张阳东；楚瑞雪；时磊；翁代慧；张萌；原正军
目的 实时荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)技术检测宫颈癌组织中基因肿瘤超甲基化基因1(HIC1)mRNA表达水平,并探讨其表达差异在宫颈癌临床诊断治疗中的意义.方法 2010～2012年常熟地区综合医院临床妇科专业确诊并行手术治疗的宫颈癌疾病组织,按病理学分宫颈癌、宫颈原位癌两组,每组20例;收集20例正常宫颈组织设为对照组.提取其总RNA,FQ-PCR相对定量法检测每组中HIC1-mRNA的表达水平.统计学方差分析F检验,t检验分析三组间HIC1 mRNA表达量是否存在显著性差异.结果宫颈癌、宫颈原位癌及正常宫颈组织中HIC1 mRNA相对定量结果(2-△△CT)分别为1.0,0.45和0.15.F检验三组间表达量均呈现统计学显著性差异(F＝4.16,P＜0.05),t检验显示HIC1-mRNA在宫颈癌组织中的表达水平低于宫颈原位癌组织(t＝1.74,P＜0.05);宫颈原位癌中HIC1-mRNA表达水平低于正常宫颈组织(t＝2.14,P＜0.05);而宫颈癌组织中表达水平极显著低于正常组织(t＝3.69,P＜0.01).结论 FQ-PCR相对定量法可以敏感且特异地检测出HIC1-mRNA的表达水平,方法准确可靠,操作简便.宫颈癌不同分期中HIC1 mRNA表达水平存在统计学差异,HIC1基因的低水平表达与宫颈癌的侵袭转移有关.
作者：赵一琳；崔映红；黄少芝 刊期： 2013年第03期
目的 ELISA法检测EB病毒抗体血清样本优化,并探讨其在体检初筛中的应用价值.方法 在经典EBV-CA-IgA,EBV-EA-D-IgA检测方法的基础上,根据流行病学调查患者阳性分布特点,将体检血清每两人等量混合稀释为一个标本后,按原操作说明书操作.结果 合并血清方法(改良方法)和经典方法(标准方法)进行平行试验,EBV-CA-IgA,EBV-EA-D-IgA的Kappa值分别为0.94和0.99,表示两方法检测结果一致.改良方法的批内、批间精密度较好(CV在2.3%～6.98%之间),不同患者血型间的交叉干扰和类风湿因子干扰以及非特异性抗原(HbsAg,HbeAg)的干扰,偏差均小于10%.EBV-CA-IgA和EBV-EA-D-IgA的阳性预测值分别为92.6%和98.0%,阴性预测值均为100%.结论 优化方法简便、实用、可减少成本和检测工作负担,是值得推广的方法.
作者：谢松业；徐艳玲；葛永新；吉梅；陆元善 刊期： 2013年第03期
目的 探讨has-miR-203与慢性粒细胞白血病三氧化二砷(As2O3)治疗的敏感性的关系及可能的作用机制.方法 体外培养K562细胞,利用LipofectamineTM 2000将miR-203模拟物转染至K562细胞,流式细胞术检测转染效率,MTT法检测使用miR-203,As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制率,并计算IC50;后用金正均Q值法评价用药效果.结果 miR-203转染至K562细胞,联合As2O3显著抑制K562细胞增殖,抑制效果较各单独使用组作用明显增强.As2O3浓度为0.05,0.1,0.2和0.4 μmol/L时的抑制率分别为24.0%±5.0%,33.1%±1.5%,39.4%±3.4%和47.1%±5.5%.micRNA-203浓度为5,10,20和40 μmol/L时的抑制率分别为27.0%±6.7%,38.8%±3.2%,44.6%±3.0%和59.6%±3.7%.不同浓度梯度的As2O3联合20 μmol/L的micRNA-203抑制率分别为46.9%±3.2%,48.9%±3.9%,50.2%±5.5%和56.1%±1.9%.结论 当一定浓度的miR-203与不同浓度梯度的As2O3联合之后,对K562细胞的增殖抑制表现为相加作用,提高了K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供新的依据.
作者：吕钰冰；何金花；黎毓光 刊期： 2013年第03期
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种跨膜受体酪氨酸激酶,在许多肿瘤中过表达或发生突变,通过信号转导对癌细胞增殖、凋亡和血管生成具有重要意义,已成为抗肿瘤药物的重要靶点之一.近年来,尤其是肺癌患者中开展该基因突变的检测已逐渐受到重视.掌握EGFR基因突变检测的临床意义,EGFR基因突变检测常用方法以及EGFR基因突变检测常用的样本及其处理,可为其今后在临床中的广泛应用提供更广的前景.
作者：周瑞芳；卢仁泉 刊期： 2013年第03期
目的 探讨2012年西安地区120例幽门螺杆菌(Helicoba-cter pylori,H.pylori)阳性患者标本中,H.pylori对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星的耐药情况,以指导临床用药.方法 收集2012年3月至2013年1月西安市中心医院将120例H.pylori阳性患者胃粘膜组织,接种于H.pylori选择性培养基,37℃微需氧环境培养3～5天,采用E-test法,筛选出耐药菌株.结果 120例标本H.pylori菌株培养阳性62例,H.pylori对甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素、左氧氟沙星的耐药率分别为61.3%,6.5%,33.9%和25.8%.结论 2012年西安地区H.pylori对几种常用抗生素耐药率较之前有所升高,对甲硝唑耐药率比较高,对阿莫西林较高度敏感,药敏实验有助于抗生素的选择.
作者：姜小建；张玲霞；朱建伟；谢紫阳；马京玲；庄坤 刊期： 2013年第03期
目的 研制幽门螺杆菌(HP)粪便抗原(HPSA)纳米金侧流免疫层析快速检测板.方法 利用枸橼酸钠作为还原剂制备纳米金,标记兔抗HP多价抗体,建立双抗体夹心法的纳米金侧流免疫层析快速检测板;采用该检测板和英国Atlas公司试纸条分别对HP阳性病例组(123例)、健康体检HP阳性对照I组(109例)、健康体检HP阴性对照II组(129例)进行双盲法HPSA检测,并以14C-尿素呼气试验(14C-UBT)为金标准,对结果进行评价.结果 制备的直径40 nm纳米金大吸收波长(λmax)为525 nm,标记抗体的0.05 mol/L硼酸盐缓冲液适pH为7.6,抗体标记佳用量为18 μg/ml(小标记量为15 μg/ml);检测板与试纸条的检测结果在三组之间差异无统计学意义(χ2=0～0.337,P均<0.05);以14C-UBT结果为金标准,检测板的灵敏度、特异度、符合率分别为98.3%,99.2%和98.6%,试纸条的灵敏度、特异度、符合率分别为97.4%,98.4%和97.8%.结论 以纳米金标记多抗的双抗体夹心法侧流免疫层析快速检测板,检测HPSA诊断HP感染,方法简便、价格便宜、重复性好、无创伤,具有很高的敏感度和特异度.
作者：陈达伟；江晓肖；戴玉柱；陈少明；王国政；孙长贵；成军 刊期： 2013年第03期
目的 探讨抗着丝粒蛋白B(CENPB)抗体在风湿性疾病中的临床价值.方法 对西安市风湿病研究所2009年10月~2012年10月186例抗CENPB抗体阳性患者进行回顾性分析研究.结果 186例抗CENPB抗体阳性患者中自身免疫疾病占150例(80.6%),非自身免疫疾病占36例(19.4%),经数理统计分析差异有统计学显著性意义(χ2=86.4,P<0.01).同时,在186例抗CENPB抗体阳性患者中,抗核抗体(ANA)阳性者177例(95.2%);其中荧光模型着丝点型117例,斑点型54例,均质型36例,其余核型共12例.结论 抗CENPB抗体主要与自身免疫病相关,特别是局限型系统性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、雷诺氏症、类风湿关节炎(RA).在非自身免疫病患者中抗CENPB抗体主要与肺脏、肝脏疾病相关.抗CENPB抗体阳性时其对应的荧光核型以着丝点型多见,如果联合检测抗核抗体及抗核抗体谱,有助于提高自身免疫病检出率.
作者：穆亚宏；刘小玲；任子荣；王蔼平；陈金华；罗婷 刊期： 2013年第03期
通过对迈瑞BS-320全自动生化分析仪的使用总结,归纳出由于设备配套、运行环境配置、人员操作经验等原因导致的非技术性问题的分析思路与排除方法.
作者：任从棉；李志军 刊期： 2013年第03期
目的 探讨慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的变化,评估血清NT-proBNP水平检测的临床意义.方法 采用电化学发光免疫分析法、三电极法分别测定70例COPD患者、39例慢性支气管炎患者、37例上呼吸道感染患者和5例健康对照者的血清NT-proBNP及PaO2、PaCO2水平并进行分析;同时按照中华医学会呼吸病学会慢性阻塞性肺病诊断标准,将70例COPD患者分为急性发作期COPD(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)组(n=55)和稳定期COPD组(n=15),比较两组间患者的血清NT-proBNP及PaO2,PaCO2水平变化;评估血清NT-proBNP水平对COPD患者的诊断及病情监测的临床价值.结果 COPD、慢性支气管炎、上呼吸道感染患者的血清NT-proBNP水平均显著高于对照组[COPD组:277.40(127.25～775.43)pmol/L;慢性支气管炎组203.10(174.40～439.40)pmol/L;上呼吸道感染组:52.30(25.39～138.50)pmol/L;对照组:26.10(16.30～51.98)pmol/L,P均<0.01],COPD、慢性支气管炎患者血清NT-proBNP水平显著高于上呼吸道感染患者(P<0.01);且AECOPD患者血清NT-proBNP水平[372.20(206.15～838.05)pmol/L]显著高于稳定期COPD患者[101.30(43.72～100.60)pmol/L,P<0.05].进一步相关性分析显示,上述呼吸系统疾病患者的血清NT-proBNP水平与PaO2呈显著负相关(r=-0.275,P=0.001),与PaCO2呈显著正相关(r=0.210,P=0.011).结论 血清NT-proBNP水平与呼吸系统疾病患者的严重程度相关,可作为COPD诊断及病情监测的有效标志物.
作者：唐海霞；王苏梦；宋佳希；汪俊军 刊期： 2013年第03期
该文就精液检测的现状进行评述,提出精液病理学检测的目的、范围和精液脱落细胞学内容以及生精细胞凋亡检测的临床意义,对取代睾丸活检的可行性进行探讨.对病毒性感染:人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型和流行性腮腺炎感染,导致睾丸损伤及生精细胞凋亡引起不育症进行分析.对精液中检出包涵体和类型进行报道,介绍急性睾丸炎病理组织变性与精液中检出含铁血黄素结晶形态特征.
作者：曹兴午；王立红；袁长巍 刊期： 2013年第03期
目的 对中国两个高IgM综合征(HIGM)家系进行基因突变检测,并应用生物信息学软件加以分析诊断.方法 该研究以2012年中国贵州省收治的两名HIGM先证者(男孩)及其家系成员为研究对象,对先证者的CD40LG,AICDA,CD40和UNG基因外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物经纯化后Sanger法测序.应用Mutation Surveyor软件检测序列图谱中所有的基因变异点,并运用Alamut软件预测变异的致病性.同时选取100位排除患有HIGM疾病健康者的DNA,作为基因多态性对照.结果 基因测序分析发现:第1例先证者为7岁男孩,其CD40LG基因第5外显子存在错义突变p.Gly167Arg(c.499G>C),该患者母亲携带此错义突变;第2例先证者为3岁男孩,其CD40LG基因第1外显子存在单碱基缺失c.114delG,导致39位后编码氨基酸发生移码突变,并在53位引入终止密码,形成截断型蛋白(p.Ser39GlnfsX14),患者母亲同样携带此突变.两个突变均未在100位排除患有HIGM疾病健康者中发现.结论 该研究建立了HIGM准确、简便的基因突变筛查办法,CD40LG基因c.114delG突变为国际上首次报道.
作者：郁俐；汪希珂；王剑 刊期： 2013年第03期
目的 运用ROC曲线评价前列腺酸性磷酸酶(PAP)在诊断前列腺癌骨转移中的应用价值.方法 参照<外科学>(第7版),根据病理组织学检查,并结合病史及PSA水平,收集前列腺疾病106例,分为三组:①前列腺癌骨转移组,36例;②前列腺癌未转移组,20例;③前列腺良性疾病组,50例.另设健康对照组50名.采用化学发光法对四组人群血清中的PAP进行定量检测.比较四组结果间的差异,评估PAP在前列腺癌骨转移中的诊断价值.结果 前列腺癌骨转移组为23.497(3.553~100.000)ng/ml,高于未转移组的3.638(0.361~12.694)ng/ml,前列腺良性疾病组的1.955(0.721~4.448)ng/ml和健康对照组的1.350(0.130~1.780)ng/ml,差异有统计学意义(H=104.473,P=0.000),对实验数据进行ROC曲线分析显示,PAP诊断前列腺癌骨转移组的ROC曲线下面积(AUC)为0.940,诊断临界值为9.528 ng/ml,其诊断敏感度为80.55%,特异度为95.00%,阳性预期值(PV+)为96.67%,阴性预期值(PV-)为73.08%,准确率为85.71%,Youden值为75.60%.结论 PAP在诊断前列腺癌骨转移中具有较好的敏感性和较高的特异性,可作为前列腺癌骨转移诊断以及与其他前列腺疾病的鉴别诊断指标.
作者：严明生；王强；彭雪莲；王东升；蔡艳娟；汪光蓉；张瞿明；唐中；张国元 刊期： 2013年第03期
目的 了解汉族健康人群中雌激素受体(ER)基因多态性的分布,为研究ER表达与某些疾病之间的关联奠定基础.方法 选取2011年怀化市第一人民医院体检中心健康体检者100名,采用限制性片段长度多态性(restiction fagment length polymorphism,RFLP)方法检测其ERα,ERβ酶切位点多态性.结果在该人群中,ERα PvuII基因型的频率:PP型16%,Pp型40%,pp型44%,其等位基因发生频率以p等位基因常见(64%),其次为P等位基因(36%);ERα XbaI基因型的频率:XX型7%,Xx型30%,xx型63%,其等位基因发生频率以x等位基因常见(78%),其次为X等位基因(22%).ERβ RsaI基因型的频率:RR型14%,Rr型55%,rr型31%,其等位基因发生频率以r等位基因常见(59%),其次为R等位基因(41%);ERβ AluI基因型的频率:AA型1%,Aa型17%,aa型82%,其等位基因发生频率以a等位基因常见(90%),其次为A等位基因(10%).经χ2检验 (χ2=0.004～2.77,P值均>0.05),四种基因的基因型及等位基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡,具有群代表性.结论 湖南怀化地区汉族人群ERα PvuII位点存在P/p多态性,ERα XbaI位点存在X/x多态性,ERβ RsaI位点存在R/r多态性,ERβ AluI位点存在A/a多态性.
作者：廖晓敏；周细国；曾静；陈琳 刊期： 2013年第03期
目的 对同一医院内血清葡萄糖在两台生化分析仪上检测可比性进行验证.方法 极差检验可比性方法包括:选择比对的分析物,选择比对的仪器,确定可比性检验接近的分析物浓度,计算用于比对样本选择的期望的浓度,选择可比性的样本,设定可比性检验的临界差值,患者结果可比性检验可接受标准,确定检测重复的次数.结果 两台生化分析仪(仪器A和B)在两个浓度水平质控制物(质控物1和2)的不精密度(CV%)分别为:1.17%,0.92%;1.47%,1.44%.质控物1合成的CV为1.76%,质控物2合成的CV为1.46%.患者样本范围计算为控制物均值的20%,即为4.33～6.49 mmol/L和10.48～15.72 mmol/L.对于比对试验选择在分析仪器A上样本初的值为5.54 mmol/L (样本1)和13.25 mmol/L(样本2).临界差值可接受标准定为1.90%.根据极差检验的临界差值(%)以及上述的信息可选择两个不同水平的患者样本,且每一样本只作三次检测来检验两台仪器之间是否存在差异.两台检测系统对于两个浓度水平的患者样本的极差值分别为1.83%和1.30%,因为极差值小于临界差值,对于两样本方法的可比性对于给定的已知的差值是可接受的.结论 极差检验方法为评估在一个医疗机构内检测同一患者样本的不同系统的可比性提供了指南,比传统的方法比对试验简单、易实施.
作者：赵海建；王萌；张传宝；王薇；闫颖；张天娇；王治国 刊期： 2013年第03期
目的 检测分析原发性肾病综合征(NS)患儿血清全基因组微小核糖核酸(miRNA)表达谱,验证其中表达上调的miR-30a-5p,探讨其作为NS分子诊断指标的可能性.方法 收集南京军区南京总医院2010～2011年期间33例住院NS患儿未经治疗前血清和尿液样本,同时以30例年龄、性别匹配的健康儿童作对照.用高通量的TaqMan低密度芯片技术分别检测NS患儿和健康儿童的混合血清全基因组miRNA的表达量,再用TaqMan实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对在患儿血清中表达上调的miR-30a-5p进行验证,同时测定miR-30a-5p在尿液中的含量.结果 低密度芯片结果显示,30种miRNA在患儿血清中的表达量是健康儿童的2倍以上,其中miR-30a-5p为正常对照的104倍.qRT-PCR检测证实,miR-30a-5p在患儿血清中的含量4.34±0.08,显著高于对照组1.00±0.02(Z=5.916,P<0.000 1),在患儿尿液中的水平也明显升高(3.44±0.05 vs 1.00±0.04)(Z=3.312,P=0.001).用于诊断NS的血清miR-30a-5p ROC曲线下面积(AUCROC)为0.960(95% CI,0.915～1.000),敏感度和特异度均为98.3%.相关性分析显示,血清或尿液中的miR-30a-5p含量与患儿年龄、性别、肾功能及血脂水平均无明显关联(P>0.05).结论 NS患儿血清miRNA表达谱与健康儿童有明显差异,miR-30a-5p在患儿血清及尿液中水平显著升高,与NS密切相关,是NS潜在的分子诊断指标.
作者：时永辉；罗阳；王成；陈熹；曾科；张辰宇；夏正坤；蔡晓懿；汪俊军；张春妮 刊期： 2013年第03期
4例血清标本同时做TP-ELISA,TPPA和RPR平行试验,结果显示4例标本TP-ELISA全为阴性,TPPA全部为阳性,RPR1:8,1:8,阴性,1:64,结合临床诊断,4例患者全部确诊为梅毒感染者.这一结果说明,部分梅毒感染者没有产生与TP-ELISA试剂结合的相应的抗体,可能与个体的特殊性有关,另外一种可能,ELISA试剂没有涵盖所有的梅毒感染者.
作者：李韶深；焦春梅；刘春莉；韩玉华 刊期： 2013年第03期
目的 探讨标本前处理因素对临床全血标本血铅测定结果的影响.方法 使用钨舟原子吸收光谱仪技术测定全血标本血铅浓度,比较标本浓度、保存时间、标本管类型、反复冻融次数等因素对检测结果的影响,评价可能对血铅定量检测结果的标本前处理因素.结果 ①相同的保存条件下,不同浓度的标本显示出不同的稳定性;②大于三次的反复冻融将导致血铅测定结果偏高;③2～8℃保存130天未见血铅测定结果出现升高或降低.④应用两种厂家肝素抗凝管采集的标本进行血铅检测,结果无统计学差异,提示使用同一抗凝剂的不同厂家的抗凝管不影响检测结果.结论 影响血铅检测结果特别是冻融后检测结果的因素较多,检测前需要考虑标本浓度水平,保存温度,冻融次数等多种情况,严格控制这些因素能够保证血铅检测结果稳定再现.
作者：甘春玉；石华；李文胜；方晶晶；王永文；张鸽 刊期： 2013年第03期
除传统的抗人球蛋白实验外,酶联免疫吸附实验、流式细胞仪检测以及表面等离子体共振也是常见的用于检测ABO血型抗体的方法,了解这些方法的原理和优缺点对提高检验质量具有重要意义.
作者：杨树法；赵娟 刊期： 2013年第03期
目的 调查西安地区女性生殖道感染HPV基因型分布状况,了解不同亚型HPV在女性中的感染情况及流行病学意义.方法 对2012年6月～2013年2月在陕西省人民医院妇科门诊及住院患者阴道分泌物标本采用PCR-反向斑点杂交法检测19个HPV基因型,包括低危型(HPV6,11和43)和高危型(HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68和CP8304亚型).结果 1 786例样本中检出HPV阳性者514例,检出率为28.8%,HPV阳性者中低危型占30.9%,高危型占39.7%,两型和两型以上混合感染占29.4%;1 786例样本中感染率高的为低危HPV6型(9.1%),其他型别分别为HPV16(5.5%),HPV11(3.9%),HPV52(3.8%),HPV58(2.7%),HPV66(2.4%),HPV53(2.0%),HPV68(1.8%),HPV51(1.6%),HPV39(1.4%),HPV33(1.2%),HPV31(1.0%),HPV-CP8304(1.0%),HPV18(0.7%),HPV43(0.7%),HPV59(0.5%),HPV56(0.11%),HPV35(0.10%)和HPV45(0.09%).结论 西安地区女性生殖道感染HPV基因分布有区域特点,HPV检测具有重要的流行病学意义.
作者：李岳西；王华；苏宝凤；苍金荣；刘文康 刊期： 2013年第03期
目的 探讨肌钙蛋白(cTnI)和低密度脂蛋白氧化修饰期联合检测在诊断急性冠脉综合征(ACS)患者病变程度中的价值.方法 采用共扼双烯(CD)法测定低密度脂蛋白氧化修饰期,胶乳增强免疫比浊法测定cTnI,经检测ACS患者80例,其中急性心肌梗死(AMI)30例、不稳定性心绞痛(UAP)20例、稳定心绞痛(SAP)患者30例,并与正常对照组40例比较.结果 ACS不同病变程度组即急性心肌梗死组、不稳定性心绞痛组和稳定性心绞痛组患者与对照组cTnI含量和LDL氧化修饰期参数差异有统计学意义(t=10.24,15.48,22.49,P＜0.01;t=32.76,25.35,22.05,P＜0.01).而急性心肌梗死组和不稳定性心绞痛组cTnI含量差异无统计学意义(t=0.879,P＞0.05),LDL氧化修饰延滞时间在上述两组间差异有统计学意义(t=8.476,P＜0.05).结论 ACS患者联合检测cTnI和LDL氧化修饰期的变化,可界定ACS病变程度.
作者：王维梅；再努拉·阿不都艾尼；王长友 刊期： 2013年第03期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
