张翠平;陈婷婷;王成;于汉卿;张辰宇;张春妮
目的 探讨半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)检测的实验室环境影响因素以及如何降低假阳性,提高检测的准确性.方法 选择2016年6月~2017年4月在南京医科大学第一附属医院初诊为疑似侵袭性真菌病的住院患者为研究对象,在不同的实验室环境下进行ELISA法检测血清GM.在一般环境下检测3407例样本,进行随机空气培养,观察培养结果并鉴定出菌落种类,并以培养菌落制备混悬液进行处理取上清进行GM检测.在严格控制环境下检测1167例样本,并进行两组之间的比较.结果 在一般环境下检测的真阳性率为3.38%,敏感度为63.0%(34/54),特异度为40.9%(56/137),阳性预测值(positive predictive value,PPV)为29.6%;在严格控制环境下真阳性率为3.94%,敏感度和特异度分别为79.4%(27/34)和34.5%(10/29),PPV为58.7%(27/46).两者之间,后者PPV明显高于前者,差异有统计学意义(χ2=11.85,P<0.001).空气培养、鉴定结果及GM检测结果表明,随机污染的曲霉菌属导致较强的假阳性结果,毛霉菌属导致中度的假阳性结果,而枯草芽孢杆菌导致轻度假阳性结果.结论 环境中的枯草芽孢杆菌,曲霉菌和毛霉菌对检测环境的随机污染是导致GM检测假阳性结果的重要原因,通过对检测环境严格的控制和消毒措施可以降低假阳性,改善检测结果,提高检测结果的敏感性.
作者:娄鉴芳;梅亚宁;张世昌;徐华国;王加 刊期: 2019年第01期
Galectin-4是半乳凝集素(galectins)亚家族成员,广泛分布于各种动植物组织中,并参与各种如细胞增殖、凋亡、黏附、信号转导等功能.近几年,Galectin-4在生理及病理过程中所起的作用正日益受到人们的重视.目前发现Galectin-4的低表达与结肠癌、肝癌、肺癌、尿路上皮癌等多种肿瘤的预后不良相关,有望成为判断肿瘤预后的可靠检测指标.
作者:王李秦;魏绪仓 刊期: 2019年第01期
目的 研究尿代谢物在慢性肾脏疾病(CKD)晚期患者中的变化及与肾脏疾病发展的相关性.方法 通过NMR分析15例患者和15例健康人的尿代谢组分,进行主成分分析(PCA)检验,并进一步运用液相色谱-三重四极杆质谱法分析另外16例CKD患者和15例对照的尿液样本进行验证,并鉴定CKD和非CKD尿样之间的尿代谢物.结果发现CKD和非CKD尿样之间有七种尿代谢物显著不同(P<0.05),其中枸橼酸盐、牛磺酸、5-羟脯氨酸在CKD患者中显著降低(P<0.05),而谷氨酸、鸟苷酸乙酸酯、α-苯乙酰谷氨酰胺和N-氧化三甲胺显著上升(P<0.05).根据这些代谢物的变化趋势,5例CKD患者中有4例被鉴定为CKD患者(80%准确性),7例健康人中有6例被划分到对照区(86%准确性).结论 该方法特异度高,可以用来预测 CKD,其临床引用前景良好.
作者:冯琴;尚小玲;李智;胡芳 刊期: 2019年第01期
目的 分析原发性肝癌(HCC)患者CD39+和CD73+调节性T细胞(Treg)表达水平,及其与肝损伤的相关性.方法 采用流式细胞术检测220例HCC患者(HCC组)、100例慢性乙肝患者(CHB组)和100例健康体检者(C组)外周血CD4+Treg细胞中CD39+,CD73+,自然杀伤(NK)细胞的表达,比较分析其与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝损伤指标的关系.结果 与C组比较,CHB组、HCC组外周血CD4+Treg细胞中CD39+[(11.21±1.57),(15.44±2.42)vs(8.14±1.25)]%,CD73+[(13.86±3.61),(19.52±4.57)vs(10.31±2.56)]%细胞比例明显升高,而NK[(20.13±2.77),(17.05±2.40)vs(24.15±3.65)]%细胞比例明显下降(F=663.61,255.18,182.26,均P<0.001).与CHB组比较,HCC组外周血CD4+Treg细胞中CD39+,CD73+细胞比例明显升高,而NK细胞比例明显下降(P<0.001).并发肝损伤的肝癌患者外周血CD4+Treg细胞中CD39+[(17.16±2.54)vs(14.23±2.30)]%,CD73+[(20.21±4.78)vs(18.04±3.29)]% 细胞比例明显高于无肝损伤的肝癌患者,而NK[(15.57±2.31)vs(19.13±2.73)]%细胞比例则明显降低,差异均有统计学意义(F=8.89,3.99,10.09,均P<0.001).CD39+,CD73+与NK细胞呈显著负相关(r=-0.452,-0.424,均P<0.05).AST,ALT与CD39+,CD73+细胞比例呈显著正相关(r=0.342,0.377,P<0.05),与NK细胞比例呈显著负相关(r=-0.352,P<0.05).结论 HCC患者外周血CD39+,CD73+Treg表达水平明显升高,且与肝损伤密切相关.阻断CD39+,CD73+的表达可能有望成为抗肿瘤免疫治疗的一种安全有效的途径.
作者:沈海涛;焦荣红;陆志成;徐正;谢钰帆;蒋秀娣 刊期: 2019年第01期
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以对称性多关节炎为特征的慢性、进行性、侵袭性风湿免疫病.RA不仅自身免疫系统功能紊乱,也涉及心、肺、肾、神经和血管等多个系统,不同程度地影响着患者的健康和生活质量.该文探讨了RA免疫学发病机制研究的新进展,以加深人们对疾病的认识,为RA的基础研究和临床治疗提供讨论的依据与新的方向.
作者:周莹;王子铭;虞伟;李晓军 刊期: 2019年第01期
目的 分析西安地区儿童静脉注射免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)无反应型川崎病(kawasaki disease,KD)的危险因素,建立预测评分体系,为提高临床早期预测能力提供依据.方法 回顾性分析2017年西安市儿童医院KD患儿临床资料,纳入符合KD诊断标准患儿共387例,其中IVIG敏感组336例,IVIG无反应组51例;采用单因素分析和多因素Logistic回归分析寻找西安地区KD儿童发生IVIG治疗无反应的独立危险因素,针对危险因素的临界值进行赋值,建立新的简单评分体系,并评价其有效性.结果 单因素分析结果显示冠状动脉瘤、中性粒细胞百分比(N%)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和脑利钠肽前体(NT-proBNP)与IVIG无反应型KD相关(t或χ2=-2.47~8.78,均P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示冠状动脉瘤、N%,HCT,TBIL和AST是IVIG无反应型KD的独立危险因素(均P<0.05);建立新的简单评分体系,共纳入冠状动脉瘤、N%,HCT,TBIL,ALT,AST和BNP等7项指标(均P<0.05),当N%≥63%时赋值2分,其余6个量均赋值1分,总计8分,临界值为3分.ROC曲线下面积(AUC)为0.81(95%CI:0.74~0.89),灵敏度75%,特异度75%,约登指数为0.45.结论 西安地区IVIG无反应型KD的预测评体系简单可行,可提高对该地区IVIG无反应型KD患儿的临床预测能力.
作者:李俏;张李钰;赵传梅;吴爽;曹三成 刊期: 2019年第01期
目的:分析血清淀粉样蛋白A(SAA),C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)在脓毒性休克中的诊断及预后的评估价值.方法将同济大学附属杨浦医院急诊科收治的89例脓毒症患者根据病情分为脓毒性休克组(n=41)、非脓毒性休克组(n=48);同时根据预后情况分为预后良好组(n=58)和预后不良组(n=31).比较各组SAA,PCT,CRP水平及序贯器衰竭评估(SOFA)评分的变化,并分析各炎症指标联合检测对脓毒性休克患者预后的预测价值.结果与非脓毒性休克组比较,脓毒性休克组SAA(280.27±14.16 mg/L vs 251.87±25.20 mg/L),CRP(105.74±23.57 mg/L vs 84.25±15.27 mg/L),PCT(7.11±2.54μg/L vs 3.34±1.84μg/L),SOFA评分(9.03±2.37 vs 5.75±2.05)均明显升高,差异有统计学意义(t=6.61,5.07,7.97,6.96,均P<0.001).预后不良组SAA(291.32±15.28 mg/L vs 242.35±24.88 mg/L),PCT(7.28±2.69μg/L vs 2.44±1.24μg/L),SOFA评分(9.16±2.25 vs 5.34±1.80)较预后良好组显著升高,差异有统计学意义(t=11.27,10.77,8.81,均P<0.001).非脓毒性休克患者SOFA评分与SAA(r=0.372,P=0.041),PCT(r=0.354,P=0.047)呈显著正相关,而与CRP无显著相关性(r=0.289,P=0.071);脓毒性休克患者SOFA评分与SAA(r=0.414,P=0.024),CRP(r=0.342,P=0.044),PCT(r=0.395,P=0.031)均呈显著正相关(P<0.05).联合检测预测脓毒性休克患者预后的AUC(0.96 vs 0.84,0.67,0.82)、灵敏度(0.81±0.21 vs 0.78±0.20,0.60±0.22,0.75±0.25)、特异度(0.74±0.25 vs 0.72±0.24,0.63±0.17,0.71±0.28)均显著高于SAA,PCT,PCR单独检测(P<0.05).结论SAA,PCT和CRP是脓毒性休克患者病情严重程度及预后的有效评价指标,在SOFA的基础上,联合SAA,PCT,CRP可进一步提高脓毒性休克预后预测的敏感性.
作者:戴晓勇;陈永珍;华玮;沈健;叶宥文;杨晓英;石斌 刊期: 2019年第01期
目的 研究不同浓度氟化钠抗凝血对POCT血糖仪结果干扰情况.方法 20例研究对象每人采集1支EDTA-K2样本管和6支含不同浓度氟化钠的(NaF)EDTA-K2样本管静脉血,每管2 ml,POCT血糖仪与生化仪检测每管血糖水平,比较不同浓度氟化钠组间样本管血糖水平差异及相同氟化钠浓度样本管POCT血糖仪与生化仪检测血糖水平差异.结果 POCT血糖仪检测不同浓度氟化钠样本管血糖水平组间比较,其差异有统计学意义(F=12.192,P<0.001);采用LSD法进行多重比较,不含NaF组血糖水平与其它含NaF组血糖水平比较,不含NaF组血糖水平明显高于其它含NaF组血糖水平(t=13.556,14.223,13.512,14.012,13.876,13.864,均P<0.001),含NaF不同组间血糖水平比较,差异无统计学意义(t=0.352,0.412,0.386,0.411,0.395,0.414,均P>0.05);生化仪检测不同浓度氟化钠组间血糖水平比较,其差异无统计学意义(F=0.428,P=0.829).不含氟化钠样本管两仪器检测血糖水平比较,差异无统计学意义(t=0.457,P=0.358);含相同浓度氟化钠样本管两仪器检测血糖水平比较,生化仪检测血糖水平明显高于POCT血糖仪水平(t=-14.415,-14.746,-13.613,-14.108,-15.253,-14.069,均P<0.01).结论 氟化钠对采用葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪结果有明显抑制作用,抑制程度与氟化钠浓度无明显相关,氟化钠不宜作为葡萄糖脱氢酶法POCT血糖仪比对标本的糖酵解抑制剂.
作者:李广权;周卫东;钟培英;徐梦娇 刊期: 2019年第01期
目的 调查西安地区妊娠期妇女生殖道支原体阳性率及耐药情况,为治疗支原体感染合理用药提供参考.方法支原体感染检测及药敏试验采用普通培养法.结果西安地区2350例妊娠期妇女阴道分泌物中共检出支原体阳性994例,阳性率为42.30%;其中单纯解脲支原体(Uu)感染者844例,占84.91%,单纯人型支原体(Mh)感染者49例,占4.93%,二者合并感染者101例,占10.16%.药敏试验结果显示,UU,Mh,Uu+Mh对交沙霉素、强力霉素和美满霉素敏感性普遍较高,而对环丙沙星和螺旋霉素敏感性普遍较低.结论西安地区妊娠期女性生殖道支原体感染以Uu为主,交沙霉素、强力霉素和美满霉素作为治疗首选药物.
作者:赵海卫;魏娟;王建云;张星星;陶绍辉;赵小军 刊期: 2019年第01期
目的 比较罗氏Urisys2400,爱科来AX4030和美侨Mejer600三种尿液干化学分析仪检测结果的一致性.方法AX4030和Mejer600分别与靶机Urisys2400进行比对,计算酸碱度(pH值)、比重(SG)的均值差异百分率,计算白细胞(LEU)、红细胞(ERY)、亚硝酸盐(NIT)、蛋白质(PRO)、葡萄糖(Glu)、胆红素(Bil)、尿胆原(URO)和酮体(KET)结果的阳性检出率和符合率.通过确证实验,对所有尿液标本的红细胞(ERY)、白细胞(LEU)、蛋白(PRO)进行确认,分别计算三种仪器各自符合率和假阴性率.结果AX4030和Mejer600与靶机Urisys 2400 pH均值差异百分率<10%,SG均值差异百分率<1%,一致性符合要求;AX4030与Urisys2400相比,ERY和PRO阳性检出率存在显著差异(χ2=5.114,5.921,均P<0.05);Mejer600 ERY阳性检出率与Urisys2400 ERY存在显著差异(χ2=5.692,P<0.05);AX4030和Mejer600与Urisys2400相比,除SG,pH外,其他项目一般符合率>80%,Kappa>0.4,结果一致性良好;三种仪器ERY,LEU,PRO检测结果与确证实验比较,ERY符合率为69.8%~79.3%,假阴性率为7.2%~12.4%,LEU符合率为70.1%~76.2%,假阴性率为17.4%~29.6%,PRO符合率为63.4%~88.3%,假阴性率为4.2%~15.9%.结论三种尿液干化学分析仪检测一致性良好,均可满足临床需要,但对部分可疑标本,需要结合其他沉渣仪器及确证实验综合分析.
作者:王刚强;程翔;杨丽华;何娟;卢佩;汪沛;李程华;杨若凡;郑善銮;郝晓柯 刊期: 2019年第01期
目的 探讨血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和同源蛋白3(tribbleshomologprotein3,TRB3)mRNA表达在生活方式干预治疗糖耐量受损(IGT)疾病中的应用价值.方法 收集58例接受生活方式干预治疗的糖耐量受损患者(治疗前组和治疗后组)和53例健康人群(对照组)的血液及临床资料,采用实时荧光定量PCR(real-time-PCR,RT-PCR)技术检测各组研究对象的血清eNOS mRNA和TRB3 mRNA表达.所有研究对象均接受葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验,通过空腹血糖(FPG)及空腹胰岛素(FINS)水平计算得到胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).采用高效液相色谱仪检测糖化血红蛋白(HbA1c)水平.比较分析以上指标的变化与IGT的关系.采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价血清eNOSmRNA和TRB3mRNA在IGT中的临床意义.结果在对照组、治疗后组和治疗前组中,血清eNOSmRNA和TRB3mRNA的表达量分别为0.93±0.23,0.69±0.20,0.19±0.10和0.35±0.14,0.62±0.21,0.96±0.25.TRB3mRNA在治疗前组的表达显著高于治疗后组,在治疗后组的表达显著高于对照组(F=93.27,P<0.01);而eNOSmRNA在治疗前组的表达显著低于与治疗后组,在治疗后组的表达显著低于对照组(F=89.65,P<0.01),差异均有统计学意义.在对照组、治疗后组和治疗前组中,FPG(mmol/L),FINs(μU/ml),HbA1c(%)水平及HOMA-IR分别为5.07±0.41,7.23±7.57,5.29±0.36,2.13±0.47;5.51±0.47,5.73±0.35,2.87±0.77和6.12±0.59,11.39±11.71,6.17±0.39,3.17±0.83.治疗前组的FPG,FINs,HbA1c水平及HOMA-IR分别与治疗后组比较显著增高,治疗后组的各项指标与对照组比较显著增高,差异均有统计学意义(F=60.03~110.51,均P<0.01).血清eNOSmRNA和TRB3mRNA在治疗前组和治疗后组中的表达具有负相关性(r=-0.867,-0.826,均P<0.01).血清eNOSmRNA在治疗前组和治疗后组中的表达与FPG,FINs,HbA1c水平及HOMA-IR呈负相关性(r=-0.779,-0.739,-0.727,-0.755,均P<0.01),(r=-0.726,-0.689,-0.667,-0.696,均P<0.01),而TRB3mRNA在治疗前组和治疗后组中的表达与FPG,FINs,HbA1c水平及HOMA-IR呈正相关性(r=0.823,0.769,0.753,0.797,均P<0.01),(r=0.753,0.697,0.685,0.726,均P<0.01).ROC曲线分析显示,eNOSmRNA和TRB3mRNA的AUC分别为[0.858(95%CI:0.756~0.960,P<0.01),0.862(95%CI:0.753~0.970,P<0.01)].结论 血清 eNOSmRNA 和 TRB3mRNA 的检测可应用于评价生活方式干预治疗 IGT 疾病的效果,并可能为 IGT 及 2 型糖尿病的治疗提供有效的基因学依据.
作者:樊萍;苟小林;李娜 刊期: 2019年第01期
目的 对粪肠球菌进行多位点序列分析(MLST),探讨浙江地区粪肠球菌的分子分型与耐药性的相关性.方法收集2018年1~8月浙江地区多家医院临床分离的粪肠球菌,总计74株;根据粪肠球菌的7个管家基因序列对74株菌株进行多位点序列(MLST)分型;同时对该74株菌株进行药敏实验,分析MLST与药物耐药性的相关性.结果74株菌分为20个ST型,3个型别为新的型别.ST16和ST179是浙江地区的优势型别菌株,同属于CC16克隆复合体,两者占所有菌株的55%以上,其中ST16包含21株菌(占28.38%),其次为ST179,包含20株菌(占27.03%),再次是ST4和ST6,各包含6株(占8.11%).药敏结果显示,粪肠球菌耐药程度高的抗生素主要是四环素及红霉素,其耐药率分别为89.2%和73%,不同ST的粪肠球菌均对这两种抗生素产生耐药.ST179与ST16两者耐药谱相似,区别主要是ST179对利福平均为敏感,而ST16有部分(33.3%)会对利福平产生耐药;另外,ST6对喹诺酮类药物及高浓度的庆大霉素耐药,ST4型的粪肠球菌会对青霉素产生耐药.结论目前浙江省粪肠球菌分离菌株主要以CC16(包含ST16与ST179)克隆株为主,不同MLST分型的菌株与耐药可能有一定的相关性,仍需验证.
作者:施宏;陈书韵;杨狄;任绪义 刊期: 2019年第01期
目的 应用基于患者风险管理的统计质量控制程序Sigma-SQC诺曼图设计临床生物化学酶类检测项目的质量控制策略.方法 根据实验室酶类检测项目Sigma度量值大小不同,应用患者风险参数MaxE(NUF)相关联图形工具即Sigma-SQC诺曼图,设计日立7180生化分析仪酶类检测项目起始质控程序和过程监测质控程序.结果 Sigma度量值5.1~6.0的项目丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和肌酸激酶(CK)起始候选质控程序:多规则MR N4,分析样本量=200,误差检出概率(Ped)=1.00;MR N2,分析样本量=200,Ped=0.94;过程监测候选质控程序:12.5s N1,分析批长度=200,假失控概率(Pfr)=0.01;13s N1,分析批长度=70,Pfr=0.00.Sigma度量值4.1~5.0的项目乳酸脱氢酶(LDH)、淀粉酶(AMY)和谷氨酰转肽酶(GGT),起始候选质控程序:多规则MR N4,分析样本量=200,Ped=1.00;MR N2,分析样本量=200,Ped=0.94;过程监测候选质控程序:13s N2,分析批长度=25,Pfr=0.00;MR N2,分析批长度=50,Pfr=0.01;13s N4,分析批长度=70,Pfr=0.01.结论 临床生物化学酶类检测项目ALT,AST,ALP,CK的起始质控程序MR N2,分析样本量=200,过程监测质控程序12.5s N1,分析批长度=200;LDH,AMY,GGT的起始质控程序MR N2,分析样本量=200,过程监测质控程序MR N2,分析批长度=50,MaxE(NUF)≤1可以大程度地降低患者风险.
作者:孔丽蕊;王华丽;吴风 刊期: 2019年第01期
目的 了解支气管哮喘(哮喘)并发幽门螺杆菌感染患儿幽门螺杆茵(HP)感染情况、免疫表型及其血清型的分布特征.方法 收集2016年12月~2017年12月支气管哮喘患儿与同龄健康体检儿童的14 C-BUT检测结果,并收集两组人群的粪便与血清样本,分别采用粪便HP抗原和血清HP抗体检测,比较其与14 C-BUT对于儿童HP感染检测结果之间的差异;采用三种HP诊断方法(14 C-BUT,粪便HP抗原,血清HP抗体检测)筛查两组HP感染,比较各组间HP感染的阳性率是否存在差异;另外,对血清HP抗体阳性的哮喘和健康体检儿童,进一步采用HP血清抗体谱进行分析,以了解哮喘并发HP感染儿童HP血清抗体谱的分布,并比较分析两组间抗体谱及血清型分布差异.结果 通过在哮喘和健康体检儿童中三种HP诊断方法比较,三者间的差异无统计学意义(χ2=1.06,0.77,0.72,均P>0.05),在支气管哮喘与健康体检儿童中HP感染率分别为:30.4%~32.6%和35.4%~37.4%,两组间差异无统计学意义(P>0.05),HP抗体阳性哮喘患儿和健康体检儿童中各抗体谱阳性率为:抗VacA-95KD(31.8%,50.9%),VacA-91KD(31.8%,50.9%),UreA-66KD(65.9%,54.5%),UreB-30KD(63.6%,52.7%),其抗体的阳性率在两组之间差异无统计学意义(χ2=3.64,3.64,1.31,1.19,均P>0.05);仅CagA-116 KD抗体阳性率(36.4%,56.4%)在两组间差异具有统计学意义(χ2=3.92,P<0.05).另外I型和Ⅱ型HP感染率在两组中的百分比分别为:哮喘组Ⅰ型36.4%(16/44)和Ⅱ型63.6%(28/44),健康体检组Ⅰ型56.4%(31/55)和Ⅱ型43.6%(31/55),两组间差异存在统计学意义(χ2=3.92,P<0.05).结论 哮喘的发病率与HP的感染率无直接联系,但其与抗-CagA抗体的阳性率存在明显的负相关,且具有特定的血清型和抗体谱分布特征,这为我们进一步研究哮喘与HP感染的内在联系奠定了理论基础.
作者:赵含信;郝维敏 刊期: 2019年第01期
目的 使用六西格玛(6σ)质量管理理论对部分内分泌类项目进行精益管理.方法 允许总误差(TEa)源于各项目的2018年卫生部临床检验中心室间质量评价标准,偏差(Bias%)源于2018年第一次全国内分泌类项目室间质评成绩,变异系数(CV%)源于实验室开展室内质控的统计结果,根据σ=(TEa%-Bias%)/CV%计算各项目的σ值并绘制标准化的性能决定图,对σ值<4的项目进行精益管理和比较纠正前后σ值的变化.结果 评估的13个项目中σ值>6的项目2个(15.38%)、σ值介于5~6之间的项目1个(7.69%)、σ值介于4~5之间的项目4个(30.77%)、σ值<4的项目6个(46.15%),对σ值<4以下的项目进行原因分析、纠正措施等精益管理,纠正后TT 3σ值升至4.6,其余均达到5以上.结论 临床检验工作中可以使用6σ质量管理理论指导质量控制方案的设计,对内分泌类项目进行精益管理.
作者:刘彦明;何坤;刘熙君;蔡文灿 刊期: 2019年第01期
目的 观察冷藏保存对兔骨髓间充质干细胞生长活性的影响及还原性谷胱甘肽对其可能存在的保护作用.方法日本雄性大耳白兔12只,取出兔骨髓后,采用Percoll非连续性密度梯度离心法分离出单个核细胞,取原代培养后细胞经免疫磁珠分析和流式细胞术鉴定后进行传代培养.第3代传代培养细胞分别在体外4℃冷藏后分为对照组(0 h)和实验组.实验组分为冷藏6 h(6 h组),12 h(12 h组)和24 h(24 h组).部分冷藏12 h单个核细胞分别加入0.5 mmol/L和1.0 mmol/L还原性谷胱甘肽(GSH)共培养,分别为12 h+0.5 mmol/L GSH组和12 h+1.0 mmol/L GSH组.对各组进行8天生长曲线的绘制并完成活性的测定.采用SPSS 17.0软件进行配对t检验分析,P<0.05为差异有统计学意义.结果对照组分离出单个核细胞12天可铺满瓶底.细胞原代培养后,流式细胞仪显示经免疫磁珠分选的细胞CD29阳性率达91.7%,表达CD29,CD44,CD90,不表达CD19,CD45,CD34.生长曲线显示,6 h组,12 h+0.5 mmol/L GSH组,12 h+1.0 mmol/L GSH组与对照组的细胞增殖能力差异均无统计学意义(均P>0.05).统计学显示12 h组和24 h组的细胞增殖能力与对照组,6 h组,12 h+0.5 mmol/L GSH组及12 h+1.0 mmol/L GSH组的细胞相比差异有统计学意义(均P<0.01);24 h组的细胞增殖能力与12 h组的细胞相比差异有统计学意义(P<0.01).结论Percoll非连续性密度梯度离心法对于兔骨髓的骨髓间充质干细胞分离起着良好的效果.体外4℃冷藏保存对骨髓间充质干细胞的生长活性起着抑制效果,且随着冷藏时间的延长而更加明显.还原性谷胱甘肽对冷藏保存后的骨髓间充质干细胞起着保护活性的作用.
作者:胡坚方;汪照函;雷雪扬;邓长青;刘文婧;罗文 刊期: 2019年第01期
目的 探讨临床血液感染沙门菌血清分型、基因同源性及耐药质粒和细菌耐药性的关系.方法 收集武汉大学中南医院2015~2017年临床血流感染分离的10株沙门菌.采用法国梅里埃Vitek 2 Compact全自动鉴定药敏检测系统进行鉴定和药敏实验,按国家标准对沙门菌进行血清学分型,用肠杆菌科基因间重复序列的聚合酶链反应(ERIC-PCR)对其进行基因分型,采用Cluster 3.0软件对PCR扩增产物进行聚类分析.结果 10株沙门菌分为3种血清群,A群1株,B群3株,D群6株,D群是优势血清群,约占60.0%;10株沙门菌中2,3,4,5和8号菌株含有质粒,不含质粒的是1,6,7,9和10号菌株;10株沙门菌对氨苄西林耐药率为80.0%,左氧氟沙星中介率80.0%,对三、四代头孢及碳青霉烯类100.0%敏感,对复方磺胺类敏感率为80.0%;4号和10号菌株、8号和9号菌株的同源性超过80.0%,1号和2号,5号和6号菌株的同源性大于70.0%.结论 沙门菌存在耐药质粒,质粒的多少表明耐药程度的高低;沙门菌对氨苄西林及氨苄西林/舒巴坦耐药率较高,对头孢他啶敏感率高,因此治疗血流感染时可选用三、四代头孢或亚胺培南,采用降阶梯治疗.
作者:周俊英;田宏攀 刊期: 2019年第01期
目的 通过流式细胞术研究急性髓系白血病(AML)患者粒细胞、单核细胞糖基磷脂酰肌醇(glycosyl-phosphatidyl inositol,GPI)锚链和红细胞CD59表达水平及其临床意义.方法 该研究纳入了36例并发血管内溶血的AML患者及21例阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)患者,依据国际临床流式细胞协会推荐的PNH流式诊断指南,分别对受试对象的红细胞和有核细胞进行PNH克隆检测,统计分析AML患者粒细胞、单核细胞及红细胞PNH克隆的水平.结果 AML组患者与PNH组患者相比较无明显红细胞CD59表达缺陷(I型红细胞98.49±4.61 vs 61.41±25.86,Ⅱ型红细胞1.33±4.55 vs 16.82±19.92,Ⅲ型红细胞0.17±0.85 vs 21.71±21.12,差异均有统计学意义(t=6.43,3.41,4.71,均P<0.001);粒细胞、单核细胞缺陷克隆检测存在但与PNH组比较则明显减少(粒细胞26.46±23.36 vs 73.12±28.41,单核细胞35.80±27.80 vs 78.37±25.03,差异有统计学意义(t=4.59,3.76,均P<0.001).结论 AML患者有核细胞中可出现FLAER阴性的PNH克隆,但未见CD59表达缺陷的红细胞,可与PNH区分.
作者:范臻佳;金丽兰;史册;刘禹;蔡刚 刊期: 2019年第01期
目的 探讨平均血小板体积、血小板分布宽度和癌胚抗原(CEA)对胃癌和胃溃疡的鉴别诊断作用.方法 选取2012年1月~2016年1月商洛市中心医院收治的100例胃癌患者和100例胃溃疡患者,及同期体检的健康人群100例作为对照组,比较临床和生化指标、平均血小板体积(MPV)及血小板分布宽度(PDW),分析胃癌患者术前MPV及PDW与临床病理特征的相关性,并采用ROC曲线分析联合检测区分健康人群、胃溃疡及胃癌患者的灵敏度和特异度.结果 对照组、胃溃疡组和胃癌组MPV(fl)分别为10.3±1.3,10.7±1.5和8.7±1.2,两两比较差异均具有统计学意义(F=65.165,P<0.001);三组PDW分(%)别为14.8±2.3,12.8±2.3和17.8±3.2,两两比较差异均具有统计学意义(F=101.552,P<0.001).肿瘤<4.5cm的胃癌患者PDW(17.7% ±1.4%)显著高于肿瘤 ≥4.5cm的胃癌患者(17.2% ±1.6%),差异具有统计学意义(t=2.020,P<0.05).CEA+PDW联合检测区分健康组和胃癌组患者的灵敏度、特异度和AUC分别为0.835,0.908和0.939(0.910~0.961);CEA+PDW联合检测区分胃溃疡和胃癌患者的灵敏度、特异度和AUC分别为0.990,0.979和0.996(0.984~1.000).结论 平均血小板体积、血小板分布宽度和癌胚抗原联合检测可以有效区分胃癌和胃溃疡患者,值得进一步研究.
作者:陈绪阳;吉茂礼;刘雪花;魏铁军;张恒;郭艺静;张永利;姜萌 刊期: 2019年第01期
目的 探讨尿液6种蛋白与尿Cys C对糖尿病肾病(DKD)的诊断价值.方法 测定41例DKD患者、47例DM患者、53例健康体检者和39例DM控制不佳患者的尿液6种蛋白与尿Cys C水平,并运用IBM SPSS23.0软件对结果进行统计处理.结果 DKD患者的尿液Cys C,NGAL,α1-MG,β2-MG,TRF,RBP和mALB结果都明显高于DM患者和健康体检者,P值均为0.000.它们的ROC曲线下面积分别为0.989,0.991,0.988,0.994,0.988,0.991和0.990.用尿液的CysC≥0.255 mg/L,NGAL≥98.5μg/L,α1-MG≥11.55 mg/L,β2-MG≥0.44 mg/L,TRF≥3.15 mg/L,RBP≥1.325 mg/L和mALB≥22.5 mg/L的7项之2诊断DKD,敏感度为97.56%,特异度为98.04%.在DM患者控制不佳的情况下可提高46.15%的DKD诊断.结论 尿液Cys C,NGAL,α1-MG,β2-MG,TRF和RBP的联合检测可对DKD患者作早期诊断.DKD患者的尿液Cys C,NGAL,α1-MG,β2-MG,TRF和RBP升高均早于mALB,联合检测可减少DKD诊断的漏诊率.
作者:张求霞;汪隆海;昌国庆;黄飞;唐丽群;姚芹梅;王勇;姜中云 刊期: 2019年第01期