电子交叉配血提供必要数据支持.方法 收集2006~2008年186 069人次无偿献血者的血型检测结果,分析ABO/RhD血型经过初检、复检和确认后发生血型错误的概率和非技术因素导致错误的频率,比较重复献血者和初次献血者血型鉴定的错误率,文献调查血型初检发生错误的频率范围.结果 ABO血型鉴定复检后错误率(0.009%)明显低于初检的错误发生率(0.08%)(P<0.05),确认试验后发生错误率为0,且明显低于初检和复检(P<0.05).重复献血者血型鉴定错误率明显低于初次献血者(P<0.05).文献调查ABO血型初检发生错误的频率范围为0.04%~1.16%.结论 血型鉴定经过初检、复检和确认后发生错误的概率为0,重复献血者血型鉴定准确率高于初次献血者,满足电子配血对献血者血型鉴定准确率100%的要求,该地区具备开展电子配血的首要条件.
作者:何子毅;王德文;叶柱江;钟炽辉;唐斯;邹文涛;李慧敏;刘赴平 刊期: 2010年第01期
目的 探讨发热门诊甲型流感患病人群分布的特点.方法 对2009年11月1日~10日空军总医院发热门诊共1 084例发热患者,使用甲型流感病毒检测试剂盒(胶体金法)检测患者鼻黏膜分泌物,进行甲型流感初筛,对患病人群的性别、年龄、感染率等进行统计学分析.结果 1 084例就诊患者中292例甲流筛查阳性,阳性率为26.9%.男性甲流阳性率为28.2%,女性为25.6%,男、女甲流患病率差异无统计学显著性意义(P>0.05);不同年龄组间进行R×C表资料的χ2检验:各年龄组在总体上差异有统计学显著性意义(P<0.05);0~15岁组感染人数占总感染数的44.4%,为感染率高组;其他各年龄组感染率分别为:16~20岁,32.8%;21~30岁,20.8%;≥31岁,12.0%.结论 甲流感染无性别差异;感染人群趋向于低龄人群,感染率随年龄增高呈逐渐下降趋势.提醒人们要对青少年儿童实施加倍的防护,以杜绝群体感染.
作者:安映红;马红雨;罗丹;张晓燕;李凤芝 刊期: 2010年第01期
目的 研究不同病因产生的白细胞性胸腔积液中腺苷脱氨酶(ADA)活性值的差异,及其与传统的常规生化学指标之间的相互关系.方法 分析100例白细胞性胸腔积液中的ADA活性值,其中包括结核性40例、恶性肿瘤性40例、漏出性20例.结果 以40 U/L 作为诊断结核的阳性界限值,其特异度为98.4%,敏感度为97.0%;ADA活性值与白细胞总数、淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、常规生化指标含量无关.恶性胸腔积液的ADA活性值与漏出性胸腔积液比较无显著性差异.结论 ADA检测对结核性胸腔积液具有相当高的特异度(98.4%),敏感度(97.0%).常规生化指标与ADA活性值无明显相关性.
作者:周铁成;岳乔红;杨小云;秦庆;张莹;童开;袁亚娟;郝晓柯 刊期: 2010年第01期
目的 比较微粒子酶联免疫分析法(MEIA)与化学发光微粒子免疫法(CMIA)检测甲型肝炎病毒(HAV)抗体IgM.方法 对中日友好医院349份门诊或体检患者血清(包括10份含干扰物质的血清),同时用MEIA和CMIA进行甲肝病毒抗体IgM检测,结果进行卡方检验统计.结果 MEIA和CMIA检测的349份标本,两者之间阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为100%,一致性高,统计学上无差异.同时干扰实验显示:RF因子、高血脂、重度溶血、黄疸及急性乙肝感染(HBc-IgM抗体阳性)对甲型肝炎病毒抗体IgM检测无明显影响.结论 MEIA法检测HAV抗体IgM与已获认可批准上市的CMIA法具有临床等效性,可以用于HAV抗体IgM的检测,为临床甲型肝炎感染提供诊断依据.
作者:金燕萍;贾莉;部小霞;石玉惠;王杰英;鄢盛恺 刊期: 2010年第01期
目的 探讨尿沉渣显微镜红细胞及白细胞定量计数与尿液细胞实际浓度之间的关系.方法 收集患者尿液干化学检查细胞阳性标本63例,RCF400 g,离心5 min,吸取上清液,余0.2 ml尿沉渣,分别对不离心尿液、离心后尿液上清液及尿沉渣进行显微镜细胞定量计数.结果 离心后尿沉渣细胞计数结果与不离心尿液细胞计数结果有较大差异;39例含有红细胞的尿液离心后尿沉渣中检出红细胞数仅为未离心尿液红细胞数的65.7%;24例含有白细胞的尿液离心后尿沉渣中检出白细胞数为未离心尿液白细胞数的70.3%.;上清液中红、白细胞残留率分别为8.02%和8.6%;尿沉渣及上清液细胞计数之和小于未离心尿液细胞数.结论 传统尿沉渣显微镜细胞定量计数方法,由于存在诸多影响因素,即使进行标准化的操作,方法规范,条件固定,也很难获得准确结果,不适于作为尿液有形成分细胞定量的检查方法.
作者:岳秀玲;王平;吴静;王苏平;刘亚楠;康熙雄 刊期: 2010年第01期
目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选鼻咽癌(NPC)患者血清中的标志蛋白.方法 用Ciphergen Biosystem公司生产的PBSⅡ/C型蛋白质指纹图谱仪和GoldChip(金芯片)蛋白芯片检测98例鼻咽癌患者和30例正常人血清的蛋白指纹图谱,采用Biomaker Wizard 3.1软件分析两组的蛋白表达情况筛选差异表达蛋白.结果 两组均检出较多蛋白峰,并且有表达明显的蛋白峰(P<0.01),在鼻咽癌患者中,低表达的有1个(即m/z为5 026Da),高表达的有4个(即m/z为5 934 Da,5 352 Da,6 655 Da,6 675 Da).结论 用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术筛选NPC患者血清中特异性蛋白标志物对鼻咽癌的早期诊断具有较大价值.
作者:汪碧琼;陶华林;唐明霞 刊期: 2010年第01期
目的 探讨糖尿病并发症患者血清腺苷脱氨酶活性的变化以及与糖化血红蛋白的相关性.方法 正常对照组45例,糖尿病(DM)组40例,DM并发症组43例,均清晨空腹抽取静脉血分别测定血清葡萄糖(FBG)、腺苷脱氨酶(ADA) 、糖化血红蛋白(HbA1c)水平.结果 ①DM并发症组FBG,ADA,HbA1c水平与对照组、DM组比较均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);②DM组FBG,HbA1c水平与对照组比较均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01),而ADA活性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);③DM并发症组FBG与HbA1c水平有明显正相关关系(r=0.713 5,P<0.01),ADA与HbA1c也有明显正相关关系(r=0.547 0,P<0.01);④DM组FBG与HbA1c有明显相关关系(r=0.732 3 ,P<0.01),而ADA与HbA1c无明显相关关系(r=0.247 8,P>0.05).结论 血清ADA活性测定对于预测糖尿病并发症的发生、鉴别糖尿病与糖尿病并发症、衡量糖尿病并发症患者血糖控制好坏具有重要的临床意义.
作者:朱征;杨敏;黄倩 刊期: 2010年第01期
缺血性脑卒中是一种与遗传因素密切相关的多基因疾病.TOAST分型是一种侧重于脑卒中病因学的分型方法,它将缺血性脑卒中分为大动脉粥样硬化型(LAA)、小动脉闭塞型(SAA)、心源性栓塞型(CE)、其他明确病因型(SOE)及不明原因型(SUE),且各亚型的遗传易感基因有所差异.研究缺血性脑卒中易感基因多态性及其在不同亚型之间的分布差异,有助于从分子水平上认识该疾病,并且针对病因进行个体化治疗.
作者:王克迪;康熙雄 刊期: 2010年第01期
目的 探讨HIV感染者血清β2-微球蛋白的临床意义.方法 检测HIV感染者血β2-微球蛋白、CD4+T淋巴细胞计数、HIV病毒载量、尿素氮和肌酐,分析其血清β2-微球蛋白浓度变化及与病毒载量、CD4+ T淋巴细胞计数的相关性以及肾功能的变化.结果 HIV感染组血清β2-微球蛋白浓度明显高于正常对照组(P<0.05),且A,B,C三期逐渐升高(P<0.05),B,C两期患者明显高于A期(P<0.05),B期与C期比较差异无统计学显著性意义(P>0.05);AIDS组血清β2-微球蛋白浓度显著高于非AIDS组(P<0.05);死亡组显著高于未死亡组(P<0.05);24例患者接受HARRT治疗三月后血清β2-微球蛋白浓度显著降低(P<0.05).HIV感染者血β2-微球蛋白浓度与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.419,P<0.01),与病毒载量呈正相关(r=0.571,P<0.01).几乎所有的HIV感染者肾功能指标都正常.结论 HIV感染者血清β2-微球蛋白升高,可能与免疫系统被激活和淋巴细胞被破坏致机体产生了更多的β2-微球蛋白有关,可反映患者体内病毒复制情况.体内高浓度的β2-微球蛋白可能提示患者预后不佳.血清β2-微球蛋白浓度的检测是进行临床分期、病情预测的重要指标,并可评价HARRT疗效.
作者:黄菁;王清波;隋俊;虞玲 刊期: 2010年第01期
目的 探讨促血管生成素2 (Ang-2)在常见恶性肿瘤患者中的早期筛查及其临床应用.方法 诊断但尚未经治疗肺癌53例,肝癌46例,肠癌50例作为实验组,良性疾病对照组47例,正常对照组80例,分别检测其血清中Ang-2,AFP,CEA,CA199的浓度水平,Ang-2用单克隆抗体微球免疫比浊法检测,AFP,CEA,CA199用电化学发光法检测,分别计算其相应敏感度和特异度,并进行相关比较.结果 Ang-2在肺癌、肝癌、肠癌、良性疾病对照组及正常对照组中敏感度分别为47.2%(25/53),19.6%(9/46),22.0%(11/50),12.8%(6/47)和6.3%(5/80),总特异度为91.3%(116/127).Ang-2在肺癌中的敏感度较高,与疾病对照组及正常对照组比较差异有统计学显著性意义(P<0.01),Ang-2分别与CEA和CA199进行相关性分析(r=-0.114和r=-0.255),r绝对值小于0.30,与CEA诊断价值相当,可作为肺癌的独立肿瘤指标;在肝癌及肠癌中敏感度较低,与疾病对照组及正常对照组比较差异无统计学显著性意义(P>0.05),不宜单独作为恶性肿瘤早期筛查指标.肿瘤患者血清AFP,CEA,CA199全部阴性而Ang-2阳性者占7.4%,单一肿瘤指标阴性而Ang-2阳性者在8.0%~22.6% .结论 Ang-2在肺癌中敏感度较高,可作为肺癌的独立肿瘤指标,联合检测Ang-2,AFP,CEA,CA199,有助于提高常见恶性肿瘤(肺癌、肝癌、肠癌)的早期检出率.
作者:方玲;顾向明;沈庆茂;徐志萍 刊期: 2010年第01期
ABBOTT ARCHITECT i2000SR全自动免疫分析仪是美国雅培公司研制开发的大型全自动免疫分析仪,利用化学发光原理进行检测.但在使用过程中经常会遇到一些故障,现对仪器常见故障的处理方法报道如下.
作者:刘青;王厚照 刊期: 2010年第01期
目的 研究改良试剂瓶对于提高生化试剂开瓶稳定性的应用价值.方法 在全自动生化分析仪上使用改良试剂瓶对Cre,ALP,TBA,Lp(a),Na+等生化试剂进行开瓶稳定性、精密度及校准周期试验,并以普通试剂瓶设为对照组,观察测定结果的差异显著性.结果 监测期内在相同条件下使用改良试剂瓶及普通试剂瓶保存Cre,ALP,TBA,Lp(a),Na+试剂,观察实验结果:①监测期末测定结果下降的偏差(%)分别为-3.84/-24.23,-2.47/-11.99,-1.75/-25.58,4.25/-7.35,1.17/8.6;②开瓶后的有效期(d)分别为15/7,30/15,60/15,72/30,7/4;③检测结果的日间变异CV(%)分别为1.57/5.14,1.10/4.41,4.01/9.51,3.4/3.55,1.0/3.18;④检测项目的校准周期(d)分别为15/7,26/18,60/16,68/30,15/4;⑤改良试剂瓶在监测期内的测定结果与对照组有显著性差异,5组项目检测结果中除Lpa正常值水平差异无统计学意义(P>0.05)外,其余差异均有统计学显著性意义(P<0.01).结论 改良试剂瓶对于提高Cre,ALP,TBA,Lp(a),Na+等不同类型生化试剂开瓶后的稳定性、延长效期及减小室内检测结果日间变异效果显著,因此在实验室检验成本控制和检验质量控制方面具有较高的应用价值,可替代普通试剂瓶广泛应用于生化自动化分析.
作者:邓建平;朱海波;徐继勋;向环英 刊期: 2010年第01期
目的 建立广州地区1~8岁儿童血清补体C3,C4含量的参考范围.方法 应用Beckman-coulter Immage 800特种蛋白分析仪,采用免疫比浊法对968例1~8岁健康儿童血清补体C3,C4含量进行检测,分成7个年龄段对结果进行统计分析.结果 广州地区1~8岁健康儿童血清补体C3,C4含量在性别和各年龄段之间差别无统计学意义(P>0.05),总的参考范围(g/L)为C3:0.59~1.81,C4:0.19~0.22.同时与全国临床检验操作规程以及厂家提供的参考范围相比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 1~8岁儿童血清补体C3,C4旧的参考范围已不适用于当今人群,各地、各实验室应测定一批健康人的标本,统计出各自实验室的参考范围,若存在性别差异,应分别制定两性的参考范围,若存在年龄组间差异,还应进一步制定两性间各个年龄组的参考范围.
作者:姜志勇;刘云锋;关启鸿;关克涛;欧阳芬;刘海英 刊期: 2010年第01期