学术投稿

巢式实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA的临床应用

孟小蓉;包勇;李凯;曹敏;纪风兵

关键词:巢式实时荧光定量, DNA, 结核分枝杆菌, 结核病
摘要:目的 探讨巢式实时荧光定量PCR(QNRT-PCR)检测结核分枝杆菌(MTB) DNA的临床价值.方法 应用SYBR Green Ⅰ建立检测结核分枝杆菌MTP64基因的QNRT-PCR方法,分别检测24份肺结核患者痰液,27份结核性胸膜炎患者胸水,以及对照组75份痰液和胸水的MTB DNA含量.结果 以培养为金标准,QNRT-PCR敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)分别为95.83%、61.54%、69.70%和94.12%,结核性胸膜炎的阳性率为70.37%.三种PCR方法阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05),QNRT-PCR与实时荧光定量PCR拷贝数配对检验差异没有统计学意义(P>0.05),QNRT-PCR与实时荧光定量PCR的Cr值配对检验差异具有统计学意义(P<0.01).结论 QNRT-PCR方法可检测痰液和胸水MTB DNA,对含微量MTB DNA样本的高敏感性在结核病的早期诊断中有重要参考价值.
中华肺部疾病(电子版)杂志相关文献
  • EGFR-TKIs治疗非小细胞肺癌并发相关间质性肺病的诊治

    近年来,分子靶向药物表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)对EGFR敏感突变晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的疗效已经获得肯定.随着应用的深入,临床发现EGFR-TKIs治疗NSCLC并发相关间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)成为其临床应用中需要重视的问题.ILD是EGFR-TKIs治疗中少见但致死的不良反应,病死率较高.目前,其发生机制仍不明确,尚无统一的诊断和治疗标准.现就EGFR-TKIs治疗NSCLC并发相关ILD的发病情况、诊断和治疗现状进行综述,并分析其可能的发生机制,以期为今后临床预防、诊断和EGFR-TKIs治疗NSCLC并发相关ILD提供参考.

    作者:何勇;崔社怀 刊期: 2014年第01期

  • 克里唑替尼在非小细胞肺癌治疗中的研究进展

    肺癌作为常见的恶性肿瘤之一,具有预后差、中位生存期短和5年生存率极低的特点.包括鳞癌、腺癌、大细胞癌等,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌总数的85%,相对于小细胞肺癌来说,对于传统化疗反应不佳,造成了临床上的治疗难题[1-2].虽然自2002年起,针对NSCLC的分子靶向治疗的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)已应用于临床,但临床研究表明,并非所有NSCLC患者都对EGFR-TKI敏感[3].在NSCLC患者中,间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因重排的阳性率大约为3% ~5%.

    作者:刘春花;宋勇 刊期: 2014年第01期

  • 肿瘤相关性巨噬细胞在非小细胞肺癌中的研究进展

    巨噬细胞是机体免疫反应中的一种重要细胞,既往认为其可直接杀伤肿瘤细胞或者通过抗原提呈作用诱导机体免疫应答进而清除肿瘤细胞,在抗肿瘤免疫调节中发挥着重要作用.然而,近年来越来越多的研究表明肿瘤微环境中浸润的巨噬细胞即肿瘤相关性巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)不但不能起到抗肿瘤的作用,相反具有促进肿瘤进展的作用.既往的研究已经提示TAMs的广泛浸润与乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等的不良预后有关[1-2].但TAMs在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的作用尚有争议.现就TAMs在NSCLC中的研究进展进行综述.

    作者:白翠青;姚艳雯;宋勇 刊期: 2014年第01期

  • 认知行为治疗对慢性阻塞性肺疾病患者睡眠障碍的改善作用

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)通常伴有不同程度的睡眠障碍和夜间低氧血症.夜间睡眠质量的下降严重的影响着COPD患者的生活质量以及疾病康复[1].镇静催眠药物可以引起低氧血症和高碳酸血症,而且COPD患者常伴有抑郁症状,其安全性差.COPD患者睡眠障碍主要有以下因素,如夜间气短咳嗽,长期患病导致心理障碍,白天卧床多户外活动少以及治疗COPD的一些药物影响睡眠[2].综合以上导致睡眠障碍的原因以及认知行为治疗对慢性失眠治疗效果,本研究旨在通过认知行为的治疗改善COPD患者的睡眠[3].

    作者:谢梅;李凤娟 刊期: 2014年第01期

  • 非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体基因突变与ERCC1和RRM1 mRNA表达的关系

    目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中人表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与切除修复交叉互补蛋白1(ERCC1)和核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1) mRNA表达的关系.方法 应用实时荧光定量PCR方法检测257例NSCLC组织中EGFR基因突变、ERCC1和RRM1 mRNA的表达.结果 NSCLC组织中EGFR基因突变率占49.03%(126/257),在女性和不吸烟患者中较高(P<0.05);ERCC1mRNA高表达占47.47%(122/257),RRM1mRNA高表达占61.87%(159/257).与未检测到EGFR基因突变的NSCLC患者比较,EGFR基因突变中ERCC1mRNA低表达者多见(P<0.05);NSCLC组织中,EGFR基因突变与RRM1mRNA表达水平无关(P>0.05);ERCC1mRNA表达水平与RRM1mRNA表达水平无关(P<0.05).结论 NSCLC组织中EGFR基因突变患者ERCC1倾向低表达,可能受益于以铂类药物为基础的化疗.

    作者:田玉旺;许春伟;高文斌;张玉萍;李扬;亓岽东 刊期: 2014年第01期

  • 振动排痰对不同肺功能分级慢性阻塞性肺疾病的疗效

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以炎症反应、气流受限为特点的慢性疾病,且气流受限呈持续性、进行性加重,临床主要表现为反复咳嗽、咳痰、气促.痰液引流在COPD的临床治疗上具有重要意义.本研究对2013年1月1日至8月15日入住我科治疗的COPD患者,在接受经验抗感染、雾化平喘、药物祛痰、氧疗的基础上联合使用振动排痰仪排痰治疗,并比较了不同肺功能严重度分级的慢性阻塞性肺疾病患者对振动排痰仪排痰治疗的疗效.现报道如下.

    作者:尹慧;龙翔;宋卫东 刊期: 2014年第01期

  • 慢性阻塞性肺疾病急性加重期血清皮质醇的表达特征

    目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)血清皮质醇的表达特征.方法 随机选取2011年10月至2012年10月在我院住院的AECOPD患者65例为COPD组,根据肺功能结果分为轻中度组33例及重度、极重度组32例,同期住院的非COPD患者33例为非COPD组.全部研究对象分别于入院后第二天的8 am、4pm及0am三个时间段各抽取肘静脉血,分别检测血清皮质醇和促肾上腺皮质激素水平.结果 三个不同时间段轻、中度组及重度、极重度组皮质醇水平明显低于非COPD组(P<0.01);8am时段轻、中度组明显低于重度、极重度组(P<0.01).三个不同时段轻、中度组及重度、极重度组促肾上腺皮质激素水平高于非COPD组(P<0.05).结论 AECOPD患者存在肾上腺皮质代谢紊乱,表现为血清皮质醇水平降低,促肾上腺皮质激素水平升高.

    作者:韦鹏;陈昌枝 刊期: 2014年第01期

  • 结缔组织病相关肺动脉高压的研究进展

    肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一组以肺动脉平均压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)升高为特征的临床-病理生理综合征.肺血管重塑引起肺循环血流动力学改变,终导致右心衰竭,作为具有潜在破坏力的慢性肺循环疾病,PAH一直是临床诊治的难点.结缔组织病(connective tissue disease,CTD)多系统损害的特点使之与PAH密切关联.结缔组织病相关肺动脉高压(CTD-PAH)已日益受到人们的关注.现对CTD-PAH的研究进展作简要综述.

    作者:董佳慧;孙耕耘 刊期: 2014年第01期

  • 甲状腺转录因子-1,细胞角蛋白8/18,P63和HMW联合检测对肺鳞癌和肺腺癌鉴别诊断价值

    目的 探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)、细胞角蛋白8/18(CK8/18)、P63细胞角蛋白HMW(CK-HMW)联合检测在鉴别肺鳞癌和肺腺癌中的价值.方法 收集2010年1月至2012年12月入住华中科技大学武汉同济医院1028例肺鳞癌和肺腺癌患者的病理组织标本及相关临床资料.采用免疫组化EnVision两步法分别检测TTF-1、CK8/18、P63及HMW在肺鳞癌和肺腺癌中的表达并对结果进行分析.结果 单个免疫组化标志物中,P63对于诊断肺鳞癌和肺腺癌有较高的灵敏性和准确度,TTF-1诊断肺腺癌的敏感性为86.3%,特异度为87.7%,准确度为86.8%;CK8/18诊断肺腺癌的敏感性为100%,特异度为16.0%,准确度为68.7%;P63诊断肺鳞癌的敏感性为97.2%,特异度为79.0%,准确度为90.5%;HMW诊断肺鳞癌的敏感性为100%,特异度为25.0%,准确度为80.3%.P63和HMW共同阳性表达对于诊断肺鳞癌的特异度和准确度均大大提高,为76.9%和92.2%,而TF-1和CK8/18共同阳性表达对肺腺癌的特异度和准确度也大大提高,为100%和96.6%.结论 TF-1、CK8/18、P63和HMW的联合检测对鉴别肺鳞癌和肺腺癌有很高的价值,P63和HMW、TTF-1和CK8/18的联合检测可以显著提高肺鳞癌和肺腺癌诊断的准确度.

    作者:郑姮;段楚骁;付圣灵;徐沁孜;付向宁 刊期: 2014年第01期

  • 巢式实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA的临床应用

    目的 探讨巢式实时荧光定量PCR(QNRT-PCR)检测结核分枝杆菌(MTB) DNA的临床价值.方法 应用SYBR Green Ⅰ建立检测结核分枝杆菌MTP64基因的QNRT-PCR方法,分别检测24份肺结核患者痰液,27份结核性胸膜炎患者胸水,以及对照组75份痰液和胸水的MTB DNA含量.结果 以培养为金标准,QNRT-PCR敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)分别为95.83%、61.54%、69.70%和94.12%,结核性胸膜炎的阳性率为70.37%.三种PCR方法阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05),QNRT-PCR与实时荧光定量PCR拷贝数配对检验差异没有统计学意义(P>0.05),QNRT-PCR与实时荧光定量PCR的Cr值配对检验差异具有统计学意义(P<0.01).结论 QNRT-PCR方法可检测痰液和胸水MTB DNA,对含微量MTB DNA样本的高敏感性在结核病的早期诊断中有重要参考价值.

    作者:孟小蓉;包勇;李凯;曹敏;纪风兵 刊期: 2014年第01期

  • 急性重症呼吸衰竭与体外膜肺氧合

    急性重症呼吸衰竭(severe acute respiratory failure)是由于肺外或肺内的严重疾病引起肺损伤导致气体交换障碍,产生严重的低氧血症和/或高碳酸血症,其病情较重,病死率高.尽管在呼吸危重病治疗方面已取得一些进展,但由于急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome,ALI/ARDS)病因复杂,发病机制不明,并无有效的救治方法,已有的数据显示急性重症呼吸衰竭患者病死率可高达80% [1-2].

    作者:金发光 刊期: 2014年第01期

  • 肺癌化疗相关性白细胞减少的危险因素分析

    目的 探讨肺癌化疗后发生化疗相关性白细胞减少(CIL)的危险因素.方法 采用回顾性病例对照研究的方法,将192例肺癌化疗后发生CIL患者(CIL组)和100例无CIL患者(对照组)的临床指标进行单因素和多因素分析.结果 在292例肺癌化疗患者中,共192例出现CIL,发生率为65.8%,其中28例(14.6%)为Ⅲ-Ⅳ级CIL.两组的性别(P=0.691)、年龄(P =0.245)、基础疾病(P=0.670)差异无统计学意义.CIL组的体质量下降率、PS评分、治疗前白细胞计数、治疗前血小板计数、曾接受化疗次数与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).多因素分析显示治疗前白细胞减低(OR=11.852)、体质量下降率≥5%(OR =0.324)、曾接受化疗次数≥3(OR=2.709)是肺癌化疗后发生CIL的独立危险因素.结论 治疗前白细胞减低、体质量下降率≥5%、曾接受化疗次数≥3是肺癌化疗后发生CIL的独立危险因素.

    作者:罗莉;张明周;朱小莉;吴学玲 刊期: 2014年第01期

  • 慢性阻塞性肺疾病评估测试的研究进展

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以持续存在并呈进行性发展的气流受限为特征的慢性呼吸系统疾病[1-2],具有发病率、致残率和病死率均较高的特点.预计到2020年,COPD将是导致全球疾病死亡的第三大原因,仅次于肿瘤和脑血管疾病[34].在中国40岁以上的居民中COPD患病率高达8.2%[5].COPD不仅表现为慢性咳嗽、咳痰、气喘等呼吸系统症状,还常伴有一些肺外症状,如活动受限、肌肉萎缩、骨质疏松、情绪障碍、睡眠障碍等[5],严重影响患者的生活质量.尽管目前对COPD的诊治逐渐规范化,但仍有许多患者由于不能正确评估疾病严重程度和治疗疗效而未能得到充分正确的治疗,从而导致生活质量的进一步恶化.生活质量现已成为衡量COPD科学研究及治疗疗效的重要标准[6-7],提高生活质量也是COPD的主要治疗目标之一[1].

    作者:涂友慧;费广鹤 刊期: 2014年第01期

  • 奈达铂联合多西他赛二线治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

    目的 探讨奈达铂联合多西他赛二线治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的有效性及安全性.方法 选择100例一线治疗失败的晚期NSCLC患者,随机分为试验和对照两组,试验组接受奈达铂+多西他赛化疗,对照组接受多西他赛单药化疗,评价两组患者的疗效、无进展生存时间(PFS)、中位总生存时间(OS)和不良反应.结果 试验组与对照组患者的疾病控制率(DCR)分别为80%和62%,两组差异有统计学意义(P<0.05).试验组与对照组患者的中位PFS分别为4.2个月和4.0个月,中位OS分别8.8个月和8.1个月,1年生存率分别为24%和22%,两组差异无统计学意义(P>0.05).试验组的不良反应包括白细胞减少、血小板减少及恶心、呕吐,发生率均明显高于对照组.结论 与多西他赛单药相比,奈达铂联合多西他赛二线治疗晚期NSCLC,可提高DCR,但未延长PFS,未显著增加OS,血液学及消化道不良反应更明显,但可耐受.

    作者:谢强;陈群;石琴;林江平;王成辉;钟爱虹;卢筠 刊期: 2014年第01期

  • 肺原发恶性黑色素瘤1例并文献复习

    黑色素瘤又称恶性黑色素瘤,以皮肤黑色素瘤多见,而原发于肺部者极其罕见.肺黑色素瘤在临床上容易引起误诊,现结合我院近期收治的1例肺部黑色素瘤病例,并复习国内文献报道如下.临床资料患者,58岁,女性,以“反复咳嗽、咳痰3个月,加重1周.”为主诉入院.入院3个月前无明显诱因出现咳嗽、咳痰,咳嗽呈阵发性,痰白色黏稠,量少,咳出顺利,无痰中带血丝,无畏冷、发热,无胸闷、胸痛、咯血等不适,在当地医院诊治,上述症状时有反复,未进一步诊治.

    作者:唐玫艳;薛青;焦维克;李树奇;邓新宇 刊期: 2014年第01期

  • 低氧诱导肺间质纤维化的相关机制

    肺间质纤维化(pulmonary interstitial fibrosis,PIF)是一种组织学和/或影像学表现为寻常型间质性肺炎,呈慢性进行性加重的间质性肺疾病[1-2].目前其病因不明、发病机制尚不清楚,主要累及肺间质、肺泡和/或细支气管.肺间质纤维化主要病理改变为肺组织局灶性纤维细胞增殖、细胞外基质积聚、肺泡囊腔样扩张,导致肺正常结构改建和远端的有效换气面积减少,多数患者终死于低氧性呼吸衰竭.其发病率逐年升高,但治疗效果差,病死率高.随着肺间质纤维化病程的进展,患者缺氧程度持续并逐渐加重,而缺氧可能又参与了肺间质纤维化的疾病发生及其进展过程,导致了低氧与致纤维化因素之间的恶性循环.现就低氧与肺间质纤维化之间关系的研究进行了综述.

    作者:王玉波;崔社怀 刊期: 2014年第01期

  • 超声造影在经皮肺穿刺活检肺周围型病变中的临床研究

    目的 探讨超声造影(CEUS)在经皮肺活检肺周围型病变中的临床价值.方法 对38例肺周围型病变行彩色多普勒超声和CEUS检查,观察其彩色多普勒和声学造影特征,并选择肿块内造影不同增强区域,在超声引导下行经皮肺穿刺活检.结果 38例肺周围型病变彩色多普勒与CEUS血流分级比较,乏血供组与富血供组x2=28.33,P<0.001,差异具有统计学意义.38例肺周围型病变中,彩色多普勒超声可显示全部病灶内部血流19例,超声造影均能显示病灶内部血流状态.造影剂分布特征均匀增强型9例,不均匀增强型29例(Fisher检验,P=0.005).经病理证实,29例为恶性病变,其超声造影均表现为病灶局部高增强改变(100%,29/29).9例为良性病变,其造影模式表现为较多样化,其中2例病灶呈高增强,5例等增强,2例低/无增强.CEUS引导下在高增强区域穿刺能获得恶性病变准确病理诊断,且无严重穿刺并发症发生.结论 超声造影可提高周围型肺癌的活检成功率,降低操作风险,是经皮肺穿刺活检重要的辅助方法.

    作者:黄伟俊;邱懿德;黄婷;简国亮;陈志妍 刊期: 2014年第01期

  • 结节病合并肺隐球菌病1例

    临床资料患者,女,47岁,因间断咳嗽1个月余就诊.既往有抑郁症病史.人院查体:全身浅表淋巴结未扪及肿大,双肺呼吸音清晰,未闻及干湿哕音.血常规检查提示正常.胸部CT提示:双侧肺门及纵隔淋巴结肿大,大直径约1 cm×2cm,见图1.纤支镜检查未见异常.连续三次痰查抗酸杆菌阴性,血结核抗体阴性,结核T-SPOT阴性.血沉正常,肿瘤标志物全套提示均正常.遂行全身PET-CT检查,见图2,提示诊断为胸内结节病.予以口服强的松片20 mg/d进行治疗,1个月后复诊胸部CT,见图3,提示双侧肺门及纵隔淋巴结较前稍有缩小.

    作者:陈照俊 刊期: 2014年第01期

  • 气管腺样囊性癌1例报道

    病例资料患者,男性,37岁.主因“反复咳嗽、喘息2年”就诊.患者于2年前无明显诱因出现咳嗽,多为刺激性干咳,活动后感喘息,无畏寒、发热,无胸痛、咯血等症状,未予重视.近1年来,上述症状加重,曾多次在当地医院就诊,行胸片、肺功能等辅助检查,诊断为“慢性支气管炎、支气管哮喘”,给予抗感染、扩张支气管等对症治疗后,症状元缓解.于2012年11月6日在我院行胸部CT检查,发现气管肿物,恶性可能性大,见图1.为进一步治疗收住入院.查体:轻度喘息貌,口唇无发绀,颈静脉无怒张.

    作者:徐海玲;张克香 刊期: 2014年第01期

  • 双水平气道正压通气对慢性肺源性心脏病急性加重期疗效的观察

    目的 探讨经面罩双水平气道正压通气(BiPAP)呼吸机治疗慢性肺源性心脏病急性加重期(AECPHD)患者的临床疗效.方法 92例AECPHD患者随机分为治疗组和对照组,各46例.两组均常规综合治疗,给予控制感染、营养支持、纠正酸碱平衡及水、电解质紊乱、解痉平喘、止咳祛痰,应用利尿剂、洋地黄以及扩血管药物等.对照组加持续低流量氧疗,治疗组加面罩BiPAP呼吸机治疗.观察两组临床症状、生命体征、血气指标、心功能分级、面罩舒适度、漏气情况及不良反应.结果 ①治疗组治疗后心率、呼吸频率、动脉血二氧化碳分压及pH值均明显下降,住院天数缩短,PaO2、SaO2明显上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01);②治疗组总有效率93.5% (43/46)与对照组76.1%(35/46)相比差异有统计学意义(P<0.05);③治疗组3例治疗72 h后症状改善不明显,2例120 h后逐渐好转,死亡1例.对照组11例经治疗72 h后症状无明显改善,行气管插管进行有创机械通气,平均通气时间为(7.9±1.8)d,死亡6例;④治疗组患者有2例出现轻度腹胀,休息后逐渐缓解.4例患者因面部压迫有不适感觉,调整面罩松紧后不适感缓解.结论 早期应用BiPAP呼吸机治疗AECPHD患者,可防止病情恶化、避免气管插管,降低病死率.BiPAP具有操作简单、容易掌握、痛苦小、缩短住院时间等优点,可作为早期治疗AECPHD患者的一种安全、有效的方法.

    作者:王永;刘勇;朱宝山 刊期: 2014年第01期

中华肺部疾病(电子版)杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生健康委员会

主办:中华医学会