黄鹤光；冷希圣；杨波
寻找甲胎蛋白（AFP）以外更新、更敏感的血清标记物是肝癌研究中的重要课题。近年有关细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和肝细胞肝癌（HCC）的研究提示，ICAM-1在HCC病人组织及血清中（cICAM-1）呈高水平表达〔1，3〕。本研究通过检测HCC组织中ICAM-1信使核糖核酸（ICAM-1 mRNA）的表达，探讨血清中高水平ICAM-1与HCC组织中ICAM-1 mRNA的相互关系，为cICAM-测定在HCC早期诊断及术后复发监测中的作用寻找理论依据。 1.材料与方法：1998年6月至1999年3月在我院行外科手术或经肝穿病理证实为肝细胞癌样本22例。男性19例，女性3例，年龄29～70岁，中位年龄48岁。肿瘤直径3.5～20.8 cm，中位直径13.7 cm。其中大肝癌(≥5 cm)20例，小肝癌(＜5 cm)2例。血清甲胎蛋白(AFP)＞400 ng/ml 11例，AFP 20～399 ng/ml 8例，AFP＜20 ng/ml 3例。另取3例肝血管瘤无肝硬化肝组织作为正常对照。
作者：徐静；梅铭惠；石青峰；杨景红；覃理灵 刊期： 2001年第01期
一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕，重症急性胰腺炎(SAP)急性期常伴有急剧的全身病理生理改变，细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2，3〕，诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情，是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO)。 材料和方法 1.实验动物：雄性SD大鼠200～250 g128只，清洁级，购自中国科学院上海实验动物中心。随机分为假手术组8只，SAP组60只，治疗组60只，其中SAP组和治疗组各观察20只动物死亡率。 2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作：参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进 氯胺酮(50 mg/kg)和3%苯比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管，无菌条件下，手术显微镜下，十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管，微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma公司)1.0 ml/kg，注射速度0.2 ml/min，注射持续10 min。肉眼下，大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。假手术组仅翻动胰腺后关腹，治疗组于诱发SAP后皮下注射奥曲肽(诺华公司)，每次14 μg/kg q8 h×2 d。
作者：黄鹤光；冷希圣；杨波 刊期： 2001年第01期
侵袭和转移是恶性肿瘤的基本特征，肝细胞癌晚期易侵犯门静脉、肝静脉及肝外脏器(如肺、骨等)，但却很少发生胆道侵犯或转移。文献报道〔1〕肝癌晚期发生胆道侵犯后，可在胆道内形成与肝内原发灶一致的癌栓或癌性血栓，从而导致阻塞性黄疸的发生，临床上称为“黄疸型(icteric type)”或“淤胆型(cholestatic type)”肝癌。其发病率约占肝癌型病人的1.5%～10%〔2〕。本文通过对此类病人临床特征及病理标本的研究，探讨了肝癌侵入胆道的几种可能途径。 1.材料和方法：1984年1月至1998年12月，本院经手术证实共发现肝细胞癌侵犯胆道病人的39例，占同期肝癌病人的6.3%。19例病人进行了病灶侧的半肝、肝叶或肝段切除，其余病人进行胆总管取栓术及肝血管插管化疗或放疗术。手术标本均用10%福尔马林固定，肝切除标本在肿瘤边缘及中心进行多处取材，每个标本制作5～10张切片，HE染色后镜检。镜下主要观察肿瘤的类型及分化程度、肿瘤侵犯血管及胆管的方式及途径，以及肿瘤有无包膜及合并的基础肝病。见表1～2。
作者：王锦波；何振平 刊期： 2001年第01期
1909年，Beuer和Reich首次报道了尿液中存在蛋白酶抑制剂(ulinary trypsin inhibitor，UTI),现多称为乌司他丁(ulinastatin)］，能有效抑制多种酶的活性。后来研究发现，在感染、肿瘤、妊娠、休克、手术，给予糖皮质激素等生物体受到刺激时，尿液中该物质活性升高，从而引起研究者的浓厚兴趣。现就乌司他丁在国内、国外的研究、应用进展作一简要介绍。 一、乌司他丁的生化与药效学作用 1.生化性质：乌司他丁是从男性尿中分离纯化的尿胰蛋白酶抑制剂，为糖蛋白，含有143个氨基酸，分子量约67000 Dal，是一种典型的Kuniz型的蛋白酶抑制剂，具有两个活性功能区。由于两个活性功能区均有很广的抑酶谱，且不完全重叠，能够同时抑制胰蛋白酶、磷脂酶A2、透明质酸酶、弹性蛋白酶等多种水解酶的活性；另外，乌司他丁分解形成的低分子量成分也具有很强的抑制水解酶的作用。
作者：曾文红；白国强 刊期： 2001年第01期
《中国微创外科杂志》设置的栏目有：内窥镜，介入治疗，临床论著，基础研究，经验交流，专家笔谈，新技术，国外医学动态，医疗器械进展，文献综述，短篇/个案报道，基层医院园地，争鸣园地等。传统外科是微创外科的基础，因此，有关传统外科方面的学术论文同样受欢迎。 《中国微创外科杂志》为双月刊，国际流行大16开，64页，采用铜版纸印刷，2001年2月创刊，对国内外公开发行，每期6元，全年36元，国内读者2001年可来信编辑部直接订阅，国外读者通过中国国际图书贸易总公司订阅。 编辑部地址：100083 北京海淀区花园北路49号北京大学第三临床医学院《中国微创外科杂志》编辑部 电话：010-62017691转2730 E-mail:PUH3-WCWK@mail.bjmu.edu.cn《中国微创外科杂志》编辑部
作者： 刊期： 2001年第01期
肿瘤的生物学特性与癌细胞的过度增殖有关，更与癌细胞的凋亡减少有关。bcl-w和bcl-x是bcl-2家族的重要成员，前者编码产物具有抗细胞凋亡功能〔1〕，迄今有关bcl-w基因对肿瘤细胞凋亡调控的研究文献报道甚少；后者存在两种片段，bcl-xL有抗凋亡作用，bcl-xS具促凋亡活性〔2〕。本研究采用免疫组织化学方法检测bcl-w和bcl-x在肝细胞癌(HCC)的表达及意义。 1.材料与方法:(1)标本：来自第四军医大学西京医院手术切除并经病理检查证实的组织。40例HCC高、低分化型分别为23例和17例；临床分期Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ 期为 13例、27例。取14例肝硬化对照。(2)主要试剂：羊抗人Bcl-w抗体、兔抗人Bcl-x抗体为美国Santa Cruz公司产品；桥抗兔抗羊抗体为美国Sigma公司产品; EnvisionTM试剂盒为丹麦Dako公司产品。(3)方法：采用免疫组化LDP法(Labelled Dextran Polymer法)〔3〕。阴性对照设PBS替代一抗的空白对照和鼠抗人乙脑单克隆抗体替代一抗对照。细胞浆呈黄色或阳性细胞率大于20%为阳性，细胞浆无黄色或阳性细胞反应率小于20%或背景同空白对照者为阴性。统计学处理采用χ2和配对计数资料的χ2检验。
作者：徐宏勇；李开宗；窦科峰；付由池；阎庆国；王映梅；李景梦 刊期： 2001年第01期
我院自1994年至1996年应用常温下全肝血流阻断（THVE）技术切除肝巨大海绵状血管瘤8例，其中男3例，女5例，肿瘤位于肝Ⅷ段4例，Ⅶ、Ⅷ段3例，Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ段1例,瘤体大直径18 cm，小10 cm，平均13 cm。方法是首先游离右半肝，解剖肝上下腔静脉（IVC）及肝下IVC，分别预置阻断带，然后施Pringle法阻断入肝血流，于血管瘤外缘切开肝被膜，沿血管瘤包膜外钝性剥离，遇有通经肿瘤的管道系统均钳夹切断，直至肿瘤切除。如果术中肝主静脉（HV）及IVC出血，可立即阻断肝下IVC及肝上IVC，修补损伤血管。本组有3例损伤HV，采用本法均修补成功。本组术中出血300～900 ml，Pringle法阻断时间平均25 min，THVE时间4～11 min，手术无死亡。2例术后胸腔积液，对症治疗消失，8例均痊愈出院。 讨论：手术切除中央型肝肿瘤，术中易损伤HV及IVC，发生难以控制的大出血及空气栓塞，以往为手术禁区。而应用THVE技术，可在清晰的视野中从容修补血管，提高手术的安全性。THVE技术对肝细胞功能的影响与Pringle技术相同，而IVC的阻断仅影响回心血量，并不加重肝细胞的损害。无肝硬化及基础肝病的THVE安全阻断时间为60 min，而肝血管瘤病人往往很少伴有肝硬化，60 min内修补血管应该是非常充足的，本组THVE长时间仅为11 min，THVE技术本身并不增加手术的危险，又能很好控制HV及IVC的出血，我们主张实施中央型肝肿瘤切除时，应做好THVE准备，做到有备无患。
作者：华向东；付庆才；刘国生 刊期： 2001年第01期
病人男，21岁、藏族、有犬羊接触史。右上腹隐痛2年，期间曾发热一次，结膜黄疸，纳食差，水泻便8 d。于1998年9月26日住院。查体：体温36.2℃，血压90/60 mmHg，消瘦，精神略差，结膜黄染呈金黄色，右上腹轻度压痛，肝区叩击痛明显，一分钟胆红素78.2 μmol/L，转氨酶63 U，血沉74 mm/1h，卡松尼氏试验阳性，B超提示肝右后叶直径6.1 cm液性暗区，心电图示窦性心动过绶伴心律不齐。于1998年10月14日在硬膜外麻醉下行右肋缘下切口。进入腹腔后见肝右后叶(Ⅷ段)有约8 cm×10 cm之包块与膈肌粘连，切开囊壁厚约0.60 cm，硬韧、吸出黄色脓性液约500 ml，无恶臭，期间加杂内囊残壳呈灰白色，待吸净后搔刮囊壁，3%双氧水，生理盐水反复冲洗。用乙醇纱布擦拭囊周壁，自囊壁处不断流出少量胆汁，因位置较深，胆瘘口细，费时许久未能探明胆瘘处，故在囊腔内置一根乳胶管行外引流，严密缝合原切开的囊壁，后关腹。术后24 h引流出胆汁500 ml，48 h胆汁量300 ml，与此同时，结膜黄疸消退，水泻便停止，复查总胆红素、转氨酶、血沉均趋于正常，此后每日胆汁量在200～300 ml之间增减，经过408 h后胆汁引流自行停止，经引流管造影残腔已闭合，拔除引流管。
作者：蒋宗华；常春超；达娃次仁 刊期： 2001年第01期
目的 检测肝细胞肝癌(HCC)病人围手术期血清IL-10浓度并探讨其意义。方法 用ELISA检测法测定了30例HCC病人术前、术后血清IL-10浓度，以30例健康人为对照。结果 HCC病人术前、术后血清IL-10浓度均高于健康人，术前血清IL-10浓度高于术后。肿瘤直径＞5 cm和低分化的病人血清IL-10浓度高于肿瘤直径＜5 cm和高分化者(P<0.01)。结论 HCC细胞可能产生IL-10，IL-10可能参与HCC的免疫调节，IL-10可能是一个可反映HCC分化程度、估计预后及预测复发的指标。
作者：刘维藩；汪根树；谭小宇 刊期： 2001年第01期
病人男性，61岁，因右上腹疼痛1个月以“右肝占位性病变”收住我院肝胆外科。病人1个月前出现右上腹疼痛，间断性隐痛，向腰背部放散，疼痛持续1～2 h可自行缓解，无发热、黄疸，既往无类似腹痛史。外院CT检查发现右肝3 cm×3 cm高密度病灶，考虑“出血”性病变。查体：体温36.5℃,脉搏84次/min，呼吸20次/min，血压120/82.5 mmHg。发育营养正常，神志情楚。皮肤巩膜无黄染，浅表淋巴结不肿大，心肺未见异常。腹平坦，剑突下轻压痛，无反跳痛及肌紧张，肝脾不大，腹部未扪及肿块，肝区无叩痛。化验：血色素129.81 g/L, 红细胞4.04×1012/L,白细胞4.0×109/L,中性72%,淋巴28%,血小板104×1012/L。白蛋白43.38 g/L,球蛋白28.39 g/L,GPT 21 U/L，总胆红素8.50 umol/L，乳酸脱氢酶128 U/L，总胆汁酸 27 umol/L。HBsAg(+),HBeAg(-),抗-HBe(+)，抗-HBc(+),抗-HBs(-)。AFP<25 μg/L，CEA 8.5 μg/L，铁蛋白92.1 μg/L。B超：肝右后见3.3 cm×3 cm实质性回声块影，有包膜伴声影，胆囊息肉（0.3～0.5cm）。CT：肝大小形态正常，肝右后叶3.1 cm×2.5 cm不规则高密度影，其边界清楚，密度欠均匀，疑为“肝癌”。临床诊断右肝占位，施行剖腹探查术。手术见：右肝与膈肌广泛纤维性粘连，肝大小形态正常，肝右后叶3.3 cm×3.0 cm灰白色区域，质地稍硬，未突出肝脏表面，周围肝组织正常，胆囊胆固醇息肉(切除)，其它脏器未见异常。锐性分离粘连，游离肝脏，局部挖除肿块，肿块为灰白色曩性,3 cm×3 cm×3.2 cm，包膜完整,壁厚0.3 cm,质地坚韧,内容为乳白色牙膏样粘稠糊状物。病理报告：隐球菌病伴曩肿形成。术后7 d康复出院,随访4个月无异常。
作者：宋小文；金世龙；顾红光；袁涛 刊期： 2001年第01期
肝海绵状血管瘤(Cavernous hemangioma of the liver , CHL)的组织来源及增长方式存有争议。有人认为 CHL是真性肿瘤，其增长是新血管瘤组织的形成〔1〕;有人认为是血管畸形，其增长是血窦在血流作用下扩张〔2〕。本实验检测 CHL内皮细胞PCNA表达及 AgNOR平均计数，了解CHL内皮细胞有无异常增殖，旨在探讨其增长方式，推测其是否是真性肿瘤。 材料与方法：标本：收集手术切除的 19位病人21个 CHL标本，男 8例，女 11例。年龄 34～55岁。瘤体直径小于 4 cm者 3个， 4～10 cm者 14个，大于 10 cm者 4个。 对照组：10例血管瘤旁正常肝组织和 3例其它病人正常肝组织汇管区血管。
作者：徐杰明；刘青光；潘承恩；马清涌；张梅 刊期： 2001年第01期
目的 分析原发性肝癌并胆道癌栓的临床、影像学及病理特点，总结其诊断的规律 。方法 分析近4年来我院收治的肝癌并胆道癌栓42例病人的一般情况，病人入院后行常规实验室检查及B超、CT、MRI、ERCP、PTC等检查。结果 本组术前正确诊断率为71.8%。临床表现为肝癌及梗阻性黄疸症状。实验室检查AFP阳性27例，乙肝表面抗原阳性28例。术前血清胆红素增高者33例，血清碱性磷酸酶增高19例，白细胞增高18例。影像学特点为：肝内肿瘤，胆道扩张，胆道内占位。术中见癌栓组织松脆易碎，多与胆道壁无相连，与肝内原发病灶相连或不相连。B超、CT、MRI、ERCP、PTC的正确诊断率分别为8.11%、2.63%、10.00%、69.70%、100%。结论 肝脏占位，肝炎病史，AFP升高同时出现胆道扩张、黄疸，应考虑到本病存在，并选择多种检查手段，综合分析结果。
作者：孙婧璟；吴孟超；沈锋；王义 刊期： 2001年第01期
女性，46岁，因右上腹进行性胀痛半年于1999年3月2日入院。既往无肝炎、外伤及血吸虫等病史，结婚20年未服用任何避孕药物。查体：一般情况良好，皮肤巩膜无黄染，心肺正常，腹平坦，未见肠型及蠕动波，右上腹轻压痛，无肌卫及反跳痛，莫非氏征(-)，右肋缘下未触及肝脏，肝区轻叩痛，肝界不大，无移动性浊音。化验：肝功能正常，HBsAg(-)，AFP 8.8 μg/L，血WBC 5.5×109/L，RBC 4.2×1012/L。B超提示：肝脏正常大小，右肝见3 cm×2.5 cm稍强回声，边界清楚，提示“肝血管瘤”，CT：肝右后叶下段见一不规则低密度影像，约3.2 cm×2.7 cm，CT值-64 Hu，密度均匀，边界清，造影后无强化表现，提示：肝右后叶下段约3.2 cm×2.7 cm大小脂肪密度病灶，考虑为肝血管肌脂肪瘤可能性大。入院诊断：肝Ⅵ段占位性病变。于1999年3月11日上午在全麻下行肝Ⅵ段部分切除术。术中见肝脏正常大小，色红润，无瘀胆及硬化改变，SVI边缘见3.0 cm×3.5 cm×3 cm有完整包膜质软肿块向脏面稍突起，其内为黄色脂肪组织。切下肿块送病理检查为：右肝后叶脂肪瘤，病理编号：17628-99，术后诊断：肝脂肪瘤。
作者：李金龙；李荣祥；潘万能；陈勇 刊期： 2001年第01期
已有资料表明，肿瘤细胞能分泌大量基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP），且具有高转移倾向的肿瘤细胞分泌的金属蛋白酶的含量亦高，对肿瘤的侵袭和转移起着极为重要的作用〔1〕。基质金属蛋白酶-9（MMP-9，E.C.）是金属蛋白酶类的主要成员之一。我们应用逆转录聚合酶链反应和明胶酶谱法检测肝细胞癌（HCC）组织、癌栓组织和癌旁组织中MMP-9 mRNA的表达水平和酶活性表达，以探讨其在HCC侵袭和转移过程中的意义。 1.资料与方法：7例正常肝组织，47例手术切除并病理证实的癌及癌旁组织，其中8例有门静脉主干癌栓。有包膜者25例，无包膜者22例。大肝癌24例（>5 cm），小肝癌23例（≤5 cm）。所有病例均无肝外转移征象。方法：(1)RT-PCR：使用Trizol溶液一步提取mRNA，条件为94℃ 1 min，65℃ 1 min，循环30次。扩增条带特异性经酶切分析证实。PCR产物经2%琼脂糖电泳，VDS扫描。以MMP-9和内标β-actin扫描值的比值作为MMP-9 mRNA的表达相对值，半定量分析MMP-9 mRNA表达水平。(2)明胶酶谱法：制备蛋白抽提液，行SDS-PAGE电泳后，将凝胶分别置于洗脱液、漂洗液、孵育液、染色液、脱色液中处理，后拍照。(3)统计学处理：MMP-9 mRNA表达相对值以±S，两组间均数采用t检验，两组间率采用χ2检验。
作者：蔡阳；封光华；吴志全；樊嘉；贺斌；刘银坤；叶胜龙；汤钊猷 刊期： 2001年第01期
随着肝动脉栓塞化疗术(TAE)治疗中晚期肝癌日益增多,TAE治疗的副作用和并发症亦开始备受关注。本文报道我院1997年5月至1998年5月1?000例肝癌病人TAE治疗的副作用和并发症。 1.材料和方法：1?000例肝癌系1997年5月至1998年5月在我院行TAE且资料完整的连续性病例。原发性肝癌890例，其中192例系术后复发，转移性肝癌110例。男性878例，女性122例。年龄8～74岁，平均55岁。采用Seldinger法经股动脉插管（造影摄片程序略），导管通常为6F的Cook或Yashiro肝动脉导管，经腹腔动脉造影确定肿瘤大小部位及供血情况，同时利用间接门脉造影法观察有无门静脉受侵犯及其程度。在导丝引导下导管超选进入肝固有动脉或其分支后注入超液化碘油5～30 ml，阿霉素或表阿霉素20～40 mg，5-氟尿嘧啶0.5～1.0 g,卡铂100～200 mg，有肺转移灶者超选入支气管动脉灌注丝裂霉素或其它化疗药。部分病人加用明胶海绵碎片1/4～3/4块行肝动脉栓塞。 所有病人入院后均行肝功、肾功、电解质、血常规、AFP、CEA、 HBV三抗、PT、蛋白电泳及胃镜或钡餐检查，TAE术后3 d复查肝功、肾功、电解质、血常规。
作者：钱国军；曲增强；陈汉；高亚莲；程红岩；陈栋；徐爱民；朱伟；张惠敏 刊期： 2001年第01期
目的 了解p53基因及其蛋白在结肠癌发生、转移过程中的动态变化以及p53变异与生存期的关系。方法 p53基因exon 5-9以DGGE及自动DNA序列分析来检测。结果 41例大肠癌病人中，26例呈p53变异(63%)，其中6例仅在肝转移灶发现p53变异，其 余均为原发灶、转移灶一致性的变异。另有3例原发灶即有p53变异的病人，在转移灶出现了新增加的变异。生存分析显示，在肝转移灶含变异型p53的病人比含野生型P53者具有更长的术后生存期。结论 在结肠癌肝转移过程中，p53变异主要开始于肠癌原发灶，并被保持于转移至肝脏的癌细胞内，小部分p53变异也可以始发于转移灶。对于实施肝部分切除术的病人，术后生存期在转移癌灶含变异型p53者长于含野生型p53者。
作者：杨洋；罗荣城；郑航 刊期： 2001年第01期
肝尾叶肿瘤由于紧贴肝后下腔静脉且位置深，难以显露，极易发生大出血，手术难度很大。我们采用第三肝门解剖法分离结扎肝短静脉，使肝后下腔静脉与肿瘤分离，从而使肿瘤切除变得安全、简便，出血量明显减少〔1〕。大部分病人不需要行全肝血流阻断，自1994年4月至1998年8月，我们切除肝尾叶肿瘤34例，其中27例采用第三肝门解剖法切除，报告如下。 1.一般情况：34例病人中男性25例，女性9例。年龄25～57岁(平均42.3岁)，原发性肝癌27例，肝血管瘤5例，胆管细胞癌1例，肝脂肪瘤1例。肿瘤位于左尾叶者10例，右尾叶者22例，尾叶横部者2例。肿瘤的直径3～12 cm，平均6.2 cm。(1)切口选择及肝脏游离：右尾叶肿瘤选择右肋缘下切口，左尾叶肿瘤选择左右肋缘下“人”字形切口。进腹后探查肝脏，切断肝周诸韧带，右尾叶肿瘤需游离肝裸区至肝后腔静脉侧壁，左尾叶肿瘤需完全游离肝左叶并切断肝胃韧带。必要时游离肝上、下腔静脉并置阻断带，所有病例均未行胸腹联合切口。(2)解剖第三肝门：将肝脏向左上方翻起，显露出肝下腔静脉，沿腔静脉浅面，由下至上，由右至左，仔细分离肝脏与下腔静脉之间的间隙，肝短静脉予以双重结扎并切断，直至肿瘤与下腔静脉完全分离。左尾叶除较小的肿瘤直接沿肿瘤边缘分离结扎血管外，较大肿瘤也可采用此法分离、结扎肝短静脉。(3)肿瘤切除途径：不同部位的肿瘤采用不同的切除途径：①右尾叶局部切除：于右肝门后缘横行切开肝实质，分离结扎肿瘤周围管道；②右尾叶联合其他肝叶切除：沿正中裂切开肝实质，至右肝门右侧，切断结扎需切除肝叶的管道，绕至右肝门后部，分离切除肿瘤；③左尾叶局部切除：将左叶翻向右上方，沿肿瘤与下腔静脉之间分离，结扎血管，切除肿瘤；④左尾叶联合其他肝叶切除：先切除左外叶或左半肝，再切除肿瘤；或左半肝联合肿瘤一并切除；⑤尾叶横部肿瘤切除：沿正中裂切开肝实质，结扎切断左、中肝静脉，沿肿瘤右侧分离结扎血管，连同左半肝一并切除。(4)肝血流阻断法：常规采用间歇性第一肝门阻断法，5例病人采用联合全肝血流阻断法
作者：周伟平；吴孟超；陈汉；姚晓平；杨甲梅；杨广顺；吴伯文 刊期： 2001年第01期
肝癌是世界上恶性程度极高，且预后极差的恶性肿瘤之一，每年全球约有125万人患病。在我国肝癌目前已处于恶性肿瘤死亡率的第二位，每年至少有10万名新发现病人，和11万名肝癌病人死亡〔1〕。尽管目前肝癌的治疗方法有许多种，但治疗效果都十分有限，并未显著延长病人的生存期。大部分肝癌病人对化疗及放疗等治疗均不敏感，能手术根治的病人仅占15%。随着分子生物学和免疫学理论及技术的不断发展和对肿瘤发病机制的不断认识，人们可以利用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗，且在该领域已显示出一定的临床治疗效果。如Habib等〔2〕使用野生型p53基因治疗原发性肝细胞癌的临床治疗试验，取得了很大的成功，引起人们的普遍关注。本文就目前肝癌基因治疗的研究现状和发展趋势作一综述。 一、肝癌基因治疗中所使用的载体系统和治疗途径的选择 目前在肝癌基因治疗实验当中使用多的是病毒载体系统，包括腺病毒载体〔3〕、逆转录病毒载体〔4〕、腺相关病毒载体〔5〕等，非病毒载体系统主要是使用脂质体〔2，6〕介导，且已进入临床试验阶段。在肿瘤基因治疗中，腺病毒载体系统具有许多优点，如制备容易，能获得高纯度、高滴度的腺病毒体；无遗传毒性，以游离型状态存在，不整合进入宿主DNA中；表达时间相对短暂，一般15～20 d左右，不会造成对免疫系统的长期慢性刺激〔7〕；感染宿主范围相对较广，尤其是能感染复制、分裂期的细胞。近几年临床上使用腺病毒载体治疗恶性肿瘤的例子越来越多〔8〕。体外实验证实，数个人的肝癌细胞系HepG2、Hep3B、Hnh7、HLE、HLF、SK-HEP-1和大鼠肝癌细胞系McA-RH7777等，均对腺病毒十分易感，50MOI可使近100%的细胞被感染〔9〕。作者曾在军事医学科学院百环生物医学研究中心吴祖泽院士指导下，以腺病毒载体介导绿色荧光蛋白基因作为标记基因，也证实3个人的肝癌细胞系HepG2、SMMC7721、BEL-7402，一个胆管癌细胞系QBC939，一个正常肝细胞系L02，均对腺病毒易感，50MOI可使90%左右的靶细胞受感染。Castell等〔10〕利用携带LacZ基因的腺病毒体，感染体外原代培养的正常肝细胞，结果证实：肝细胞对腺病毒十分易感，15MOI感染1 h，可使80%的肝细胞受感染，20MOI感染1 h可使100%的肝细胞受感染；导入的目的基因可以在肝细胞内高效表达；感染腺病毒后，并不影响肝细胞的正常生化功能，如肝细胞的尿素合成、胞膜蛋白合成、生物转化活性等，认为使用腺病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗，是十分有效的工具载体。但有实验表明大剂量腺病毒载体对肝功能还是有影响的〔11〕，随感染病毒量的加大，肝脏的毒性作用也加大，且感染腺病毒的靶细胞刺激机体产生免疫反应，从而使腺病毒的转化效率降低，限制了重复使用。使用逆转录病毒载体进行肝脏疾病的基因治疗，也有其有利之处：因逆转录病毒只感染处于复制、分裂期的细胞，而处于非复制期的细胞则不受感染。因肿瘤细胞多处于分裂期，而肿瘤周围的正常肝细胞多处于静止期，故逆转录病毒载体具有一定的靶细胞特异性〔4〕。Kitten等〔12〕使用逆转录病毒载体，通过门静脉注入大鼠肝内，有46%±17%的肝细胞受到感染，随病毒滴度的升高，细胞的转导效率也 增加。虽然逆转录病毒载体能将目的基因有效地导入肝癌细胞内，对肝脏这样的低分裂组织局部应用较为合适，但系统体内(in vivo)法应用，就会对骨髓、生殖细胞、肠上皮细胞等分裂增殖旺盛的组织，产生致死性杀伤作用，有产生与放、化疗相似副作用的危险。对于原发性肝细胞癌，癌细胞的增殖生长一般比较缓慢〔12〕，因此使用逆转录病毒载体可能转化效率较低，但对于肝转移癌，因为细胞增殖较为旺盛，故使用逆转录病毒载体较为合适。对于使用腺相关病毒载体进行肝癌的基因治疗，目前还研究较少，但腺相关病毒无致病性，有广泛的宿主范围，能感染不分裂的S期细胞，并能整合到宿主DNA的特异部位中，故减少了发生插入突变的危险性。Su等〔5〕使用AAV介导AFP/HSV-TK基因，证实目的基因能在肝癌细胞中高效表达，并具有杀伤肝癌细胞的作用。
作者：王征旭；王红阳；吴孟超 刊期： 2001年第01期
病人男，47岁，因上腹不适1个月入院。查体：皮肤、巩膜无黄染，腹部平坦，无压痛，未触及明显包块，肝脾未触及，无腹水征。化验：外周血常规正常，HBsAg(+)，AFP正常，肝功能正常。腹部B超及CT检查均发现右肝约有5.0 cm×4.0 cm大小实性包块，考虑为原发性肝癌、剖腹探查：肝右后叶约有5.0 cm×4.2 cm×3.0 cm大小包块，质硬，即行不规则肝切除，切缘距肿物约3 cm，门静脉置化疗泵。术后病理报告：肝母细胞瘤。术后经化疗泵予顺铂、阿霉素、长春新碱化疗。对病人随访3个月，B超检查示右肝出现6.0 cm×3.5 cm、4.8 cm×3.0 cm大小包块，术后半年病人死亡。
作者：万叔良；潘玉琨 刊期： 2001年第01期
目的 探讨原发性肝癌(PHC)癌组织及癌周组织mdr1表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高，特异性强的逆转录－聚合酶链反应(RT－PCR)技术，定量检测48例PHC病人癌组织及癌周组织中mdr1表达水平。其中18例病人术前行肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗。结果 PHC癌组织中mdr1阳性率为63.3%，远高于癌周组织的26.7%(P<0.01)；术前行TACE组癌组织中mdr1阳性率为88.9%，远比未化疗组63.3%高。结论 PHC存在内源性MDR和获得性MDR，mdr1高表达是PHC病人MDR产生的重要机制之一。
作者：孔连宝；杜竞辉；王学浩；钱建民；赵中辛 刊期： 2001年第01期
中华肝胆外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
