核因子-KB与大肠肿瘤细胞凋亡及增生的关系

肝干细胞的研究进展

肝干细胞的存在与否曾是一个争议性问题,目前则趋于肯定,并取得重要研究进展.肝干细胞有肝源性和非肝源性两类,前者包括胆管源性卵圆细胞和分化肝细胞,后者包括胚胎干细胞(ES细胞)、骨髓/血液干细胞及胰腺上皮细胞等.肝干细胞受多种细胞因子调节;卵圆细胞可通过流式细胞仪分离,经特殊培养液培养条件及遗传学改造等进行长期培养;肝干细胞与肝坏死后的再生及增生有关,也和肝细胞癌变有关.已在动物中成功进行了肝源性和非肝源性肝干细胞移植.肝干细胞是研究肝细胞发育、生长、增生、再生、纤维化及癌变等生理和病理生理过程中不可缺少的关键角色,并可能通过肝细胞移植、体外生物人工肝及肝导向基因治疗,在多种肝病及肝脏相关疾病中发挥重要作用.

作者：王宇明；陈耀凯 刊期： 2002年第03期

2002年度《消化病诊断和治疗》节目单二

作者： 刊期： 2002年第03期

重视食管静脉曲张出血内镜与药物的联合治疗

食管静脉曲张出血(EVB)是肝硬化患者死亡的重要原因之一.首次和再次静脉曲张出血病死率均为30～50%.采用内镜治疗EVB止血率可达85%以上,食管静脉曲张消失率达83%,出血死亡率可下降至10%左右.急诊内镜控制EVB效果远优于三腔二囊管和血管加压素,并可减少早期再出血率.然而活动性出血时内镜视野欠清晰,且ELS和EVL治疗后,曲张静脉闭塞消失之前,仍有一定的再出血率,并可出现溃疡、穿孔、吞咽困难、食管狭窄等并发症.内镜治疗联合应用血管收缩剂、β-受体阻滞剂、钙离子拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂、抑酸剂、止血剂等药物,可降低内镜治疗过程中注射拔针时针孔喷血和涌血发生率,减少活动性出血,使视野变清晰.可降低急诊手术率、休克发生率,提高内镜治疗的安全性和成功率.此外,能减少输血需求量,降低近期再出血率,预防再次出血或减少再出血,推迟曲张静脉再破裂出血时间,并能明显减少吞咽困难和食管狭窄的形成,促进硬化治疗后,食管或胃底溃疡的愈合.联合治疗可使患者从中获得诸多益处.

作者：常丽丽；任锡玲；高富贵；刘玉珍 刊期： 2002年第03期

中国消化内镜治疗水平现状

随着消化内镜治疗附件的不断发明和临床应用,治疗项目在不断扩大,且向纵深开展.近十多年来取得了飞速发展.(1)消化道大出血的内镜止血术不论是静脉曲张破裂出血还是其他原因的出血,通过局部喷洒止血剂、局部注射止血剂、金属夹子、激光、微波、套扎器止血等,已使即刻止血成功率达到95%以上,其中包括动脉破裂出血.(2)消化道息肉切除术:通过高频电、微波等方法的治疗,目前已可使95%以上的消化道息肉得到治疗,且出血、穿孔并发症的发生率控制在5%以下.(3)消化道早期癌的切除术:按照内镜绝对指征,内镜下使用多种黏膜切除术方法可使早期癌的完全切除率达到95%.但目前能够开展此工作的医院尚不普及,且用超声内镜进行术前确定癌灶浸润深度的论文尚少.(4)消化道狭窄扩张术:使用探条、气囊、电切、微波、激光等方法可使不同类型的狭窄段得到扩张,其短期疗效达到95～l00%.对于一些癌性狭窄的患者,扩张后可放置各种支架而保持其通畅,其成功率在95%以上.(5)胰胆疾病的治疗:目前已在全国较大范围开展了乳头切开、取石、内外引流管的植入等治疗.但如何减少并发症的发生和进一步扩大开展医院是今后的发展方向.(6)超声内镜及其微探头:其在确定癌灶浸润深度、确定病变性质等方面已显示出优越性,配合细针穿刺、活检可大大提高诊断的准确率和治疗作用,有待今后扩大应用医院.

作者：苏鲁 刊期： 2002年第03期

肝靶向基因给药系统AsOR-PL+PEG-PEl的研究

目的:研制含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的肝靶向的DNA给药系统.方法:分别制备As0R-PL偶合物及PEG-PEI偶合物.然后按照不同的比例先后与报告基因DNA形成复合物,再进行Huh-7细胞的体外转染试验和静脉给药后小鼠体内的表达试验.结果:AsOR-Pt/PFG,-PEt/DNA复合物对受体阳性的Huh-7细胞具有较高的转染效率;小鼠尾静脉给药后能够在肝脏特异性表达.结论:含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的载体系统能将DNA选择性的投放于小鼠肝脏,显示了较好的应用前景.

作者：靳雪源；张玲霞；楼敏；谢建芳 刊期： 2002年第03期

西安地区急性GBVmC/HGV感染者的分子流行病学及临床特征

目的:为了了解西安地区急性GBV-C/HGV感染者的分子流行病学及临床特征.方法:连续收集急性病毒性肝炎病例458例,诊断符合上海会议标准.经ELISA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测HGVRNA,采用统一<急性病毒性肝炎调查表>,由专人负责进行l临床和流行病学调查.所有数据用EPI软件处理.结果:经ELISA检测的67例非甲-戊型肝炎患者经套式PCR方法检测有17例呈HGVRNA阳性,50为诊断不明患者.通过对17例HGVRNA阳性患者的流行病学分布所进行的分析表明HGV极易感染抵抗力较弱的儿童和老年人,26岁以下占88.23%,与同一人群同年龄乙肝、丙肝和丁肝患者相比,明显增多,经x2检验有统计学意义(P＜0.05).而当HGV与HCV或HBV同时感染时,致病力增强,可以使各年龄段人群感染.同时我们可以看到HGVRNA阳性患者于冬春季有一明显的发病高峰,尤以冬季为明显.结论:GBV-C/HGV并不是临床急性肝炎的主要致病因子.HGVRNA阳性患者在暴露因素、流行病学及临床特征等方面具有与其他各型肝炎相同或相似的特点.

作者：李如琳；徐德忠；聂青和；闫永平；张景霞 刊期： 2002年第03期

原发性肝癌HSP70与MHC-I类抗原表达的意义

目的:研究热休克蛋白70(HSP70)与MHC-I类抗原(HLA-A/B/C)在人原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达并探讨二者与肿瘤生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测了10例正常肝组织、40例HCC肿瘤组织及癌旁组织中HSP70及MHC-I类抗原的表达.结果:HSP70在正常肝脏、癌旁组织、HCC中的阳性表达率分别为10%(1/10)、45%(18/40)、80%(3/40),HCC中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常肝脏(Xl2=10.45,X22=14.49,P＜0.05).HLA-A/B/C在正常肝脏、癌旁组织、HCC中的阳性表达率分别为100%(10/10)、95%(38/40)、55%(22/40),其在癌组织阳性表达率明显低于癌旁组织和正常肝脏组织(x12=5.21,X22=17.06,P＜0.05).HSP70表达与癌周淋巴细胞浸润(X2=1.4,P＞0.05)和转移(X2=1.9,P＞0.05)无关,但与癌组织分化程度有关,HSP70在高、中、低分化肝癌中的阳性表达率分别为50%(5/10)、78.6%(11/14)、100%(16/16),中、低分化肝癌中的阳性表达率高于高分化肝癌(X2=9.40,P＜0.05).HSP70+HSP70+HLA-A/B/C+者,高、中、低分化HCC所占比例分别为22.2%(4/18)、50%(9/18)、27.8%(5/18).HSP70与HLA-A/B/C其一或二者均为阴性时,高、中、低分化HCC所占比例分别为18.2%(4/22)、22.7%(5/22)、59.1%(13/22).前者分化程度高于后者(X2=8.13,P＜0.05).结论:HSP70在HCC中表达增高,HSP70可作为判断HCC分化程度的指标;HSP70与MHC-I类抗原均为阳性者HCC分化程度较高,二者在HCC的演变过程中可能发挥作用.

作者：吴胜利；潘承恩；杨威；牛新捷；耿志敏 刊期： 2002年第03期

鸡腿蘑多糖对肿瘤生长的抑制作用

目的:研究鸡腿蘑多糖(CCP)对肝癌细胞体外增生的抑制作用和对小鼠Slso腹水瘤与实体瘤的抑制作用.方法:人肝癌SMMC-7721细胞与CCP共培养后,MTF比色分析法检测活细胞数;显微镜直接计数法测定CCP对小鼠S180腹水瘤细胞有丝分裂指数的影响;腹腔注射CCP,用ANAE法测定CCP对T淋巴细胞增生的作用;观察不同浓度的CCP对肝癌SMMC-7721细胞及小鼠S180腹水瘤、实体瘤生长的影响.结果:CCP对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增生有一定抑制作用,在50-200mg@L-1范围中作用与浓度呈正相关(r=0.8,P＜0.01);显著抑制小鼠S180实体瘤和腹水瘤的生长(P＜0.05),治疗组50mg@kg-1的CCP对小鼠移植性实体瘤抑瘤率达59%;能明显降低腹水瘤有丝分裂指数(P＜0.05),50mg@kg-1的CCP可使小鼠S180水瘤有丝分裂指数从3.4%降低到1.5%;50mg@kg-1的CCP使T淋巴细胞数量增长35.38%(P＜0.05),通过上调T细胞数量进一步调节细胞免疫,增强机体对肿瘤的免疫能力.结论:鸡腿蘑多糖(CCP)能抑制肿瘤的生长,具有预防和治疗癌症的潜在价值.

作者：崔晻；张好建；安利国 刊期： 2002年第03期

细胞间黏附分子-1与胃癌侵袭转移关系的研究

细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是体内重要的免疫活性分子,参与机体免疫过程,尤其是在炎症、肿瘤的发生发展中起着极为重要的作用.ICAM-1通过与其相应配体的结合,介导肿瘤细胞与不同细胞、基质的黏附,终使癌细胞逃避免疫监视,利于侵袭转移.近年来,国外对ICAM-l与胃癌侵袭转移关系的研究相当活跃,本文就其研究进展作一综述.

作者：倪海滨；张彦亮；黄介飞 刊期： 2002年第03期

腺苷蛋氨酸治疗急性黄疸型肝炎的疗效31例

目的:观察腺苷蛋氨酸治疗急性黄疸型肝炎的疗效.方法:治疗组3l例.使用腺苷蛋氨酸每日1000mg,稀释后静脉滴入,通过4wk治疗,两组治疗经温度计学处理.结果:存在显著差异(P＜O.05).结论:腺苷蛋氨酸治疗急性黄疸型肝炎有很好的疗效.

作者：呼守舫；从丽娴 刊期： 2002年第03期

非甾体类抗炎药对胃癌SGC7901细胞增生及环氧合酶活性的影响

目的:探讨非甾体类抗炎药(nonstemidal anti-imqammatory drugs,NSAID)对体外培养的胃癌细胞SGC7901生长及环氧合酶活性的作用.方法:用MTT法观察阿司匹林、尼美舒利对胃癌细胞SGC7901生长的影响;免疫细胞化学方法检测Ki-67及COX-2蛋白表达;采用放射免疫分析法测定细胞培养上清PGE2水平.结果:阿司匹林和尼美舒利呈时间、剂量依赖性方式抑制细胞增生,减少Ki-67蛋白表达.胃癌细胞SGC7901COX-2蛋白表达阳性,并伴有PGE2释放,尼美舒利可减少PGE2产生,但对COX-2蛋白表达无影响.结论:阿司匹林和尼美舒利均可抑制COX-2表达阳性的胃癌细胞SGC790l生长,尼美舒利通过抑制COX-2酶活性而减少PGE2释放,该研究提示COX-2可能在胃癌细胞SGC7901增生中起重要作用.

作者：李建英；于皆平；罗和生；余保平；黄杰安 刊期： 2002年第03期

酒精性脂肪肝的发病机制研究进展

近几年来我国脂肪肝的发病率呈上升趋势,酒精的消耗也在逐年上升,而酒精是导致脂肪肝的重要因素之一,其危害性已经引起人们的关注.但由于其发病机制的复杂性,其治疗效果并不尽人意.可以说,酒精性脂肪肝的治疗进展就是其发病机制研究进展的一个重要体现.因此,深入研究脂肪肝的发病机制将会极大地促进临床治疗以及对于该病的防治.目前,国内对酒精性脂肪肝的研究多偏向于中医药,中医对该病的病机演变、辨证论治等进行了研究和论述,并取得了一定进展.本文将从乙醇和乙醛、氧应激与脂质过氧化、β-内啡肽、铁、炎症递质与细胞因子、免疫学等方面阐述酒精性脂肪肝的发病机制.

作者：冯志强；沈志祥；谭诗云 刊期： 2002年第03期

肝细胞体外培养技术的研究现状

本文综述了肝细胞原代分离、低温冻存、培养液补充物、常用肝细胞培养方法等肝细胞体外培养的有关内容,强调非实质细胞和基质生物学在维持细胞形态和功能方面的重要性.体外肝细胞培养技术及其应用方式都取得了长足进步,反映了肝组织生物学的重大进展.许多新技术已应用于临床,取得良效,如微囊肝技术用于肝细胞移植肝细胞中空毛细血管三维培养技术用于生物型人工肝支持系统等.随着肝细胞生物学和细胞培养技术以及细胞工程技术的发展,我们将能更好地模拟肝细胞的体内生长环境,从而体外大规模长期培养活力旺盛功能良好的肝细胞,应用于临床.

作者：张颖；白雪帆；黄长形；吴军正 刊期： 2002年第03期

构建乙型肝炎核酸疫苗的几条新思路

近年来兴起的核酸疫苗的研究在乙型肝炎的防治中显示出诱人的前景,引起了国内外学者们的关注.然而,研制高效低毒的乙型肝炎核酸疫苗仍是目前研发的主要目标.本文就如何构建高效的乙型肝炎核酸疫苗提供了几条新思路.

作者：刘宏；赵连三 刊期： 2002年第03期

γ-干扰素对大鼠二甲基亚硝胺肝纤维化肝脏胶原代谢的作用

目的:探讨γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)影响肝脏胶原代谢的抗肝纤维化作用机制.方法:二甲基亚硝胺腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,以IFN-γ5万U/只,im,bid,共4 wk.观察大鼠的体质量、肝脾重质量等一般情况.大鼠肝脏HE染色与丽春红胶原染色,分级分期观察肝组织的炎性坏死与胶原纤维沉积变化.检测大鼠血清肝功能与肝组织羟脯氨酸含量,分析肝组织间质型胶原酶(interstitialcollagenase,MMP-1)活性,检测肝组织I型前胶原[a1(1)]基因表达.结果:模型大鼠肝脏胶原纤维间隔形成,肝小叶与肝窦内胶原增生沉积明显;脾脏明显增大;血清ALT活性升高;肝组织羟脯氨酸含量上升,MMP-1活性轻度上升,I型前胶原基因表达明显增多.与模型对照组比较,γ-于扰素可显著降低模型大鼠肝组织羟脯氨酸含量(29.8±u.0μg@g-1,vs 44.7±14.2μg@g-1,P＜O.05),减轻肝脏内胶原纤维增生沉积,降低血清ALT活性(478.4±156.4 nkat@L-1,vs 1055.2±l28.4 nkat@L-1,P＜0.05),提高肝组织MMP-1活性(39.8±6.5 u,vs 32.O±2.8 U,P＜0.05),降低I型前胶原基因表达(84.8±9.5%,vs 112.3±8.7%,P＜0.05).结论:IFN-γ有良好的治疗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化效果,其作用机制主要在于纠正纤维化肝脏异常胶原代谢,即抑制肝脏纤维过度增生,促进增生沉积的胶原降解.

作者：刘成海；李风华；顾宏图；胡义扬；刘平；刘成 刊期： 2002年第03期

大鼠肝细胞癌形成过程中Smad2/3的表达

目的:了解肝细胞癌(HCC)形成过程中smad2/3蛋白表达的变化.方法:免疫组化检测3'-甲基4-二甲基偶氮苯(DAB)诱发的HCC中smad2/3蛋白的表达,探讨smad2/3在HCC形成过程中的作用.结果:HCC形成过程中smad2在增生、不典型增生的胆管细胞、肝细胞内均有表达阳性率l00%(19/19),而smad3仅个别例中有局灶性表达,阳性率15.8%(3/19),二者有显著差异(P＜0.01).8mad3主要在星状细胞中表达.癌细胞中smad2、3的阳性率分别为l00%(11/11),9.1%(1/11)(P＜0.01).结论:增生、不典型增生的细胞产生的TGF-β可激活其下游的smad信号转导蛋白使其在细胞质中的表达增加,并可形成DNA结合复合物进入胞核调节基因的表达,从而实现TGF-β的增生调控作用.smad2的表达强弱与HCC发展呈正相关.smad3在间质形成和纤维化中发挥作用.

作者：胡志英；胡锡琪；朱世能；顾映红 刊期： 2002年第03期

肿瘤转移抑制基因α-连环素与胃肠道肿瘤

钙粘蛋白复合体是近10 a来发现的细胞信号转导系统,他与细胞间紧密连接的建立、细胞极性的维持、伤口的愈合以及肿瘤的发生和发展等多种生理和病理过程有着密切的关系.此复合体中的α-连环素对其有独立的调控作用,其表达情况是反映此复合体功能的敏感指标.检测肿瘤组织中α-连环素的表达有助于对肿瘤的生物学表型作出判断,对患者预后的估计也有帮助.本文综述了近年来关于α-连环素的生物学性质、功能调控、α-连环素在胃肠道肿瘤中的表达特点以及α-连环素的检测方法.

作者：陈国裕；陈锡镁 刊期： 2002年第03期

丹参酸乙的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞增生的影响

目的:研究丹参酸乙(salvianolic acid B,SAB)的抗氧化作用对大鼠肝星状细胞(hepatic stallate cells,HSC)增生周期的影响.方法:采用原位灌注法消化大鼠肝脏,108g@L-1nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞,分别以不同浓度的SAB或MDA/SAB处理细胞,3H-TdR掺入法观察细胞的增生能力,流式细胞术分析细胞周期各时相变化及凋亡情况.结果:1和10 tanol@L1SAB可显著抑制HSC的增生(2862±123M&2988±407 vs 4986±727,P＜0.05,P＜0.01),这种作用主要是抑制了细胞周期过程中G期向S期的过渡;1和10 pmol@L1SAB均可抑制MDA刺激的HSC增生(3067±73l&3042±321vs4007±587,P＜0.05,P＜0.01);两组剂量的SAB均不促进HSC的凋亡.结论:丹参酸乙可抑制体外培养HSC的增生,这种抑制作用与SAB的抗氧化作用有一定的关系.

作者：崔云华；王晓玲；刘晴；刘平 刊期： 2002年第03期

扩张置管术治疗食管狭窄和瘘

0 引言食管狭窄和瘘导致患者进食困难,引起严重感染,影响患者生活质量和生存期,随着介入治疗技术的不断发展,扩张置管术已成为治疗食管狭窄和瘘的主要方法,在器械选择、操作技术、临床疗效、并发症及防治等方面积累了丰富的经验.

作者：邵先玉；陈振华；宁建文 刊期： 2002年第03期

幽门螺杆菌18000u外膜蛋白编码基因的克隆及表达

目的:构建含幽门螺杆菌(Hp)18000 u外膜蛋白编码基因的重组载体并在E.coli BL2l中表达.为Hp的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础.方法:用PCR从Hp染色体中,扩增18000 u外膜蛋白编码基因片段.将目的基因与pET32a(+)同时经BamH I,HindⅢ双酶切、纯化、连接,转化含有目的基因的重组载体.以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21(DE30)并表达.表达产物经纯化后,用ELISA法检测其抗原性.结果:经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hpl8000 u的外膜蛋白编码基因,与Tomb等报道相比较,有2%编码基因发生变异,1.7%氨基酸残基改变.经SDS-PAGE分析发现,融合基因表达的蛋白为38000 u,其中pET32a(+)表达的蛋白约为20000u,可溶性表达产物占全菌总蛋白的21.3%.重组蛋白经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上.ELISA法检测显示,该重组蛋白可被Hp阳性患者的血清所识别,具有良好的抗原性.结论:成功地克隆并表达Hp18000 u的外膜蛋白编码基因,为Hp蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究奠定了基础.

作者：姜政；黄爱龙；汪志群；陶小红；王丕龙；蒲丹 刊期： 2002年第03期