钟伟明;黄家亮;韦干芬
目的 探讨富血小板血浆(PRP)血小板浓度与全血血小板浓度、红细胞比容(HCT)相关性.方法 随机收集162例门诊体检志愿者静脉血标本,以EDTA-K2,枸橼酸钠抗凝.枸橼酸钠抗凝血800 r/min(离心半径19 cm)离心5 min,分离富含血小板血浆(PRP),应用Sysmex XE-2100血液分析仪测定全血血小板浓度(X1)和HCT(X2),PRP血小板浓度(Y).以HCT 0.35为界,将数据分为正常组和低值组.结果 所得数据采用多元相关性统计分析得到回归方程Y总=1.309 51X1 +744.294 5X2-262.068(R2 =0.897 8);Y正常组=1.380 208X1 +855.884 8X2-323.374(R2=0.892 9);Y低值组=1.088 972X1 +465.228 8X2-123.101(R2=0.961 1).结论 全血血小板浓度、红细胞比容与富血小板血浆血小板浓度相关显著,由全血血小板浓度和红细胞比容可初步推算富血小板血浆血小板浓度.
作者:李祖兰;任军伟;丛玉隆;白洁;邓新立;马长生;陈兴明;杨亮程;王海立 刊期: 2012年第01期
目的 调查分析盐城市盐都区儿童部分疫苗接种后的免疫效果.方法 采用微量血间接ELISA法对盐都区9乡镇6 648名1~16周岁具有相关疫苗接种史的儿童做麻疹、乙型脑炎及A群脑膜炎、脊髓灰质炎或白喉、破伤风IgG抗体的检测,并对结果进行分析.结果 受检儿童麻疹、乙型脑炎、A群脑膜炎、脊髓灰质炎、白喉、破伤风IgG抗体阳性率分别为74.31%,89.58%,64.67%,75.53%,93.01%和86.42%;不同性别儿童之间抗体阳性率差异无统计学意义(x2=0.261~2.599,P>0.05);各年龄段白喉和乙型脑炎抗体均处于较高水平,多个年龄组麻疹、脊髓灰质炎和A群脑膜炎抗体阳性率相对较低,破伤风抗体水平7岁以后、A群脑膜炎8岁以后有随年龄增长而下降的趋势.结论 盐都区健康儿童A群脑膜炎、麻疹、脊髓灰质炎抗体阳性率相对较低,需提高疫苗冷链管理和接种质量,并正常开展免疫监测,对未检出保护性抗体的儿童进行相关疫苗的加强接种.
作者:胥加耕;王荣堂;梅志锋 刊期: 2012年第01期
目的 研究人结直肠癌组织中S100P,E-cadherin和Ki-67的表达情况并探讨三者表达的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测80例结直肠癌及其癌旁正常肠黏膜组织、30例良性肠病中三者的表达情况,结合患者临床病理资料进行分析,并探讨三者间表达的相关性.结果 ①S100P蛋白在结直肠癌组织中的表达率(57.5%)显著高于良性肠病(6.7%)及癌旁正常组织(3.8%)(x2=66.234,P<0.01);较之对照组,淋巴结转移组(x2=4.940,P<0.05)及晚期(Dukes C+D期)结直肠癌组(x2=5.693,P<0.05)S100P蛋白的表达均显著升高;随着结直肠癌分化程度的降低,S100P蛋白的表达有升高的趋势.②结直肠癌组织中E-cadherin的表达率(52.5%)较良性肠病(90.0%)及癌旁正常组织(93.8%%)明显降低(x2=41.014,P<0.01);E-cadherin的表达与结直肠癌的分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05).③Ki-67在结直肠癌组织中的阳性指数(66.78%±9.77%)明显高于两对照组(31.40%±9.19%和7.14%±3.87%)(P<0.0l);淋巴结转移组和晚期(Dukes C+D期)组Ki-67阳性指数(68.49%±9.27%和69.35%±8.78%)升高,但较对照组(65.44%±l0.04%和65.74%±10.03%)差异无统计学显著性意义(P>0.05);Ki-67表达与其他临床病理特征无关.④三者间表达无显著相关性(P>0.05),但不能排除在肿瘤进展过程中三者有间接的协同作用.结论 结直肠癌组织中S100P和Ki-67表达明显升高,而E-cadherin表达明显降低;S100P和E-cadherin与结直肠癌组织侵袭、转移密切相关;联合检测三者有助于判断结直肠癌的发展趋势及评估预后.
作者:许华;李胜水;张凤梅;李双标;刘岩;张霖 刊期: 2012年第01期
目的 以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式.方法 以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒,作为完全非甲基化和完全甲基化标准品.设计通用引物,采用加入荧光染料SYBR Green I的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列,以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较,确定四株肺癌细胞株(NCI-H446,NCI-H460,SPCA1,NCI-H520)在该区段的甲基化模式,并通过克隆测序验证.同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式.结果 四株肺癌细胞株中,NCI-H446,SPCA1和NCI-H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同,而NCI-H460的Tm值有两个,分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合,并经克隆测序验证.两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间.结论 小细胞肺癌细胞株NCI-H446,肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI-H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型,而大细胞肺癌细胞株NCI-H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型.两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型.熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法.
作者:高丽;潘世扬;陈丹;张丽霞;谢而付;徐建;黄佩珺 刊期: 2012年第01期
目的 探讨基于生物学变异的质量规范在临床生化质控方案设计中的应用.方法 按照Westgard等[7]的报道方法对18个临床生化项目基于生物学变异不同水平质量目标对应的sigma值进行了计算.不精密度(CV%)的数据采用近6个月(2011年5月~10月)室内质控数据.偏倚(Bias)的数据采用该室参加Bio-Rad实验室间质控比对计划(Inter laboratoryQCProgram)中与对等组比较的近(2011年10月)的偏倚数据.根据sigma值及质控方案性能选择合适的质量目标及质控方案.结果 18个生化项目中,分别有7个、2个和6个项目选择了佳、期望和低水平的生物学变异的质量规范.Ca,Cl和Na目前的性能不能满足低水平生物学变异质量规范的要求,分别选择了CLIA' 88和德国Rilibak质控指南的标准.结论 应用基于生物学变异不同水平的质量规范,可以让临床清楚了解检测过程给实验结果带来的误差大有多少,更有利于检测结果的临床应用.
作者:尹利民;胡大春 刊期: 2012年第01期
目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月~2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5%;经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4%.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.
作者:曹树正;王文武 刊期: 2012年第01期
目的 流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平.方法 将新生1天20只乳鼠随机分为3组(试验组15只,阴性和阳性对照组各5只),取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液,经蓝莓花色苷、双氧水处理后,加入二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)孵育,DCF-DA进入细胞后可被ROS氧化生成发荧光的2',7'-二氯荧光素(DCF)52,通过流式细胞仪检测DCF荧光水平的变化,同时设立阴性及阳性对照.结果 蓝莓花色苷物质可以降低H2 O2刺激诱导的胞内ROS的产生,以1μmol/L效果为明显.结论 利用流式细胞仪检测过氧化物刺激后胞内产生的活性氧是一种简单、准确、稳定的方法.
作者:赵凯;陈琦;王利;贾宇臣 刊期: 2012年第01期
目的 了解湖南省株洲市第一医院患者梅毒感染情况及其分布,为梅毒的全面预防工作提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对株洲市第一医院2010年1月~2011年3月门诊普通患者及术前拟输血患者共29 328例进行梅毒抗体检测,阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法确证.结果 29 328例标本中,男性阳性结果为426例,女性阳性结果为310例,总阳性率为2.51%.在各年龄组均发现有梅毒感染.其中20~40岁组阳性率高,占55.43%.在感染科室当中,外科患者阳性感染率高,其次是妇产科.结论 患者血清梅毒抗体在临床科室占一定比例的阳性率,因此对患者,尤其是术前患者进行梅毒抗体检测,可以及时阻断梅毒的传播,有效预防院内感染,并有利于医护人员的自我保护.
作者:唐满玲;顾敏;彭俊;李见红 刊期: 2012年第01期
胸腺素β4(Tβ4)由43个氨基酸组成,广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物中.Tβ4自发现以来,由于其存在于大多数组织和细胞中而被科学研究人员广泛关注,经大量实验证实Tβ4具有抗炎症、促伤口愈合、促进器官修复、促进毛发生长等多种生物学功能.
作者:何娟娟;马列婷 刊期: 2012年第01期
目的 探讨自制肿瘤标志物质控品在临床实验室中的应用可行性.方法 收集肿瘤患者检测血清样本,与健康人群血清按比例混合,配制成肿瘤标志物多项目(AFP,CEA,CA125,CA15-3,CA19-9,CA21-1,NSE,CA72-4和TPSA)复合血清,液态分装,-20℃保存,作为自制质控品每工作日检测一次,连续检测3个月,观察其稳定性;统计3个月内自制质控品各项目月均值、累积均值、月CV%、累积CV%和失控次数,探讨其在室内质量控制活动中的应用价值.结果 ①-20℃分装保存3个月的自制肿瘤标志物复合项目质控品冻溶后外观清澈透明,无浑浊及沉淀;该自制质控品-20℃分装保存第1,7,15,30,50,70,90天各项肿瘤标志物量值未见明显变化;对第21~30,51~60,81~90天各项目测定结果进行方差分析,差异无统计学意义(P>0.05).②自制复合质控品用于室内质控活动,对各项目第1,2,3个月结果进行方差分析,差异无统计学意义(P>0.05),各项目月均值及三个月累积均值之间比较,月均值及累积均值未出现均值漂移或趋势变化;各项目月CV%和累积CV%,均在不精密度(cVA%)控制允许范围内(CVA% <0.5倍个体内生物学变异);3个月室内质控活动中,失控报警:13s6次,22s3次,R1s1次.结论 自制肿瘤标志物复合项目冰冻血清作为室内质控品,具有良好的稳定性,可替代其进口产品;其应用于室内质控活动,能及时发现检测系统的不稳定性因素,并加以纠正处理,确保肿瘤标志物检测结果的可靠性.
作者:杨悦林;胡大春;钱净;杨丽琼;张水丽 刊期: 2012年第01期
目的 探讨ApoE基因多态性与唐氏综合征发病风险的相关性.方法 采用多重特异性扩增突变系统快速分型法检测80名唐氏综合征初筛高危孕妇,80名初筛低危孕妇和80名正常非孕对照女性的ApoE基因多态性,同时用化学发光法检测血清AFP,β-HCG和uE3,并对不同组基因型、等位基因频率及血清学标志物进行比较.结果 ①高危组、低危组AFP,β-HCG,uE3均明显高于对照组(P<0.01);与低危组相比,高危组AFP(15.43±15.26 μg/L),uE3(0.73±0.35ng/ml)明显降低(P<0.01),β-HCG(45.01±35.63 μg/L)明显增高(P<0.01),孕妇年龄(30±5岁)明显增大(P<0.01).②经x2检验,不同ApoE基因型及等位基因在DS高危组、低危组及对照组分布差异无统计学显著性意义(P>0.05).③经logistic分析ApoE E3等位基因与β-HCG升高,uE3降低,高龄对唐氏综合征风险交互作用差异有统计学显著性意义(P<0.05),A值分别为422.9,12.08和22.72.结论 ApoE基因多态性不是唐氏综合征高危的风险因子,但E3等位基因与血清β-HCG,uE3水平,孕妇年龄的交互作用可能与唐氏综合征高危风险有关.
作者:刘薇;尹志农;程珍;王俊文 刊期: 2012年第01期
目的 研究血吸虫病患者是否有肝自身免疫性抗体存在.方法 收集来自荆州市第一人民医院住院的100例血吸虫病患者的血清,运用免疫印迹法检测肝抗原IgG谱,同时运用全自动生化分析仪检测其肝功能,并综合分析其结果.结果 100例血吸虫病患者肝抗原IgG谱显示,LKM-1,LC-1及SLA/LP均为阴性,但有21例血吸虫病患者AMA-M2阳性;对AMA-M2阳性和阴性患者血清肝功能进行比较发现,血清ALT,AST,ALP及γ-GT差异有统计学意义(P<0.05),其t值分别为7.115,6.685,7.219和8.398.结论 血吸虫病患者可以出现肝自身免疫性抗体,且AMA-M2阳性患者往往伴随肝功能损伤.
作者:张家均;王娴默;雷鸿斌;黄娥;雷选斌;郭辉;董虹 刊期: 2012年第01期
目的 探讨补肾清透方对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量、乙肝病毒标志物(HBV-M)和肝功能的关系.方法 60例慢性乙型肝炎患者被随机分成治疗组和对照组,每组30例,治疗组接受补肾清透方治疗,疗程48周,对照组不接受药物治疗.两组分别在开始和第48周时抽血检查HBV DNA,HBV-M和肝功能.结果 治疗组治疗后病毒标志物HBV DNA,HBsAg和HBeAg阴转率分别为23.3%(7/30),16.7%(5/30)和36.7%(11/30),HBeAb阳转率为16.7%(5/30),与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01或0.05);肝功能指标ALT,AST和GGT下降,A/G升高,差异有统计学显著性意义(P<0.01或0.05).对照组检测上述指标,结果差异均无统计学显著性意义(P>0.05).结论 补肾清透方能降低乙型肝炎病毒栽量,提高乙肝病毒标志物转化率,改善肝功能.
作者:刘心亮;熊益群;周大桥;童光东;贺劲松;徐绍钢;穆桂萍;刘文赫 刊期: 2012年第01期
目的 比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞(PBMC) EBV-DNA的阳性率及病毒载量.方法 采用荧光定量PCR法,对56例淋巴瘤患者(霍奇金淋巴瘤13例,非霍奇金淋巴瘤43例)血浆和PBMC EBV-DNA进行定量测定,比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异.结果 淋巴瘤患者血浆EBV-DNA阳性率(26.8%)与PBMCEBV-DNA阳性率(32.1%)之间差异无统计学意义(P>0.05);EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义(P>0.05).结论 荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA具有较好的特异性和敏感性,血浆EBV-DNA定量可以代替PBMC EBV-DNA定量作为监测EBV阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志.
作者:姜昌丽;龚军丽;李云;林明辉;王惠萱 刊期: 2012年第01期
目的 研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与绝经前女性缺铁性贫血(IDA)的相关性.方法 收集陕西省人民医院2009年2月~2011年3月门诊及住院绝经前女性IDA患者154例及健康门诊体检绝经前女性87例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体.将HP阳性患者随机分为2组,其中1组(39例)及HP阴性组(76例)给予补铁治疗,2组(39例)给予补铁十清除HP治疗.所有患者治疗前、治疗后2周、4周复查血常规及血清铁蛋白.结果 ①154例女性IDA患者,HP阳性78例,感染率50.65%;对照组87例,HP阳性32例,感染率36.79%,二者相比差异具有统计学意义(P<0.05);②血清铁蛋白在治疗4周后HP阳性2组明显高于1组(0.005<P<0.01)及HP阴性组(P<0.001).结论 幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,有效地清除HP治疗能提高铁储存,从而可能提高这些IDA患者的疗效.
作者:连小赟;王一;牛倩;苗玉迪;翟欣辉;张玎;王岐山 刊期: 2012年第01期
目的 探索目标人群检验样本生物信息数据库及管理平台的建立和应用.方法 建立血清/DNA检验样本标准化冻存库和冻存管理流程体系,建立样本对应的生物信息数据库和软件管理平台.结果 初步建立了3 000多位健康或/和亚健康目标人群连续两年血清和DNA样本冻存库和样本对应生物信息数据库;特殊疾病人群的血清/DNA样本冻存库和对应样本的生物信息数据库和管理平台的建立.结论 临床检验样本生物信息数据库及管理平台的建立是科学高效使用宝贵生物学资源的良好途径和有力保证.
作者:胡梅;谈春荣;邵淑君;田宗梅;李莉;侯军林;张曼 刊期: 2012年第01期
目的 以检验报告质量为指标确定室内质量控制的分析批长度,使得既保证检验质量,又降低质控成本.方法 以不合格检验结果个数≤1为目标,采用概率计算的方法,预测不同分析性能的项目在出现不同类型误差(间断误差和持续误差)时,分别应采取的分析批长度作为推荐分析批长度,并将此与实际分析批长度做比较.结果 所选项目分析性能介于2.83~6.01 Sigma,存在间断误差时的推荐分析批长度介于942~45 737 062 445个测试数,存在持续误差时的推荐分析批长度介于480~43 907 579 947个测试数.分析性能≥3Sigma时,推荐分析批长度远远长于实际分析批;分析性能<3Sigma时,推荐分析批长度接近甚至短于实际分析批.结论 分析性能≥3Sigma的项目可根据实际情况适当延长分析批长度,降低质控成本;分析性能<3Sigma的项目需小心谨慎,必要时可根据推荐分析批长度,缩短质控时间间隔,保证检验质量.
作者:李园园;李萍;吴建平;陈晓玲 刊期: 2012年第01期
目的 分析鳞癌患者、非鳞癌患者和健康人血清中结合珠蛋白( Haptoglobin,Hp)含量的差异,探讨结合珠蛋白在鳞癌诊断中的应用价值,为筛选鳞癌血清分子学标志物提供依据.方法 收集52例鳞癌患者、48例非鳞癌患者和30例健康人血清为样本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白免疫印迹检测血清中结合珠蛋白含量.通过SPSS V10.1软件分析血清结合珠蛋白含量的差异.结果 鳞癌患者血清Hp平均含量为300.58 ng/ml,明显高于非鳞癌患者血清Hp含量233.40 ng/ml(t=6.25,P<0.01)和健康人血清Hp含量182.41 ng/ml(t=18.9,P<0.01).鳞癌患者血清Hp含量随疾病的发展呈现增高趋势,直线相关分析显示Hp与癌症分期呈正相关(r=0.49,P<0.01).但四种类型的鳞癌(肺鳞癌、鼻咽鳞癌、宫颈鳞癌、食管鳞癌)之间相比,血清Hp含量差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清结合珠蛋白检测对鳞癌的诊断及鉴别诊断具有一定的临床意义.
作者:王冰;邱红;朱月蓉;楼小伟;何玉杰 刊期: 2012年第01期
目的 探讨全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值.方法 使用法国Sebia公司的Capillarys2全自动毛细管电泳仪对18 003例成人血标本进行血红蛋白电泳分析,检测HbA,HbF,HbA2和异常血红蛋白含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析.结果 18 003例成人标本筛查出α珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者2 226例,筛查阳性率12.36%,其中召回1 070例行基因分析,626例为α珠蛋白基因缺失,符合率58.50%;β珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者1 329例,筛查阳性率7.38%,其中召回733例行基因分析,710例为β珠蛋白基因突变,符合率96.86%.结论 全自动毛细管电泳作为一种新型液相分离技术,具有快速、灵敏度高、分辨率高等优点,能对HbA2进行准确的定位及定量,可初步区分α,β珠蛋白生成障碍性贫血,有效筛出高危患者,全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的符合性,为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断提供重要依据.
作者:万志丹;黄湘;吴学威;李冬秀;郑国兵;姚英姿;梁睿 刊期: 2012年第01期
目的 旨在建立一种快速及高通量的CYP2C19药物代谢酶相关基因多态性的检测方法,为个体化治疗提供用药参考.方法 抽取96例人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,且以Sanger测序法测序结果为对照,观察分析准确性.结果 运用焦磷酸测序可以成功检测CYP2C19相关基因型;单个SNP位点检测经与Sanger测序方法比较,符合率为100%.同时,通过设计焦磷酸测序引物,两个PCR产物可合并于一管中进行焦磷酸测序,与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比,能有效降低检测成本,节省检测时间.结论 该方法可准确、高通量、快速检测药物代谢酶相关基因多态性,该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值,也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测.
作者:施宏;虞闰六;马金飞;任绪义 刊期: 2012年第01期