王继贵
目的 构建特异性沉默Ku80基因的真核表达栽体,检测其对乳腺癌基因HER2表达的影响.方法 设计2务表达短发夹RNA的互补DNA序列,分别克隆至真核表达载体pGCsi-U6/Neo/DsRed构建shRNA-Ku80,转化大肠埃希菌DH5α菌株扩增后,提取质粒测序分析,以相同的方法构建并鉴定Ku80基因的真核表达载体pEGFP-N1-Ku80;将2种shRNA-Ku80分别与pEGFP-N1-Ku80共转染HEK293细胞株,通过流式细胞仪检测荧光强度筛选高效敲减靶点,并在基因和蛋白水平观察抑制Ku80对乳腺癌基因HER2表达的影响.结果 成功构建Ku80特异性shRNA表达载体,shR-NA-Ku80对靶点Ku80敲减效率达到59.50％,抑制Ku80表达使乳腺癌基因HER2在基因和蛋白水平明显降低.结论 成功构建shRNA-Ku80载体,在体外可有效抑制Ku80的表达,使癌基因HER2的表达明显下调,提示Ku80有望成为乳腺癌治疗的基因靶点.
作者：王萍；杨勤；官全生 刊期： 2014年第02期
目的 建立深圳龙华新区健康成年女性人群血清CA125和CA153含量水平的参考区间.方法 采用罗氏Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪对2 745例健康成年女性人群的新鲜血清进行CA125及CA153含量测定,检测结果按CLSIC28-A3(临床实验室参考范围的定义和确认,第3版)进行统计处理,确定健康成年女性人群CA125及CA153含量水平正常参考区间,并分析成年女性人群之间CA125及CA153含量水平变化情况.结果 CA125及CA153检测结果呈偏态分布,龙华新区健康成年女性CA125总体参考区间为0.93～33.12U/ml及CA153总体参考区间为0.67～26.09U/ml;与CA125及CA153推荐参考区间(35±0.7 U/ml)和(28士0.6 U/ml)比较差异无统计学显著性意义(x2=0.762,P=0.378,P＞0.05),成年女性人群CA125及CA153含量随年龄增加而呈逐渐下降趋势;月经期及孕期血清中CA125及CA153含量明显高于其他人群;更年期低于除50岁以上外其他人群.结论 龙华新区健康成年女性人群CA125及CA153含量水平的参考区间稍低于推荐参考区间,两者比较差异无统计学显著性意义.依据实验允许误差范围,本区CA125及CA153的含量水平参考区间可以采用相应的推荐参考区间.
作者：施俊柱；刘爱胜；陈荣贵；文艳 刊期： 2014年第02期
目的 探讨急性脑梗死患者早期缺血修饰清蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的临床意义.方法 采用终点法和电化学发光法分别对50例入院12 h内的急性脑梗死患者和50例体检健康者血清中的IMA和NSE进行测定.结果 急性脑梗死组血清中IMA的ACB值(56.7±6.10 U/ml)低于对照组(72.55±5.53 U/ml),差异有统计学意义(t=-13.39,P＜0.01);急性脑梗死组血清中NSE水平(23.03±6.91 ng/ml)高于对照组(10.85士2.61 ng/ml),差异有统计学显著性意义(t=11.94,P＜0.01).结论 IMA可以帮助判断脑组织缺血、缺氧程度,NSE可以帮助判断脑组织受损程度,两者联合检测可以作为急性脑梗死早期诊断、判断疾病缺血和损伤严重程度的指标.
作者：石坚；蒋洪敏 刊期： 2014年第02期
近年来,随着器官移植、艾滋病、恶性肿瘤放化疗等引起的免疫低下患者的增多,侵袭性曲霉菌病(IAD)的发病率也大幅度增加.尽管目前检测曲霉菌的方法很多,但尚未有一种能满足临床对曲霉菌病早期、快速、准确诊断的要求,致使曲霉菌病的病死率仍居高不下.PCR检测技术在生物基因相关方面的研究有很多突出优点,已有多种类型的PCR技术被广泛应用于临床诊断曲霉菌病,但一些方法的检测环节及检测性能仍存争议,以致尚未有被公认作为临床曲霉菌检测的标准化参考方法.该综述主要对曲霉菌PCR检测方法标准化的相关要素进行探讨,为今后曲霉菌PCR检测方法的研究及其标准化提供参考.
作者：廖新辉；易浔飞；兰小鹏 刊期： 2014年第02期
目的 用新型卟啉化合物分光光度法和原子吸收法检测精浆锌结果,观察比较其对诊断男性不育症的意义.方法 用新型卟啉化合物与精浆锌反应,用分光光度计比色,与标准品比较计算出精浆锌浓度,同时与原子吸收法检测结果比较.结果 原子吸收法测定200例健康组精浆锌为2.16±0.692 3 mmol/L,分光光度法测定200例健康组精浆锌为2.14±0.871 0 mmol/L,两种方法的相关系数r=0.998 6,差异无统计学意义(t=1.29,P＞0.05).用分光光度法检测实验组210例不育症患者精浆锌均值为1.65±0.571 mmol/L,健康组200例已育男性精浆锌均值为2.14±0.871 mmol/L,两组相比差异有统计学意义(t=10.43,P＜0.05).结论 新型卟啉化合物分光光度法是测定水中锌的一种简便方法,通过试验创新用于检测精浆锌,操作简单、灵敏度高、准确性和重复性好,与原子吸收法呈正相关(r=0.998 6),对男性不育症的诊断有很大参考价值,值得在基层医疗机构推广应用.
作者：李朝献；张志华；李妤蓉 刊期： 2014年第02期
目的 了解人免疫缺陷病毒(HIV)在河南省肿瘤患者中的感染分布情况,以协助临床诊断和治疗,防止HIV院内传播.方法 对2012年3月～2013年2月期间,郑州大学附属肿瘤医院门诊及住院的35 585名肿瘤患者血清进行HIV抗体检测,并按性别、年龄和部位计算频数、构成比和感染率.结果 35 585例标本中阳性21例(男性7例,女性14例),年龄27～67岁,感染率是0.06％,颈部肿瘤感染构成比高为23.8％(5/21).结论 肿瘤患者HIV抗体阳性率较高,对其进行HIV常规检测,减少医源性感染,有利于艾滋病的防控工作.
作者：王书锋；王园园；周丽莉 刊期： 2014年第02期
目的 探讨血清肿瘤标志物人附睾分泌蛋白4(HE4),CA125和ROMA指数在卵巢癌预测和诊断中的应用价值.方法 用化学发光法检测手术前卵巢癌患者96例和卵巢良性肿瘤患者60例及健康体检者75例的血清中HE4,CA125水平,并计算出卵巢癌风险预测模型(ROMA)值,联合绝经状态预测患卵巢癌的风险性.结果 卵巢癌组HE4,CA125和ROMA值三项指标的中位水平分别为222.2 pmol/L,153.9 U/ml和73.0％,与卵巢良性肿瘤组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).将HE4和CA125的cut-off值定在140 pmol/L和35 U/ml,绝经前、后妇女ROMA指数cut-off值定为11.4％和29.9％,则HE4,CA125和ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度分别为72.9％,89.6％和87.5％;特异度分别为98.3％,55.0％和90.0％;准确度分别为87.1％,81.9％和90.5％;联合检测HE4,CA125与ROMA指数预测和诊断卵巢癌的灵敏度、特异度分别为97.0％和92.8％.结论 联合检测血清HE4和CA125并计算出ROMA指数有助于预测腹盆腔肿块患者患卵巢癌的风险性,鉴别卵巢肿瘤的良恶性,提高卵巢癌的早期诊断率.
作者：朱自力；戴伟萍；肖春红；顾建美；张金业 刊期： 2014年第02期
目的 研究癌性贫血患者中骨形成发生蛋白(BMP6)和BMP4的表达水平,以及与铁调素调节蛋白(s-HJV和Hepcidin之间的关系.方法 应用双抗夹心生物素亲和素-酶联免疫吸附试验方法检测53例癌性贫血患者和52例无贫血癌症患者的血清BMP6,BMP4,s-HJV和Hepcidin水平,并分析它们之间的相互关系.结果 ①贫血组BMP6和Hepcidin分别为434.53±212.11 ng/ml和5.68±3.89 μg/L,均高于无贫血组癌症患者(334.37±171.32 ng/ml和4.60±2.28 μg/L)(分别为P＜0.01或P＜0.05);s-HJV则为0.69±0.28 ng/ml,明显低于无贫血组癌症患者1.07±1.00 ng/ml(P＜0.01).而癌症贫血患者的BMP4表达水平与癌症无贫血患者比较,差异无统计学意义.②BMP6与s-HJV,Hb均呈负相关(r=-0.253 6,-0.294 9;P均＜0.01),但与Hepcidin不相关.而BMP4则与Hb,s-HJV和Hepcidin三者均无相关关系.结论 癌性贫血患者高表达BMP6和Hepcidin,低表达s-HJV.BMP6和s-HJV呈负相关关系,BMP6,s-HJV和Hepcidin在贫血的发生发展中起重要的作用.
作者：史玉娟；潘湘涛 刊期： 2014年第02期
采用Excel VBA对即刻法质控方案中的公式、函数、质控判断等工作适当编程,经固化、隐藏、加密、自动化等处理后制作安全快捷的数据处理模板;使用模板时只需录入质控数据,右击鼠标立即显示每次质控情况(20次以内),如:SI上下限计算、N2s和N3s自动查找与比较、质控判断等,并且不用担心操作失误改变模板内容,应用方便快捷.
作者：罗士来；庄小青；夏前凤；薛梦；赵文静；杨露；庄雪 刊期： 2014年第02期
目的 对四种不同样本保存方法用于强直性脊椎炎(AS)患者流式细胞术测定B27表达情况的临床效果进行评估;从而探讨一种更好的流式细胞术B27样本保存方式的可能性.方法 收集武汉大学人民医院2009年10月～2012年11月间门诊及住院AS 155例患者外周血标本作为研究对象,将上述样本分别按照不同的保存方式分为室温保存全血细胞(RTWB)、冻存单个核细胞(FMNC)、冻存去红细胞的白细胞(FWBC)、冻存血小板(FPLT)、新鲜全血样本(IWB)和新鲜血小板(IPLT);采用流式细胞术(FCM)对上述几种方法保存的样本HLA-B27表达情况进行测定;分别计算出上述不同样本保存方法用于AS诊断的诊断效能指标(灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预告值、阴性预告值),以评估不同样本保存方法对AS临床诊断价值的影响.结果 FMNC,FWBC,FPLT与IWB和IPLT用于AS病诊断的灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、阳性预告值和阴性预告值分别均为87.1％,88.5％,11.5％,12.9％,86％和89.4％,诊断效能指标完全一致;而RTWB敏感度和特异度分别为77.4％和80.8％,明显低于新鲜标本(x2=11.23,8.11,P＜0.05),误诊率和漏诊率分别为19.2％和22.6％,高于新鲜标本(x2=10.53,7.85,P＜0.05).结论 该研究表明采用一定方式冻存的外周血样在流式细胞术HLA-B27测定用于AS病的诊断中能够达到与新鲜样本一样的诊断效能,FPLT样本进行FCM B27测定结果可靠且操作简单、高效,更适合临床诊断.
作者：洪俊；饶永彩 刊期： 2014年第02期
目的 探讨血清N端脑钠肽前体在心脏功能衰竭、脑梗死及肾脏功能衰竭疾病的诊断以及治疗监测中的研究.方法 选择健康体检者30例作为正常对照组,同时选取经临床确诊的心功能衰竭患者101例、脑梗死患者95例及肾脏功能衰竭患者66例;采用罗氏全自动电化学发光免疫分析系统检测受检者血清N端脑钠肽前体浓度.结果 正常对照组、肾功能衰竭组、心功能衰竭组及脑梗死组血清N端脑钠肽前体的检测结果((x)士s,pg/ml)分别为:55.41士25.63,15 110.08±22 951.45,5 082.35±9 546.15和1 960.06±2 653.07.正常对照组与临床三组间及临床三组之间结果经t检验分析,t值在-2.73～6.99之间,P均＜0.01,差异有统计学意义.结论 血清N端脑钠肽前体浓度水平不仅是评价和监测心功能状态的良好指标,同时对脑梗死及肾脏功能衰竭患者的诊断与治疗监测亦具有重要的临床意义.研究结果表明,即血清N端脑钠肽前体浓度水平在临床疾病的诊断中具有非常广泛的应用价值.
作者：李玲；王华；刘文康；解娟；王俊燕；任健康 刊期： 2014年第02期
目的 研究新喋定、CA19-9和组织多肽特异性抗原(polypeptide-specific antigen,TPS)对胰腺癌和慢性胰腺炎的鉴别诊断价值.方法 选取2010～2012年75名胰腺癌患者和62例慢性胰腺炎患者,同时选择50例健康人作为对照,采集临床资料,检测血清CA19-9、新喋定和TPS,并进行统计学分析.结果 胰腺癌惠者的新喋定(17.7 nmol/L),CA19-9(102.2U/ml)和TPS(135.3 U/L)高于慢性胰腺炎患者(6.1 nmol/L,23.5 U/ml,61U/L)(p＜0.01).慢性胰腺炎患者TPS和CA19-9高于正常对照组(40U/1,9.3 U/ml) (P＜0.01),而新喋定差异无统计学意义(P＞0.05).新喋定对胰腺癌的灵敏度和特异度(92.2％,87.3％)高于CA19-9(82.2％,75.3％)和TPS(72.2％,64.3％).结论 新喋定对鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎具有较好的诊断价值.
作者：伍海英；桂满元；刘卓然 刊期： 2014年第02期
目的 了解铜陵地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,分析该地区HBV不同基因型别与肝功能损害、病毒复制水平及血清标志物的关系,探讨不同基因型的临床意义.方法 采用聚合酶链式反应-反向点杂交法(polymerase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)对铜陵地区228例ABV阳性感染者的血清分别进行HBV基因型的分型、HBV-DNA载量以及HBV血清标志物和肝功能等的检测,并结合其指标进行相关性分析.结果 在228份患者的血清样本中,226份样本成功分型,其中B型54.4％(124/228),C型37.3％(85/228),B/C混合型7.5％(17/228),2例未检出占0.88％(2/228).在各临床分型的慢性HBV感染者中,B基因型在慢性乙型肝炎组(CHB)、肝硬化组(LC)和原发性肝细胞癌组(HCC)中的构成比依次为61.8％,36.4％和60％,C基因型依次为25.7％,63.6％和40％,B型在CHB组占优势(x2=19.253,P=0.001);C型在LC组占优势,差异有统计学显著性意义(x2=9.818,P＜0.001).C基因型HBV-DNA载量明显高于B型及B/C混合型,差异具有统计学非常显著性意义(P＜0.01).在不同基因型HBV患者中,除了性别,男性高于女性外,患者的生化指标经方差分析各组差异均无统计学显著性意义(P＞0.05).结论 铜陵地区HBV基因型主要以B型为主,对HBV基因分型有助于了解患者的病情,对HBV感染患者的临床诊治具有重要指导意义.
作者：唐吉斌；翁伟；张盛；宋有良；焦瑞宝；章文 刊期： 2014年第02期
目的 分析伴t(8;21)易位急性髓细胞初诊白血病患者FAB分型、血常规、骨髓细胞形态学、细胞遗传学及临床预后特点.方法 20例患者为中日友好医院2004年～2011年按WHO标准确诊的急性髓细胞白血病(AML)患者,血常规采用XE-2100全自动分析仪分析;骨髓细胞形态学检测对骨髓涂片进行瑞氏-姬姆萨染色,显微镜计数细胞;细胞遗传学检测为常规培养骨髓细胞,采用G显带技术对染色体核型进行分析.结果 伴t(8;21)易位AML患者中55％(11/20)患者外周血白细胞升高,20％(4/20)患者白细胞减低,所有患者均伴血小板减低.85％(17/20)患者骨髓涂片中可见奥氏小体.根据FAB分型,20例患者中15％(3/20)诊断为MDS-RAEB,20％(4/20)为MDS-RAEBt,55％(11/20)为AML-M2,10％(2/10)为AML-M4.55％(11/20)患者为单纯t(8;21)易位,45％(9/20)患者为t(8;21)易位同时伴有其它异常,其中伴性染色体丢失占所有患者35％(7/20),伴有9q-占所有患者的10％(2/20).82.4％(14/17)患者能达到完全缓解.结论 伴t(8;21)易位AML患者可见于FAB分型的不同亚型,主要见于AML-M2.t(8;21)患者常伴有附加异常,以性染色体丢失常见.t(8;21)易位患者疗效较好.
作者：沈军；马亮；钟明华；韩呈武；曹永跃；湛玉良；曹永彤 刊期： 2014年第02期
目的 研究肾移植术后患者抗HLA抗体与移植肾长期存活的关系.方法 选择2008年前已行移植肾手术的652例肾移植患者,于2009年10月～2010年4月检测群体反应性抗体(PRA),而后每年连续观察肾功能.结果 652例肾移植患者中,抗HLA抗体阳性患者81例,占12.42％(81/652),移植肾功能下降或丧失患者71例,占87.65％(71/81).PRA阴性患者571例,占87.58％(571/652),移植肾功能下降患者44例,占7.71％(44/571).PRA阳性与阴性对肾移植患者移植肾功能的影响具有统计学差异(x2 =306.64,P＜0.001).结论 抗HLA抗体可能是引起移植肾慢性失功的重要因素之一.
作者：贾保祥；武俊杰；徐秀红；尚东浩 刊期： 2014年第02期
目的 鉴定一位育龄妇女所携带的在中国人中罕见的β珠蛋白生成障碍性贫血基因突变并对其家系进行研究.方法 将先证者及其他3位家系成员(父亲、母亲与丈夫)一起作为调查分析对象.血液学表型分析采用常规红细胞指数及高效液相色谱技术(HPLC);α与β珠蛋白生成障碍性贫血常规基因检测分别采用Gap-PCR和反向点杂交法(RDB).另外对常规基因检测不能确诊的β珠蛋白生成障碍性贫血基因突变进行β珠蛋白基因序列测定.结果 先证者及其父亲具有典型的β珠蛋白生成障碍性贫血血液学表型,RDB法未检测出已知的β珠蛋白生成障碍性贫血突变类型,测序显示这两位家系成员的β珠蛋白基因共缺失CD89～CD92全部的密码子和CD93第1与第2位的核苷酸(-AGTGAGCTG-CACTG,-14bp),并发生了移码突变,使CD89位上提前出现终止密码子TGA;先证者丈夫基因型为CD41-42(-TCTT)/N.结论 CD89～93(-14bp)移码突变在中国人群中属于比较罕见的β珠蛋白生成障碍性贫血类型,其在β珠蛋白生成障碍性贫血高风险家庭中的检出,对β珠蛋白生成障碍性贫血的产前诊断工作有参考价值.
作者：曾劲伟；方颖迪 刊期： 2014年第02期
目的 分析BCR/ABL阴性的骨髓增殖性疾病(MPD)患者JAK2V617F点突变的突变率及其外周血细胞水平,为其分子诊断及靶向治疗提供理论依据.方法 应用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR),对158例初诊患者JAK2基因的V617F位点进行扩增,并对其发病年龄和临床血液学指标进行统计分析.结果 158例患者JAK2V617F总突变率为72.15％,其中真性红细胞增多症(PV) 78.46％,原发性血小板增多症(ET) 69.05％和特发性骨髓纤维化(PMF)55.56％.血液学指标显示PV患者中JAK2V617F突变型组的外周血血红蛋白水平和白细胞计数分别为(200.26±19.72)g/L,(17.57±10.96)×109/L,显著高于野生型组(t=1.636～2.406,P值均＜0.05).ET患者中JAK2V617F突变型组的年龄、红细胞计数和白细胞计数分别为(60.41±18.52)岁,(4.72士1.51)×1012/L,(14.78±12.21)×109/L,显著高于野生型组(t=1.634～3.284,P值均＜0.05).PMF患者中JAK2V617F点突变型组的红细胞计数和血红蛋白含量分别为(4.51±1.42)×1012/L和(135.58±34.76) g/L,显著高于野生型组(t=2.274～2.810,P值均＜0.05).结论 JAK2V617F有助于BCR/ABL阴性的不同类型MPD的诊断.
作者：韩瑞玲；李艳；汪明；童永清；吴薇 刊期： 2014年第02期
目的 分析急性白血病免疫分型的特点,为临床诊断提供快速准确的实验室依据.方法 回顾93例初发急性白血病的临床资料,采用流式细胞术进行骨髓免疫分型.结果 93例初发急性白血病中,急性髓系白血病(AML) 66例,其抗原表达从低到高依次为:CD7 (16.7％),CD15 (30.3％),CD71 (31.2％),CD11B (34.5％),CD34 (48.5％),CD117(50.0％),HLA-DR(65.2％),CD13(70％),CD33(86.4％)和CD38 (92.4％).急性B淋巴细胞白血病(B-ALL) 22例,其抗原表达从低到高依次为:CD34 (36.4％),CD20 (50.0％),CD38 (63.6％),CD10 (72.7％),HLA-DR (86.3％)和CD19(95.5％).急性T(T-ALL)淋巴细胞白血病5例,其抗原表达从低到高依次为:HLA-DR(60.0％),CD34 (60.0％),CD2(80.0％),CD7 (80.0％)和CD38(100.0％).结论 流式细胞术免疫分型能够快速、准确地为临床急性白血病的分型诊断提供依据.
作者：袁莉；杨玉琮；陈葳 刊期： 2014年第02期
目的 以基于生物学变异确定的允许不精密度,1/3TEa,1/4TEa作为质量规范,评价2012年4月份参加卫生部临检中心心肌损伤标志物的380家单位和脑钠肽/N末端脑钠肽140家单位的室间质评单位室内质控不精密度.方法 组织全国心肌损伤标志物和脑钠肽/N末端脑钠肽室间质评参加单位回报2012年4月份当月在控室内质控变异系数,对肌酸激酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白T(cTnT)、脑钠肽(BNP)和N末端前脑钠肽(NT-proBNP)7个检测项目(其中CK-MB项目,回报单位分别为μg/L和U/L,视为两个检测项目)2个批号的变异系数进行统计分析,判断室内变异系数小于基于生物学变异导出的不精密度(CV％)质量规范和1/3TEa,1/4TEa质量规范所占的比例.结果 以80％实验室变异系数小于质量规范作为判断标准,结果显示:只有cTn Ⅰ的1批号不能满足1/3TEa的要求;而要满足1/4TEa的要求只有NT-pro BNP的两个批号同时满足;对于低标准所有项目都可以满足,对于适当标准只有CK-MB两个批号同时满足;目前还没有项目可以满足佳标准.结论 目前,大多数实验室都可以满足1/3TEa的精密度要求和允许不精密度的低标准,但还不能满足适当标准,说明我国实验室在精密度性能上还需要进一步提高.
作者：张妍；王薇；何法霖；钟堃；王治国 刊期： 2014年第02期
目的 了解常见输血不良反应发生率及相关因素调查分析.方法 收集东莞市4家医院在2009～2012年发生的输血不良反应临床记录162例,采用医学统计学方法进行数据分析.结果 输血不良反应总发生率为0.26％,其中女性受血者输血不良反应发生率明显多于男性受血者(x2 =41.2,P＜0.05),有多次输血史者输血不良反应发生率明显多于首次输血者(x2=101.7,P＜0.05),输注血浆后输血不良反应发生率高达0.79％,明显高于其他血液产品(x2=78.4,P＜0.05),发生输血不良反应与临床用血科室和ABO血型无关.输血不良反应类型以过敏反应发生率高(74.1％),其次为非溶血性发热反应(24.1％).结论 输血不良反应的总发生率为0.26％,以过敏反应和发热反应为主;临床规范合理用血和尽量减少血浆应用可减少输血不良反应发生.
作者：陈金凤；叶柱江；何子毅 刊期： 2014年第02期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
