学术投稿

人巨细胞病毒UL82基因重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

毛敬伟;李黔生;李磊

关键词:人巨细胞病毒, UL82基因, 基因克隆, 基因表达
摘要:目的:用基因工程技术克隆人巨细胞病毒pp71蛋白基因,构建高效表达pp71蛋白的工程菌.方法:在传代培养的人包皮成纤维细胞中接种人巨细胞病毒(HCMV),待绝大多数的细胞出现了细胞病变效应后,用冻融法收获细胞,用PCR技术扩增目的基因,将基因片段插入表达载体pGEX-4T-1内,转化大肠杆菌DH5α,TPTG诱导其表达.结果:获得的工程菌所表达的pp71蛋白大小约为71000,约占菌体总蛋白的30.0%.结论:成功的构建了oGEX/pp71重组表达质粒,并在DH5α中高效表达出pp71蛋白,为下一步pp71蛋白的大量表达和纯化奠定了基础.
西南国防医药杂志相关文献
  • 纳米技术与口腔材料学的发展

    口腔医学的发展史是与牙科材料-口腔材料学的发展密切相关,而口腔材料学的水平则又基于整个材料学的发展.人类对材料的开发促进了社会进步.口腔材料发展的水平,标志一个社会的现代化程度.材料学已从观察、解释阶段进入到预见阶段,逐步达到能指定性设计材料.材料科学和生命科学-人体科学-口腔科学的交叉,促使传统牙科材料学向口腔生物材料学过渡.

    作者:张文云;李南;贾安琦 刊期: 2004年第04期

  • 碱性成纤维细胞生长因子与肿瘤血管生成研究进展

    碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种能广泛地促进来源于中胚层及神经外胚层细胞增殖的多肽生长因子,于1974年由Gospodarowicz从牛脑垂体和脑组织中分离得到,因其能刺激成纤维细胞分裂增殖而得名.bFGF在体内具有广泛的生理功能.近来研究还表明,bFGF与肿瘤血管生成有密切关系,并越来越引起人们的关注.

    作者:王诗华;曾仁杰;王豫蓉;谭永红;谢军 刊期: 2004年第04期

  • 血管紧张素Ⅱ在纤维蛋白溶解系统中的作用

    血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对纤维蛋白溶解系统(纤溶系统)和血管内环境平衡的调节作用近些年日受重视.新近研究表明,AngⅡ通过自分泌或旁分泌机制调节血管局部纤溶系统和血管内环境的平衡,从而影响局部血管开放和组织供血[1].本文就AngⅡ在这一过程中的作用作一综述.

    作者:和平;刘建平;何国祥 刊期: 2004年第04期

  • 军队医院手术室专业合同护士培训的实践与体会

    近年来,由于部队医院精简整编,合同护士已成为护理工作中的主力军,手术室更是如此.由于整体素质较差[1-3],从而影响了手术室配合质量的稳步提高.我科自1996年开始,开展了合同护士有计划、分层次、分阶段的规范化培训,严格各项管理考核措施,从而提高了合同护士的综合素质.

    作者:尤祥妹 刊期: 2004年第04期

  • 试论整体护理与护士长素质

    护士长在医院整体护理工作中发挥着非常重要的作用,她既是病区整体护理的执行者,又是病区整体护理队伍的带头人,其素质高低直接影响护理工作的质量.因此,要想病区整体护理质量高,必须首先有一个高素质的护士长.怎样才算一个高素质的护士长呢?我们认为应具备四个方面的基本要求.

    作者:李洁;王慧敏;王丽香;刘文清 刊期: 2004年第04期

  • 医疗事故中医生心理特征的探讨

    <医疗事故处理条例>颁布实施后,一方面加大了医院及医护人员的责任,另一方面也赋予了患者更多的权利,正确防范与处理医疗事故已成为当前医院十分重要的问题.过去,在探讨医疗事故的原因时,往往对客观因素分析得比较细致,对主观因素,即对医务人员心理方面的原因考虑得比较笼统,常常说成责任心不强、技术不熟练等,没有挖掘根源,所以,同类医疗事故总是重复发生.新的医学模式将病人的致病因素扩大到心理和社会范畴,那么,医生的诊疗活动也应与其自身的心理活动相联系,这样才符合现代医学发展对医生的要求.本文通过对医生的心理特征进行分析,找出主观因素造成医疗事故的内在原因,对防范医疗事故,提高医疗质量将起到一定的作用.

    作者:唐斌 刊期: 2004年第04期

  • 生存素(Survivin)的克隆表达及生物医学意义初步探讨

    目的:克隆、表达肿瘤特异性凋亡抑制因子(生存素,Survivin),并对其生物学意义进行研究.方法:从人白血病细胞系HL60提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出SVV基因片段.将SVV基因片段插入载体pGEM-T Easy中,经全自动序列分析仪测序正确后用NdeⅠ/XhoⅠ双酶切,亚克隆到原核表达载体pRSET-C中,构建重组表达载体pRSET-c-SVV,并转化大肠杆菌BL21菌株.取工程菌,经IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE鉴定并初步纯化.结果:经RT-PCR测序和酶切鉴定,成功地克隆了人SVV基因;经IPTG诱导的重组质粒pRSET-c-SVV表达出相对分子质量约为16500U的蛋白,与预期的结果相符.结论:成功克隆了人肿瘤细胞的抗凋亡基因SVV,并在大肠杆菌BL21中表达出SVV蛋白.该基因的高效表达为进一步探讨以SVV为基础的肿瘤诊、治奠定了实验基础.

    作者:侯毅鞠;张惠中;张盈华;张利朝;邹爱民 刊期: 2004年第04期

  • 48例尿毒症患者高血钾所致心律失常的治疗体会

    目的:探讨尿毒症患者发生高血钾时所致的各种心律失常的原因、机制,以提高诊治水平.方法:总结48例发生高血钾的尿毒症患者所致心律失常的种类、治疗措施及其效果.结果:在尿毒症患者高血钾所致心律失常中,以窦性心动过缓的发生率为高,达27.0%,其次为房室传导阻滞,发生率≥1.0%.经血透和药物治疗后各种心律失常消失,总有效率为94.0%.结论:高血钾所致的严重心律失常是尿毒症患者死亡的重要原因之一,通过以血透为主的综合治疗,可有效地消除各种严重的心律失常,挽救患者生命.

    作者:李靖;孙丹林;白卫;陈茜 刊期: 2004年第04期

  • 医学心理学与神经康复

    医学心理学与康复医学相对于传统的生物医学模式而言,应该算作是医学领域里的新贵,它们是20世纪后期我国现代医学从生物医学模式向生物-心理-社会医学模式转换的具体表现形式,是现代社会发展的必然产物.以前我们治病只强调临床治愈,对后期的康复治疗不够重视,致使诸多患者产生了这样或那样的心理障碍,以至他们回到工作岗位或重新踏入社会后仍不能很好地工作,仍不能与他人正常交流.这是患者本人的不幸,也是我们整个社会的不幸,这种现象在我国持续了很多年.美国有一位资深的心理医师曾这样断言:随着中国社会向商业化的变革,人们面临的心理问题对自身生存的威胁远远大于一直困扰于中国人的生理疾病[1].心理学家曾统计出了这样一个惊人的数字:在人群中,80.0%的人都在不同的年龄阶段,甚至一生均存在不同程度的心理疾病、人格缺陷和习惯性不良行为.如何保持健康的心理、健全的人格和成熟的心态,是现代人类面临的人生及社会问题[2].

    作者:吴渝宪;王伟文 刊期: 2004年第04期

  • 重症胰腺炎营养支持疗法的护理探讨

    重症胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis,SAP)在当前仍是一种常见极为凶险的外科危重急腹症,我院1994年9月-2002年9月共收治SAP患者142例,短期或长期施行全胃肠外营养(TPN),取得了较为满意的效果.现将护理体会报告如下:

    作者:樊晋;田军;张雪梅;邱永梅 刊期: 2004年第04期

  • 外源性雌激素在脂多糖诱导大鼠急性肺损伤中的作用

    目的:探讨外源性雌激素在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)中对肺脏病理改变及作用机理.方法:选用Wistar大鼠60只,随机分成3组:正常对照组(静注生理盐水)、LPS组(尾静脉注射LPS 5mg/kg)和LPS+雌二醇组(注射LPS 5mg/kg+雌二醇1mg/kg),24h后观察大鼠肺脏病理变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,肺通透指数,外周血中雌二醇和催乳素浓度,肺组织中雌激素受体、孕激素受体表达.结果:注射LPS后肺泡灌洗液中蛋白含量及肺通透指数均升高(p<0.05),给予外源性雌激素可显著减轻上述变化(p<0.05).LPS+雌二醇组外周血中雌二醇和催乳素浓度,肺组织中雌激素受体、孕激素受体含量较LPS组有显著性差异,肺组织损伤较轻.结论:外源性雌激素对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用.

    作者:程青;陈忠庆 刊期: 2004年第04期

  • HP根治前后ASCG胃肠激素及G、D、EC1细胞变化的研究

    目的:探讨HP感染的慢性活动性浅表性胃炎(ASCG)患者HP根治前后胃粘膜中胃肠激素Gas、SS、SP和G、D、EC1细胞变化及其相关性.方法:对35例HP感染的ASCG病人,HP根治前后分别用放射免疫法及免疫组化染色图像定量分析检测其胃窦粘膜中Gas、SS、SP含量和G、D、EC1细胞密度、灰度.结果:HP阳性的ASCG病人经药物治疗根除后胃粘膜Gas含量均较治疗前明显降低(P<0.01或<0.05).图像定量分析示,HP根治前后胃粘膜G、D、EC1细胞密度差异不显著(P>0.05).结论:HP感染干扰了Gas、SS激素分泌释放的调控,是HP相关性胃炎的发病机制之一.SP抑制胃泌素分泌释放,而对生长抑素无抑制作用,具有胃粘膜保护功能.

    作者:黄卫昆;董树强;张宇民 刊期: 2004年第04期

  • 高原腹部闭合性损伤的观察与护理

    我院地处海拔3650m高原,空气中氧分压约为海平面的65.0%.1991年8月-2002年8月,共收治腹部闭合性损伤病人118例,经治疗取得了满意疗效.现对其观察与护理体会报告如下:

    作者:周晓兰;彭桂英;周萍;杨永勤;王碧霞 刊期: 2004年第04期

  • 厄贝沙坦和贝那普利联合治疗肾性高血压的临床观察

    目的:观察厄贝沙坦和贝那普利联合治疗肾性高血压的临床疗效.方法:将88例肾性高血压患者随机分为3组,31例单用厄贝沙坦(A组)、28例单用贝那普利(B组)和29例采用厄贝沙坦联合贝那普利用药(C组)进行比较,疗程均选择为3个月,观察各组治疗前后血压、蛋白尿、血尿酸、血肌酐变化情况.结果:A、B两组平均用药30d后血压明显下降(P<0.05);C组平均用药10d后即出现血压明显下降(P<0.05);C组于用药60d有血肌酐明显下降(P<0.05),而A、B两组血肌酐无明显变化(P>0.05);A、C组用药对血尿酸的降低作用均明显(P<0.05);三组治疗对蛋白尿的控制均有明显效果(P<0.05),同时C组同A、B组疗效间有显著性差异(P<0.05),而A、B两组间疗效无显著性差异(P>0.05).结论:厄贝沙坦和贝那普利联合治疗肾性高血压较单独用药更能有效地控制血压,减少蛋白尿,降低血肌酐和血尿酸.

    作者:刘志康;许亚宏;李健;马小平;汤锋;李宏辉 刊期: 2004年第04期

  • 1782例机械性手外伤的原因分析及对策

    目的:通过对机械性手外伤伤者的致伤原因分析,提出合理化的建议及有效的预防措施.方法:对1782例急诊手外伤患者进行统计学处理.结果:本组1782例手外伤者平均年龄27.71岁,男女之比1.51;1,受伤时间分布以一天中11:00-18:00受伤率高.结论:手外伤的预防工作应加强,特别是在企业管理上要严格落实劳动安全保护制度.

    作者:黄建红;黄德华;邱圳荣;关秀琴;俞玉梅;李宝华 刊期: 2004年第04期

  • 移位再植矫治单纯性上颌尖牙阻生18例报告

    单纯性上颌尖牙阻生是一种并不少见的错(牙合)畸形,会导致上唇局部突出,影响美观和正常的(牙合)关系.近几年,我们利用上颌第一双尖牙的拔牙窝移位再植阻生的上颌尖牙,个别病例配合滑动直丝弓矫治,经2000-2003年临床观察,效果较好.现报告如下:

    作者:李瑛;陈康 刊期: 2004年第04期

  • 心肌细胞凋亡的信号传导途径

    凋亡是细胞死亡的一种形式,受遗传和分子程序控制.凋亡存在于各种心血管疾病中.致细胞凋亡的主要因素有:氧自由基(包括NO)、细胞因子(FAS/TNF-α受体信号)、应激状态(化学或物理、辐射)、血管紧张素Ⅱ等.心肌细胞凋亡对泵衰竭、心律失常和心肌重塑的发展有重要作用,认识众多的靶分子与心肌凋亡的关系,将为治疗提供依据.我们就信号通路蛋白激酶尤其是MAPK系统对细胞凋亡的作用作一综述.

    作者:杨丽霞;祝善俊 刊期: 2004年第04期

  • 加强综合素质教育培养合格人才

    加强综合素质教育,培养合格人才,是教学医院谋取求新的突破,是实现快速发展的根本任务.我院始终把培养合格人才放在首位,经过教职员工的共同努力,临床教学质量得到明显提高.

    作者:韩景芳 刊期: 2004年第04期

  • 海洛因中毒37例抢救体会

    目的:探讨海洛因中毒救治效果.方法:37例确诊后,在保持呼吸道通畅情况下,迅速予以静脉注射纳络酮0.4-0.8mg/次,恢复自主呼吸12次/min以上,间隔5-15min重复使用,或改为静滴,直至自主呼吸恢复.结果:本组37例海洛因中毒者,34例抢救成功.15例并发肺水肿,其中3例因肾功衰竭、低血压休克和合并酒精中毒各1例,经抢救无效死亡.结论:海洛因中毒主要危险为呼吸中枢抑制和肺水肿,在诊断明确后,应尽早、尽快迅速投用阿片拮抗剂纳络酮是抢救成功的关键.

    作者:鲁国勇;董明志 刊期: 2004年第04期

  • 中西医结合治疗股骨头缺血性坏死的疗效观察

    目的:探讨中西医结合治疗股骨头缺血性坏死的新方法与作用机制.方法:采用中西医结合、内外合治的六联疗法对股骨头缺血性坏死148例进行综合治疗;参考95丹东成人股骨头缺血性坏死疗效评价标准及曾氏报道综合治疗评价标准;并于治疗前及治疗后8周,对94例患者进行血液流变学、血脂的检测.结果:本疗法总有效率为97.3%.全血粘度、甘油三脂、总胆固醇,治疗前后有显著差异(P<0.01).结论:中西医结合、内外合治的六联疗法,可以降低血脂,改善血液循环,促进坏死股骨头的修复与再生.

    作者:彭仲杰;宁亚功;王云华;李峻辉;叶建红;吕丽;吴亚玲 刊期: 2004年第04期

西南国防医药杂志

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主管:成都军区联勤部卫生部

主办:成都军区医学科学技术委员会