房兵；孙淼；李友建；李娜；耿家珍；邵先安
目的 对融合蛋白d-EGF二级、三级结构进行预测,为构建相应结构重组分子的可能性提供理论指导.方法 以融合蛋白基因序列为基础,用DNAStar软件预测其蛋白质的二级结构;用Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模预测.结果 DNAStar软件的Gamier Robson方法预测融合蛋白d-EGF含较多β-折叠结构；Charge Density-Charge显示其3～22,31～48区段含丰富的正电荷.Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模显示融合蛋白d-EGF存在一个由六个链内二硫键组成的结构域,同时存在3个反向平行的β-折叠结构,这些结构是融合前β-defensin-3,EGF两分子生物学活性所必需的部分.结论 融合蛋白d-EGF的二、三级结构预测结果显示该组合分子可能具有β-defensin-3,EGF两种分子的功能,该方法可以为构建具有相应结构重组蛋白的可能性提供理论基础.
作者：房兵；孙淼；李友建；李娜；耿家珍；邵先安 刊期： 2012年第01期
目的 探讨肥胖孕妇血清BMP-7(人骨成形蛋白7)和胰岛素抵抗水平的变化及意义.方法 选取妊娠期肥胖孕妇22例,正常妊娠孕妇122例,测定空腹血清BMP-7、空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 妊娠期肥胖组血清BMP-7含量平均值1 619.61±633.23 ng/L,正常妊娠组血清BMP-7含量平均值1 472.05±1196.18 ng/L;妊娠期肥胖组血清BMP-7水平明显高于正常妊娠组(P＜0.05)；妊娠期肥胖组胰岛素抵抗指数平均值2.30±1.21,正常妊娠组胰岛素抵抗指数平均值1.80±1.41,两组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)；分析结果显示,空腹血清BMP-7水平与FINS呈正相关(P＜0.05).结论 妊娠期肥胖组孕妇血清BMP-7水平的升高,可能参与了妊娠期糖尿病病理性胰岛素抵抗的发生.
作者：汪小娟；郝艳华；李建梅；刘莉莉；刘香萍；李小永 刊期： 2012年第01期
胸腺素β4(Tβ4)由43个氨基酸组成,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中.Tβ4自发现以来,由于其存在于大多数组织和细胞中而被科学研究人员广泛关注,经大量实验证实Tβ4具有抗炎症、促伤口愈合、促进器官修复、促进毛发生长等多种生物学功能.
作者：何娟娟；马列婷 刊期： 2012年第01期
目的 探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品.空白样品采用配套的稀释液,系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得.样品制备后用Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度,以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度.结果 NT-proBNP的空白限为2.53 pg/ml,检出限为7.75 pg/ml,10％ CV时的功能灵敏度为8.82 pg/ml.结论 建立了Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息.
作者：索明环；张秀明；温冬梅；王伟佳；李飞；欧阳能良；阚丽娟；严海忠 刊期： 2012年第01期
目的 探讨自制肿瘤标志物质控品在临床实验室中的应用可行性.方法 收集肿瘤患者检测血清样本,与健康人群血清按比例混合,配制成肿瘤标志物多项目(AFP,CEA,CA125,CA15-3,CA19-9,CA21-1,NSE,CA72-4和TPSA)复合血清,液态分装,-20℃保存,作为自制质控品每工作日检测一次,连续检测3个月,观察其稳定性；统计3个月内自制质控品各项目月均值、累积均值、月CV％、累积CV％和失控次数,探讨其在室内质量控制活动中的应用价值.结果 ①-20℃分装保存3个月的自制肿瘤标志物复合项目质控品冻溶后外观清澈透明,无浑浊及沉淀；该自制质控品-20℃分装保存第1,7,15,30,50,70,90天各项肿瘤标志物量值未见明显变化；对第21～30,51～60,81～90天各项目测定结果进行方差分析,差异无统计学意义(P＞0.05).②自制复合质控品用于室内质控活动,对各项目第1,2,3个月结果进行方差分析,差异无统计学意义(P＞0.05),各项目月均值及三个月累积均值之间比较,月均值及累积均值未出现均值漂移或趋势变化；各项目月CV％和累积CV％,均在不精密度(cVA％)控制允许范围内(CVA％ ＜0.5倍个体内生物学变异)；3个月室内质控活动中,失控报警:13s6次,22s3次,R1s1次.结论 自制肿瘤标志物复合项目冰冻血清作为室内质控品,具有良好的稳定性,可替代其进口产品；其应用于室内质控活动,能及时发现检测系统的不稳定性因素,并加以纠正处理,确保肿瘤标志物检测结果的可靠性.
作者：杨悦林；胡大春；钱净；杨丽琼；张水丽 刊期： 2012年第01期
目的 探讨血清中总IgE与巨噬细胞移动抑制因子(MIF)水平在特应性皮炎(AD)中的临床意义.方法 采用ELISA方法检测126例特应性皮炎患者(AD患者按SCORAD指数分三个亚组,轻度AD组31例、中度AD组58例、重度AD组37例)及46名健康对照者血清总IgE和MIF水平,并进行组间比较.结果 AD患者组血清总IgE和MIF水平分别为(1 596.04±1 064.61)U/ml和(28.28±11.95)μg/L,均显著高于健康对照组(101.60±64.67)U/ml和(7.29±1.83)μg/L(F值分别为70.20,1 297.15,P均＜0.05).轻、中、重度AD血清总IgE水平及中、重度AD血清MIF的含量与疾病严重程度SCORAD指数均呈明显正相关(r值分别为0.513,0.526,0.569,0.426和0.447,P均＜0.05).将血清总IgE与MIF水平用于AD的临床诊断时,曲线下面积分别为0.979和0.958,佳cutoff值分别为163.81U/ml和8.87 μg/L.结论 不同病程的AD患者血清总IgE和MIF表达增高,血清中总IgE与MIF水平可作为判断AD病情活动和评价疾病严重程度的有效检验指标,但MIF对区分轻度AD患者的临床诊断价值较低.
作者：王蕾；常连刚 刊期： 2012年第01期
目的 比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞(PBMC) EBV-DNA的阳性率及病毒载量.方法 采用荧光定量PCR法,对56例淋巴瘤患者(霍奇金淋巴瘤13例,非霍奇金淋巴瘤43例)血浆和PBMC EBV-DNA进行定量测定,比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异.结果 淋巴瘤患者血浆EBV-DNA阳性率(26.8％)与PBMCEBV-DNA阳性率(32.1％)之间差异无统计学意义(P＞0.05)；EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA具有较好的特异性和敏感性,血浆EBV-DNA定量可以代替PBMC EBV-DNA定量作为监测EBV阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志.
作者：姜昌丽；龚军丽；李云；林明辉；王惠萱 刊期： 2012年第01期
目的 探讨多药耐药基因MDR1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 收集2009年12月～2010年8月胃癌新鲜癌组织标本53例(实验组)、15例正常胃黏膜组织(对照组),采用逆转录-聚合酶链反应技术检测胃癌组织和正常胃组织中MDR1基因的表达,并分析与临床病理特征之间的关系及对化疗的指导意义.结果 MDR1基因在正常胃组织及胃癌组织中的表达分别为0.57±0.27和0.20±0.10(t=8.13,P＜0.001).MDR1基因的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移之间差异具有统计学意义(t=2.83,3.47;P=0.007,0.002),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间差异无统计学显著性意义(t=1.41,0.54,1.16；P=0.16,0.60,0.25).结论 MDR1基因的高表达可能是胃癌多药耐药产生的基础,MDR1基因的检测对制定化疗方案和选择化疗药物有一定的指导意义.
作者：胡秀学；赵颖；杜汉芳；高波；吴玉竹 刊期： 2012年第01期
结合无偿献血后服务工作实践,对无偿献血者标本检测结果为HIV抗体不确定的献血者反馈过程中应注意的问题进行总结并提出几点建议.
作者：魏兰华 刊期： 2012年第01期
目的 检测新生儿脐带血淋巴细胞亚群和调节性T细胞比率,了解脐带血免疫学的特征.方法 使用Sysmex XE2100血细胞分析仪分别计数脐带血、新生儿母亲及对照组外周血淋巴细胞；采用流式细胞术分别检测其CD3+T细胞、CD19+B细胞、CD3- CD16+56+ NK细胞、CD3+ CD4+细胞、CD3+ CD8+细胞占淋巴细胞百分比,以及CD4+ CD25+CD127low调节性T细胞占CD4+细胞的百分比.结果 脐带血、新生儿母亲及对照组淋巴细胞计数分别为(3.68±1.07)×109/L,(1.42±0.44)×109/L和(2.06±0.88)×109/L；B淋巴细胞为:15.71％±3.89％,11.13％±3.79％和9.69％±2.22％；CD4+T细胞为:50.27％±9.08％,37.25％±7.13％和34.65％±7.17％；调节性T细胞为:6.94％±1.09％,5.09％±0.95％和4.8％1±0.99％.上述检测结果脐带血均显著高于母亲及对照组,P＜0.01,母亲与对照组差异无统计学显著性意义P＞0.05.三组间CD3+T细胞(69.64％±9.97％,74.83％±5.91％和69.41％±5.42％)和NK(11.36％±7.93％,10.48％±6.78％和16.31％±4.69％)细胞无显著性差异,P＞0.05.脐带血中CD8+T细胞低于母亲及对照组(19.38％±6.62％,32.39％±2.08％和31.16％±1.87％),P＜0.01.结论 脐血中高水平的CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞和低水平的CD8+T细胞有助于保持脐带血的低免疫状态.
作者：张劼；陈军浩 刊期： 2012年第01期
目的 初步探索胱硫醚β-合酶(CBS)基因C770T突变在广西汉族老年缺血性脑梗死发病中的作用.方法 用扩增阻滞突变体系法检测61例广西汉族老年缺血性脑梗死患者(病例组)及30例正常老年人(对照组)CBSC770T基因型；采用酶联免疫分析法检测血浆Hcy.结果 CBS C770T产生C/C和C/T两种基因型,病例组C/C及C/T型频率分别为45.90％及54.10％,C,T等位基因频率分别为72.95％及27.05％;对照组上述基因型及等位基因频率分别为60％,40％,80％和20％.卡方检验结果显示,两组之间基因型频率以及等位基因频率差异均无统计学显著性意义(x2分别为1.60,1.07,P均＞0.05)；病例组血浆Hcy浓度为(21.82±3.92)μmol/L,其中C/C型为(19.29±4.19) μmol/L,C/T型为(24.36±4.25)μmol/L,对照组血浆Hcy为(13.15±2.11)μmol/L,其中C/C型和C/T型分别为(12.71±2.31)μmol/L和(13.59±1.91)μmol/L,经配对t检验,血浆Hcy在两组之间以及各基因型之间差异均有统计学显著性意义(t值分别为4.79,3.45和4.60,均P＜0.05).结论 CBS C770T基因突变对广西汉族老年缺血性脑梗死发病的作用可能非常有限,该基因位点突变可能不足以构成广西汉族老年缺血性脑梗死发病的独立遗传风险因素.
作者：钟冬梅；黄晓群 刊期： 2012年第01期
目的 了解上海儿童医学中心2010～2011年梅毒阳性产妇分娩的新生儿梅毒感染和发病情况,为新生儿性病感染工作提供依据.方法 分别对2010～2011年梅毒阳性产妇分娩的新生儿进行血清甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和梅毒IgM抗体(19SIgM-TPPA)检测.结果 2010和2011年胎传梅毒阳性率分别为3.8％(11/291)和4.1％(15/370),P＞0.05;两年的男性和女性胎传梅毒阳性率分别为2.4％(16/661)和1.5％(10/661),P＞0.05；2010和2011年新生儿现症梅毒阳性率分别为22.0％(64/291)和20.3％(75/370),P＞0.05；两年的男性和女性新生儿现症梅毒阳性率分别为10.7％(71/661)和10.3％(68/661),P＞0.05；2010和2011年新生儿被动感染梅毒阳性率分别为17.5％(51/291)和22.4％(83/370),P＞0.05；两年的男性和女性新生儿被动梅毒阳性率分别为11.2％(74/661)和9.1％(60/661),P＞0.05.结论 2010和2011年胎传梅毒阳性率、新生儿现症梅毒阳性率和新生儿被动感染梅毒阳性率基本持平,应继续加强孕前及孕期的梅毒检测及规范治疗,有效阻断母婴垂直传播.
作者：郑岚；张晓琪；李怀远；傅启华 刊期： 2012年第01期
目的 研究人结直肠癌组织中S100P,E-cadherin和Ki-67的表达情况并探讨三者表达的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测80例结直肠癌及其癌旁正常肠黏膜组织、30例良性肠病中三者的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨三者间表达的相关性.结果 ①S100P蛋白在结直肠癌组织中的表达率(57.5％)显著高于良性肠病(6.7％)及癌旁正常组织(3.8％)(x2=66.234,P＜0.01)；较之对照组,淋巴结转移组(x2=4.940,P＜0.05)及晚期(Dukes C+D期)结直肠癌组(x2=5.693,P＜0.05)S100P蛋白的表达均显著升高；随着结直肠癌分化程度的降低,S100P蛋白的表达有升高的趋势.②结直肠癌组织中E-cadherin的表达率(52.5％)较良性肠病(90.0％)及癌旁正常组织(93.8％％)明显降低(x2=41.014,P＜0.01)；E-cadherin的表达与结直肠癌的分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).③Ki-67在结直肠癌组织中的阳性指数(66.78％±9.77％)明显高于两对照组(31.40％±9.19％和7.14％±3.87％)(P＜0.0l)；淋巴结转移组和晚期(Dukes C+D期)组Ki-67阳性指数(68.49％±9.27％和69.35％±8.78％)升高,但较对照组(65.44％±l0.04％和65.74％±10.03％)差异无统计学显著性意义(P＞0.05)；Ki-67表达与其他临床病理特征无关.④三者间表达无显著相关性(P＞0.05),但不能排除在肿瘤进展过程中三者有间接的协同作用.结论 结直肠癌组织中S100P和Ki-67表达明显升高,而E-cadherin表达明显降低；S100P和E-cadherin与结直肠癌组织侵袭、转移密切相关；联合检测三者有助于判断结直肠癌的发展趋势及评估预后.
作者：许华；李胜水；张凤梅；李双标；刘岩；张霖 刊期： 2012年第01期
目的 探讨一种快速、简便、效果好的OPRM1基因PCR产物和测序产物纯化方法,建立稳定的DNA测序技术平台.方法 采用乙醇/醋酸钠、过柱和SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit 3种纯化方法,对50份OPRM1基因PCR产物和测序产物进行纯化效果的比较.结果 SAP-Exonuclease Ⅰ法对PCR反应产物进行纯化的回收率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为0.86±0.01,0.48±0.08,0.65±0.01(t=32.5,P＜0.001；t=86.1,P＜0.001)；BigDye Xterminator Purification Kit法对测序产物进行纯化成功率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为100％,62％和84％(x2=23.46,P＜0.001;x2 =8.70,P=0.003).结论 SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit是一种快速、简便、效果好的测序纯化方法.
作者：李少英；马晓燕；张双全；张慧敏；黎青 刊期： 2012年第01期
目的 调查邯郸地区无偿献血人群ALT上限值及不合格原因,为低限度的减少因ALT不合格造成的血液浪费提供方法和依据.方法 用SPSS软件建立邯郸市中心血站无偿献血者的年龄、性别、献血次数、职业、文化程度和HB-sAg,抗-HCV,抗-HIV和梅毒等指标以及相关ALT值的数据库,一共为10 844人,通过SPSS13.0软件对其进行分析.结果 无偿献血者的ALT上限值95％的参考范围为不高于48.91U/L.按照现在的献血体检标准速率法ALT≥40 U/L的淘汰标准,经Logistic逐步回归分析,和ALT不合格相关的差异有统计学意义的是性别、年龄以及HBsAg,抗-HCV,抗-HIV和梅毒阳性(有一项为阳性,变量定为1,都为阴性,变量定为0).其中男性和女性相比(OR=4.001;95％CI:3.279～4.883,P=0.00)；年龄(OR=1.008;95％ CI:1～1.005,P=0.039)；HBsAg,抗-HCV,抗-HIV和梅毒阳性(OR=1.805;95％CI:1.19～2.912,P=0.015).结论 无偿献血群体ALT上限值略高于现行献血法颁发的淘汰标准,献血次数、献血者的职业和受教育程度在统计学上对ALT不合格没有意义,对ALT不合格有影响的仍是献血者本人的性别、年龄以及其它检测项目阳性这些内在因素.固定无偿献血队伍的建立不能从根本上减少因ALT不合格造成的血液报废率,如何在献血者中建立更科学的ALT淘汰标准才是今后献血工作中应该关注的问题.
作者：李燕；徐晓艳；刘宁；刘虎林 刊期： 2012年第01期
目的 研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与绝经前女性缺铁性贫血(IDA)的相关性.方法 收集陕西省人民医院2009年2月～2011年3月门诊及住院绝经前女性IDA患者154例及健康门诊体检绝经前女性87例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体.将HP阳性患者随机分为2组,其中1组(39例)及HP阴性组(76例)给予补铁治疗,2组(39例)给予补铁十清除HP治疗.所有患者治疗前、治疗后2周、4周复查血常规及血清铁蛋白.结果 ①154例女性IDA患者,HP阳性78例,感染率50.65％；对照组87例,HP阳性32例,感染率36.79％,二者相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；②血清铁蛋白在治疗4周后HP阳性2组明显高于1组(0.005＜P＜0.01)及HP阴性组(P＜0.001).结论 幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,有效地清除HP治疗能提高铁储存,从而可能提高这些IDA患者的疗效.
作者：连小赟；王一；牛倩；苗玉迪；翟欣辉；张玎；王岐山 刊期： 2012年第01期
目的 建立嗜肺巴斯德菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法.方法 针对嗜肺巴斯德菌16SrRNA基因设计特异性引物和探针,建立嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异度、敏感度和稳定性.对2008～2011年采集的1 680份样本进行检测.结果 嗜肺巴斯德菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法具有高度特异性,对多杀巴斯德菌、产气巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应,检测灵敏度达22拷贝.标准曲线显示备浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.488,PCR效率为100％.荧光定量PCR检测1 680份样本,检出137份嗜肺巴斯德菌阳性.该方法可直接从样本中特异性地检出嗜肺巴斯德菌.结论 TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、稳定的特性,适用于嗜肺巴斯德菌的快速检测.
作者：高正琴；岳秉飞；贺争鸣 刊期： 2012年第01期
ALT不合格是血站实验室检测结果中非特异性并且导致血液报废率高的指标.献血者初次ALT单项不合格的血液予以报废,连续两次ALT单项不合格的则予以淘汰,为减少献血者因饮酒、肥胖、疲劳、运动、服药、高脂饮食造成非病理性淘汰,有效地保留献血者并为进行特殊人群采血前ALT快速检测收集数据,笔者对本站ALT单项不合格献血者进行调查.
作者：何玲 刊期： 2012年第01期
结核病至今仍然是危害公共健康的一大难题.耐多药/广泛耐药的结核分枝杆菌(MDR-TB/XDR-TB)仍是制约控制结核病传播的重大影响因素,因此分析结核分枝杆菌对一线及二线抗结核药的耐药情况是十分必要的.传统检测方法耗时长且操作繁琐.近些年来,出现了一些快速的结核分枝杆菌耐药检测方法,该综述将介绍几种以结核分枝杆菌培养为基础的快速耐药检测.
作者：曾昭瑛；苏建荣 刊期： 2012年第01期
目的 研究EHD2与肿瘤的关系及其表达抑制对乳腺上皮细胞转化能力的影响.方法 取3例浸润性乳腺导管癌及其配对癌旁正常组织,通过Western Blot比对EHD2的蛋白表达水平.siRNA干扰非癌乳腺上皮细胞HBL100的EHD2蛋白表达水平,研究EHD2下调对细胞悬浮性克隆生长能力的影响.结果 EHD2在癌组织中的蛋白表达均高于正常乳腺组织(F=5.389,P＜0.05)；siRNA干扰EHD2表达明显降低(t=101.458,P＜0.005),HBL100细胞的悬浮生长克隆数显著增加(t=88.754,P＜0.000).结论 EHD2可能是新乳腺抑癌基因,它的表达缺失可能引起正常上皮细胞的恶性转化.
作者：田刚；王学涵；李盼；王洪玉；郭立莎；肖春花；应国光 刊期： 2012年第01期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
