胡利清;肖奇志;周玉球;吴洪秋
目的 以检验报告质量为指标确定室内质量控制的分析批长度,使得既保证检验质量,又降低质控成本.方法 以不合格检验结果个数≤1为目标,采用概率计算的方法,预测不同分析性能的项目在出现不同类型误差(间断误差和持续误差)时,分别应采取的分析批长度作为推荐分析批长度,并将此与实际分析批长度做比较.结果 所选项目分析性能介于2.83~6.01 Sigma,存在间断误差时的推荐分析批长度介于942~45 737 062 445个测试数,存在持续误差时的推荐分析批长度介于480~43 907 579 947个测试数.分析性能≥3Sigma时,推荐分析批长度远远长于实际分析批;分析性能<3Sigma时,推荐分析批长度接近甚至短于实际分析批.结论 分析性能≥3Sigma的项目可根据实际情况适当延长分析批长度,降低质控成本;分析性能<3Sigma的项目需小心谨慎,必要时可根据推荐分析批长度,缩短质控时间间隔,保证检验质量.
作者:李园园;李萍;吴建平;陈晓玲 刊期: 2012年第01期
目的 研究紫外线照射对骨髓间充质干细胞中survivin表达的影响及其意义.方法 分离并培养正常成人骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测其特异性表面标志.利用普通紫外线距离细胞20 cm分别照射2 min,5 min后,RT-PCR法检测其中survivin mRNA的表达情况,利用gel-pro analyzer软件比较未经照射、照射2 min、照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量,应用SPSS13.0软件,配对t检验方法分析结果.结果 经紫外线照射2 min组与未经照射组比较t值为2.013,P>0.05,差异无统计学意义,而经紫外线照射5 min组与未经照射组比较t值为7.225,P<0.01,差异有统计学意义,经紫外线照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量明显增高.结论 紫外线照射可以提高正常成人骨髓间充质干细胞中survivinmRNA的表达量,提示紫外线照射可能通过提高抗凋亡基因survivin的表达而延长间充质干细胞的寿命.
作者:周雅丽;白海;马丽;马得炳;张红 刊期: 2012年第01期
目的 探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品.空白样品采用配套的稀释液,系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得.样品制备后用Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度,以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度.结果 NT-proBNP的空白限为2.53 pg/ml,检出限为7.75 pg/ml,10% CV时的功能灵敏度为8.82 pg/ml.结论 建立了Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息.
作者:索明环;张秀明;温冬梅;王伟佳;李飞;欧阳能良;阚丽娟;严海忠 刊期: 2012年第01期
目的 比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞(PBMC) EBV-DNA的阳性率及病毒载量.方法 采用荧光定量PCR法,对56例淋巴瘤患者(霍奇金淋巴瘤13例,非霍奇金淋巴瘤43例)血浆和PBMC EBV-DNA进行定量测定,比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异.结果 淋巴瘤患者血浆EBV-DNA阳性率(26.8%)与PBMCEBV-DNA阳性率(32.1%)之间差异无统计学意义(P>0.05);EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义(P>0.05).结论 荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA具有较好的特异性和敏感性,血浆EBV-DNA定量可以代替PBMC EBV-DNA定量作为监测EBV阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志.
作者:姜昌丽;龚军丽;李云;林明辉;王惠萱 刊期: 2012年第01期
目的 通过基因工程的方法获得风疹病毒E1蛋白在原核系统内可溶性表达,亲和纯化后,评价该重组蛋白在风疹病毒患者血清学诊断方面的可行性.方法 将PCR扩增得到的风疹病毒E1核酸序列克隆至原核表达载体pET-NusA中,利用原核系统表达融合蛋白NusA-E1,用Western Blot和ELISA方法对其抗原性进行初步评价.结果 NusA-E1蛋白以可溶性形式进行表达,亲和纯化后可以获得高纯度的重组蛋白.Western Blot和ELISA方法结果均证明该重组蛋白具有较强的抗原活性.结论 融合蛋白NusA-E1在大肠埃希菌中以可溶性形式表达,高纯度的重组融合蛋白NusA-E1抗原性强,临床上可以作为血清学诊断抗原,检测风疹病毒抗体.
作者:孙卫国;李邦印;王卫;张灵霞;李国利;程小星 刊期: 2012年第01期
血气分析仪是医院抢救、监护和治疗危重病人的重要临床检验设备[1].该类仪器含有气路、液路和电路,是计算机技术、微电子技术及电化学整合设计的高科技产品.ABL-5型全自动血气分析仪,由丹麦雷杜公司生产的,具有准确度及精密度高,检测快速,用血量少,操作简便,结果稳定可靠等优点,但在实际应用中也经常会出现一些常见故障及报警,只要认真解读,大多可以自行解决.现将在日常使用过程中,所发生的常见故障及处理方法总结如下,供同行参考.
作者:钟伟明;黄家亮;韦干芬 刊期: 2012年第01期
目的 调查分析盐城市盐都区儿童部分疫苗接种后的免疫效果.方法 采用微量血间接ELISA法对盐都区9乡镇6 648名1~16周岁具有相关疫苗接种史的儿童做麻疹、乙型脑炎及A群脑膜炎、脊髓灰质炎或白喉、破伤风IgG抗体的检测,并对结果进行分析.结果 受检儿童麻疹、乙型脑炎、A群脑膜炎、脊髓灰质炎、白喉、破伤风IgG抗体阳性率分别为74.31%,89.58%,64.67%,75.53%,93.01%和86.42%;不同性别儿童之间抗体阳性率差异无统计学意义(x2=0.261~2.599,P>0.05);各年龄段白喉和乙型脑炎抗体均处于较高水平,多个年龄组麻疹、脊髓灰质炎和A群脑膜炎抗体阳性率相对较低,破伤风抗体水平7岁以后、A群脑膜炎8岁以后有随年龄增长而下降的趋势.结论 盐都区健康儿童A群脑膜炎、麻疹、脊髓灰质炎抗体阳性率相对较低,需提高疫苗冷链管理和接种质量,并正常开展免疫监测,对未检出保护性抗体的儿童进行相关疫苗的加强接种.
作者:胥加耕;王荣堂;梅志锋 刊期: 2012年第01期
目的 探讨肥胖孕妇血清BMP-7(人骨成形蛋白7)和胰岛素抵抗水平的变化及意义.方法 选取妊娠期肥胖孕妇22例,正常妊娠孕妇122例,测定空腹血清BMP-7、空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 妊娠期肥胖组血清BMP-7含量平均值1 619.61±633.23 ng/L,正常妊娠组血清BMP-7含量平均值1 472.05±1196.18 ng/L;妊娠期肥胖组血清BMP-7水平明显高于正常妊娠组(P<0.05);妊娠期肥胖组胰岛素抵抗指数平均值2.30±1.21,正常妊娠组胰岛素抵抗指数平均值1.80±1.41,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05);分析结果显示,空腹血清BMP-7水平与FINS呈正相关(P<0.05).结论 妊娠期肥胖组孕妇血清BMP-7水平的升高,可能参与了妊娠期糖尿病病理性胰岛素抵抗的发生.
作者:汪小娟;郝艳华;李建梅;刘莉莉;刘香萍;李小永 刊期: 2012年第01期
目的 了解糖尿病湿性坏疽细菌感染的耐药特点,使临床选择抗菌药物治疗更有针对性.方法 取糖尿病湿性坏疽分泌物进行需氧菌、真菌培养和药敏试验.结果 275例糖尿病湿性坏疽患者中,细菌培养结果阳性率为100%,共培养出358株细菌.革兰阳性(G+)菌213株,其中葡萄菌属有5种药物的耐药菌株大于50%、肠球菌属有11种药物的耐药菌株大于50%.革兰阴性(G-)菌122株,其中肠杆菌科有3种药物的耐药菌株大于50%、不动杆菌属和假单胞菌属有8种药物的耐药菌株大于50%.真菌23株,其中光滑念珠菌有3种药物的耐药菌株大于50%.结论 糖尿病湿性坏疽需氧菌感染耐药特点是G+菌感染中的肠球菌属、G-菌感染中的不动杆菌属和假单胞菌属、真菌感染中的光滑念珠菌耐药率较高.
作者:范洪;刘静;王汝哲;尹金秀 刊期: 2012年第01期
目的 探讨尿移行上皮细胞在膀胱炎和肾盂肾炎鉴别诊断中的应用价值.方法 应用普通光学显微镜对156例泌尿系感染的尿沉渣标本进行分析[取患者中段尿10 ml于无菌试管中送检,400×g离心5 min,剩余沉淀0.2 ml,混匀后吸沉淀物20μl,滴在波片上,用18 mm×18 mm盖玻片覆盖后显微镜检查,先用10×10低倍镜观察图片,后用10×40高倍镜仔细观察细胞,检查20个视野],探讨表层移行上皮细胞,中、底层移行上皮细胞对膀胱炎、肾盂肾炎的诊断与临床诊断结果进行对比分析,判断其符合情况.以临床诊断作为标准,计算尿沉渣检测结果对膀胱炎和肾盂肾炎诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度.结果 以白细胞>5/HP、红细胞>3/HP、移行上皮细胞>3/HP为阳性,对156例尿沉渣标本结果与临床诊断相比较进行分析,表层移行上皮细胞对膀胱炎的诊断(x2=2.5,P>0.05)及中、底层移行上皮细胞对肾盂肾炎的诊断(x2=0.1,P>0.05),差异无统计学意义.表层移行上皮细胞对膀胱炎的诊断灵敏度为80.0%,特异度为98.3%,阳性预测值为94.1%,阴性预测值为93.4%,准确度为93.6%,中、底层移行上皮细胞对肾盂肾炎的诊断灵敏度为78.3%,特异度为96.2%,阳性预测值为78.3%,阴性预测值为96.2%,准确度为93.6%,与临床诊断有很好的符合率.结论 尿沉渣是泌尿系感染检查的重要检测手段,尤其是移行上皮细胞对膀胱炎和肾盂肾炎鉴别诊断有非常好的应用价值.
作者:刘婧;汪建军;余艳丽;任超杰 刊期: 2012年第01期
目的 评价国产酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测ξ-珠蛋白链快速筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的性能.方法 选择珠蛋白基因型已经基于PCR技术确诊的临床血液标本265份,其中珠蛋白基因型正常93例,静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血(-α/αα)22例,东南亚缺失型(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血136例,HbH病7例和β-珠蛋白生成障碍性贫血并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血6例及HbG并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血1例,采用双盲方式分别用海泰生物技术股份有限公司(简称海泰生物)和美国United Biotech(简称美国UBI)公司生产的固相ELISA试剂盒检测ξ-珠蛋白链筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血并以基于PCR技术的诊断结果作为金标准,对这两种ELISA试剂盒筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的性能进行评估.结果 海泰生物与美国UBI生产的ELISA试剂盒均能准确地筛出(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血和HbG并发(__SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血以及正常血样,但两者既不能筛出静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血,也不能完全检出HbH病;检测(——SEA)基因总的灵敏度、特异度、准确度、阴性预测值(NPV)、阳性预测值(PPV)和诊断效率(EDF)(分别为98%,97.5%,98.9%,98%,100%和98.9%)与后者相比(分别为98.7%,98.3?%,99.2%,98.7%,100%和99.2%),差异无统计学显著性意义(P均>0.9).两者诊断(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血的效率均为100%.结论 固相ELISA法是一种高度灵敏、高度特异和非常可靠的筛查(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血的方法.海泰生物生产的(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血ELISA检测试剂盒与同类进口产品相比,具有成本低、需要样品量少的优势,非常适合于地贫高发区大人群的α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查.
作者:胡利清;肖奇志;周玉球;吴洪秋 刊期: 2012年第01期
目的 探讨富血小板血浆(PRP)血小板浓度与全血血小板浓度、红细胞比容(HCT)相关性.方法 随机收集162例门诊体检志愿者静脉血标本,以EDTA-K2,枸橼酸钠抗凝.枸橼酸钠抗凝血800 r/min(离心半径19 cm)离心5 min,分离富含血小板血浆(PRP),应用Sysmex XE-2100血液分析仪测定全血血小板浓度(X1)和HCT(X2),PRP血小板浓度(Y).以HCT 0.35为界,将数据分为正常组和低值组.结果 所得数据采用多元相关性统计分析得到回归方程Y总=1.309 51X1 +744.294 5X2-262.068(R2 =0.897 8);Y正常组=1.380 208X1 +855.884 8X2-323.374(R2=0.892 9);Y低值组=1.088 972X1 +465.228 8X2-123.101(R2=0.961 1).结论 全血血小板浓度、红细胞比容与富血小板血浆血小板浓度相关显著,由全血血小板浓度和红细胞比容可初步推算富血小板血浆血小板浓度.
作者:李祖兰;任军伟;丛玉隆;白洁;邓新立;马长生;陈兴明;杨亮程;王海立 刊期: 2012年第01期
目的 了解湖南省株洲市第一医院患者梅毒感染情况及其分布,为梅毒的全面预防工作提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对株洲市第一医院2010年1月~2011年3月门诊普通患者及术前拟输血患者共29 328例进行梅毒抗体检测,阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法确证.结果 29 328例标本中,男性阳性结果为426例,女性阳性结果为310例,总阳性率为2.51%.在各年龄组均发现有梅毒感染.其中20~40岁组阳性率高,占55.43%.在感染科室当中,外科患者阳性感染率高,其次是妇产科.结论 患者血清梅毒抗体在临床科室占一定比例的阳性率,因此对患者,尤其是术前患者进行梅毒抗体检测,可以及时阻断梅毒的传播,有效预防院内感染,并有利于医护人员的自我保护.
作者:唐满玲;顾敏;彭俊;李见红 刊期: 2012年第01期
目的 对密度梯度离心法分离脐血单个核细胞的方法进行优化,以提高该方法分离脐血单个核细胞的收率.方法 脐血40份,每份40 ml,分为常规组和优化组,每组20份.常规组脐血与NS1∶1混合稀释后,直接通过Ficoll分离液分离单个核细胞;优化组通过先将脐血洗涤一次,加入等量NS充分吹打混匀,200目筛网过滤,保持细胞悬液和Ficoll分离液1:1的体积比进行分离操作.对每份分离得到的脐血单个核细胞通过白细胞稀释液稀释后计数.结果 常规组分离后的白膜层有11份界面不清晰,同时均混有少量的红细胞.优化组分离后的白膜层有1份界面不清晰,仅有极少的红细胞混入.两种方法收集的脐血单个核细胞数比较,优化组多于常规组(P<0.01).结论 通过对密度梯度离心法的步骤进行优化,可提高脐血单个核细胞的分离效果.
作者:任思坡;吴秀娟;罗小虎;李全双;韩光宇;谭昆;拾莉;耿跃春 刊期: 2012年第01期
目的 探讨MCV及HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血(thalassemia)筛查中的诊断价值.方法 收集已作GapPCR技术及反向斑点杂交基因诊断,确诊为α单纯轻型缺失型患者96例,β单纯突变型患者74例,对照组103例,进行MCV及HbA2检测,确定两者分别在α型及β型筛查中的佳临界值(CT),并对其诊断价值作相关的统计学分析.结果 MCV在α型及β型的佳临界值分别为:≤71.9fl和≤71.55fl,HbA2的佳临界值则分别为:≤3.85%和≥5.25%;MCV在α型筛查中的诊断价值显著高于HbA2(x2=53.38,P<0.05),在β型中与HbA2相比差异无统计学意义(x2=5.663,P>0.05);MCV在两组的诊断价值差异无统计学意义(x2=0.053,P>0.05),HbA2在α型的诊断价值显著低于β型(x2=82.559,P<0.05).结论 MCV在α,β珠蛋白生成障碍性贫血筛查中诊断价值均较高;HbA2在a珠蛋白生成障碍性贫血中的诊断价值较低,在β珠蛋白生成障碍性贫血中的诊断价值较高.
作者:刘志伟;高慧;罗韬 刊期: 2012年第01期
结核病至今仍然是危害公共健康的一大难题.耐多药/广泛耐药的结核分枝杆菌(MDR-TB/XDR-TB)仍是制约控制结核病传播的重大影响因素,因此分析结核分枝杆菌对一线及二线抗结核药的耐药情况是十分必要的.传统检测方法耗时长且操作繁琐.近些年来,出现了一些快速的结核分枝杆菌耐药检测方法,该综述将介绍几种以结核分枝杆菌培养为基础的快速耐药检测.
作者:曾昭瑛;苏建荣 刊期: 2012年第01期
目的 了解耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的抗生素耐药情况,指导临床合理用药.方法 选取中国中医研究院望京医院2008~2010年期间临床和门诊患者样本的耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌分离株,通过药敏实验分析这些菌株对15种常见抗生素的耐药性.结果 从标本类型分布看,主要的是痰液标本,共110株(88%),其次是分泌物共9株(7.2%)和2株自导管(1.6%).从科室统计分析发现,ICU分离到的鲍曼不动杆菌数多,68株;其次是针灸科,分离的菌株是15株;神经外科、CCU、普通外科、心内科、内分泌科、呼吸科、创伤一科,分别分离到14,11,7,4,3,2和1株.选取的125株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、美罗培南、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢曲松和头孢他啶耐药率高达90%以上,依次为100%,99.2%,99.2%,98.4%,96.8%,96%,96%,94.4%,93.6%,92%和91.2%.其次是氨曲南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴克坦,耐药率依次是72.8%,64%和30.4%,对多黏菌素B的耐药率低,仅为0.8%.结论 该院耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌对大多数种类的抗生素均有较高的耐药性,仅对少数几种抗生素表现为敏感,临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用,防治耐药性的进一步产生和院内传播.
作者:郭洁;徐杰;王丽丽;王玉飞;苑锡铜;袁静;宋宏彬;黄留玉;张宁;陈泽良;陈永德;刘世巍 刊期: 2012年第01期
microRNA是一类长约19~25个核苷酸的非编码小分子RNA,通过与靶mRNA的3'UTR结合,抑制mRNA翻译或增加其稳定性而发挥作用.肺癌是目前全世界病死率高的癌症之一,虽然对肺癌的研究取得了一定的进展,但是5年生存率并没有得到明显改善.miRNA与肺癌的发生、发展关系密切,可能在肺癌的诊断、治疗及预后监测中发挥重要作用.
作者:姜波;王玉明;段勇 刊期: 2012年第01期
目的 研究EHD2与肿瘤的关系及其表达抑制对乳腺上皮细胞转化能力的影响.方法 取3例浸润性乳腺导管癌及其配对癌旁正常组织,通过Western Blot比对EHD2的蛋白表达水平.siRNA干扰非癌乳腺上皮细胞HBL100的EHD2蛋白表达水平,研究EHD2下调对细胞悬浮性克隆生长能力的影响.结果 EHD2在癌组织中的蛋白表达均高于正常乳腺组织(F=5.389,P<0.05);siRNA干扰EHD2表达明显降低(t=101.458,P<0.005),HBL100细胞的悬浮生长克隆数显著增加(t=88.754,P<0.000).结论 EHD2可能是新乳腺抑癌基因,它的表达缺失可能引起正常上皮细胞的恶性转化.
作者:田刚;王学涵;李盼;王洪玉;郭立莎;肖春花;应国光 刊期: 2012年第01期
目的 旨在建立一种快速及高通量的CYP2C19药物代谢酶相关基因多态性的检测方法,为个体化治疗提供用药参考.方法 抽取96例人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,且以Sanger测序法测序结果为对照,观察分析准确性.结果 运用焦磷酸测序可以成功检测CYP2C19相关基因型;单个SNP位点检测经与Sanger测序方法比较,符合率为100%.同时,通过设计焦磷酸测序引物,两个PCR产物可合并于一管中进行焦磷酸测序,与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比,能有效降低检测成本,节省检测时间.结论 该方法可准确、高通量、快速检测药物代谢酶相关基因多态性,该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值,也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测.
作者:施宏;虞闰六;马金飞;任绪义 刊期: 2012年第01期