全薇；朱鲜阳；张玉威；邓东安；韩秀敏；崔春生；盛晓棠；王琦光；金岩
作者：杜秀丽；刘娟 刊期： 2004年第z1期
作者：马士新；魏盟；于金珍；刘铭雅；李京波；张昀昀 刊期： 2004年第z1期
作者：谭乃杰；刘立新；陈元禄；刘芳；孙宝东 刊期： 2004年第z1期
作者：张瑞英；黄永麟；孙艺红 刊期： 2004年第z1期
作者：韩雅玲；王效增；荆全民；王守力；马颍艳 刊期： 2004年第z1期
作者：张存泰；卜军；刘念；陆再英 刊期： 2004年第z1期
作者：严衍玲；刘仁光；徐兆龙 刊期： 2004年第z1期
作者：高展；高润霖；阮英茆；孟亮；袁卫民；司文学；王清峙 刊期： 2004年第z1期
作者：刘学波；葛均波；程树军；钱菊英；王翔飞；潘浩；贾剑国；姚瑞明；王克强 刊期： 2004年第z1期
作者：张子新；曾定尹；王绽菲 刊期： 2004年第z1期
作者：吴钢；黄从新；黄峥嵘；唐其柱；江洪；唐艳红；谢强；王腾 刊期： 2004年第z1期
作者：董培康；罗开良；胡蓉；刘增长；邓昌明 刊期： 2004年第z1期
作者：韩雅玲；荆全民；王守力；马颖艳；栾波；王耿 刊期： 2004年第z1期
作者：李德；何国祥；唐波；唐兵 刊期： 2004年第z1期
作者：吴炜；张抒扬；刘震宇；谢洪智；张建岩；陈连凤；沈珠军；严晓伟；李方；陈黎波 刊期： 2004年第z1期
作者：杨德业；张怀勤；季亢挺；黄晓燕；徐力辛 刊期： 2004年第z1期
作者：张少衡；葛均波；钱菊英；王齐兵；孙爱军；史剑慧；贾建国；王克强 刊期： 2004年第z1期
目的长QT综合征(10ngQTsyndrome,LQTS)是由于编码心脏离子通道的基因突变导致相应的离子通道功能异常而引起的一组综合征.近我们通过单链构象多态性(Single Strand Confor-mation Polymorphism,SSCP)和PCR-DNA直接测序方法分别对国内30余个长QT综合征家系的先证者进行基因筛查,在对KvLQT1跨膜编码区S2-S6的检测时发现细胞质内的S2-S3区内的L191P突变.该研究拟采用分子克隆、转基因、细胞电生理等方法,与野生型KvLQT1(KvLQT1-WT)对照,对L191P基因突变(KvLQT1-L191P)进行表达和功能检测.方法以野生型(WT)KvLQT1的cDNA作为模板应用重组PCR诱变法制备突变,并经过测序验证.野生型和突变型cDNA克隆至pcDNA3.1质粒中,应用脂质体转染方法分别瞬时转染至人胚胎肾细胞(HEK293)中,绿色荧光蛋白质粒作为标记物共转染.转染后24～48小时后,选择孤立的荧光细胞,应用全细胞膜片钳技术记录表达电流.所有数据均采用Pulse软件采集,并应用Origin、SPSS和Prism软件进行数据处理.比较野生型和突变型基因表达电流的幅值和激活特征的差异.结果KvLQT1-WT的大表达电流为(1248±250)pA,电流密度(59.4±11.9)pA/pF,KvLQT1-L191P的表达电流为(432±102)pA,电流密度(20.6±4.9)pMpF,二者相比具有显著差异(P＜0.01).KvLQT1-L191P的大电流较KvLQTl-WT降低幅度达65.4%.与Kv-LQT1-WT相比,KvLQT1-L191P的大尾电流也显著降低[(532±89)pA比(272±42)pA,P＜0.01].激活动力学曲线未发现KvLQT1-WT和KvLQT1-L191P突变型的半激活电压有明显差异[(34.4±10.6)mV比(47.9±18.2)mV,P＞0.05];二者的斜率也无显著差异(27.7±9.6比39.2±10.8,P＞0.05).结论携带572T＞C基因突变的患者KvLQT1亚基191位的氨基酸由亮氨酸变为脯氨酸后,突变体的电流激活特征与野生型KvLQT1相似,但电流幅值和电流幅值显著小于野生型KvLQT1.即L191P突变引起该基因编码的Iks电流显著降低是引起患者QT间期延长的机制.
作者：杨进刚；胡大一；李翠兰；刘文玲；李蕾；魏永祥；刘小超 刊期： 2004年第z1期
作者：王哲 刊期： 2004年第z1期
作者：刘正湘；蓝荣芳；宋玉娥；刘晓春；张欣；汪道文 刊期： 2004年第z1期
中华心血管病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
