李祖兰；任军伟；丛玉隆；白洁；邓新立；马长生；陈兴明；杨亮程；王海立
目的 探讨一种快速、简便、效果好的OPRM1基因PCR产物和测序产物纯化方法,建立稳定的DNA测序技术平台.方法 采用乙醇/醋酸钠、过柱和SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit 3种纯化方法,对50份OPRM1基因PCR产物和测序产物进行纯化效果的比较.结果 SAP-Exonuclease Ⅰ法对PCR反应产物进行纯化的回收率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为0.86±0.01,0.48±0.08,0.65±0.01(t=32.5,P＜0.001；t=86.1,P＜0.001)；BigDye Xterminator Purification Kit法对测序产物进行纯化成功率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为100％,62％和84％(x2=23.46,P＜0.001;x2 =8.70,P=0.003).结论 SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit是一种快速、简便、效果好的测序纯化方法.
作者：李少英；马晓燕；张双全；张慧敏；黎青 刊期： 2012年第01期
血气分析仪是医院抢救、监护和治疗危重病人的重要临床检验设备[1].该类仪器含有气路、液路和电路,是计算机技术、微电子技术及电化学整合设计的高科技产品.ABL-5型全自动血气分析仪,由丹麦雷杜公司生产的,具有准确度及精密度高,检测快速,用血量少,操作简便,结果稳定可靠等优点,但在实际应用中也经常会出现一些常见故障及报警,只要认真解读,大多可以自行解决.现将在日常使用过程中,所发生的常见故障及处理方法总结如下,供同行参考.
作者：钟伟明；黄家亮；韦干芬 刊期： 2012年第01期
目的 研究人结直肠癌组织中S100P,E-cadherin和Ki-67的表达情况并探讨三者表达的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测80例结直肠癌及其癌旁正常肠黏膜组织、30例良性肠病中三者的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨三者间表达的相关性.结果 ①S100P蛋白在结直肠癌组织中的表达率(57.5％)显著高于良性肠病(6.7％)及癌旁正常组织(3.8％)(x2=66.234,P＜0.01)；较之对照组,淋巴结转移组(x2=4.940,P＜0.05)及晚期(Dukes C+D期)结直肠癌组(x2=5.693,P＜0.05)S100P蛋白的表达均显著升高；随着结直肠癌分化程度的降低,S100P蛋白的表达有升高的趋势.②结直肠癌组织中E-cadherin的表达率(52.5％)较良性肠病(90.0％)及癌旁正常组织(93.8％％)明显降低(x2=41.014,P＜0.01)；E-cadherin的表达与结直肠癌的分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).③Ki-67在结直肠癌组织中的阳性指数(66.78％±9.77％)明显高于两对照组(31.40％±9.19％和7.14％±3.87％)(P＜0.0l)；淋巴结转移组和晚期(Dukes C+D期)组Ki-67阳性指数(68.49％±9.27％和69.35％±8.78％)升高,但较对照组(65.44％±l0.04％和65.74％±10.03％)差异无统计学显著性意义(P＞0.05)；Ki-67表达与其他临床病理特征无关.④三者间表达无显著相关性(P＞0.05),但不能排除在肿瘤进展过程中三者有间接的协同作用.结论 结直肠癌组织中S100P和Ki-67表达明显升高,而E-cadherin表达明显降低；S100P和E-cadherin与结直肠癌组织侵袭、转移密切相关；联合检测三者有助于判断结直肠癌的发展趋势及评估预后.
作者：许华；李胜水；张凤梅；李双标；刘岩；张霖 刊期： 2012年第01期
目的 探讨醌氧化还原酶1[ (NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]C609T基因多态性在精神分裂症迟发性运动障碍( tardive dyskinesia,TD)发病中的作用.方法 采用病例-对照研究,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测了233例精神分裂症患者(TD组55例和非TD组178例)NQOIC609T基因多态性.结果 TD组中NQO1 C609T位点CC,CT和TT基因型频率分别为45.5％,40.0％和14.5％；C和T等位基因频率分别为65.5％和34.5％.非TD组中CC,CT和TT基因型频率分别为36.0％,47.2％和16.8％;C和T等位基因频率分别为59.6％和40.4％.NQO1 C609T基因型频率和等位基因频率在TD组与非TD组之间差异无统计学意义(x2=1.61,P=0.448;x2=1.23,P=0.267).结论 NQO1基因C609T位点在中国云南汉族人群中存在多态性,其基因多态性与中国云南汉族精神分裂症的迟发性运动障碍不存在关联,该基因多态性在迟发性运动障碍发病中的作用机制还有待进一步研究.
作者：赵若莲；杨保春；龚毅；王玉明 刊期： 2012年第01期
目的 应用一种自主研发的新型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)快速药敏系统(MB FS-1型)检测MTB对利福平(RIF)和异烟肼(INH)的耐药性,并对该系统的临床应用效果进行评价.方法 采用新型药敏系统对115株MTB临床分离株进行药敏试验,异烟肼以及利福平分别设置三个浓度梯度,与BECTEC MGIT 960法对比分析药敏结果,评估该系统检测多药耐药结核( Multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的应用性价值.结果 以BECTEC MGIT 960法为参考标准,MB-FS-1型快速药敏系统检测INH的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.43％,94.88％,97.26％和88.10％,检测RIF分别为96.50％,94.83％,94.83％和96.50％.异烟肼浓度为0.2μg/ml或0.1 μg/ml,利福平浓度为1.0 μg/ml时两种药敏方法等效性高,符合率分别为93.97％和95.69％.Kappa值分别为0.867和0.913,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 该新型MTB快速药敏系统检测MTB对异烟肼和利福平的耐药性与BACTEC MGIT 960符合率高,具有快速、价廉、操作简便的优点,可作为临床检测MDR-TB的快速检测方法之一.
作者：胡香南；吴晓渊；吕小华；郭建；邓桂林；吴文娟 刊期： 2012年第01期
目的 探讨肥胖孕妇血清BMP-7(人骨成形蛋白7)和胰岛素抵抗水平的变化及意义.方法 选取妊娠期肥胖孕妇22例,正常妊娠孕妇122例,测定空腹血清BMP-7、空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 妊娠期肥胖组血清BMP-7含量平均值1 619.61±633.23 ng/L,正常妊娠组血清BMP-7含量平均值1 472.05±1196.18 ng/L;妊娠期肥胖组血清BMP-7水平明显高于正常妊娠组(P＜0.05)；妊娠期肥胖组胰岛素抵抗指数平均值2.30±1.21,正常妊娠组胰岛素抵抗指数平均值1.80±1.41,两组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)；分析结果显示,空腹血清BMP-7水平与FINS呈正相关(P＜0.05).结论 妊娠期肥胖组孕妇血清BMP-7水平的升高,可能参与了妊娠期糖尿病病理性胰岛素抵抗的发生.
作者：汪小娟；郝艳华；李建梅；刘莉莉；刘香萍；李小永 刊期： 2012年第01期
目的 以检验报告质量为指标确定室内质量控制的分析批长度,使得既保证检验质量,又降低质控成本.方法 以不合格检验结果个数≤1为目标,采用概率计算的方法,预测不同分析性能的项目在出现不同类型误差(间断误差和持续误差)时,分别应采取的分析批长度作为推荐分析批长度,并将此与实际分析批长度做比较.结果 所选项目分析性能介于2.83～6.01 Sigma,存在间断误差时的推荐分析批长度介于942～45 737 062 445个测试数,存在持续误差时的推荐分析批长度介于480～43 907 579 947个测试数.分析性能≥3Sigma时,推荐分析批长度远远长于实际分析批；分析性能＜3Sigma时,推荐分析批长度接近甚至短于实际分析批.结论 分析性能≥3Sigma的项目可根据实际情况适当延长分析批长度,降低质控成本；分析性能＜3Sigma的项目需小心谨慎,必要时可根据推荐分析批长度,缩短质控时间间隔,保证检验质量.
作者：李园园；李萍；吴建平；陈晓玲 刊期： 2012年第01期
目的 分析鳞癌患者、非鳞癌患者和健康人血清中结合珠蛋白( Haptoglobin,Hp)含量的差异,探讨结合珠蛋白在鳞癌诊断中的应用价值,为筛选鳞癌血清分子学标志物提供依据.方法 收集52例鳞癌患者、48例非鳞癌患者和30例健康人血清为样本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白免疫印迹检测血清中结合珠蛋白含量.通过SPSS V10.1软件分析血清结合珠蛋白含量的差异.结果 鳞癌患者血清Hp平均含量为300.58 ng/ml,明显高于非鳞癌患者血清Hp含量233.40 ng/ml(t=6.25,P＜0.01)和健康人血清Hp含量182.41 ng/ml(t=18.9,P＜0.01).鳞癌患者血清Hp含量随疾病的发展呈现增高趋势,直线相关分析显示Hp与癌症分期呈正相关(r=0.49,P＜0.01).但四种类型的鳞癌(肺鳞癌、鼻咽鳞癌、宫颈鳞癌、食管鳞癌)之间相比,血清Hp含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血清结合珠蛋白检测对鳞癌的诊断及鉴别诊断具有一定的临床意义.
作者：王冰；邱红；朱月蓉；楼小伟；何玉杰 刊期： 2012年第01期
目的 以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式.方法 以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒,作为完全非甲基化和完全甲基化标准品.设计通用引物,采用加入荧光染料SYBR Green I的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列,以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较,确定四株肺癌细胞株(NCI-H446,NCI-H460,SPCA1,NCI-H520)在该区段的甲基化模式,并通过克隆测序验证.同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式.结果 四株肺癌细胞株中,NCI-H446,SPCA1和NCI-H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同,而NCI-H460的Tm值有两个,分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合,并经克隆测序验证.两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间.结论 小细胞肺癌细胞株NCI-H446,肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI-H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型,而大细胞肺癌细胞株NCI-H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型.两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型.熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法.
作者：高丽；潘世扬；陈丹；张丽霞；谢而付；徐建；黄佩珺 刊期： 2012年第01期
目的 了解耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的抗生素耐药情况,指导临床合理用药.方法 选取中国中医研究院望京医院2008～2010年期间临床和门诊患者样本的耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌分离株,通过药敏实验分析这些菌株对15种常见抗生素的耐药性.结果 从标本类型分布看,主要的是痰液标本,共110株(88％),其次是分泌物共9株(7.2％)和2株自导管(1.6％).从科室统计分析发现,ICU分离到的鲍曼不动杆菌数多,68株；其次是针灸科,分离的菌株是15株；神经外科、CCU、普通外科、心内科、内分泌科、呼吸科、创伤一科,分别分离到14,11,7,4,3,2和1株.选取的125株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、美罗培南、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢曲松和头孢他啶耐药率高达90％以上,依次为100％,99.2％,99.2％,98.4％,96.8％,96％,96％,94.4％,93.6％,92％和91.2％.其次是氨曲南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴克坦,耐药率依次是72.8％,64％和30.4％,对多黏菌素B的耐药率低,仅为0.8％.结论 该院耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌对大多数种类的抗生素均有较高的耐药性,仅对少数几种抗生素表现为敏感,临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用,防治耐药性的进一步产生和院内传播.
作者：郭洁；徐杰；王丽丽；王玉飞；苑锡铜；袁静；宋宏彬；黄留玉；张宁；陈泽良；陈永德；刘世巍 刊期： 2012年第01期
目的 通过测定女性激素水平观察西安地区健康女性卵巢功能情况,探讨该地区围绝经期妇女卵巢功能状况及年龄分布,为开展围绝经期及绝经后妇女的保健工作提供依据.方法 2011年3～10月,采用放射免疫分析技术,对278例40岁以上西京医院健康查体女性(排除心、肺、高血压、糖尿病以及肾脏疾患)进行性激素[雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(H)]水平检测.以每五年跨度年龄段为一组.共分为5组进行激素水平分析,以FSH＞20IU/L,LH＞15 IU/ml,E2＜30 pmol/L标准判定为卵巢功能衰退.计量资料进行统计学分析.结果 278例健康调查女性人群中,第一组(40～45岁)105例,5.71％出现卵巢功能衰退,E2=87.81±54.07 pmol/L,FSH=6.46±6.89 IU/L,LH=8.4±9.01 (IU/L)；第二组(46～50岁)78例中24.36％出现卵巢功能衰退,E2=61.29±56.48 pmol/L,FSH=13.28±11.21IU/L,LH=12.37±9.66 IU/L;第三组(51～55岁)53例中71.71％出现卵巢功能衰退,E2=39.86±58.66 pmol/L,FSH=23.55±9.82 IU/L,LH=19.18±8.01IU/L;第四组(56～60岁)27例中88.89％出现卵巢功能衰退,E2=15.76±6.24pmol/L,FSH=,28.45±9.33 IU/L,LH=23.24±9.98 IU/L;第五组(60岁以上)15例中93.33％出现卵巢功能衰退,E2=16.79±5.20 pmol/L,FSH=28.93±9.74 IU/L,LH=18.76±6.09 IU/L.多组间激素水平比较采用方差分析,F分别为17.17,58.67,23.63.差异有统计学显著性意义(P=0.000).各组间多样本均数两两比较(SNK-q检验)结果显示:E2水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为24.11(P=0.05),23.07(P＞0.05)；FSH水平三组与四,五组间比较差异具有统计学意义,平均差分别为4.91(P＜0.05),6.04(P＜0.05)；LH水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为4.06(P＞0.05),0.16(P＞0.05).结论 西安地区健康女性生理性绝经期主要集中出现于51～55岁之间,晚于中国城市妇女平均绝经年龄49.5岁,且FSH水平升高较E2,LH水平变化早了一个年龄组段,说明FSH对卵巢功能的早期变化较敏感,因此,早期关注女性FSH水平升高是绝经过渡期保健和激素替代治疗的工作重点.
作者：刘缨；徐焰 刊期： 2012年第01期
结核病至今仍然是危害公共健康的一大难题.耐多药/广泛耐药的结核分枝杆菌(MDR-TB/XDR-TB)仍是制约控制结核病传播的重大影响因素,因此分析结核分枝杆菌对一线及二线抗结核药的耐药情况是十分必要的.传统检测方法耗时长且操作繁琐.近些年来,出现了一些快速的结核分枝杆菌耐药检测方法,该综述将介绍几种以结核分枝杆菌培养为基础的快速耐药检测.
作者：曾昭瑛；苏建荣 刊期： 2012年第01期
目的 研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与绝经前女性缺铁性贫血(IDA)的相关性.方法 收集陕西省人民医院2009年2月～2011年3月门诊及住院绝经前女性IDA患者154例及健康门诊体检绝经前女性87例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体.将HP阳性患者随机分为2组,其中1组(39例)及HP阴性组(76例)给予补铁治疗,2组(39例)给予补铁十清除HP治疗.所有患者治疗前、治疗后2周、4周复查血常规及血清铁蛋白.结果 ①154例女性IDA患者,HP阳性78例,感染率50.65％；对照组87例,HP阳性32例,感染率36.79％,二者相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；②血清铁蛋白在治疗4周后HP阳性2组明显高于1组(0.005＜P＜0.01)及HP阴性组(P＜0.001).结论 幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,有效地清除HP治疗能提高铁储存,从而可能提高这些IDA患者的疗效.
作者：连小赟；王一；牛倩；苗玉迪；翟欣辉；张玎；王岐山 刊期： 2012年第01期
目的 探索目标人群检验样本生物信息数据库及管理平台的建立和应用.方法 建立血清/DNA检验样本标准化冻存库和冻存管理流程体系,建立样本对应的生物信息数据库和软件管理平台.结果 初步建立了3 000多位健康或/和亚健康目标人群连续两年血清和DNA样本冻存库和样本对应生物信息数据库；特殊疾病人群的血清/DNA样本冻存库和对应样本的生物信息数据库和管理平台的建立.结论 临床检验样本生物信息数据库及管理平台的建立是科学高效使用宝贵生物学资源的良好途径和有力保证.
作者：胡梅；谈春荣；邵淑君；田宗梅；李莉；侯军林；张曼 刊期： 2012年第01期
目的 探讨不同浓度CoCl2诱导乏氧对体外培养的人肺腺癌细胞株A549增殖、缺氧诱导因子-1α mRNA (HIF-1αmRNA)表达变化及诱导凋亡作用.方法 对肺腺癌细胞A549分别进行常规和氯化钴模拟乏氧培养,采用MTT法检测乏氧对A549细胞增殖的影响.实时荧光定量PCR法测定不同浓度CoCl2诱导乏氧HIF-1α mRNA表达水平的变化.Annexin V-FITC/PI双标记染色,流式细胞术检测不同浓度CoCl2诱导乏氧时A549细胞凋亡情况.结果 CoCl2对A549细胞增殖抑制作用表现出时间和剂量依赖性抑制作用.常氧条件下的A549细胞即有一定水平的HIF-1α mRNA的表达,随着CoCl2浓度的增加,HIF-1α mRNA水平呈上升趋势,经单因素方差分析统计,各组差异有统计学意义(F=195.414,P=0.000).流式细胞仪检测结果显示,正常对照组,50,100,200,400 μmol/L CoCl2不同浓度组A549细胞凋亡率分别为1.97％±0.40％,3.97％±0.15％,6.93％±0.29％,12.97％±0.45％和15.80％±1.37％,经单因素方差分析统计,各组差异有统计学意义(F=220.209,P=0.000).结论 CoCl2对肿瘤细胞的增殖凋亡的影响呈浓度依赖性,进行化学模拟低氧时,要考虑CoCl2的作用浓度.
作者：陶绍能；周建国；程光华；张新路；葛俊亮 刊期： 2012年第01期
目的 研究紫外线照射对骨髓间充质干细胞中survivin表达的影响及其意义.方法 分离并培养正常成人骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测其特异性表面标志.利用普通紫外线距离细胞20 cm分别照射2 min,5 min后,RT-PCR法检测其中survivin mRNA的表达情况,利用gel-pro analyzer软件比较未经照射、照射2 min、照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量,应用SPSS13.0软件,配对t检验方法分析结果.结果 经紫外线照射2 min组与未经照射组比较t值为2.013,P＞0.05,差异无统计学意义,而经紫外线照射5 min组与未经照射组比较t值为7.225,P＜0.01,差异有统计学意义,经紫外线照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量明显增高.结论 紫外线照射可以提高正常成人骨髓间充质干细胞中survivinmRNA的表达量,提示紫外线照射可能通过提高抗凋亡基因survivin的表达而延长间充质干细胞的寿命.
作者：周雅丽；白海；马丽；马得炳；张红 刊期： 2012年第01期
目的 探讨尿移行上皮细胞在膀胱炎和肾盂肾炎鉴别诊断中的应用价值.方法 应用普通光学显微镜对156例泌尿系感染的尿沉渣标本进行分析[取患者中段尿10 ml于无菌试管中送检,400×g离心5 min,剩余沉淀0.2 ml,混匀后吸沉淀物20μl,滴在波片上,用18 mm×18 mm盖玻片覆盖后显微镜检查,先用10×10低倍镜观察图片,后用10×40高倍镜仔细观察细胞,检查20个视野],探讨表层移行上皮细胞,中、底层移行上皮细胞对膀胱炎、肾盂肾炎的诊断与临床诊断结果进行对比分析,判断其符合情况.以临床诊断作为标准,计算尿沉渣检测结果对膀胱炎和肾盂肾炎诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度.结果 以白细胞＞5/HP、红细胞＞3/HP、移行上皮细胞＞3/HP为阳性,对156例尿沉渣标本结果与临床诊断相比较进行分析,表层移行上皮细胞对膀胱炎的诊断(x2=2.5,P＞0.05)及中、底层移行上皮细胞对肾盂肾炎的诊断(x2=0.1,P＞0.05),差异无统计学意义.表层移行上皮细胞对膀胱炎的诊断灵敏度为80.0％,特异度为98.3％,阳性预测值为94.1％,阴性预测值为93.4％,准确度为93.6％,中、底层移行上皮细胞对肾盂肾炎的诊断灵敏度为78.3％,特异度为96.2％,阳性预测值为78.3％,阴性预测值为96.2％,准确度为93.6％,与临床诊断有很好的符合率.结论 尿沉渣是泌尿系感染检查的重要检测手段,尤其是移行上皮细胞对膀胱炎和肾盂肾炎鉴别诊断有非常好的应用价值.
作者：刘婧；汪建军；余艳丽；任超杰 刊期： 2012年第01期
目的 了解糖尿病湿性坏疽细菌感染的耐药特点,使临床选择抗菌药物治疗更有针对性.方法 取糖尿病湿性坏疽分泌物进行需氧菌、真菌培养和药敏试验.结果 275例糖尿病湿性坏疽患者中,细菌培养结果阳性率为100％,共培养出358株细菌.革兰阳性(G+)菌213株,其中葡萄菌属有5种药物的耐药菌株大于50％、肠球菌属有11种药物的耐药菌株大于50％.革兰阴性(G-)菌122株,其中肠杆菌科有3种药物的耐药菌株大于50％、不动杆菌属和假单胞菌属有8种药物的耐药菌株大于50％.真菌23株,其中光滑念珠菌有3种药物的耐药菌株大于50％.结论 糖尿病湿性坏疽需氧菌感染耐药特点是G+菌感染中的肠球菌属、G-菌感染中的不动杆菌属和假单胞菌属、真菌感染中的光滑念珠菌耐药率较高.
作者：范洪；刘静；王汝哲；尹金秀 刊期： 2012年第01期
胸腺素β4(Tβ4)由43个氨基酸组成,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中.Tβ4自发现以来,由于其存在于大多数组织和细胞中而被科学研究人员广泛关注,经大量实验证实Tβ4具有抗炎症、促伤口愈合、促进器官修复、促进毛发生长等多种生物学功能.
作者：何娟娟；马列婷 刊期： 2012年第01期
目的 建立嗜肺巴斯德菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法.方法 针对嗜肺巴斯德菌16SrRNA基因设计特异性引物和探针,建立嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异度、敏感度和稳定性.对2008～2011年采集的1 680份样本进行检测.结果 嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法具有高度特异性,对多杀巴斯德菌、产气巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应,检测灵敏度达22拷贝.标准曲线显示备浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.488,PCR效率为100％.荧光定量PCR检测1 680份样本,检出137份嗜肺巴斯德菌阳性.该方法可直接从样本中特异性地检出嗜肺巴斯德菌.结论 TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、稳定的特性,适用于嗜肺巴斯德菌的快速检测.
作者：高正琴；岳秉飞；贺争鸣 刊期： 2012年第01期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
