李园园;李萍;吴建平;陈晓玲
目的 评价国产酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测ξ-珠蛋白链快速筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的性能.方法 选择珠蛋白基因型已经基于PCR技术确诊的临床血液标本265份,其中珠蛋白基因型正常93例,静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血(-α/αα)22例,东南亚缺失型(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血136例,HbH病7例和β-珠蛋白生成障碍性贫血并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血6例及HbG并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血1例,采用双盲方式分别用海泰生物技术股份有限公司(简称海泰生物)和美国United Biotech(简称美国UBI)公司生产的固相ELISA试剂盒检测ξ-珠蛋白链筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血并以基于PCR技术的诊断结果作为金标准,对这两种ELISA试剂盒筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的性能进行评估.结果 海泰生物与美国UBI生产的ELISA试剂盒均能准确地筛出(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血并发(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血和HbG并发(__SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血以及正常血样,但两者既不能筛出静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血,也不能完全检出HbH病;检测(——SEA)基因总的灵敏度、特异度、准确度、阴性预测值(NPV)、阳性预测值(PPV)和诊断效率(EDF)(分别为98%,97.5%,98.9%,98%,100%和98.9%)与后者相比(分别为98.7%,98.3?%,99.2%,98.7%,100%和99.2%),差异无统计学显著性意义(P均>0.9).两者诊断(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血的效率均为100%.结论 固相ELISA法是一种高度灵敏、高度特异和非常可靠的筛查(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血的方法.海泰生物生产的(——SEA)α-珠蛋白生成障碍性贫血ELISA检测试剂盒与同类进口产品相比,具有成本低、需要样品量少的优势,非常适合于地贫高发区大人群的α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查.
作者:胡利清;肖奇志;周玉球;吴洪秋 刊期: 2012年第01期
目的 探讨ApoE基因多态性与唐氏综合征发病风险的相关性.方法 采用多重特异性扩增突变系统快速分型法检测80名唐氏综合征初筛高危孕妇,80名初筛低危孕妇和80名正常非孕对照女性的ApoE基因多态性,同时用化学发光法检测血清AFP,β-HCG和uE3,并对不同组基因型、等位基因频率及血清学标志物进行比较.结果 ①高危组、低危组AFP,β-HCG,uE3均明显高于对照组(P<0.01);与低危组相比,高危组AFP(15.43±15.26 μg/L),uE3(0.73±0.35ng/ml)明显降低(P<0.01),β-HCG(45.01±35.63 μg/L)明显增高(P<0.01),孕妇年龄(30±5岁)明显增大(P<0.01).②经x2检验,不同ApoE基因型及等位基因在DS高危组、低危组及对照组分布差异无统计学显著性意义(P>0.05).③经logistic分析ApoE E3等位基因与β-HCG升高,uE3降低,高龄对唐氏综合征风险交互作用差异有统计学显著性意义(P<0.05),A值分别为422.9,12.08和22.72.结论 ApoE基因多态性不是唐氏综合征高危的风险因子,但E3等位基因与血清β-HCG,uE3水平,孕妇年龄的交互作用可能与唐氏综合征高危风险有关.
作者:刘薇;尹志农;程珍;王俊文 刊期: 2012年第01期
目的 探讨血清中总IgE与巨噬细胞移动抑制因子(MIF)水平在特应性皮炎(AD)中的临床意义.方法 采用ELISA方法检测126例特应性皮炎患者(AD患者按SCORAD指数分三个亚组,轻度AD组31例、中度AD组58例、重度AD组37例)及46名健康对照者血清总IgE和MIF水平,并进行组间比较.结果 AD患者组血清总IgE和MIF水平分别为(1 596.04±1 064.61)U/ml和(28.28±11.95)μg/L,均显著高于健康对照组(101.60±64.67)U/ml和(7.29±1.83)μg/L(F值分别为70.20,1 297.15,P均<0.05).轻、中、重度AD血清总IgE水平及中、重度AD血清MIF的含量与疾病严重程度SCORAD指数均呈明显正相关(r值分别为0.513,0.526,0.569,0.426和0.447,P均<0.05).将血清总IgE与MIF水平用于AD的临床诊断时,曲线下面积分别为0.979和0.958,佳cutoff值分别为163.81U/ml和8.87 μg/L.结论 不同病程的AD患者血清总IgE和MIF表达增高,血清中总IgE与MIF水平可作为判断AD病情活动和评价疾病严重程度的有效检验指标,但MIF对区分轻度AD患者的临床诊断价值较低.
作者:王蕾;常连刚 刊期: 2012年第01期
目的 探讨补肾清透方对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量、乙肝病毒标志物(HBV-M)和肝功能的关系.方法 60例慢性乙型肝炎患者被随机分成治疗组和对照组,每组30例,治疗组接受补肾清透方治疗,疗程48周,对照组不接受药物治疗.两组分别在开始和第48周时抽血检查HBV DNA,HBV-M和肝功能.结果 治疗组治疗后病毒标志物HBV DNA,HBsAg和HBeAg阴转率分别为23.3%(7/30),16.7%(5/30)和36.7%(11/30),HBeAb阳转率为16.7%(5/30),与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01或0.05);肝功能指标ALT,AST和GGT下降,A/G升高,差异有统计学显著性意义(P<0.01或0.05).对照组检测上述指标,结果差异均无统计学显著性意义(P>0.05).结论 补肾清透方能降低乙型肝炎病毒栽量,提高乙肝病毒标志物转化率,改善肝功能.
作者:刘心亮;熊益群;周大桥;童光东;贺劲松;徐绍钢;穆桂萍;刘文赫 刊期: 2012年第01期
目的 探讨MCV及HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血(thalassemia)筛查中的诊断价值.方法 收集已作GapPCR技术及反向斑点杂交基因诊断,确诊为α单纯轻型缺失型患者96例,β单纯突变型患者74例,对照组103例,进行MCV及HbA2检测,确定两者分别在α型及β型筛查中的佳临界值(CT),并对其诊断价值作相关的统计学分析.结果 MCV在α型及β型的佳临界值分别为:≤71.9fl和≤71.55fl,HbA2的佳临界值则分别为:≤3.85%和≥5.25%;MCV在α型筛查中的诊断价值显著高于HbA2(x2=53.38,P<0.05),在β型中与HbA2相比差异无统计学意义(x2=5.663,P>0.05);MCV在两组的诊断价值差异无统计学意义(x2=0.053,P>0.05),HbA2在α型的诊断价值显著低于β型(x2=82.559,P<0.05).结论 MCV在α,β珠蛋白生成障碍性贫血筛查中诊断价值均较高;HbA2在a珠蛋白生成障碍性贫血中的诊断价值较低,在β珠蛋白生成障碍性贫血中的诊断价值较高.
作者:刘志伟;高慧;罗韬 刊期: 2012年第01期
目的 对在怀柔区第一医院参加体检的健康成人血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)浓度水平和特征进行调查,并对现有参考范围进行评估.方法 利用全自动生化分析仪测定参加健康体检的3 812例成人血清总胆红素和直接胆红素水平,按照性别、年龄等因素对数据进行统计学分析,并依据统计结果对现有参考值进行评价.结果 怀柔地区健康成人血清总胆红素参考范围分别为男性15.07±5.55 μmol/L,女性12.59±4.59μmol/L,总体13.88±5.26 μmol/L;直接胆红素参考范围分别为男性5.00±2.07 μmol/L,女性3.91±1.72 μmol/L,总体4.48±1.99 μmol/L.不同性别间参考值水平差异具有统计学意义(P<0.001),各年龄组之间参考值水平除男性TBIL外差异均具有统计学意义(P<0.001),怀柔地区血清胆红素参考范围与文献提供参考值水平相比差异具有统计学意义(P<0.001).结论 怀柔地区健康成人血清胆红素水平与原参考值相比发生了较大改变,建议各地实验室应根据不同性别及年龄建立各自的参考范围.
作者:马丽;陈慧娟;周绘;徐辉 刊期: 2012年第01期
目的 探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品.空白样品采用配套的稀释液,系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得.样品制备后用Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度,以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度.结果 NT-proBNP的空白限为2.53 pg/ml,检出限为7.75 pg/ml,10% CV时的功能灵敏度为8.82 pg/ml.结论 建立了Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息.
作者:索明环;张秀明;温冬梅;王伟佳;李飞;欧阳能良;阚丽娟;严海忠 刊期: 2012年第01期
目的 以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式.方法 以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒,作为完全非甲基化和完全甲基化标准品.设计通用引物,采用加入荧光染料SYBR Green I的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列,以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较,确定四株肺癌细胞株(NCI-H446,NCI-H460,SPCA1,NCI-H520)在该区段的甲基化模式,并通过克隆测序验证.同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式.结果 四株肺癌细胞株中,NCI-H446,SPCA1和NCI-H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同,而NCI-H460的Tm值有两个,分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合,并经克隆测序验证.两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间.结论 小细胞肺癌细胞株NCI-H446,肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI-H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型,而大细胞肺癌细胞株NCI-H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型.两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型.熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法.
作者:高丽;潘世扬;陈丹;张丽霞;谢而付;徐建;黄佩珺 刊期: 2012年第01期
目的 研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与绝经前女性缺铁性贫血(IDA)的相关性.方法 收集陕西省人民医院2009年2月~2011年3月门诊及住院绝经前女性IDA患者154例及健康门诊体检绝经前女性87例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体.将HP阳性患者随机分为2组,其中1组(39例)及HP阴性组(76例)给予补铁治疗,2组(39例)给予补铁十清除HP治疗.所有患者治疗前、治疗后2周、4周复查血常规及血清铁蛋白.结果 ①154例女性IDA患者,HP阳性78例,感染率50.65%;对照组87例,HP阳性32例,感染率36.79%,二者相比差异具有统计学意义(P<0.05);②血清铁蛋白在治疗4周后HP阳性2组明显高于1组(0.005<P<0.01)及HP阴性组(P<0.001).结论 幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,有效地清除HP治疗能提高铁储存,从而可能提高这些IDA患者的疗效.
作者:连小赟;王一;牛倩;苗玉迪;翟欣辉;张玎;王岐山 刊期: 2012年第01期
目的 了解耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的抗生素耐药情况,指导临床合理用药.方法 选取中国中医研究院望京医院2008~2010年期间临床和门诊患者样本的耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌分离株,通过药敏实验分析这些菌株对15种常见抗生素的耐药性.结果 从标本类型分布看,主要的是痰液标本,共110株(88%),其次是分泌物共9株(7.2%)和2株自导管(1.6%).从科室统计分析发现,ICU分离到的鲍曼不动杆菌数多,68株;其次是针灸科,分离的菌株是15株;神经外科、CCU、普通外科、心内科、内分泌科、呼吸科、创伤一科,分别分离到14,11,7,4,3,2和1株.选取的125株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、美罗培南、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢曲松和头孢他啶耐药率高达90%以上,依次为100%,99.2%,99.2%,98.4%,96.8%,96%,96%,94.4%,93.6%,92%和91.2%.其次是氨曲南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴克坦,耐药率依次是72.8%,64%和30.4%,对多黏菌素B的耐药率低,仅为0.8%.结论 该院耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌对大多数种类的抗生素均有较高的耐药性,仅对少数几种抗生素表现为敏感,临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用,防治耐药性的进一步产生和院内传播.
作者:郭洁;徐杰;王丽丽;王玉飞;苑锡铜;袁静;宋宏彬;黄留玉;张宁;陈泽良;陈永德;刘世巍 刊期: 2012年第01期
目的 流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平.方法 将新生1天20只乳鼠随机分为3组(试验组15只,阴性和阳性对照组各5只),取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液,经蓝莓花色苷、双氧水处理后,加入二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)孵育,DCF-DA进入细胞后可被ROS氧化生成发荧光的2',7'-二氯荧光素(DCF)52,通过流式细胞仪检测DCF荧光水平的变化,同时设立阴性及阳性对照.结果 蓝莓花色苷物质可以降低H2 O2刺激诱导的胞内ROS的产生,以1μmol/L效果为明显.结论 利用流式细胞仪检测过氧化物刺激后胞内产生的活性氧是一种简单、准确、稳定的方法.
作者:赵凯;陈琦;王利;贾宇臣 刊期: 2012年第01期
胸腺素β4(Tβ4)由43个氨基酸组成,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中.Tβ4自发现以来,由于其存在于大多数组织和细胞中而被科学研究人员广泛关注,经大量实验证实Tβ4具有抗炎症、促伤口愈合、促进器官修复、促进毛发生长等多种生物学功能.
作者:何娟娟;马列婷 刊期: 2012年第01期
目的 了解糖尿病湿性坏疽细菌感染的耐药特点,使临床选择抗菌药物治疗更有针对性.方法 取糖尿病湿性坏疽分泌物进行需氧菌、真菌培养和药敏试验.结果 275例糖尿病湿性坏疽患者中,细菌培养结果阳性率为100%,共培养出358株细菌.革兰阳性(G+)菌213株,其中葡萄菌属有5种药物的耐药菌株大于50%、肠球菌属有11种药物的耐药菌株大于50%.革兰阴性(G-)菌122株,其中肠杆菌科有3种药物的耐药菌株大于50%、不动杆菌属和假单胞菌属有8种药物的耐药菌株大于50%.真菌23株,其中光滑念珠菌有3种药物的耐药菌株大于50%.结论 糖尿病湿性坏疽需氧菌感染耐药特点是G+菌感染中的肠球菌属、G-菌感染中的不动杆菌属和假单胞菌属、真菌感染中的光滑念珠菌耐药率较高.
作者:范洪;刘静;王汝哲;尹金秀 刊期: 2012年第01期
目的 通过测定女性激素水平观察西安地区健康女性卵巢功能情况,探讨该地区围绝经期妇女卵巢功能状况及年龄分布,为开展围绝经期及绝经后妇女的保健工作提供依据.方法 2011年3~10月,采用放射免疫分析技术,对278例40岁以上西京医院健康查体女性(排除心、肺、高血压、糖尿病以及肾脏疾患)进行性激素[雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(H)]水平检测.以每五年跨度年龄段为一组.共分为5组进行激素水平分析,以FSH>20IU/L,LH>15 IU/ml,E2<30 pmol/L标准判定为卵巢功能衰退.计量资料进行统计学分析.结果 278例健康调查女性人群中,第一组(40~45岁)105例,5.71%出现卵巢功能衰退,E2=87.81±54.07 pmol/L,FSH=6.46±6.89 IU/L,LH=8.4±9.01 (IU/L);第二组(46~50岁)78例中24.36%出现卵巢功能衰退,E2=61.29±56.48 pmol/L,FSH=13.28±11.21IU/L,LH=12.37±9.66 IU/L;第三组(51~55岁)53例中71.71%出现卵巢功能衰退,E2=39.86±58.66 pmol/L,FSH=23.55±9.82 IU/L,LH=19.18±8.01IU/L;第四组(56~60岁)27例中88.89%出现卵巢功能衰退,E2=15.76±6.24pmol/L,FSH=,28.45±9.33 IU/L,LH=23.24±9.98 IU/L;第五组(60岁以上)15例中93.33%出现卵巢功能衰退,E2=16.79±5.20 pmol/L,FSH=28.93±9.74 IU/L,LH=18.76±6.09 IU/L.多组间激素水平比较采用方差分析,F分别为17.17,58.67,23.63.差异有统计学显著性意义(P=0.000).各组间多样本均数两两比较(SNK-q检验)结果显示:E2水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为24.11(P=0.05),23.07(P>0.05);FSH水平三组与四,五组间比较差异具有统计学意义,平均差分别为4.91(P<0.05),6.04(P<0.05);LH水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为4.06(P>0.05),0.16(P>0.05).结论 西安地区健康女性生理性绝经期主要集中出现于51~55岁之间,晚于中国城市妇女平均绝经年龄49.5岁,且FSH水平升高较E2,LH水平变化早了一个年龄组段,说明FSH对卵巢功能的早期变化较敏感,因此,早期关注女性FSH水平升高是绝经过渡期保健和激素替代治疗的工作重点.
作者:刘缨;徐焰 刊期: 2012年第01期
目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月~2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5%;经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4%.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.
作者:曹树正;王文武 刊期: 2012年第01期
目的 对融合蛋白d-EGF二级、三级结构进行预测,为构建相应结构重组分子的可能性提供理论指导.方法 以融合蛋白基因序列为基础,用DNAStar软件预测其蛋白质的二级结构;用Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模预测.结果 DNAStar软件的Gamier Robson方法预测融合蛋白d-EGF含较多β-折叠结构;Charge Density-Charge显示其3~22,31~48区段含丰富的正电荷.Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模显示融合蛋白d-EGF存在一个由六个链内二硫键组成的结构域,同时存在3个反向平行的β-折叠结构,这些结构是融合前β-defensin-3,EGF两分子生物学活性所必需的部分.结论 融合蛋白d-EGF的二、三级结构预测结果显示该组合分子可能具有β-defensin-3,EGF两种分子的功能,该方法可以为构建具有相应结构重组蛋白的可能性提供理论基础.
作者:房兵;孙淼;李友建;李娜;耿家珍;邵先安 刊期: 2012年第01期
血气分析仪是医院抢救、监护和治疗危重病人的重要临床检验设备[1].该类仪器含有气路、液路和电路,是计算机技术、微电子技术及电化学整合设计的高科技产品.ABL-5型全自动血气分析仪,由丹麦雷杜公司生产的,具有准确度及精密度高,检测快速,用血量少,操作简便,结果稳定可靠等优点,但在实际应用中也经常会出现一些常见故障及报警,只要认真解读,大多可以自行解决.现将在日常使用过程中,所发生的常见故障及处理方法总结如下,供同行参考.
作者:钟伟明;黄家亮;韦干芬 刊期: 2012年第01期
目的 应用一种自主研发的新型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)快速药敏系统(MB FS-1型)检测MTB对利福平(RIF)和异烟肼(INH)的耐药性,并对该系统的临床应用效果进行评价.方法 采用新型药敏系统对115株MTB临床分离株进行药敏试验,异烟肼以及利福平分别设置三个浓度梯度,与BECTEC MGIT 960法对比分析药敏结果,评估该系统检测多药耐药结核( Multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的应用性价值.结果 以BECTEC MGIT 960法为参考标准,MB-FS-1型快速药敏系统检测INH的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.43%,94.88%,97.26%和88.10%,检测RIF分别为96.50%,94.83%,94.83%和96.50%.异烟肼浓度为0.2μg/ml或0.1 μg/ml,利福平浓度为1.0 μg/ml时两种药敏方法等效性高,符合率分别为93.97%和95.69%.Kappa值分别为0.867和0.913,差异无统计学意义(P>0.05).结论 该新型MTB快速药敏系统检测MTB对异烟肼和利福平的耐药性与BACTEC MGIT 960符合率高,具有快速、价廉、操作简便的优点,可作为临床检测MDR-TB的快速检测方法之一.
作者:胡香南;吴晓渊;吕小华;郭建;邓桂林;吴文娟 刊期: 2012年第01期
结合无偿献血后服务工作实践,对无偿献血者标本检测结果为HIV抗体不确定的献血者反馈过程中应注意的问题进行总结并提出几点建议.
作者:魏兰华 刊期: 2012年第01期
目的 利用CLSI EP15-A指南对德灵公司生产的BN Prospec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的精密度和正确度进行验证.方法 精密度验证试验对2个不同水平的质控品每个每天测定3次,共测定5天,分别计算其批内不精密度和天间不精密度,然后与厂家声明的不精密度进行比较,若小于厂家声明的不精密度则认为该仪器的精密度符合厂家声明的精密度;正确度验证试验使用卫生部临检中心发放的室间质控品作为参考物质,对2个不同水平的室间质控品5天内每个每批测定2次求均值,计算相对偏倚.若相对偏倚在参考物质允许的偏倚范围内,结果为可接受.结果 BNProspec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的批内和天间不精密度均达到厂家声明的不精密度.2个室间质控品的测定结果与靶值的相对偏倚均小于卫生部临床检验中心室间质评的允许偏倚范围内.结论 BN Prospec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的精密度和正确度达到厂家声明的性能.
作者:莫扬 刊期: 2012年第01期