李少英；马晓燕；张双全；张慧敏；黎青
目的 对融合蛋白d-EGF二级、三级结构进行预测,为构建相应结构重组分子的可能性提供理论指导.方法 以融合蛋白基因序列为基础,用DNAStar软件预测其蛋白质的二级结构;用Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模预测.结果 DNAStar软件的Gamier Robson方法预测融合蛋白d-EGF含较多β-折叠结构；Charge Density-Charge显示其3～22,31～48区段含丰富的正电荷.Insight Ⅱ软件对其三级结构进行建模显示融合蛋白d-EGF存在一个由六个链内二硫键组成的结构域,同时存在3个反向平行的β-折叠结构,这些结构是融合前β-defensin-3,EGF两分子生物学活性所必需的部分.结论 融合蛋白d-EGF的二、三级结构预测结果显示该组合分子可能具有β-defensin-3,EGF两种分子的功能,该方法可以为构建具有相应结构重组蛋白的可能性提供理论基础.
作者：房兵；孙淼；李友建；李娜；耿家珍；邵先安 刊期： 2012年第01期
目的 探索目标人群检验样本生物信息数据库及管理平台的建立和应用.方法 建立血清/DNA检验样本标准化冻存库和冻存管理流程体系,建立样本对应的生物信息数据库和软件管理平台.结果 初步建立了3 000多位健康或/和亚健康目标人群连续两年血清和DNA样本冻存库和样本对应生物信息数据库；特殊疾病人群的血清/DNA样本冻存库和对应样本的生物信息数据库和管理平台的建立.结论 临床检验样本生物信息数据库及管理平台的建立是科学高效使用宝贵生物学资源的良好途径和有力保证.
作者：胡梅；谈春荣；邵淑君；田宗梅；李莉；侯军林；张曼 刊期： 2012年第01期
目的 研究人结直肠癌组织中S100P,E-cadherin和Ki-67的表达情况并探讨三者表达的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测80例结直肠癌及其癌旁正常肠黏膜组织、30例良性肠病中三者的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨三者间表达的相关性.结果 ①S100P蛋白在结直肠癌组织中的表达率(57.5％)显著高于良性肠病(6.7％)及癌旁正常组织(3.8％)(x2=66.234,P＜0.01)；较之对照组,淋巴结转移组(x2=4.940,P＜0.05)及晚期(Dukes C+D期)结直肠癌组(x2=5.693,P＜0.05)S100P蛋白的表达均显著升高；随着结直肠癌分化程度的降低,S100P蛋白的表达有升高的趋势.②结直肠癌组织中E-cadherin的表达率(52.5％)较良性肠病(90.0％)及癌旁正常组织(93.8％％)明显降低(x2=41.014,P＜0.01)；E-cadherin的表达与结直肠癌的分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05).③Ki-67在结直肠癌组织中的阳性指数(66.78％±9.77％)明显高于两对照组(31.40％±9.19％和7.14％±3.87％)(P＜0.0l)；淋巴结转移组和晚期(Dukes C+D期)组Ki-67阳性指数(68.49％±9.27％和69.35％±8.78％)升高,但较对照组(65.44％±l0.04％和65.74％±10.03％)差异无统计学显著性意义(P＞0.05)；Ki-67表达与其他临床病理特征无关.④三者间表达无显著相关性(P＞0.05),但不能排除在肿瘤进展过程中三者有间接的协同作用.结论 结直肠癌组织中S100P和Ki-67表达明显升高,而E-cadherin表达明显降低；S100P和E-cadherin与结直肠癌组织侵袭、转移密切相关；联合检测三者有助于判断结直肠癌的发展趋势及评估预后.
作者：许华；李胜水；张凤梅；李双标；刘岩；张霖 刊期： 2012年第01期
目的 为研究大鼠肠道缺血再灌注损伤时肠系膜淋巴液在“肠-淋巴”途径中的作用,建立淋巴液的两种处理方法.方法SPF级SD健康雄性大鼠,体重280～320 g,随机分为:肠道缺血再灌注引流(I/R+D)组和普通引流(N+D)组(η=10).I/R+D组夹闭肠系膜上动脉60 min后复灌120min,同时引流肠系膜淋巴液180 min;N+D组开腹后只引沆淋巴液180 min.收集肠系膜淋巴液.两组的淋巴液处理:①用蛋白酶K水解法降解其中蛋白质,并测定水解前后淋巴液中蛋白含量；②内毒素去除柱除去淋巴液中内毒素,并检测过柱前后淋巴液中内毒素水平.结果 大鼠肠道缺血再灌注损伤后,淋巴液中的蛋白质含量及内毒素水平显著高于对照组(t值分别为-8.32和-9.91,P＜0.05差异有统计学显著性意义).用蛋白酶K水解后能降解淋巴液中大部分蛋白质,处理前后蛋白含量:N+D组(24.35±1.37)vs(2.94±0.33) g/L,I/R+D组(34.89±1.68) g/L vs(3.72±0.51) g/L,其水解效率都在87％以上；内毒素去除柱能除去淋巴液中大部分内毒素,处理前后淋巴液中内毒素水平:N+D组(0.0095±0.005 3)EU/ml vs(0.002 1±0.000 5)EU/ml,I/R+D组(0.032 1±0.013 1)EU/ml vs(0.003 0±0.000 3)EU/ml,其去除效率I/R+D组达到90％.结论 肠道缺血再灌注损伤后淋巴液中蛋白质含量和内毒素水平显著增高；蛋白酶K能够降解淋巴液中87％以上的蛋白质,内毒素去除柱能够通过亲和的方法去除淋巴液中大部分内毒素,为进一步研究“肠-淋巴”途径中淋巴液成分在肠道缺血再灌注损伤中的作用提供了新的方法及思路.
作者：张睿；何桂珍；王玉康 刊期： 2012年第01期
目的 初步探索胱硫醚β-合酶(CBS)基因C770T突变在广西汉族老年缺血性脑梗死发病中的作用.方法 用扩增阻滞突变体系法检测61例广西汉族老年缺血性脑梗死患者(病例组)及30例正常老年人(对照组)CBSC770T基因型；采用酶联免疫分析法检测血浆Hcy.结果 CBS C770T产生C/C和C/T两种基因型,病例组C/C及C/T型频率分别为45.90％及54.10％,C,T等位基因频率分别为72.95％及27.05％;对照组上述基因型及等位基因频率分别为60％,40％,80％和20％.卡方检验结果显示,两组之间基因型频率以及等位基因频率差异均无统计学显著性意义(x2分别为1.60,1.07,P均＞0.05)；病例组血浆Hcy浓度为(21.82±3.92)μmol/L,其中C/C型为(19.29±4.19) μmol/L,C/T型为(24.36±4.25)μmol/L,对照组血浆Hcy为(13.15±2.11)μmol/L,其中C/C型和C/T型分别为(12.71±2.31)μmol/L和(13.59±1.91)μmol/L,经配对t检验,血浆Hcy在两组之间以及各基因型之间差异均有统计学显著性意义(t值分别为4.79,3.45和4.60,均P＜0.05).结论 CBS C770T基因突变对广西汉族老年缺血性脑梗死发病的作用可能非常有限,该基因位点突变可能不足以构成广西汉族老年缺血性脑梗死发病的独立遗传风险因素.
作者：钟冬梅；黄晓群 刊期： 2012年第01期
目的 了解湖南省株洲市第一医院患者梅毒感染情况及其分布,为梅毒的全面预防工作提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对株洲市第一医院2010年1月～2011年3月门诊普通患者及术前拟输血患者共29 328例进行梅毒抗体检测,阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法确证.结果 29 328例标本中,男性阳性结果为426例,女性阳性结果为310例,总阳性率为2.51％.在各年龄组均发现有梅毒感染.其中20～40岁组阳性率高,占55.43％.在感染科室当中,外科患者阳性感染率高,其次是妇产科.结论 患者血清梅毒抗体在临床科室占一定比例的阳性率,因此对患者,尤其是术前患者进行梅毒抗体检测,可以及时阻断梅毒的传播,有效预防院内感染,并有利于医护人员的自我保护.
作者：唐满玲；顾敏；彭俊；李见红 刊期： 2012年第01期
胸腺素β4(Tβ4)由43个氨基酸组成,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中.Tβ4自发现以来,由于其存在于大多数组织和细胞中而被科学研究人员广泛关注,经大量实验证实Tβ4具有抗炎症、促伤口愈合、促进器官修复、促进毛发生长等多种生物学功能.
作者：何娟娟；马列婷 刊期： 2012年第01期
目的 探讨一种快速、简便、效果好的OPRM1基因PCR产物和测序产物纯化方法,建立稳定的DNA测序技术平台.方法 采用乙醇/醋酸钠、过柱和SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit 3种纯化方法,对50份OPRM1基因PCR产物和测序产物进行纯化效果的比较.结果 SAP-Exonuclease Ⅰ法对PCR反应产物进行纯化的回收率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为0.86±0.01,0.48±0.08,0.65±0.01(t=32.5,P＜0.001；t=86.1,P＜0.001)；BigDye Xterminator Purification Kit法对测序产物进行纯化成功率显著高于乙醇/醋酸钠和过柱法,分别为100％,62％和84％(x2=23.46,P＜0.001;x2 =8.70,P=0.003).结论 SAP-Exonuclease Ⅰ结合BigDye Xterminator Purification Kit是一种快速、简便、效果好的测序纯化方法.
作者：李少英；马晓燕；张双全；张慧敏；黎青 刊期： 2012年第01期
目的 利用CLSI EP15-A指南对德灵公司生产的BN Prospec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的精密度和正确度进行验证.方法 精密度验证试验对2个不同水平的质控品每个每天测定3次,共测定5天,分别计算其批内不精密度和天间不精密度,然后与厂家声明的不精密度进行比较,若小于厂家声明的不精密度则认为该仪器的精密度符合厂家声明的精密度；正确度验证试验使用卫生部临检中心发放的室间质控品作为参考物质,对2个不同水平的室间质控品5天内每个每批测定2次求均值,计算相对偏倚.若相对偏倚在参考物质允许的偏倚范围内,结果为可接受.结果 BNProspec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的批内和天间不精密度均达到厂家声明的不精密度.2个室间质控品的测定结果与靶值的相对偏倚均小于卫生部临床检验中心室间质评的允许偏倚范围内.结论 BN Prospec特定蛋白仪测定免疫球蛋白IgG,IgA和IgM的精密度和正确度达到厂家声明的性能.
作者：莫扬 刊期： 2012年第01期
血气分析仪是医院抢救、监护和治疗危重病人的重要临床检验设备[1].该类仪器含有气路、液路和电路,是计算机技术、微电子技术及电化学整合设计的高科技产品.ABL-5型全自动血气分析仪,由丹麦雷杜公司生产的,具有准确度及精密度高,检测快速,用血量少,操作简便,结果稳定可靠等优点,但在实际应用中也经常会出现一些常见故障及报警,只要认真解读,大多可以自行解决.现将在日常使用过程中,所发生的常见故障及处理方法总结如下,供同行参考.
作者：钟伟明；黄家亮；韦干芬 刊期： 2012年第01期
ALT不合格是血站实验室检测结果中非特异性并且导致血液报废率高的指标.献血者初次ALT单项不合格的血液予以报废,连续两次ALT单项不合格的则予以淘汰,为减少献血者因饮酒、肥胖、疲劳、运动、服药、高脂饮食造成非病理性淘汰,有效地保留献血者并为进行特殊人群采血前ALT快速检测收集数据,笔者对本站ALT单项不合格献血者进行调查.
作者：何玲 刊期： 2012年第01期
目的 调查分析盐城市盐都区儿童部分疫苗接种后的免疫效果.方法 采用微量血间接ELISA法对盐都区9乡镇6 648名1～16周岁具有相关疫苗接种史的儿童做麻疹、乙型脑炎及A群脑膜炎、脊髓灰质炎或白喉、破伤风IgG抗体的检测,并对结果进行分析.结果 受检儿童麻疹、乙型脑炎、A群脑膜炎、脊髓灰质炎、白喉、破伤风IgG抗体阳性率分别为74.31％,89.58％,64.67％,75.53％,93.01％和86.42％;不同性别儿童之间抗体阳性率差异无统计学意义(x2=0.261～2.599,P＞0.05)；各年龄段白喉和乙型脑炎抗体均处于较高水平,多个年龄组麻疹、脊髓灰质炎和A群脑膜炎抗体阳性率相对较低,破伤风抗体水平7岁以后、A群脑膜炎8岁以后有随年龄增长而下降的趋势.结论 盐都区健康儿童A群脑膜炎、麻疹、脊髓灰质炎抗体阳性率相对较低,需提高疫苗冷链管理和接种质量,并正常开展免疫监测,对未检出保护性抗体的儿童进行相关疫苗的加强接种.
作者：胥加耕；王荣堂；梅志锋 刊期： 2012年第01期
目的 探讨全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值.方法 使用法国Sebia公司的Capillarys2全自动毛细管电泳仪对18 003例成人血标本进行血红蛋白电泳分析,检测HbA,HbF,HbA2和异常血红蛋白含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析.结果 18 003例成人标本筛查出α珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者2 226例,筛查阳性率12.36％,其中召回1 070例行基因分析,626例为α珠蛋白基因缺失,符合率58.50％;β珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者1 329例,筛查阳性率7.38％,其中召回733例行基因分析,710例为β珠蛋白基因突变,符合率96.86％.结论 全自动毛细管电泳作为一种新型液相分离技术,具有快速、灵敏度高、分辨率高等优点,能对HbA2进行准确的定位及定量,可初步区分α,β珠蛋白生成障碍性贫血,有效筛出高危患者,全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的符合性,为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断提供重要依据.
作者：万志丹；黄湘；吴学威；李冬秀；郑国兵；姚英姿；梁睿 刊期： 2012年第01期
目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月～2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5％；经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4％.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.
作者：曹树正；王文武 刊期： 2012年第01期
目的 研究血吸虫病患者是否有肝自身免疫性抗体存在.方法 收集来自荆州市第一人民医院住院的100例血吸虫病患者的血清,运用免疫印迹法检测肝抗原IgG谱,同时运用全自动生化分析仪检测其肝功能,并综合分析其结果.结果 100例血吸虫病患者肝抗原IgG谱显示,LKM-1,LC-1及SLA/LP均为阴性,但有21例血吸虫病患者AMA-M2阳性；对AMA-M2阳性和阴性患者血清肝功能进行比较发现,血清ALT,AST,ALP及γ-GT差异有统计学意义(P＜0.05),其t值分别为7.115,6.685,7.219和8.398.结论 血吸虫病患者可以出现肝自身免疫性抗体,且AMA-M2阳性患者往往伴随肝功能损伤.
作者：张家均；王娴默；雷鸿斌；黄娥；雷选斌；郭辉；董虹 刊期： 2012年第01期
目的 探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品.空白样品采用配套的稀释液,系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得.样品制备后用Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度,以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度.结果 NT-proBNP的空白限为2.53 pg/ml,检出限为7.75 pg/ml,10％ CV时的功能灵敏度为8.82 pg/ml.结论 建立了Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息.
作者：索明环；张秀明；温冬梅；王伟佳；李飞；欧阳能良；阚丽娟；严海忠 刊期： 2012年第01期
目的 以检验报告质量为指标确定室内质量控制的分析批长度,使得既保证检验质量,又降低质控成本.方法 以不合格检验结果个数≤1为目标,采用概率计算的方法,预测不同分析性能的项目在出现不同类型误差(间断误差和持续误差)时,分别应采取的分析批长度作为推荐分析批长度,并将此与实际分析批长度做比较.结果 所选项目分析性能介于2.83～6.01 Sigma,存在间断误差时的推荐分析批长度介于942～45 737 062 445个测试数,存在持续误差时的推荐分析批长度介于480～43 907 579 947个测试数.分析性能≥3Sigma时,推荐分析批长度远远长于实际分析批；分析性能＜3Sigma时,推荐分析批长度接近甚至短于实际分析批.结论 分析性能≥3Sigma的项目可根据实际情况适当延长分析批长度,降低质控成本；分析性能＜3Sigma的项目需小心谨慎,必要时可根据推荐分析批长度,缩短质控时间间隔,保证检验质量.
作者：李园园；李萍；吴建平；陈晓玲 刊期： 2012年第01期
目的 研究紫外线照射对骨髓间充质干细胞中survivin表达的影响及其意义.方法 分离并培养正常成人骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测其特异性表面标志.利用普通紫外线距离细胞20 cm分别照射2 min,5 min后,RT-PCR法检测其中survivin mRNA的表达情况,利用gel-pro analyzer软件比较未经照射、照射2 min、照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量,应用SPSS13.0软件,配对t检验方法分析结果.结果 经紫外线照射2 min组与未经照射组比较t值为2.013,P＞0.05,差异无统计学意义,而经紫外线照射5 min组与未经照射组比较t值为7.225,P＜0.01,差异有统计学意义,经紫外线照射5 min后正常成人骨髓间充质干细胞中survivin的表达量明显增高.结论 紫外线照射可以提高正常成人骨髓间充质干细胞中survivinmRNA的表达量,提示紫外线照射可能通过提高抗凋亡基因survivin的表达而延长间充质干细胞的寿命.
作者：周雅丽；白海；马丽；马得炳；张红 刊期： 2012年第01期
目的 通过测定女性激素水平观察西安地区健康女性卵巢功能情况,探讨该地区围绝经期妇女卵巢功能状况及年龄分布,为开展围绝经期及绝经后妇女的保健工作提供依据.方法 2011年3～10月,采用放射免疫分析技术,对278例40岁以上西京医院健康查体女性(排除心、肺、高血压、糖尿病以及肾脏疾患)进行性激素[雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(H)]水平检测.以每五年跨度年龄段为一组.共分为5组进行激素水平分析,以FSH＞20IU/L,LH＞15 IU/ml,E2＜30 pmol/L标准判定为卵巢功能衰退.计量资料进行统计学分析.结果 278例健康调查女性人群中,第一组(40～45岁)105例,5.71％出现卵巢功能衰退,E2=87.81±54.07 pmol/L,FSH=6.46±6.89 IU/L,LH=8.4±9.01 (IU/L)；第二组(46～50岁)78例中24.36％出现卵巢功能衰退,E2=61.29±56.48 pmol/L,FSH=13.28±11.21IU/L,LH=12.37±9.66 IU/L;第三组(51～55岁)53例中71.71％出现卵巢功能衰退,E2=39.86±58.66 pmol/L,FSH=23.55±9.82 IU/L,LH=19.18±8.01IU/L;第四组(56～60岁)27例中88.89％出现卵巢功能衰退,E2=15.76±6.24pmol/L,FSH=,28.45±9.33 IU/L,LH=23.24±9.98 IU/L;第五组(60岁以上)15例中93.33％出现卵巢功能衰退,E2=16.79±5.20 pmol/L,FSH=28.93±9.74 IU/L,LH=18.76±6.09 IU/L.多组间激素水平比较采用方差分析,F分别为17.17,58.67,23.63.差异有统计学显著性意义(P=0.000).各组间多样本均数两两比较(SNK-q检验)结果显示:E2水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为24.11(P=0.05),23.07(P＞0.05)；FSH水平三组与四,五组间比较差异具有统计学意义,平均差分别为4.91(P＜0.05),6.04(P＜0.05)；LH水平三组与四,五组间比较差异无统计学意义,平均差分别为4.06(P＞0.05),0.16(P＞0.05).结论 西安地区健康女性生理性绝经期主要集中出现于51～55岁之间,晚于中国城市妇女平均绝经年龄49.5岁,且FSH水平升高较E2,LH水平变化早了一个年龄组段,说明FSH对卵巢功能的早期变化较敏感,因此,早期关注女性FSH水平升高是绝经过渡期保健和激素替代治疗的工作重点.
作者：刘缨；徐焰 刊期： 2012年第01期
目的 探讨血清中总IgE与巨噬细胞移动抑制因子(MIF)水平在特应性皮炎(AD)中的临床意义.方法 采用ELISA方法检测126例特应性皮炎患者(AD患者按SCORAD指数分三个亚组,轻度AD组31例、中度AD组58例、重度AD组37例)及46名健康对照者血清总IgE和MIF水平,并进行组间比较.结果 AD患者组血清总IgE和MIF水平分别为(1 596.04±1 064.61)U/ml和(28.28±11.95)μg/L,均显著高于健康对照组(101.60±64.67)U/ml和(7.29±1.83)μg/L(F值分别为70.20,1 297.15,P均＜0.05).轻、中、重度AD血清总IgE水平及中、重度AD血清MIF的含量与疾病严重程度SCORAD指数均呈明显正相关(r值分别为0.513,0.526,0.569,0.426和0.447,P均＜0.05).将血清总IgE与MIF水平用于AD的临床诊断时,曲线下面积分别为0.979和0.958,佳cutoff值分别为163.81U/ml和8.87 μg/L.结论 不同病程的AD患者血清总IgE和MIF表达增高,血清中总IgE与MIF水平可作为判断AD病情活动和评价疾病严重程度的有效检验指标,但MIF对区分轻度AD患者的临床诊断价值较低.
作者：王蕾；常连刚 刊期： 2012年第01期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
