学术投稿

携带HR-GFP报告基因的DNA损伤同源重组修复检测系统的建立及初步应用

邓昭敏;李莎;李明远;王欢;任来峰;郭连娣;刘聪;丁娜娜

关键词:同源重组, DNA双链断裂, Ⅰ-Sce I-HR
摘要:目的 建立DNA损伤同源重组修复检测系统(Ⅰ-Sce I-HR),应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的人骨肉瘤细胞(U2OS)模型,探索细胞DNA损伤后的修复特性奠定基础.方法 通过分子克隆构建携带Ⅰ-Sce I归位内切酶识别序列的真核表达载体pcDNA3-HR-GFP,将该质粒转染入U2OS细胞中,经G418稳定筛选.随后分别瞬时转染入携带归位内切酶Ⅰ-Sce I的表达质粒pCBASCEI,以及体外经Ⅰ-Sce I线性化pcDNA3-HR-GFP.48小时后用免疫荧光方法检测DNA双链损伤效应分子-DH2AX,同时观察EGFP荧光信号;72小时后用Western blot检测报告蛋白EGFP的表达,评估DNA双链断裂后同源重组修复情况.结果 酶切鉴定和测序证实pcDNA3-HR-GFP真核表达载体构建成功;Ⅰ-Sce I-HR系统引入U2OS细胞中后,γ-H2AX表达明显上调,荧光显微镜和Western blot均显示EGFP表达.结论 DSB细胞同源重组修复模型构建成功,Ⅰ-Sce I-HR系统能够成功地诱导U2OS细胞株产生DSB,并出现同源重组修复,为进一步研究DNA同源重组信号传导提供了有效的研究工具.
西部医学杂志相关文献
  • 单双荷包缝合在PPH治疗混合痔合并直肠内脱垂的手术效果对比研究

    目的 探讨PPH手术在治疗混合痔合并直肠内脱垂中单、双荷包缝合的效果及选择原则.方法 168例患者随机分成两组,PPH手术采用单荷包缝合治疗84例,其余84例采用双荷包缝合.结果 两组在术中耐受程度、术后恢复时间方面基本相似,但手术时间、术中下腹部牵拉痛、假性憩室形成、吻合口裂开等方面,单荷包缝合优于双荷包缝合组.肛管皮肤复位、直肠内脱垂消失或两者效果均佳方面,双荷包优于单荷包缝合组.结论 混合痔合并直肠内脱垂在选择用PPH手术治疗时应采用个体化治疗措施,针对混合痔重而合并直肠内脱垂轻者,或混合痔相对轻而直肠内脱垂重者,好选用单荷包缝合,两者均重者选用双荷包缝合,并且两荷包线间距不应>2cm.

    作者:林中超;彭洪;彭明沙 刊期: 2013年第12期

  • 超声在睾丸扭转急性期的诊断价值

    目的 探讨彩色多普勒超声及超声造影在睾丸扭转急性期的诊断价值.方法 纳入经手术及超声造影证实的4例睾丸扭转急性期病例,并对术前超声诊断准确率、图像特征、漏误诊原因等进行分析.结果 术前超声检查3例睾丸扭转病例诊断正确,符合率75.0%,误诊1例(25.0%).睾丸扭转急性期病变的主要超声特征为患侧睾丸大小正常或轻度增大,回声不均质,睾丸内血流减少或未见明显减少,睾丸位置改变为横位,精索增粗;误诊1例,患侧睾丸血流较健侧稍多,附睾增大.结论 彩色多普勒超声对于诊断急性期睾丸扭转有较高的敏感性和特异性,具有重要的临床应用价值.但检查中也需要注意睾丸扭转急性期的特殊表现,以减少漏误诊病例.

    作者:岳虹;马果丰;李云祥;袁莉;张慧 刊期: 2013年第12期

  • 阿霉素对兔血清细胞炎性因子表达的影响

    目的 探讨阿霉素(ADR)蓄积作用对兔血清细胞炎性因子的影响,为慢性心衰模型的建立提供理论依据.方法 新西兰兔30只,随机分成正常对照组、模型4周组和模型8周组,每组10只.模型4、8周组:耳缘静脉注射ADR(1.0mg/kg,用生理盐水配制成1.0mg/ml溶液),每周2次,共4、8周;正常对照组:注射相同体积生理盐水.于末次注射7天后检测各组兔血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)和白细胞介素6(IL-6)的浓度变化.结果 与正常对照组相比,模型两组血清TNF-α、IL-1和IL-6浓度较正常对照组明显升高(P<0.05或P<0.01),且模型8周组较模型4周组升高更为明显(P<0.01).结论 阿霉素常规剂量长期静脉注射4、8周可致兔血清细胞炎性因子明显变化,可用于慢性心衰模型的制作.

    作者:蔡虎志;卢青;陈新宇;陈青扬 刊期: 2013年第12期

  • 临床药师干预对Ⅱ型糖尿病患者胰岛素治疗效果的影响

    目的 探讨临床药师参与Ⅱ型糖尿病患者治疗全过程对患者治疗效果的影响.方法 采用前瞻性对照研究方法,将大竹县人民医院2011年6月~2012年12月收治的195例Ⅱ型糖尿病患者随机分成实验组与对照组,实验组中临床药师参与患者治疗全过程,并进行干预;对照组则按常规方案治疗,半年后观察两组各相关指标的变化情况.结果 实验组干预前后糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FPG)、患者用药依从性改善有显著性差异(P<0.05);对照组治疗前后只有HbAlc有显著改善(P<0.05).结论 临床药师干预Ⅱ型糖尿病患者的胰岛素治疗,可提高患者的治疗效果和生活质量,既实现了医药护理的协作,又体现了对患者的医学人文关怀,应在临床推广应用.

    作者:陈胜春;孙爱斌;李代程;黄永辉;钟燕;夏渝敏;刘志刚 刊期: 2013年第12期

  • 热毒宁注射液辅助治疗重度AECOPD患者前后血液中CRP、PCT和TNF-α水平的变化

    目的 探讨热毒宁注射液辅助治疗重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者前后血液中CRP、PCT和TNF-α水平的变化.方法 100例重度AECOPD患者(D级)随机平均分为热毒宁+常规治疗组(干预组)和常规治疗组(对照组),分别测定0天和3天时患者动脉血气指标(pH、PO2和PCO2),FEV1占预计值%,血浆CRP、PCT和TNF-α水平.结果 经3天治疗后两组患者动脉血气指标(pH、PO2和PCO2),FEV1占预计值%,血浆CRP、PCT和TNF-α水平均明显改善;同时与对照组相比较,干预组动脉血气指标(pH、PO2和PCO2)和FEV1占预计值%未见明显差异(均P>0.05),但血浆CRP、PCT和TNF-α水平下降更明显(均P<0.05).同时该实验过程中干预组患者未出现与热毒宁注射液相关的严重不良反应.结论 热毒宁可以有效减少重度AECOPD(D级)患者血浆CRP、PCT和TNF-α水平,为热毒宁应用于COPD的临床治疗奠定了理论基础.

    作者:聂红玉;肖亮;徐东兰 刊期: 2013年第12期

  • 数字化成像双对比造影检查贲门癌252例

    目的 探讨数字化成像双对比造影在贲门癌诊断中的应用价值.方法 回顾性分析行数字化成像双对比造影及电子胃镜检查并经手术证实的252例贲门癌患者的临床资料,并比较双对比钡餐造影和电子胃镜检查结果与手术符合率.结果 数字化双对比造影与手术诊断相符合244例,诊断符合率为96.8%,误诊为良性溃疡3例(1.2%),漏诊5例(2.0%);电子胃镜与手术诊断相符合248例,诊断符合率98.4%,误诊4例,其中误诊为炎症2例(Ⅰ型),息肉1例(Ⅲ型),良性溃疡1例(Ⅳ型).两种方法诊断与手术符合率无统计学意义(P>0.05).结论 数字化双对比造影诊断贲门癌准确率与电子胃镜相似,但更简便、经济,是诊断贲门癌的较好方法.

    作者:何发清;官泳松;王小林;何涛;薛太平 刊期: 2013年第12期

  • 补体激活在中枢神经系统损伤中的作用

    补体系统是机体固有免疫系统的重要组成部分,中枢神经系统的神经元、星形胶质细胞及小胶质细胞可以产生几乎所有的补体系统组分,表达各种补体受体.神经科学研究发现,补体系统在中枢神经系统正常功能及一些疾病中都有重要的作用.补体广泛参与神经系统的发育、突触消除、神经网络的成熟等生理过程.在各种中枢神经系统损伤中,包括脑或脊髓外伤性损伤、脑或脊髓缺血再灌注损伤,补体也参与其病理进程.很多研究表明在发生神经系统损伤时,抑制补体激活具有神经保护作用,这也为预防和治疗中枢神经系统损伤提供了新的思路.

    作者:董全 刊期: 2013年第12期

  • 肝源性糖尿病的研究进展

    我国的肝病发病率较高,而肝脏是糖代谢的重要器官,急慢性肝病常影响糖代谢,造成糖耐量异常甚至糖尿病,对患者的诊治造成了一定的困难.肝源性糖尿病的发病、诊断、治疗有其自身的特点,本文对其研究进展做一综述,以供进一步研究与探讨.

    作者:蒋安;李寒春 刊期: 2013年第12期

  • 重症医学发展现状及研究热点

    危重症医学是为急性、危及生命的危重病人提供生命支持和医疗照顾的学科.危重症医学的出现和发展对临床医学产生了重大影响.危重症医学领域包含着大量和广泛的科学知识,重症医学的发展在体现和提高综合医疗水平方面取得了令人瞩目的成就,同时也面临着严峻的挑战.我们要充分发挥已有的优势,建设一支具有多学科知识和经验基础的医疗团队,进一步提供更高质量的医疗服务和不断促进危重症医学的发展,以造福于人类的健康事业.

    作者:张中伟;曹丽丽 刊期: 2013年第12期

  • 唐氏综合症妊娠孕中期产前筛查结果分析

    目的 探讨孕中期产前唐氏综合征筛查对胎儿染色体异常及神经管缺陷的作用,以期降低出生儿缺陷.方法 应用时间分辨荧光免疫法对2464例孕15~20周孕妇血清进行甲胎蛋白(AFP)和绒毛促性腺激素(β3-hCG)浓度检测,再根据孕妇年龄、孕周、体重等因素通过唐氏筛查软件算出风险系数,阳性切割值为1/250、1/350,对高风险者进行B超、羊水染色体检查,新生儿检查结果对照.结果 筛查2464例孕妇,高风险孕妇142例,阳性率为5.70%.其中唐氏高风险87例,18-三体高风险18例,神经管畸形高风险37例.高风险孕妇行羊水染色体检查60例,发现异常核型3例.结论 孕妇中期产前筛查,结合产前诊断对预防染色体异常胎儿,防止先天缺陷具有重要作用.

    作者:颉晓玲;周兰霞;朱江;杜晓云;耿锦楠 刊期: 2013年第12期

  • 奥氮平联合丙戊酸镁缓释片治疗精神分裂症伴阳性症状患者的对照研究

    目的 探讨奥氮平联合丙戊酸镁缓释片治疗精神分裂症伴阳性症状患者的疗效及安全性.方法 将60例精神分裂症伴阳性症状患者随机分为实验组及对照组各30例,实验组口服奥氮平联合丙戊酸镁缓释片治疗,对照组口服奥氮平联合安慰剂治疗,观察2周.于治疗前及治疗第1、2周末采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定临床疗效,副反应量表(TESS)评定不良反应,并进行组间比较.结果 治疗1周末,实验组与对照组间的疗效差异有统计学意义(x2 =8.47,P<0.05);第2周末两组间的差异无统计学意义(x2=4.68,P>0.05);实验组兴奋、激越症状的控制优于对照组(P<0.05),两组不良反应均轻微,发生率无显著性差异(P>0.05).结论 奥氮平联合丙戊酸镁缓释片治疗精神分裂症伴阳性症状患者见效快,疗效好,具有临床应用价值.

    作者:吴秀萍;杨庆华;张丽梅;周淑琼 刊期: 2013年第12期

  • 注射用脂溶性维生素(Ⅱ)致过敏反应分析

    目的 探讨脂溶性维生素(Ⅱ)导致过敏反应的原因,为临床安全使用提供参考.方法 分析彩虹医院发生的1例注射用脂溶性维生素(Ⅱ)所致过敏反应患者的发生原因,并结合已有的类似报道对其机理进行综合探讨.结果 注射用脂溶性维生素(Ⅱ)所致过敏反应的发生机制可能与患者的高敏体质及药品成分中的维生素K1有关.结论 生产厂家和医务人员应对注射用脂溶性维生素(Ⅱ)所致过敏反应给予足够重视,以保障临床用药安全有效.

    作者:张勇;乔逸;封小娜;陆扬 刊期: 2013年第12期

  • 国产牛肺表面活性剂治疗早产儿呼吸窘迫综合征的疗效观察

    目的 探讨国产牛肺表面活性剂(珂立苏)治疗早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的临床疗效及安全性.方法 将85例患新生儿呼吸窘迫综合征的早产儿分为对照组38例及治疗组47例,对照组给予鼻塞持续气道正压通气,治疗组给予鼻塞持续气道正压通气与珂立苏联合应用,比较两组的临床疗效.结果 治疗组患儿总有效率为85.11%,明显高于对照组的65.79%,二者差异有统计学意义(P<0.05).治疗后2小时两组患儿血气指标较治疗前均明显好转(P<0.01),但治疗组患儿改善更明显(P<0.01).治疗组患儿临床症状缓解和机械通气时间较对照组缩短,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组患儿肺部急慢性并发症发生率为23.40%(11/47例),明显低于对照组的44.74%(17/38例,P<0.05).结论 国产牛肺表面活性剂治疗早产儿呼吸窘迫综合征安全有效,联合鼻塞持续气道正压通气可显著提高临床疗效,改善血气指标,缓解临床症状和缩短机械通气时间,值得临床推广应用.

    作者:刘华君;许红波;刘文彬;王太森;汤雪晴;孙先琳 刊期: 2013年第12期

  • 美罗华联合Chop治疗弥漫大B细胞淋巴瘤对免疫功能及补体的影响

    目的 探讨美罗华联合Chop方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤对机体免疫功能及补体的影响.方法 60例经病理证实的弥漫大B细胞淋巴瘤患者随机分为实验组和对照组,实验组(32例)采用美罗华联合Chop化疗,对照组(28例)单用Chop方案化疗.化疗前、后1、3、6、9、12月分别检测血清Ig及补体C3、C4值,并进行统计学分析.结果 实验组与对照组比较,实验组Ig水平及补体C3、C4均有下降,两组相比有统计学意义(P<0.05).结论 美罗华单抗联合Chop治疗弥漫大B细胞淋巴瘤对机体免疫功能及补体系统有一定影响,但尚需扩大样本量做进一步临床观察.

    作者:别俊;李爽;李光明 刊期: 2013年第12期

  • 不同剂量罗哌卡因腹横肌平面阻滞在剖宫产术后镇痛中的疗效比较

    目的 比较剖宫产术后不同剂量罗哌卡因在超声引导下行腹横肌平面阻滞(transversus abdominal plane,TAP)镇痛中的疗效.方法 实施单次腰麻下剖宫产单胎足月孕初产妇60例,计算机排序随机分为A组(0.5%罗哌卡因3 mg/kg)、B组(0.5%罗哌卡因1.5mg/kg)和C组(对照组)各20例.在手术结束后实施超声引导下TAP.观察48小时内各随访时点的疼痛评分(numerical rating scale,NRS)和产妇满意度评分.48小时内辅助镇痛药使用频率.结果 产妇在术后6及12小时时点NRS运动时评分,A组明显低于B组和C组(P<0.05),余时点未见统计学差异(P>0.05);NRS静息时评分各时点组间比较皆无差异(P>0.05).各组产妇满意度评分无差异(P>0.05).72小时内辅助镇痛药使用率各组间无差异(P>0.05).结论 超声引导下单次0.5%罗哌卡因3 mg/kg剂量腹横肌平面阻滞可以产生良好的12小时左右的产科术后镇痛,但更长时间的持续镇痛需要改进操作方法.

    作者:郑珈琳;罗世忠;钟庆;郭昌立;张玲 刊期: 2013年第12期

  • 肿瘤专科护士培训效果分析

    目的 探讨肿瘤专科护士培训的效果和意义.方法 选取93名肿瘤专科护士进行培训,将培训前后考试项目进行分值对比及秩和检验,以评价培训效果.结果 经培训后,各培训项目考试分值均有不同程度的提升,与培训前比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 对肿瘤专科护士进行相关培训可以有效提高临床护理水平和患者的满意度,具有重要的临床意义.

    作者:王秀丽;刘殿臣;张冰 刊期: 2013年第12期

  • 健康教育对体重指数与高脂血症和脂肪肝的影响

    目的 探讨健康教育干预对体重指数、高脂血症和脂肪肝的影响.方法 对152名自愿参加本研究的健康人,用1年时间对其进行饮食、运动等生活方式方面的健康教育干预,1年后再进行体重、血压、肝功能和血脂检查,观察其与干预前的差别.结果 本研究有123人适当控制饮食并坚持适量运动,占所有参与者的80.92%.完成健康教育者干预后BMI、TG、CHOL-T、HDL、LDL各指标与干预前比较,差异均有统计学意义(P<0.05).其中15例脂肪肝逆转为局灶性脂肪肝,其余的108名的脂肪肝均恢复正常.未完成健康教育者干预后BMI、TG、CHOL-T、HDL、LDL各指标与干预前比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 健康教育干预措施能明显降低研究对象的体重指数、高血脂和脂肪肝的相关指标.

    作者:唐燕;但小红;窦延春;罗昭琴 刊期: 2013年第12期

  • 低浓度罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外麻醉用于分娩镇痛的临床研究

    目的 探讨罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外自控镇痛(PCEA)用于分娩镇痛的疗效及安全性.方法 按入院先后顺序,180例ASA Ⅰ~Ⅱ级,头位、单胎足月妊娠的初产妇被随机分为观察组与对照组各90例.观察组:在宫口开大3 cm时进行硬膜外穿刺,于硬膜外腔注入0.15%罗哌卡因+0.5μg/ml舒芬太尼混合液10ml,PCEA基础注药速度6 ml/h,自控镇痛量为2ml,锁定时间为15min;对照组:临产前6小时起不予阿片类镇痛药,按产科常规处理.观察两组产妇镇痛效果、运动能力、产程、分娩方式、失血量及新生儿Apgar评分等项目.结果 观察组的镇痛有效率达100%.观察组的第一产程时间为(119±51)min,第二产程(56±30)min,均较对照组明显缩短;观察组顺产率(94%)高于对照组(70%),组间差异均有统计学意义(P<0.05);对运动能力影响、产妇出血量及新生儿Apgar评分比较,组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 低浓度罗哌卡因复合舒芬太尼PCEA用于分娩镇痛的临床效果好,能提高产科质量,方法简便、安全、高效.

    作者:刘伶俐;王成刚;吕良勤;钟廖涛 刊期: 2013年第12期

  • 急诊医学的特征与建设之路

    本文简要回顾急诊医学的发展历史,透析急诊医学之现状,明确急诊医学之任务,解读急诊医学之特征,查找急诊医学之不足,探索急诊医学的发展与建设之路,积蛙步以至千里,不断健全、壮大急诊队伍,从而促进急诊医学的发展与急诊医学学科的完善,既彰显急诊医学的特征,更体现急诊医学的人文关怀价值.

    作者:谭光林;冯胜刚 刊期: 2013年第12期

  • 无针输液系统研究应用进展

    无针输液系统是一种新型现代化输液技术.该系统从根本上实现了静脉输液的无针化,能避免针刺伤的发生,有效降低针刺伤引发的血源性感染,同时职业暴露问题亦得到改善,为医护人员和患者提供了医疗安全双保障,因此无针输液系统受到广泛关注.在国外,该系统在临床工作中已得到普遍应用.本文就无针输液系统的研究应用进展做一综述.

    作者:王沙沙 刊期: 2013年第12期

西部医学杂志

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主管:川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院

主办:四川